ABSTRACT
El consumo de drogas de síntesis ha ido en aumento. Estos nuevos derivados sintéticos son análogos estructurales de la feniletilamina N-sustituida. Este grupo ha provocado severos casos de intoxicación e incluso probablemente la muerte de varios consumidores. El principal derivado es conocido como 25C-NBOMe y se consume en estampillas idénticas al LSD. En este trabajo se desarrolla una metodología analítica para la determinación de 25C-NBOMe mediante cromatografía planar instrumental (cromatografía en capa delgada de alta resolución) y cromatografía de gases con detector de masas (CG/EM) como técnicas alternativas de fácil manejo y costo. Estas metodologías demostraron ser robustas y confiables para el propósito previsto.
Consumption of synthetic drugs has increased. These new synthetic derivatives are structural analogs of N-substituted phenylethylamine, and this group has caused severe cases of poisoning and even probably the death of several users. The main derivative is known as 25C-NBOMe and it is consumed in blotters in the same manner as LSD. In this work, an analytical methodology for 25C-NBOMe determination by instrumental planar chromatography high-performance thin-layer chromatography (HPTLC) and gas chromatography with mass detector (GC/MS) were developed as alternative techniques; they are easy to use and low cost. These methods proved to be robust and reliable for the intended purpose.
O consumo de drogas sintéticas vem aumentando. Esses novos derivados sintéticos são análogos estruturais de feniletilamina N-substituída, este grupo tem causado casos graves de intoxicação e, até mesmo, provavelmente, a morte de vários consumidores. O principal derivado é conhecido como 25C-NBOMe e consumido em selos idênticos ao LSD. Neste trabalho é desenvolvida uma metodologia analítica para a determinação de 25C-NBOMe através de cromatografia planar instrumental (cromatografia em camada delgada de alta resolução) e cromatografia gasosa com detector de massas (CG/EM) como técnicas alternativas de fácil utilização e custo. Estas metodologias demonstraram serem robustas e fiáveis para a finalidade a que se destinam.
Subject(s)
Humans , Urine , Chromatography , Hallucinogens , Chromatography, Gas , Solid Phase ExtractionABSTRACT
Introducción: Los procesos de preparación de los alimentos inducen a la formación de compuestos nocivos para la salud, entre estos se encuentran los óxidos de colesterol (COPs). Objetivo: Determinar la formación de 25-hidroxicolesterol (5-colesten-3ß,25-diol), 6-cetocolesterol (3ß-hidroxi-5α-colestan-6-ona) y 7-cetocolesterol (3ß-hidroxi-5α-colestan-7-ona), en el proceso de preparación de frito pastuso (alimento típico de Nariño, Colombia). Materiales y métodos: La determinación de los COPs se realizó mediante extracción en fase sólida (SPE) y cromatografía liquida de alta eficiencia (HPLC-UV) en fase reversa. Los factores evaluados fueron: receta de preparación, tipo de grasa o aceite utilizado y tipo de carne de cerdo, aplicando un diseño experimental DCA con tres factores y tres niveles en cada caso, se realizaron 10 ensayos totalmente aleatorizados por duplicado, para verificar la reproducibilidad de los resultados. El análisis de óxidos de colesterol (COPs) se aplicó a los diferentes insumos para la preparación y en el alimento listo para el consumo. Resultados: El 7-cetocolesterol se determinó en la mayoría de las muestras; los niveles más altos se encontraron en las muestras de los experimentos donde se utilizó: carne de costilla, grasa de cerdo y la receta de fritura directa de la carne. Los niveles más bajos se encontraron para los experimentos donde se utilizó lomo y pierna, aceite reutilizado y preparaciones de la carne a cocción en agua y posterior fritura. Conclusiones: Las desviaciones estándar relativas fueron inferiores al 4,76% obteniendo resultados reproducibles. La identificación de óxidos de colesterol en la presente investigación permitió establecer la influencia que tienen las formas de preparación de los alimentos de consumo frecuente, en la formación de compuestos que presentan reconocidos efectos adversos para la salud humana.
Introduction: Food preparation processes lead to the formation of harmful compounds to health, some of these include oxides of cholesterol (COPs). Objective: To determine the formation of 25-hydroxycholesterol (5-cholesten-3ß, 25-diol), 6-cetocolesterol (3ß-hidroxi-5α-colestan-6-ona) and 7-cetocolesterol (3ß-hidroxi-5α-colestan-7-ona) in the process of preparation of "frito pastuso" (a typical dish in Nariño, Colombia). Materials and methods: The COPs were determined by extraction in solid phase (SPE) and liquid chromatography of high efficiency (HPLC-UV) in reversed phase. The evaluated factors were: recipe, type of grease or oil used and type of pork by using a DCA experimental design with three factors and three levels in each case. 10 totally randomized tests were performed in duplicate to check the reproducibility of the results. The analysis of cholesterol oxides (COPs) was applied to different inputs for the preparation and the food ready for consumption. Results: The 7-cetocolesterol was determined in the majority of samples. The highest levels were found in the samples of the experiments which used rib meat, pork fat and direct meat fried recipe. The lowest levels were found for experiments which used loin and leg, reused oil and the recipe where the meat is first cooked in water before frying. Conclusions: The relative standard deviations were lower to 4,76% where reproducible results were obtained. The identification of cholesterol oxides in this research helped to establish the influence that the different ways to prepare food of frequent consumption have on the formation of compounds that have recognized adverse effects on human health.
Subject(s)
Cholesterol , Chromatography, High Pressure Liquid , Solid Phase Extraction , Food AnalysisABSTRACT
Se realizó un estudio comparativo de dos metodologías para la determinación de residuos de plaguicidas en agua potable con el fin de establecer cuál de ellas es más adecuada como metodología de análisis. Las metodologías evaluadas involucraron extracción en fase sólida empleando el adsorbente polimérico LiChrolut®EN y extracción líquido-líquido utilizando n-hexano como solvente de extracción. La determinación se realizó por cromatografía de gases con detectores µ-ECD y NPD. El estudio involucró 50 plaguicidas, entre los que se encuentran diferentes familias químicas, tales como organofosforados, organoclorados y piretroides entre otros. Para comparar las metodologías, se evaluó la capacidad de detección y cuantificación estableciendo los límites de detección y cuantificación; la exactitud con experimentos de recuperación y la dispersión por medio de la precisión. Se estableció que estas presentan detección adecuada frente a las concentraciones máximas permitidas por la normativa colombiana, excepto para el insecticida monocrotofos, para el cual se obtuvo un límite de detección superior al exigido. Los experimentos de recuperación mostraron que la totalidad de plaguicidas organoclorados y piretroides pueden ser analizados empleando extracción líquido-líquido, mientras que la extracción en fase sólida es más adecuada para los plaguicidas más polares, tales como los organofosforados y azoles. Se determinó que 22 compuestos se pueden analizar por cualquiera de las dos metodologías, que por extracción en fase solida es posible analizar 36 de los 50 compuestos evaluados mientras que empleando extracción líquido-líquido se pueden analizar 28 de ellos.
Um estudo comparativo de dois métodos foi realizada para a determinação de resíduos de pesticidas em água potável, a fim de estabelecer qual deles é mais adequado como um método de análise. As metodologias avaliadas envolvendo extracção em fase sólida, utilizando o adsorvente polimérico LiChrolut®EN e extracção líquido-líquido utilizando n-hexano como solvente de extracção. A determinação foi realizada por detectores de GC-ECD e NPD. O estudo envolveu 50 pesticidas, incluindo aqueles que são diferentes famílias químicas, tais como os organofosforados, organoclorados e piretróides, entre outros. Para comparar os métodos, a capacidade de detectar e quantificar a estabelecer os limites de detecção e quantificação foi avaliada; a precisão e as experiências de recuperação usando precisão dispersão. Foi estabelecido que estes apresentaram taxas de detecção adequados para as concentrações máximas permitidas pela legislação colombiana, com exceção de monocrotofós inseticida, para que requerido foi obtido um limite de detecção de. Ensaios de recuperação, mostraram que todos os pesticidas organoclorados e piretróides podem ser analisados utilizando-se extracção líquido-líquido, enquanto que a extracção da fase sólida é mais adequado para os pesticidas mais polares, tais como organofosfatos e azóis. Determinou-se que 22 compostos podem ser analisados por qualquer um de dois métodos, que a extracção de fase sólida, é possível analisar 36 dos 50 compostos avaliados, enquanto utilizando a extracção liquido-liquido 28 pode analisar.
A comparative study of two methodologies for the determination of pesticide residues in drinking water was performed in order to establish which of them is more suitable of a method of analysis. The assessed methodologies involved solid phase extraction using polymeric adsorbent LiChrolut ® EN and liquid-liquid extraction using n-hexane as the extraction solvent; its determination was performed by GC with µECD and NPD detectors. The study involved 50 pesticides, including different chemical families, such as organophosphates, organochlorines and pyrethroids among others. The detection capability was assessed by establishing the limits of detection and quantification, and the accuracy and precision performing recovery experiments. It was determined that the two methodologies have suitable detection regarding the maximum concentrations permitted by the Colombian regulations, except for monocrotophos insecticide, for which a limit of detection obtained was slightly above to the required value. The recovery experiments showed that all organochlorine and pyrethroid pesticides can be analyzed using liquid-liquid extraction, while the solid phase extraction is more suitable for the more polar pesticides such as organophosphates and azoles; It was determined that 22 compounds can be analyzed by either of the two methods, that is possible to analyze 36 of the 50 compounds evaluated by solid phase extraction, while using liquid liquid extraction 28 can be analyzed.
ABSTRACT
A través del método de equilibrio batch se comparó la adsorción de las catecolaminas Dopamina (DA), Noradrenalina (NA) y Adrenalina (A), y de los metabolitos ácido dihidroxifenilacético (Dopac) y ácido indolacético (5- HIAA) en las fases sólidas octadecil (C18) hidrofóbica, diol (C Diol) hidrofílica y de intercambio catiónico débil (WCX). En la fase sólida WCX a pH 4,0 se observó un 78% de adsorción de catecolaminas y 68% de adsorción de Dopac. Las isotermas de adsorción de las catecolaminas en la fase WCX son de tipo Langmuir. La adrenalina tiene mayor afinidad que la dopamina por la fase WCX a pH 4,0 y la dopamina mayor afinidad que el Dopac y éste es coadsorbido sobre las catecolaminas adsorbidas en la fase WCX. Un ensayo con solventes orgánicos demostró que el tolueno extrajo selectivamente de una mezcla sintética el Dopac y el 5-HIAA coadsorbido, mientras que en una muestra de tejido cerebral de ratas experimentales fueron extraídos el Dopac y el ácido homovanílico (HVA). Estos resultados sirvieron para proponer un paso adicional de extracción con solventes orgánicos para la separación de metabolitos ácidos durante la extracción en fase sólida (EFS) en el análisis de catecolaminas.
The adsorptions of Dopamine (DA), Noradrenaline (NA), and Adrenaline (A) catecholamines were compared by using the batch equilibrium method, as well as those of the dihydroxyphenylacetic acid (Dopac) and indolacetic acid (5-HIAA) metabolites on the hydrophobic octadecyl (C18), hydrophilic diol (C Diol) and weak cation exchange (WCX) solid phases. On the WCX solid phase at pH 4.0, catecholamines adsorption of 78% and Dopac adsorption of 68% were observed. The adsorption isotherms of catecholamines on the for the WCX phase at pH 4.0 than dopamine, dopamine has greater affinity than Dopac, and this latter is coadsorbed over the adsorbed catecholamines on the WCX phase. A trial with organic solvents demonstrated that toluene selectively extracted Dopac and the coadsorbed 5-HIAA from a synthetic mix, while in a brain tissue specimen from experimental rats, Dopac and homovanilic acid (HVA) were extracted. These results served to propose an additional extraction step with organic solvents throughout the separation of acid metabolites during solid phase extraction (EFS) for the analysis of catecholamines.
Subject(s)
Animals , Rats , 3,4-Dihydroxyphenylacetic Acid/cerebrospinal fluid , Catecholamines/chemistry , Hydroxyindoleacetic Acid/cerebrospinal fluid , Dopamine , Epinephrine/chemistry , Norepinephrine , Solid Phase ExtractionABSTRACT
La medición de catecolaminas en orina ha sido utilizada tanto para diagnóstico como para la investigación. Este trabajo propone algunas modificaciones y condiciones estandarizadas para llevar a cabo la recolección de muestras de orina y la extracción y cuantificación de las catecolaminas utilizando cromatografía líquida de alto desempeño con detección electroquímica (HPLC-EC). Se probaron distintos métodos de preservación de la muestra durante la recolección, y se encontró que no es necesario utilizar ningún preservante o refrigerante para mantenerla estable. Se utilizó también la extracción en fase sólida (EFS) en la que, al modificar variables como la velocidad de elusión y la cantidad del eluyente final, se obtuvieron porcentajes de recuperación de 85,8% para dopamina, 88% para epinefrina y 96,9% para norepinefrina. En la medición por cromatografía, los coeficientes de variación fueron menores al 10% en la evaluación entre días y entre corridas; el error fue 2,5% en todos los casos. Se probó, además, que el método es lineal (r²Z0,9882; a<0,001) y que los valores obtenidos son comparables con resultados reportados previamente para adultos mayores, aunque el método y los cambios propuestos podrían ser utilizados también en otros grupos etarios.
Catecholamines in plasma and urine have been widely used for clinical diagnosis and research. The present paper proposes simple changes to collect, extract and quantify catecholamines among elderly people, and to obtain more accurate results using HPLC-EC. Refrigeration and acid were tested as preserving methods during urine collection. A pre-treatment with SPE was used to clean samples, and some variables were changed in order to improve recovery previous to chromatography analysis. No significant differences were found in sample catecholamines concentration using different preservation methods, or even in samples without refrigeration or acid during collection. Recovery obtained after changing some variables in SPE was 88.0% in epinephrine, 85.8% in dopamine and 96.9% in norepinephrine. VC was less than 10% between-days and between-run evaluation in all catecholamines, and error was 2.5%. Calibration curves were linear (r²Z0.9882; a<0.001) in matrixes employed. Values obtained in test samples were comparable with previous results reported in elderly people. The method and the changes proposed are useful to measure urinary catecholamines in elderly people. However, it is proposed that they could also be useful for other age groups, and not only for research but also for clinical purposes.
Subject(s)
Humans , Catecholamines , Adult , Solid Phase Extraction , Urine Specimen Collection/methods , Dopamine , Epinephrine , Norepinephrine , Chromatography, LiquidABSTRACT
Introducción: El concepto de validación se refiere a la evaluación estadística de los resultados obtenidos en la aplicación de técnicas analíticas, mediante pruebas convenientemente documentadas y demostrativas de que un método es lo suficientemente fiable a fin de producir el resultado previsto bajo condiciones definidas, como son: sistema analítico, intervalo de concentración, infraestructura y talento humano. Objetivo: Describir el proceso de validación del método analítico para la cuantificación de valsartán en plasma humano por HPLC-UV y su aplicación en estudios farmacocinéticos, de biodisponibilidad y bioequivalencia de medicamentos que contengan valsartán como principio activo. Metodología: Se desarrolló un método para la detección y cuantificación de valsartán en plasma humano, con elución isocrática por cromatografía líquida de fase reversa, con detección ultravioleta a 265 nm, mediante el método de adición de estándar. Se utilizó losartán como estándar interno. El método implica una extracción en fase sólida de los principios activos (valsartán y losartán) con cartuchos C8. La separación se realizó en una columna C18 en fase reversa y la fase móvil fue una mezcla de acetonitrilo: buffer fosfato (45:55 v/v) ajustado a pH 2.7±0.1 con ácido fosfórico concentrado. El método se validó en el rango de concentraciones de 0.05 a 20 µg/ml con adición de estándar de valsartán de 2.5 µg/ml. Resultados y conclusiones: La curva de calibración fue lineal en el rango de concentraciones establecido. Se evaluó la reproducibilidad, estabilidad y porcentaje de recuperación del método. El método para determinar el valsartán en plasma humano por HPLC/UV fue preciso y exacto con un límite de cuantificación de 1.485 µg/ml. Este método fue suficientemente sensible para su aplicación en estudios farmacocinéticos de valsartán.
Introduction: The validation concept refers to the statistical evaluation of the results obtained in the application of analytic technics, by appropriately documented and demonstrative tests that a method is sufficiently reliable to produce the result foreseen under defined conditions, like they are: analytic system, concentration interval, infrastructure and human talent.Objective: To describe the validation process of the analytic method for the valsartan quantification in human plasma by HPLC-UV and its application in pharmacokinetic, bioavailability and bioequivalence studies of products that contain the active principle valsartan.Methodology: A method for detection and quantification of valsartan in human plasma has been developed using an isocratic elution on reversed phase liquid chromatography with ultraviolet detection at a single wavelength (265 nm) and the addition standard method. Losartan was used as an internal standard. This method involves a solid-phase drug extraction (valsartan and losartan) from plasma using C8 cartridges. Separation was achieved on a C18 reversed phase column and the mobile phase consisted of 45% acetonitrile and 55% phosphate buffer (adjusted to pH 2.7 ± 0.1 with phosphoric acid). The assay has been vali-dated over a concentration range of 0.05 to 20 µg/ml with addition of valsartan 2.5 µg/ml. Results and conclusions: Calibration curve was linear in the described concentration range. The reproducibility, stability and recovery of the method were evaluated. Determination of valsartan in human plasma by HPLC/UV method was accurate and precise with a quantitation limit of 1.485 µg/ml. The method was sufficiently sensitive for pharmacokinetic studies of valsartan in human plasma.