Leptospirose: Características da enfermidade em humanos e principais técnicas de diagnóstico laboratorial / Leptospirosis: Characteristics of the human disease and main laboratory diagnostic techniques

A leptospirose é a zoonose de maior distribuição geográfica, com estimativa de cerca de 60.000 mortes por ano. A doença é causada por bactérias do gênero Leptospira, que possui mais de 300 diferentes sorovares e 64 espécies já identificadas, sendo o ambiente a principal fonte de contaminação. A doença em humanos apresenta manifestações clínicas variadas e caráter bifásico, devendo ser confirmada por meio do diagnóstico laboratorial. O objetivo deste trabalho foi reunir conceitos atualizados sobre a leptospirose humana e as principais técnicas de diagnóstico laboratorial empregadas. A MAT é considerada o padrão-ouro para o diagnóstico da leptospirose, mas devido à baixa sensibilidade na fase inicial da doença é necessário o emprego de técnicas mais sensíveis neste período. Baseado em diversos estudos, as metodologias de PCR, ELISA-IgM e teste rápido apresentaram sensibilidade satisfatória nos primeiros dias após o início dos sintomas. Na segunda semana, a MAT apresentou 100% de sensibilidade, mantendo sua alta especificidade em ambas as fases. No geral, os testes sorológicos de ELISA-IgM e teste rápido apresentaram resultados satisfatórios como métodos de diagnóstico precoce, principalmente tratando-se de locais com pouca infraestrutura, diferente dos laboratórios de referência onde é possível empregar as técnicas de PCR e MAT.

Leptospirosis is the most widespread zoonosis, which has a balance of almost 60,000 deaths per year. Bacteria of Leptospira genus, which has more than 300 different serovars and 64 species already identified, cause the disease, being the environment the main source of contamination. The human disease presents a large set of clinical manifestations, showing biphasic presentation, the reason why leptospirosis must be confirmed by laboratory diagnosis. This study aimed to group recent concepts concerning human leptospirosis and the main diagnosis techniques employed at the laboratory. MAT is considered the gold standard for leptospirosis diagnosis, but has low sensitivity on the onset of disease, leading to the use of techniques with higher sensitivity on this period. Based on several studies, PCR, ELISA-IgM and rapid test presented satisfactory sensitivity on the onset of symptoms. In the second week, MAT showed 100% of sensitivity, maintaining its high specificity in both phases. In general, the ELISA-IgM and rapid serological tests showed satisfactory results as methods for early diagnosis, especially in the case of places with poor infrastructure, different from the reference laboratories where it is possible to use the PCR and MAT techniques.

IgM ELISA for leptospirosis diagnosis: a systematic review and meta-analysis / ELISA IgM para diagnóstico de leptospirose: revisão sistemática e meta-análise

Abstract A systematic review with meta-analysis was performed to estimate the accuracy of IgM ELISA for Leptospirosis diagnosis. A search of Medline, Lilacs, Embase, Cochrane Central Register of Controlled Trials and Grey literature (Google Scholar and British Library) was conducted. The medical subject headings (MeSHs) and the words "leptospirosis", "human leptospirosis" and "IgM ELISA" were used. Fifty-two studies were analyzed, which included 10,775 samples. The pooled sensitivity of all the studies was 86% (CI 95%, 85%-87%) and specificity was 90% (CI 95%, 89%-91%). In studies of the acute phase, the sensitivity and specificity were 84% (CI 95%, 82%-85%) and 91% (CI 95%, 90%-91%), respectively. In conclusion, IgM ELISA is sensitive for use as an initial screen for leptospiral infections.

Resumo O objetivo desta revisão sistemática e meta-análise foi avaliar a acurácia do ELISA IgM para o diagnóstico precoce da leptospirose em humanos. A busca foi realizada nas seguintes bases de dados: Medline, PubMed, LILACS, Embase e Cochrane Central Register of Controlled Trials e Grey literature (Google Scholar and British Library). As palavras-chaves usadas foram: "leptospirosis", "human leptospirosis" e "IgM ELI-SA". Foram analisados 52 estudos, que incluíram 10.775 amostras. A sensibilidade e especificidade combinada de todos os estudos foram 86% (CI 95%, 85%-87%) e 90% (CI 95%, 89%-91%), respectivamente. Nos estudos de fase aguda, a sensibilidade e especificidade foram, respectivamente, 84% (CI 95%, 82%-85%) e 91% (CI 95%, 90%-91%). Conclui-se que o ELISA IgM é um teste sensível para rastreamento inicial da leptospirose.

Isolation of Leptospira spp. from a man living in a rural area of the Municipality of Cruz Alta, RS, Brazil / Isolamento de Leptospira spp. em um morador da zona rural do Município de Cruz Alta, RS, Brasil

The aim of this study was to describe the isolation of a pathogenic strain of Leptospira interrogans from the urine sample of a male human living in the rural area of the County of Cruz Alta, Rio Grande do Sul. An aliquot of each urine sample was sown in a Fletcher and Ellinghausen - McCullough - Johnson - Harris (EMJH) media. Samples in which there was growth of spirochetes were sent to the Leptospirosis Laboratory of the Institute of Pathobiology in the National Institute of Agricultural Technology, Buenos Aires, Argentina and were typified by the Multiple Locus of Variable Number Tandem Repeat technique (MLVA). Leptospira interrogans serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130 was isolated, and this is a very important finding that serves as a warning to characterize risk situation of leptospirosis epidemic by a pathogenic strain. Health professionals need to be more committed to the primary health care in Brazil and routinely apply actions of preventive medicine in rural communities in order to get success in the control of leptospirosis and other important zoonoses.

O objetivo do presente estudo foi descrever um caso de isolamento de espécie patogênica de Leptospira interrogans em amostra de urina de um humano morador da zona rural do Município de Cruz Alta, Estado do Rio Grande do Sul. De cada amostra de urina, uma alíquota foi semeada nos meios Fletcher e Ellinghausen - McCullough - Johnson - Harris (EMJH). As amostras, nas quais houve crescimento de espiroquetas, foram encaminhadas para o Laboratório de Leptospirose do Instituto de Patobiologia do Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuária, Buenos Aires, Argentina e foram tipificadas pela técnica Multiple Locus of Variable Number Tandem Repeat (MLVA). De um residente do sexo masculino da área rural do município de Cruz Alta, foi isolada Leptospira interrogans sorovariedade Copenhageni cepa Fiocruz L1-130, uma descoberta muito importante e que serve como um alerta por caracterizar uma situação de risco de epidemia de leptospirose por uma cepa patogênica. Os profissionais de saúde precisam ser mais comprometidos com a atenção primária à saúde no Brasil e rotineiramente aplicar ações de medicina preventiva nas comunidades rurais, a fim de obter sucesso no controle da leptospirose e de outras importantes zoonoses.

Avaliação da prova de hemaglutinação passiva no diagnóstico da leptospirose humana em diversos períodos evolutivos da doença / Evaluation of passive hemagglutination test in the diagnosis of human leptospirosis in different evolutive periods of the illness

Foram realizadas provas de hemaglutinação passiva em amostras séricas de 189 pacientes com leptospirose, distribuídas quanto ao período decorrido após início dos sintomas. Os resultados foram comparados aos obtidos com a prova de referência, a soroaglutinação microscópica. A hemaglutinação passiva revelou, na primeira amostra examinada, maior número de resultados positivos, estatisticamente significante, a nível de 1%, no intervalo de 6 a 10 dias de doença, quando comparada à soroaglutinação. Nos demais intervalos, os valores diagnósticos das provas foram aceitos como iguais, Os resultados sugerem que a prova de hernaglutinação passiva pode ser empregada no acompanhamen to sorológico, como subsídio no estabelecimento do estágio da infecção leptospirótica (AU).

Avaliação da prova de hemaglutinação passiva no diagnóstico da leptospirose humana / Evaluation of passive hemagglutination test for human leptospirosis

A prova de hemaglutinação passiva foi avaliada em relação à soroaglutínação microscópica em 437 amostras de soros provenientes de 192 pacientes com quadro clínico sugestivo de leptospirose, internados no Hospital de Isolamento "Emílio Ribas", em São Paulo. A prova de hemaglutinação passiva apresentou associação significativa com a soroaglutinação microscópica, revelando-se, pois, uma prova alternativa de elevado valor diagnóstico (AU).

Estado imunológico na leptospirose / Immunologic status of patients with leptospirosis

Vinte e dois pacientes com leptospirose, internados no Hospital Couto Maia, Salvador, Bahia, foram investigados no sentido de se detectar possível envolvimento imunológico na patogênese da doença. A alergia cutânea na doença foi avaliada mediante injeção de 0,1 ml de suspensão de leptospiras inativadas, denominada Leptospirin, obtendo-se 91% de positividade. Em cinco pacientes procedeu-se à biopsia da lesão dérmica, sendo o estudo histopatológico e a imunofluorescência compatíveis com processo de hipersensibilidade retardada (tipo IV). O estudo das imunoglobulinas e complemento sérico mostraram elevação de IgG e IgM, e redução de Clq e Ca• A imunoeletroforese demonstrou redução da pré-albumina, ampliação de IgM (predominante) e IgG, além de aumento marcante da alfa-B-macroglobulína. Os achados sugerem que posstvers mecanismos imunolôgícos possam estar contribuindo na patogênese da doença (AU).

Imunodiagnóstico da leptospirose humana. 1. Antígeno polissacarídico para a prova de hemaglutinação passiva / Immunodiagnosis of human leptospirosis. 1. Polysaccharide antigen for passive hemagglutination test

Antígenos polissacarídicos F. foram extraídos de leptospiras dos sorotipos icterohaemorrhagiae e pato c, cuja relação proteína/carboidrato foi de 1,24 e 0,54, respectivamente. Sua especificidade sorológica foi avaliada na reação de hemaglutinação passiva para o diagnóstico da leptospirose humana. Para tanto, hemácias de carneiro previamente fixadas com glutaraldeído foram sensibilizadas com ambas as preparações. Esta prova foi experimentada em 91 soros obtidos de 35 pacientes com leptospirose, causada presumivelmente pelos sorotipos icterohae-morrhagiae, copenhageni, grippothyphosa e pomona. Verificou-se que ambas as frações F. comportaram-se de maneira semelhante. A reação de hemaglutinação passiva foi gênero específica, bastante sensível, positivando-se precocemente na fase aguda da doença. Foram salientadas as vantagens do emprego do antígeno F. patoc, por se tratar de sorotipo não patogênico (AU).

Imunodiagnóstico da leptospirose humana. 2. Estudo comparativo das reações de soroaglutinação microscópica, hemaglutinação passiva e imunofluorescência indireta / Immunodiagnosis of human leptospirosis. 2. Comparative study of microscopic agglutination passive hemagglutination and indirect immunofluorescence tests

Foram realizadas provas de hemaglutinação pa.ssiva e de imunefluorescêncía indireta em 98 soros obtidos de 38 pacientes com leptospirose causada presumivelmente pelos soro tipos icterohaemorrhagiae, copenhageni, grippotyphosa ou pomona. Hemácias de carneiro. sensibilizadas com antígeno polissacarfdico F" obtido de leptospira do. sorotípo patoc, foram utilizadas na hemaglutinação passiva. Para a prova de imunofluorescência indireta foram empregados antígenoa íntegros do. mesmo. sorotipo. Os resultados foram comparados com os obtidos através da prova de aglutinação microscópíca, na qual foram empregados .10 soro tipos patogênicos. As reações de hemaglutinação passiva e de imunofluorescência indireta mostraram ser gênero. específicas, sendo. que a primeira caracterizou-se por ser a mais indicada para o. diagnóstico. precoce da leptospirose humana aguda (AU).

Considerações sobre novo surto epidêmico de leptospirose humana na Grande Recife, Brasil, em 1975 / Considerations on a new epidemic outbreak of human leptospirosis in Greater Recife, Brazil, in 1975

Foi apresentado um breve relato de novo surto epidêmico de leptospirose ocorrido em 1975 na população da Grande Recife, conseqüente às enchentes que em julho de 1975 assolaram a cidade e arredores. Foram registrados 107 casos, 105 identificados através de soro-aglutinação e 2, através de hemocultura. Mais Uma vez o sorotipo icterohaemorrhagiae foi o agente etiológico predominante, encontrado em 55 casos, seguido do ballum com 18 casos, do grippotyphosa com 9 casos e do pyrogenes com 8 casos (AU).