Anatomía del cuerpo calloso en ratas sometidas a estrés prenatal crónico / Anatomy of corpus callosum in rats submitted to chronic prenatal stress

RESUMEN: El cuerpo calloso (CC), es la mayor comisura de sustancia blanca del encéfalo de los mamíferos placentados, constituida por numerosos haces de fibras transversales que conectan áreas corticales de ambos hemisferios cerebrales. Por otro lado, el estrés se define como una respuesta general del organismo ante demandas externas o internas, inicialmente amenazantes, que consiste en movilizar recursos fisiológicos y psicológicos para poderlas afrontar. Dada la importancia del cuerpo calloso en las conexiones cortico-corticales, el objetivo del presente estudio, fue evaluar el efecto en ratas, de un estrés prenatal crónico por inmovilización, sobre la anatomía macroscópica del CC. Se utilizaron seis ratas preñadas de la cepa Wistar de 250 g, de las cuales tres fueron sometidas, a partir del octavo día postconcepción, a una restricción de movimiento por diez días (2h/día). Posteriormente, las madres prosiguieron su gestación, parto y lactancia. Al nacimiento, las camadas fueron ajustadas a seis crías machos por madre (n=36), destetadas a los 21 días y sacrificadas a los 45-52 días de edad. Los encéfalos fueron seccionados a través de la cisura interhemisférica y ambos hemisferios fotografiados por su cara medial. Las imágenes fueron digitalizadas y analizadas mediante el programa Scion Image®, para la medición del área total, parciales (tercio anterior, medio, posterior y quinto posterior) y perímetro callosal. Es así como, el estrés prenatal por inmovilización, afectó significativamente (p<0,01), la morfología macroscópica del cuerpo calloso. Evidenciándose una disminución del área total, áreas parciales y perímetro callosal, en los animales sometidos a restricción prenatal. Estableciendo una relación directa entre número de axones y área callosal e inversa entre diámetro y densidad axonal; lo observado podría tener incidencia en la transferencia interhemisférica.

SUMMARY: The Corpus Callosum (CC) is the largest white matter commissure in the brain of placental mammals, consisting of numerous transverse fiber bundles that connect cortical areas of both cerebral hemispheres. On the other hand, stress is defined as a general response of the organism to external or internal demands, initially threatening, which consists of mobilizing physiological and psychological resources to be able to face them. Given the importance of CC in cortico-cortical connections, the aim of the present study, was to evaluate the effect of chronic pre-natal immobilization stress on the macroscopic anatomy of CC in rats. Six 250g pregnant rats of the Wistar strain were used, of which three were subjected, starting on the eighth post-conception day, to movement restriction for ten days (2h/day). Subsequently, the mothers continued their gestation, delivery and lactation. At birth, litters were adjusted to six male offspring per mother (n=36), which were weaned at 21 days and slaughtered at 45-52 days of age. The brains were fixed, and later sectioned through the interhemispheric fissure and both hemispheres photographed by their medial aspect. The images were digitized and analyzed using the Scion Image® program, for the measurement of the total area, partial area (ante- rior, middle and posterior thirds, as well as posterior fifth) and callosal perimeter. Thus, prenatal stress due to immobilization significantly affected (p<0.01), the macroscopic morphology of the CC. Evidence shows a decrease in the total area, partial areas and callosal perimeter in the animals subjected to prenatal restraint, as compared to normal animals. Establishing a direct relationship between number of axons and callosal area and an inverse relationship between diameter and axonal density, what was observed may have an impact on interhemispheric transfer.

Prenatal stress up-regulated hippocampal glucocorticoid receptor expression in female adult rat offspring / Estrés prenatal expresión del receptor de glucocorticoides del hipocampo regulado por aumento en crías de ratas hembras adultas

Accumulating evidence from preclinical and clinical studies indicates prenatal exposure to stress or excess glucocorticoids can affect offspring brain. Glucocorticoid receptor (GR) is an important target of glucocorticoid. Therefore the aim of the present study was to investigate the expression of GR in prenatally stressed adult offspring and the relationship between GR expression and behavior in offspring. Pregnant rats received restraint stress during the last week of pregnancy. Hippocampal glucocorticoid receptor expression levels in the offspring were detected on postnatal 60 (P60).Cognition function was also detected. It shows significantly lower hippocampal GR expression was observed in female prenatally stressed offspring compared with their controls at P60. Corresponding to the expression of GR, female prenatally stressed offspring exhibited poorer spatial learning and memory abilities in the Barnes maze than control, This suggests that cognitive impairment in prenatally stressed rat offspring attribute lower hippocampal GR expression.

La evidencia acumulada de estudios preclínicos y clínicos indica que la exposición prenatal al estrés, o el exceso de glucocorticoides puede afectar el desarrollo cerebral de las crías. El receptor de glucocorticoides (RG) es un objetivo importante de los glucocorticoides. Por lo tanto, el objetivo del presente estudio fue investigar la expresión de RG en crías adultas estresadas durante el período prenatal y la relación entre la expresión de RG y el comportamiento de las crías. Las ratas preñadas recibieron niveles de estrés restringido, durante la última semana de embarazo. Se determinaron niveles de expresión del receptor de glucocorticoides del hipocampo y niveles de función cognitiva en las crías. En comparación con el grupo control se observó una expresión de RG en el hipocampo, significativamente menor en las crías estresadas prenatalmente, en comparación con los controles en P60. En referencia a la expresión de RG, las crías estresadas prenatalmente exhibieron habilidades de memoria y aprendizaje espacial menores, en el laberinto de Barnes que el grupo control. Esto sugiere que el deterioro cognitivo en crías de ratas estresadas prenatalmente muestran una menor expresión de RG en el hipocampo.

La estimulación táctil/kinestésica revierte los efectos del estrés prenatal en la región CA3 del hipocampo en ratas hembras: estudio estereológico / Tactile/kinesthetic stimulation reverses the effects of prenatal stress in the CA3 region of the hippocampus in female rats: a stereological study

Esta investigación fue realizada para saber si la estimulación táctil/kinestésica postnatal es efectiva en revertir el estrés prenatal, en la citoarquitectura de CA3 del hipocampo, en crías hembras. 12 crías de ratas hembras de la cepa Sprague-Dawley, fueron distribuidas en Grupo Control (GC), Grupo con Estrés Prenatal por restricción (EP) y Grupo Estrés prenatal con Estimulación Táctil/Kinestésica postnatal (EP-ETK). El estrés prenatal en crías hembras aumentó la densidad neuronal en las áreas CA3b y CA3c (p<0,001). Cuando se compararon las crías con estrés prenatal con las que recibieron estimulación táctil/kinestésica temprana, disminuyeron las densidades neuronales en las áreas CA3b y CA3c, (p < 0,001). La estimulación táctil/kinestésica postnatal logró revertir los efectos del estrés prenatal, al reducir la densidad neuronal en las áreas CA3b y CA3c del hipocampo.

This investigation was undertaken in order to know whether the postnatal tactile/kinesthetic stimulation is effective in reversing the Prenatal Stress, in the cytoarchitecture of the CA3 region of the hippocampus, in female pups. 12 pups of female rats from the Sprague-Dawley strain were distributed to Control Group (GC), the Prenatal Maternal Stress by restriction group (EP) and Prenatal Maternal Stress with postnatal tactile/ kinesthetic stimulation Group (EP-ETK). The Prenatal Maternal Stress in female pups increased neuronal density in CA3b and CA3c areas (p<0.001). When compared to Prenatal Maternal Stress, pups prenatal stress who received early tactile/kinesthetic stimulation showed a decrease in neuronal density in CA3b and CA3c areas (p < 0,001). Postnatal tactile/kinesthetic stimulation was shown to successfully reverse the Prenatal Maternal Stress effects by decreasing neuronal density in CA3b and CA3c hippocampal areas.

Effects of prenatal stress on conduction airway morphology / Efectos del estrés prenatal sobre la morfología de la vía aérea de conducción

SUMMARY: It is known that chronic gestational stress alters the pulmonary immune response predisposing to chronic pulmonary pathologies such as asthma, which occur with morphological alterations in both conduction and exchange airways. However, it is still unknown whether chronic gestational stress generates alterations in pulmonary morphology, specifically in the airway conduction, which predisposes to hyperreactivity or other alterations of the airway, in early postnatal stages. The aim of this work was to analyze the effects of prenatal stress on the development of pulmonary conduction airway. Eight pregnant females were randomly assigned to one control group and one group submitted to restriction of movement during the last gestational week. The offspring were sacrificed on postnatal days 0 (P0) and 14 (P14), extracting the lung to conduct a histomorphological analysis of the conduction airway. In P0 an increase in the peribronchiolar smooth muscle in stressed males was observed in the conduction airway in comparison to the control (p = 0.0002); no significant differences were observed in the female or in the P14 stage. Prenatal stress produces histomorphologic changes in the conduction airway in the offspring at early postnatal stages.

RESUMEN: Se sabe que el estrés crónico gestacional altera la respuesta inmune pulmonar, predisponiendo a patologías crónicas pulmonares como el asma, que cursan con alteraciones morfológicas tanto en la vía aérea de conducción como de intercambio. Sin embargo, se desconoce aún si el estrés crónico gestacional genera alteraciones en la morfología pulmonar, específicamente en la vía aérea de conducción, que predisponga a hiperreactividad u otras alteraciones de la vía aérea, en etapas postnatales tempranas. El objetivo de este trabajo consistió en analizar los efectos del estrés prenatal sobre el desarrollo de la vía aérea de conducción pulmonar. Ocho hembras preñadas fueron divididas aleatoriamente en un grupo control y otro grupo sometido a estrés por restricción de movimiento durante la última semana gestacional. Las crías fueron sacrificadas en los días postnatal 0 (P0) y 14 (P14), extrayendoles el pulmón para realizar un análisis histomorfológico de la vía aérea de conducción. En P0 se observó en la vía aérea de conducción un aumento en la musculatura lisa peribronquiolar en machos estresados en comparación al control (p=0,0002). No se observaron diferencias significativas en la crías hembra, ni en la etapa de P14. El estrés prenatal produce cambios histomorfológicos en la vía aérea de conducción en las crías de hembras estresadas, en etapas postnatales tempranas.

Efeito do estresse pré-natal na regulação da inflamação alérgica pulmonar no modelo murino de asma experimental

Devido ao seu rápido crescimento, o feto é particularmente vulnerável a insultos e modificações no millieu hormonal. Este fato sugere que situações adversas experimentadas pela mãe grávida podem alterar o desenvolvimento e a saúde da prole, explicado principalmente pela permeabilidade da barreira placentária a diversos hormônios e substâncias. O objetivo deste trabalho foi estudar o efeito do estresse pré-natal na regulação da inflamação alérgica pulmonar, empregando o modelo murino de asma experimental. Para este propósito foram utilizadas camundongas virgens da linhagem Swiss, com 50 dias de idade. Foi empregado o modelo de choque nas patas para promover o estresse pré-natal e o modelo do "metrô de Nova Efeito do estresse pré-natal na regulação da inflamação alérgica pulmonar no modelo murino de asma experimental 65 Iorque" para o estresse pós-natal. As fêmeas foram distribuídas em 4 grupos experimentais: CC: fêmeas não estressadas; CE: fêmeas estressadas pós-natalmente aos 60 dias de idade (PND60), EC: fêmeas nascidas de mães estressadas entre o dia 15 (GD15) e 18 de gestação (GD18); EE: fêmeas nascidas de mães estressadas entre o GD15 e GD18 e estressadas pós-natalmente aos PND60. A indução da inflamação alérgica pulmonar foi realizada através da sensibilização dos animais com solução de ovalbumina (OVA) 0,1 mg.Kg-1 sc para avaliação do leucograma, lavado broncoalveolar (BAL), celularidade hematopoiética medular e neuroquímica. Os experimentos foram realizados 24h após a última sessão de nebulização. O número de células do BAL foi significantemente maior nos animais do grupo EE, em relação àqueles dos grupos CC (P0.05) para os linfócitos, neutrófilos, eosinófilos e monócitos; porém, observou-se diferenças significativas (P<0.05) entre o número de bastonetes dos grupos, sendo maior nos animais do grupo CC em relação àqueles do grupo EC. O número de células hematopoiéticas da medula óssea foi significantemente (P<0.05) menor nos animais do grupo EE, em relação àqueles do grupo CC. No córtex pré-frontal, há diferenças significantes na relação Ácido Homovanílico/ Dopamina (HVA/DA) (P<0.05), sendo maior nos animais do grupo EC, em relação àqueles do grupo CE. Em conclusão, o estresse pré-natal levou a modulação de células do sistema imune (SI) dos neonatos, evidenciado após a exposição a estresse agudo pós-natal, amplificando a resposta alérgica pulmonar. Sugere-se que a maior susceptibilidade dos animais do grupo EE seja consequência de alterações induzidas pelo estresse pré-natal no eixo hipotálamo-pituitária-adrenal (HPA).

Debido a su rápido crecimiento el feto es particularmente vulnerable a los cambios en el ambiente hormonal. Esto sugiere que situaciones adversas de la madre durante la gestación pueden alterar el desarrollo y la salud de la descendencia, principalmente debido a la permeabilidad de la barrera placentaria a diversas hormonas y sustancias. El objetivo del presente trabajo fue estudiar el efecto del estrés prenatal sobre la regulación de la inflamación alérgica pulmonar, empleando el modelo murino de asma experimental. Para este propósito fueron utilizadas ratonas vírgenes de linaje suizo de 50 d de edad. Fue empleado el modelo de descargas eléctricas en las patas (Footshock) para inducir el estrés prenatal y el modelo de estrés denominado "metro de Nueva York" para el estrés posnatal. Las hembras fueron divididas en 4 grupos experimentales: CC: hembras no estresadas; CE: hembras estresadas posnatalmente a los 60 d de edad (PND60); EC: hembras nacidas de madres estresadas entre el día 15 (GD15) y 18 de gestación (GD18); EE: hembras nacidas de madres estresadas entre el GD15 y GD18 y estresadas posnatalmente al PND60. La inducción de la inflamación alérgica pulmonar fue realizada a través de la sensibilización de los animales con solución de ovoalbúmina (OVA) 0,1 mg.Kg-1 sc. para posteriormente evaluar leucograma, lavado broncoalveolar (BAL), celularidad hematopoyética medular y neuroquímica. Los experimentos fueron realizados 24 horas después de la última sesión de nebulización. El número de células del BAL fue significativamente mayor en los animales del grupo EE, en comparación con los del grupo CC (P0.05) para los linfocitos, neutrófilos, eosinófilos y monocitos; sin embargo, se observaron diferencias significativas (P<0.05) entre los grupos en el número de bastonetes, siendo mayor en los animales del grupo CC en relación al grupo EC. El número de células hematopoyéticas de la médula ósea fue significativamente menor (P<0.05) en los animales del Grupo EE, en comparación con los del grupo de CC. En la corteza prefrontal, hubo diferencias significativas en la relación Ácido Homovanílico/ Dopamina (HVA/DA) (P<0.05), siendo mayor en los animales del grupo EC, en comparación con los del grupo CE. En conclusión, el estrés prenatal produjo modulación de las células del sistema inmune (SI) de los neonatos, evidenciado después de la exposición a un estrés agudo posnatal, por la amplificación de la respuesta alérgica pulmonar. Se sugiere que la mayor susceptibilidad de los animales del grupo EE sea resultado de los cambios inducidos por el estrés prenatal en el eje hipotálamo-pituitaria-adrenal (HPA).

Due to the rapid growth of the fetus it is particularly vulnerable to insults and changes in hormonal milieu. Therefore, is suggested that adverse situations experienced by the pregnant mother can alter the development and health of offspring, mainly due to the permeability of the placental barrier to various hormones and substances. The aim of the present investigation was to study the effects of prenatal stress in the regulation of pulmonary allergic inflammation, employing the murine model of experimental asthma. For this purpose, were used virgin female mice, Swiss lineage, of 50 days old. The models used were foot shock to induce prenatally stress, and "New York subway" stress to induce postnatally stress. Females were divided into 4 groups: CC group: not stressed females; CE group: postnatally stressed females (PND60); EC: females born from stressed mothers (GD15 to GD18); EE Group: females born from stressed mothers (GD15 to GD18) (footshock) and postnatally stressed (PND60). The induction of allergic pulmonary inflammation was done through sensitization of animals with 0,1 mg.Kg-1 sc of ovalbumin (OVA) solution, to further evaluate leukogram, bronchoalveolar lavage (BAL) hematopoietic marrow cellularity and neurochemistry. The experiments were performed 24 hours after the last session of nebulization. The number of BAL cells was significantly higher in EE group animals compared with the CC group (P0.05) for lymphocytes, neutrophils, eosinophils and monocytes; however, there were significant differences (P<0.05) observed in the number of rods cells between groups, being higher in animals the CC group compared to EC group. The number of hematopoietic cells of the bone marrow was significantly lower (P<0.05) in animals of Group EE, compared with CC group. In the prefrontal cortex, there were significant differences in homovanillic acid /dopamine (HVA/DA) (P<0.05) rate, being higher in the EC group, compared to EC group. In conclusion, prenatal stress modulated the immune system (SI) cells of neonates, evidenced after exposure to a post-natal acute stress by amplification of pulmonary allergic response. It is suggested that the increased susceptibility of animals EE group is a result of changes induced by prenatal stress on hypothalamus pituitary-adrenal (HPA) axis.

Prenatal stress caused by movement restriction induces changes in the development of skull bone in CF-1 mice progeny / El estrés prenatal causado por restricción de movimiento induce cambios en la anatomía ósea de cráneo en la progenie de ratones CF-1

Prenatal stress is associated with changes in body weight and size, and with disorders of the skeletal bone development process. However, there is a lack of documentation on the impact of prenatal stress on skull bone anatomy during the gestation period. Therefore, this research focuses on the short-term effects of prenatal stress on the skull bone anatomy of CF-1 mice on the day of birth. Methodology: Gestating females were divided at random into two groups (control and stressed). The experimental group was subjected to the stress of movement restriction during the final week of gestation. Upon birth the body weight of the progeny was evaluated (control group, n=34; stressed group, n=29). They were then cleaned and stained with alizarin red in order to evaluate the length, width and suture spaces of the skull bone anatomy from superior and inferior views. Results: Gestational stress significantly altered the skull bone anatomy (p<0.05) of the offspring at birth in comparison with the control group. Conclusion: Prenatal stress alters the skull bone anatomy of the CF-1 mouse at birth.

El estrés prenatal se ha asociado con alteraciones en el peso y tamaño corporal, además de trastornos en el proceso de osificación del esqueleto en desarrollo. Sin embargo, existen escasos antecedentes acerca del impacto del estrés prenatal sobre la anatomía ósea craneal durante el periodo de gestación. Por lo tanto, la presente investigación estudió los efectos a corto plazo del estrés prenatal sobre la anatomía ósea craneal del ratón CF-1 en el día de nacimiento. Las hembras gestantes fueron divididas aleatoriamente en dos grupos (control y estresado), el grupo experimental fue sometido a estrés por restricción de movimiento durante la última semana de gestación. Al nacimiento se evaluó el peso corporal de la progenie (grupo control n:34; grupo estresado n:29), para posteriormente diafanizar y teñir con alizarina roja, evaluando dimensiones longitudinales, anchos y espacios suturales de la anatomía de los huesos de cráneo por la vista superior e inferior. El estrés gestacional alteró significativamente la anatomía de los huesos de cabeza ósea (p<0,05) de las crías en el momento del nacimiento con respecto a los controles. El estrés prenatal altera la anatomía de los huesos craneales del ratón CF-1 evaluado al nacer.

Reproductive response in offspring male rats exposed to prenatal stress and to early postnatal stimulation / Respuestas reproductivas en ratas estresadas prenatalmente, expuestas a estimulación postnatal

Stress in pregnant rats alters the pattern of secretion of corticosterone (COR) and modifies transplacentally hypothalamic-pituitary-adrenal axis (HPA) fetus. Prenatal stress during the critical hypothalamic differentiation is related to decreased fertility of male offspring by an increase in the basal level of COR. This modification could induce long-term changes in the process of apoptosis in the testis. However, early postnatal handling increases maternal behavior and could reverse the effects caused by increased secretion of COR. The aim of this research was to investigate the effects of early postnatal stimulation of male rats prenatal stressed by chronic immobilization during the last two weeks of pregnancy, on the hypothalamic-pituitary-gonadal axis and their relationship with the activity of the HPA. Male Wistar rats 3 month olds, were separated in four groups: (a) prenatally stressed animals by immobilization (IMO), without postnatal stimulation; (b) prenatally stressed animals with postnatal stimulation; (c) control animals without prenatal stress, without postnatal stimulation and (d) control animals without prenatal stress, with postnatal stimulation. In different animals groups plasmatic levels of COR, Testosterone (T) and Luteinizing Hormone (LH) were analyzed. Gonadosomatic index and testicular apoptosis was determined. In conclusion that prenatal stress by IMO increased levels of COR and inhibits the HHG axis obtaining low values of plasmatic LH and T, testicular weight, and induction of apoptosis in testes. On other hand, early postnatal stimulation results in an increase in maternal care to the offspring reversing the effects of prenatal stress on the HPG axis. This effect could be mediated by a mechanism independent of the HPA axis.

El estrés en ratas preñadas altera el patrón de secreción de corticosterona (COR) materna la cual, por vía transplacentaria, produce una alteración del eje Hipotálamo-Hipófiso-Adrenal (HHA) fetal. El estrés prenatal producido durante la etapa crítica de diferenciación hipotalámica, está relacionado con la disminución de la fertilidad en las crías macho, por un aumento en el nivel de COR basal. Esta modificación podría inducir cambios a largo plazo en el proceso de apoptosis testicular. Sin embargo, la estimulación postnatal temprana mejora el comportamiento materno, revirtiendo las alteraciones producidas por el aumento de COR en las crías adultas. El objetivo fue investigar el efecto de la estimulación postnatal temprana sobre el eje Hipotálamo-Hipófiso-Gonadal (HHG) en ratas macho estresadas prenatalmente (EP), por inmovilización crónica durante las dos últimas semanas de la preñez. Se utilizaron crías de 3 meses de edad, que fueron divididas en 4 grupos: (a) individuos EP y sin estimulación postnatal; (b) individuos EP con estimulación postnatal; (c) individuos controles no estresados prenatalmente (CP) y sin estimulación postnatal; y (d) individuos CP con estimulación postnatal. En todos los grupos se midió COR, Testosterona (T) y Hormona Luteinizante (LH). Se determinaron la apoptosis y la Caspasa 3 testicular y el índice gonadosomático. Se concluye que el estrés prenatal por inmovilización aumenta los niveles de COR del eje HHA e inhibe el eje HHG obteniendo valores bajos de LH y T plasmáticas. Se observa disminución del tamaño testicular y aumento de la apoptosis de las células testiculares. Por otro lado, la estimulación postnatal temprana se traduce en un aumento del cuidado materno hacia la cría, lo que revierte los efectos producidos por el estrés prenatal sobre el eje HHG. Este efecto podría estar mediado por algún mecanismo independiente del eje HHA.

Maternal water deprivation affects the spermatogenesis of the offspring rats / La privación del agua en la etapa materna de ratas afecta la espermatogénesis de sus crías

Prenatal stresses such as water deprivation affect developmental process of embryo. This study evaluated the effects of water deprivation in pregnant mother on histological parameters of testis of offspring. Pregnant rats were divided into two groups (control and experimental). In experimental animals, water was removed from the ewes for 48h at the end of third trimester of gestation (19-21th days). Histopathology and histomorphic analysis and also TUNEL assay on offspring's testes were performed at pubertal age (60 days). The sperm motility either compared between two groups. The results showed that prenatal water deprivation induced histopathological alteration such as epithelium vacuolization, sloughing and detachments (P<0.01). Morphometrical data showed that prenatal water deprivation decreased tubular diameter and reduce epithelium height (P<0.01). Johnsen's score showed poor spermatogenesis in experimental group (P=0.001). The percent of germ cell apoptosis was increased in offspring's testes of rats born to mothers exposed to stress during pregnancy (P=0.000). The increased number of Multinucleated cells in the seminiferous lumen (P=0.000) in parallel with decreased number of sertoli cells (P=0.03) showed adverse effect of prenatal water deprivation on blood testis barrier. Present study revealed that prenatal water deprivation had injurious effect on developmental process of testes that affects on both germ cells and sertoli cells and had noxious effect on sperm parameters. These data confirm that prenatal stress disrupts normal spermatogenesis of offspring.

El estrés prenatal, como la privación del agua, afecta el proceso de desarrollo embrionario. Este estudio evaluó los efectos de la falta de agua en la rata preñada sobre los parámetros histológicos del testículo de las crías. Las ratas preñadas fueron divididas en dos grupos (control y experimental). En los animales de experimentación, se eliminó el agua durante 48 h al final del término de la gestación (19-21 días). Junto al análisis histopatológico e histomorfométrico se realizó el ensayo TUNEL en los testículos de las crías en la edad puberal (60 días). La motilidad de los espermatozoides se comparó entre los dos grupos. Los resultados mostraron que la privación de agua prenatal induce alteraciones histopatológicas tales como vacuolización del epitelio, descamación y desunión (P<0,01). Los datos morfométricos mostraron que con la privación de agua prenatal hubo disminución del diámetro tubular y se redujo la altura del epitelio (P<0,01). El score de Johnsen mostró una espermatogénesis deficiente en el grupo experimental (p = 0,001). El porcentaje de apoptosis de las células germinales se incrementó en los testículos de las crías de las ratas nacidas de madres expuestas a estrés durante el embarazo (p = 0,000). Un aumento del número de células multinucleadas en el lumen seminífero (P = 0,000) junto a la disminución del número de células de Sustento (P = 0,03) demostró el efecto adverso de la privación de agua prenatal en la barrera hemato-testicular. El presente estudio reveló que la falta de agua prenatal tuvo un efecto perjudicial en el proceso de desarrollo de los testículos, lo que afecta a las células germinales y los sustentocitos, y tuvo un efecto nocivo sobre los parámetros seminales. Estos datos confirman que el estrés prenatal altera la espermatogénesis normal de la descendencia.

Prenatal stress caused by movement restriction induces changes in the appendicular osseous development of CF-1 mice progeny / El estrés prenatal causado por restricción de movimiento induce cambios en el desarrollo óseo apendicular de la progenie de ratones CF-1

Prenatal stress has been associated with alterations in weight and body size, as well as disturbances in the process of developing skeletal ossification, occurring during childbirth and the early stages of life. However, the effect evidence of prenatal stress on bone grow thand development during the gestation period has been low; therefore, it is unknown whether these alterations are associated with potential for growth disorders Because of this, the study aims to determine the short-term effects of prenatal stress on the CF-1mouse bone structure growth in your date of birth. The female mice were divided randomly in two groups: controlled (n=2) and stressed (n=3). The latter was put under stress by means of movement restriction during the last week of gestation. Second, an evaluation of their gestational development was made, obtaining measurements of their weight. Finally, diaphanization with KOH and staining with Alizarin red was used to measure the length of their appendicular bones and their flat pelvic bones, of 53 P0 mice (25 control; 28 stressed during gestation). The stressed mice's body weight (p=0.02) and the length of their appendicular bones (radii, p=0.0011; ulnae, p= 0.0001; humeri, p=0.0001; femorae, p=0.0006; tibiae, p=0.0015) were affected significantly in contrast with the controlled group. On the other hand,there were nosignificant differences inmaternal bodyweightand length ofthe mice pelvic bones (isquium, ilium; p>0.05). The prenatal stress by means of movement restriction alters the osseous appendicular morphology of the CF-1 mouse evaluated at birth...

El estrés prenatal se ha asociado con alteraciones en el peso y el tamaño corporal, así como trastornos en el proceso osificación en el esqueleto en desarrollo, que se producen durante el parto y las primeras etapas de vida. Sin embargo, la evidencia de los efectos del estrés prenatal sobre el crecimiento de los huesos y el desarrollo durante el período de gestación ha sido baja, desconociéndose si estas alteraciones están relacionadas con trastornos del crecimiento. El objetivo fue determinar los efectos a corto plazo del estrés prenatal en la estructura ósea del ratón CF-1 en el día de nacimiento. Las hembras gestantes fueron divididas aleatoriamente en dos grupos: control (n=2) y estresado (n=3). Este último fue puesto bajo estrés por restricción de movimiento durante la última semana de gestación. Evaluando el peso corporal en la progenie al nacer (grupo control n=25; grupo estresado n=28), para posteriormente diafanizar mediante KOH y teñir con alizarina roja, midiendo la longitud de huesos largos apendiculares y huesos planos de pelvis en el plano coronal. El peso de los ratones estresados (p = 0,02) y la longitud de los huesos apendiculares fueron significativamente menores en comparación con el grupo control (radio, p = 0,0011; ulna, p = 0,0001; húmero, p = 0,0001; fémur, p = 0,0006; tibia, p = 0,0015). Por otro lado, no hubo diferencias significativas en el peso corporal de la madre y la longitud de los huesos pélvicos de las crías (isquion, íleon, p> 0,05). El estrés prenatal por restricción de movimiento altera la morfología ósea apendicular del ratón CF-1, evaluados al nacimiento...

Correlation between function-morphology of effect of the stress and flunitrazepam administered during gestation in adult mouse ovary / Correlación entre la función y la morfología de los efectos de estrés y flunitrazepam administrado durante la gestación en ovario de ratón adulto

Previously we report long lasting effects on ovary of mice prenatally exposed to flunitrazepam (FNZ), a benzodiazepine with tranquilized action. In this work we find that the FNZ don't prevent the effects on ovary prenatally exposure to stress in mice. We studied adult females born from mothers that had been stressed by immobilization on day 6 ofgestation (GD-6) or group S, and from mothers stressed also by immobilization at GD-6, but which received a single oral dose of FNZ immediately after the stress group FNZS. The control groups were the SS that received the GD-6 saline solution and the group NT non-treated. Their ovaries were extracted for histology studies and to observe the activity of 3b hydroxysteroid dehydrogenase/isomerase (3 b-HSD). The histological analysis revealed high staining affinity ovarian cell of S and FNZS. Double oocytes and apoptotic bodies were found in the secondary atretic follicles, as well as abnormal primordial, primary and secondary follicle populations, as compared to SS and NT groups. The primordial, primary, and secondary follicles were significantly reduced in the experimental groups. But the primary and secondary atretic follicles were higher in both groups, and the number of corpora lutea was lower in both groups. The activity of 3 b-HSD was abnormally increased in both FNZS- and S-groups. These findings suggest that FNZ did not counteract the impairing effects of prenatal stress on adult offspring ovarian follicles, and could rather be responsible for long lasting changes occurring during embryonic programming.

Previamente comprobamos efectos de larga duración sobre el ovario de ratones expuestos prenatalmente a flunitrazepam (FNZ), una benzodiazepina con acción tranquilizante. En este trabajo encontramos que el FNZ, no revierte los efectos producidos por la exposición prenatal a estrés. Estudiamos hembras adultas nacidas de madres que se estresaron por inmovilización el día 6 de la gestación (DG-6) o grupo S, y de madres estresadas también por inmovilización el DG-6, las que recibieron una sola dosis de FNZ inmediatamente después del estrés (grupo FNZS). Los grupos de control fueron el SS al que se le administró solución salina y el NT no tratado. Se extrajeron sus ovarios para su estudio histológico y para observar la actividad de delta 3b-deshidroxiesteroide dehidrogenasa/isomerasa (3 b-HSD). El análisis histológico reveló una gran afinidad tintoreal en los ovarios de los grupos S y FNZS. En los ovarios de los ratones del grupo FNZS se encontraron en los folículos secundarios atrésicos ovocitos dobles y cuerpos apoptóticos así como una población mayor de folículos anormales primordiales, primarios y secundarios en comparación con los grupos SS y NT. Los folículos primarios y secundarios tuvieron una reducción significativa en los grupos experimentales pero los folículos atrésicos primarios y secundarios fueron más en ambos grupos y el número de cuerpos lúteos fue menor en ambos grupos. La actividad de 3 b-HSD aumentó de manera anormal tanto en los grupos FNZ y S. Estos hallazgos sugieren que el FNZ no contrarresta los efectos negativos del estrés prenatal sobre los folículos ováricos de las crías adultas, y podría ser responsable de los cambios largo plazo que ocurren a durante la programación embrionaria.