CA-125 and CCL2 may indicate inflammation in peritoneal dialysis patients / CA-125 e CCL2 podem indicar inflamação em pacientes em diálise peritoneal

Abstract Introduction: Progressive structural changes in the peritoneal membrane occur over the course of treatment in peritoneal dialysis (PD), resulting in an increase in cytokines such as CCL2 and structural changes in peritoneal membrane triggering an increase in CA-125 in dialysate, which reflects a probable local inflammatory process, with possible loss of mesothelial cells. Thus, the current study aimed to evaluate the association between plasma and CCL2 and CA-125 dialysate levels in patients undergoing PD. Methods: Cross-sectional study was conducted with 41 patients undergoing PD. The assessments of CA-125 and CCL2 levels were performed using a capture ELISA. Correlations were estimated using Spearman's correlation and the investigation of the association between the explanatory variables (CCL2) and response variable (CA-125) was done for crude ratio of arithmetic means and adjusted utilizing generalized linear models. Results: A moderate positive correlation was observed between the levels of CA-125 and CCL2 in the dialysate (rho = 0.696). A statistically significant association was found between the levels in the CCL2 and CA-125 dialysate (RoM=1.31; CI = 1.20-1.43), which remained after adjustment for age (RoM = 1.31; CI=1.19-1.44) and for time in months of PD (RoM=1.34, CI=1.22-1.48). Conclusion: The association of CA-125 levels with CCL2 in the dialysate may indicate that the local inflammatory process leads to temporary or definitive changes in peritoneal membrane. A better understanding of this pathogenesis could contribute to the discovery of new inflammatory biomarkers.

Resumo Introdução: Alterações estruturais progressivas na membrana peritoneal ocorrem no decorrer do tratamento em diálise peritoneal (DP), resultando em um aumento de citocinas como CCL2 e alterações estruturais na membrana peritoneal desencadeando um aumento de CA-125 no dialisato, o que reflete um provável processo inflamatório local, com possível perda de células mesoteliais. Assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar a associação entre CCL2 e CA-125 no plasma e no dialisato de pacientes submetidos à DP. Métodos: Foi realizado um estudo transversal com 41 pacientes submetidos à DP. As avaliações dos níveis de CA-125 e CCL2 foram realizadas utilizando ELISA de captura. As correlações foram estimadas usando a correlação de Spearman, e a investigação da associação entre as variáveis explicativas (CCL2) e a variável resposta (CA-125) foi feita pela razão bruta das médias aritméticas e ajustada utilizando modelos lineares generalizados. Resultados: Foi observada uma correlação positiva moderada entre os níveis de CA-125 e CCL2 no dialisato (rho = 0,696). Foi encontrada uma associação estatisticamente significativa entre os níveis no dialisato de CCL2 e CA-125 (RoM=1,31; IC = 1,20-1,43), que permaneceu após ajuste por idade (RoM = 1,31; IC=1,19-1,44) e pelo tempo de DP em meses (RoM=1,34, IC=1,22-1,48). Conclusão: A associação dos níveis de CA-125 com CCL2 no dialisato pode indicar que o processo inflamatório local leva a alterações temporárias ou definitivas na membrana peritoneal. Uma melhor compreensão desta patogênese pode contribuir para a descoberta de novos biomarcadores inflamatórios.

Lymphocyte B and Th17 chemotactic cytokine levels in peri-implant crevicular fluid of patients with healthy, peri-mucositis, and peri-implantitis implants / Niveles de citoquinas quimiotácticas de linfocitos B y Th17 en el fluido crevicular periimplantario de pacientes con implantes sanos, perimucositis y periimplantitis

Peri-implantitis is one of the leading causes of implant failure and loss, and its early diagnosis is not currently feasible due to the low sensitivity of currents methods. In the current exploratory cross-sectional study, we explored the diagnostic potential of lymphocyte B and Th17-chemotactic cytokine levels in peri-implant crevicular fluid (PICF) in 54 patients with healthy, peri-mucositis, or peri-implantitis implants. Peri-implant crevicular fluid was collected, and the levels of the molecules under study were quantified by Luminex assay. The concentrations of CCL-20 MIP-3 alpha, BAFF/BLYS, RANKL and OPG concentration in PICF were analyzed in the context of patient and clinical variables (smoking status, history of periodontitis, periodontal diagnosis, implant survival, suppuration, bleeding on probing, periodontal probing depth, clinical attachment level, mean of implant probing depth, and plaque index). Patients with peri-implantitis, appear to have an overregulation of the RANKL/BAFF-BLyS axis. This phenomenon needs to be investigated in depth in further studies with a larger sample size.

La periimplantitis es una de las principales causas de falla y pérdida del implante, y su diagnóstico temprano no es factible debido a la baja sensibilidad de los métodos actuales. En este estudio transversal exploratorio, se estudió el potencial diagnóstico de los niveles de citocinas quimiotácticas de linfocitos B y Th17 en el líquido crevicular periimplantario (LCPI) en 54 pacientes con implantes sanos, peri-mucositis o periimplantitis. Se recogió líquido crevicular periimplantario y se cuantificaron los niveles de las moléculas estudiadas mediante Luminex assay. Las concentraciones de CCL-20 MIP-3 alfa, BAFF/BLYS, RANKL y la concentración de OPG en LCPI se analizaron en el contexto de las variables clínicas y del paciente (tabaquismo, antecedentes de periodontitis, diagnóstico periodontal, supervivencia del implante, supuración, sangrado al sondaje, profundidad de sondeo periodontal, nivel de inserción clínica, media de la profundidad de sondeo del implante e índice de placa). Los pacientes con periimplantitis parecen tener una sobrerregulación del eje RANKL/BAFF-BLyS. Este fenómeno debe investigarse en profundidad en futuros estudios con un tamaño de muestra mayor.

Effect of cigarette smoke on counts of immunoreactive cells to eotaxin-1 and eosinophils on the nasal mucosa in young patients with perennial allergic rhinitis / Efeito do tabagismo nas contagens de células imunorreativas a eotaxina-1 e eosinófilos na mucosa nasal em pacientes jovens com rinite alérgica perene

Abstract Introduction: In teenagers with perennial allergic rhinitis, exposure to tobacco cigarette smoke increases the count of eosinophils in the nasal mucosa; the recruitment of eosinophils arises from the combined action of a number of cellular and molecular signals, including eotaxin. Objective: To assess the effect of exposure to tobacco cigarette smoke on the count of immunoreactive cells to eotaxin-1 and eosinophils on the nasal mucosa of children and teenagers with perennial allergic rhinitis. Methods: In a cross-sectional study, forty-four patients were evaluated (aged 7-19 years old): 22 with and 22 with no exposure to tobacco cigarette smoke. After replying to 2 validated questionnaires, on Asthma and Allergies in Childhood and on the severity of nasal symptoms, nasal mucosal samples were obtained by scraping the middle one-third of the inferior turbinates. Then counts of immunoreactive cells to eotaxin-1 and eosinophils were assessed by immunohistochemistry. Results: Patients with exposure to tobacco cigarette smoke showed higher cell counts of both eotaxin-1 and eosinophils than patients with no exposure to the smoke, with no correlation between the two variables. However, both counts, of eotaxin-1 and eosinophils, were related to the cotinine/creatinine ratio. Conclusions: Exposure to tobacco cigarette smoke can increase eotaxin-1 and the count of eosinophils in the nasal mucosa of young patients with perennial allergic rhinitis.

Resumo Introdução: Em adolescentes com rinite alérgica perene, a exposição à fumaça do cigarro de tabaco aumenta a contagem de eosinófilos na mucosa nasal. O recrutamento de eosinófilos surge da ação combinada de alguns sinais celulares e moleculares, inclusive a eotaxina. Objetivo: Avaliar o efeito da exposição à fumaça do cigarro de tabaco na contagem de células imunorreativas a eotaxina-1 e eosinófilos na mucosa nasal de crianças e adolescentes com rinite alérgica perene. Método: Em um estudo transversal, 44 pacientes foram avaliados (entre sete e 19 anos): 22 com e 22 sem exposição à fumaça do cigarro de tabaco. Depois de responder a dois questionários validados, sobre asma e alergias na infância e sobre a gravidade dos sintomas nasais, as amostras de mucosa nasal foram obtidas por meio de raspagem do terço médio das conchas inferiores. Em seguida, as contagens de células imunorreativas para eotaxina-1 e eosinófilos foram avaliadas por imuno-histoquímica. Resultados: Os pacientes com exposição à fumaça do cigarro de tabaco apresentaram contagens de células mais elevadas tanto para eotaxina-1 como para eosinófilos em comparação com os pacientes sem exposição à fumaça, sem correlação entre as duas variáveis. No entanto, ambas as contagens, de eotaxina-1 e eosinófilos foram relacionadas com a razão cotinina/creatinina. Conclusões: A exposição à fumaça do cigarro de tabaco pode aumentar a eotaxina-1 e a contagem de eosinófilos na mucosa nasal de pacientes jovens com rinite alérgica perene.

The cerebrospinal fluid in multiple sclerosis: far beyond the bands / O líquido cefalorraquidiano na esclerose múltipla: muito além das bandas

ABSTRACT The cerebrospinal fluid analysis has been employed for supporting multiple sclerosis diagnosis and ruling out the differential diagnoses. The most classical findings reflect the inflammatory nature of the disease, including mild pleocytosis, mild protein increase, intrathecal synthesis of immunoglobulin G, and, most typically, the presence of oligoclonal bands. In recent years, new biomarkers have emerged in the context of multiple sclerosis. The search for new biomarkers reflect the need of a better evaluation of disease activity, disease progression, and treatment efficiency. A more refined evaluation of disease and therapy status can contribute to better therapeutic choices, particularly in escalation of therapies. This is very relevant taking into account the availability of a greater number of drugs for multiple sclerosis treatment in recent years. In this review, we critically evaluate the current literature regarding the most important cerebrospinal fluid biomarkers in multiple sclerosis. The determination of biomarkers levels, such as chemokine ligand 13, fetuin A, and mainly light neurofilament has shown promising results in the evaluation of this disease, providing information that along with clinical and neuroimaging data may contribute to better therapeutic decisions.

RESUMO A análise do líquido cefalorraquidiano tem sido empregada para avaliação diagnóstica da esclerose múltipla e a exclusão dos diagnósticos diferenciais. Os achados clássicos refletem a natureza inflamatória da doença, incluindo discreta pleocitose, leve hiperproteinorraquia, aumento da síntese intratecal de imunoglobulina G e, mais tipicamente, a presença de bandas oligoclonais. Nos últimos anos, surgiram novos biomarcadores para esclerose múltipla, e esta busca por marcadores reflete a necessidade de melhor avaliar a atividade e a progressão da doença, bem como a eficácia terapêutica. Uma avaliação mais refinada da atividade da doença e da resposta aos medicamentos pode contribuir para melhores decisões terapêuticas, particularmente no que se refere à troca de medicação. Isto é muito importante nos dias de hoje, quando surgem novas opções medicamentosas. Neste artigo de revisão, avaliamos criticamente a literatura atual referente aos novos marcadores liquóricos na esclerose múltipla. A mensuração destes marcadores, como a quimiocina CXCL13, fetuína A e, principalmente, o neurofilamento de cadeia leve, demonstrou resultados promissores na avaliação da doença, provendo informações que, em conjunto com dados clínicos e de neuroimagem, podem contribuir para melhores decisões terapêuticas.

Soro urêmico inibe a expressão in vitro da quimiocina SDF-1: possível impacto da toxicidade urêmica na lesão endotelial / Uremic serum inhibits in vitro expression of chemokine SDF-1: impact of uremic toxicity on endothelial injury

Introdução: A disfunção endotelial é importante na patogênese da doença cardiovascular (DCV) relacionada à doença renal crônica (DRC). Stromal cell-derived factor-1 (SDF-1) é uma quimiocina que mobiliza células endoteliais progenitoras (EPC) e em conjunto com a interleucina-8 (IL-8) podem ser usadas como marcadores de reparo e lesão tecidual. Objetivo: Neste trabalho, foi investigado o efeito do meio urêmico na expressão de SDF-1 e IL-8 in vivo e in vitro. Métodos: A inflamação sistêmica foi avaliada por meio da proteína C-reativa (PCR) e interleucina-6 (IL-6). IL-8 e SDF-1 foram avaliados por ELISA como marcadores de disfunção endotelial e reparo tecidual, respectivamente. Os estudos in vitro foram realizados em células endoteliais umbilicais humanas (HUVEC) expostas ao meio urêmico ou saudável. Resultados: Foram incluídos nesse estudo 26 pacientes em hemodiálise (HD) (17 ± 3 meses em diálise, 52 ± 2 anos, 38% homens e 11% diabéticos). As concentrações séricas de PCR, IL-6, SDF-1 e IL-8 foram 4,9 ± 4,8 mg/ml, 6,7 ± 8,1 pg/ml, 2625,9 ± 1288,6 pg/ml e 128,2 ± 206,2 pg/ml, respectivamente. Houve correlação positiva entre PCR e IL-6 (ρ = 0,57; p < 0,005) e entre SDF-1 e IL-8 (ρ = 0,45; p < 0,05). Os resultados in vitro demonstraram que a expressão de SDF-1 pelas HUVEC após 6 horas de tratamento com meio urêmico é menor comparada ao tratamento com meio saudável (p < 0,05). Após 12 horas de tratamento, ocorreu aumento de IL-8 quando as HUVECs foram expostas ao meio urêmico (p < 0,005). Conclusão: Sugerimos que SDF-1 e IL-8 nos pacientes em HD podem ser usados para mensurar a extensão do dano e consequente ativação vascular na uremia. .

Introduction: Endothelial dysfunction is important in the pathogenesis of cardiovascular disease (CVD) related to chronic kidney disease (CKD). Stromal cell-derived factor-1 (SDF-1) is a chemokine which mobilizes endothelial progenitor cells (EPC) and together with interleukin-8 (IL-8) may be used as markers of tissue injury and repair. Objective: This study investigated in vivo and in vitro the effect of uremic media on SDF-1 and IL-8 expression. Methods: Systemic inflammation was assessed by C-reactive protein (CRP) and interleukin-6 (IL-6). IL-8 and SDF-1 were measured as markers of endothelial dysfunction and tissue repair, respectively, by ELISA. In vitro studies were performed on human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) exposed to healthy or uremic media. Results: The study included 26 hemodialysis (HD) patients (17 ± 3 months on dialysis, 52 ± 2 years, 38% men and 11% diabetic). Serum concentrations of CRP, IL-6, SDF-1 and IL-8 were 4.9 ± 4.8 mg/ml, 6.7 ± 8.1 pg/ml, 2625.9 ± 1288.6 pg/ml and 128.2 ± 206.2 pg/ml, respectively. There was a positive correlation between CRP and IL-6 (ρ = 0.57, p < 0.005) and between SDF-1 and IL-8 (ρ = 0.45, p < 0.05). In vitro results showed that after 6 hours treatment, SDF-1 expression by HUVEC treated with uremic media is lower compared to cells treated with healthy media (p < 0.05). After 12 hours of treatment there was an increase in IL-8 when HUVECs were exposed to uremic media (p < 0.005). Conclusion: We suggest that SDF-1 and IL-8 in HD patients can be used to measure the extent of damage and subsequent vascular activation in uremia. .

Desestruturação da polpa branca do baço na leishmaniose visceral canina: células e citocinas envolvidas / Disruption of the white pulp of the spleen in canine visceral leishmaniasis: cells and cytokines involved

A leishmaniose visceral está associada às alterações arquiteturais esplênicas e redistribuição de populações celulares envolvidas na resposta imunológica. Os objetivos desta tese foram estudar a desestruturação da polpa branca do baço na leishmaniose visceral canina e quais as células e citocinas envolvidas nesse processo. Para isso, amostras de baços de cães de uma área endêmica para LV foram agrupadas em três categorias: TIPO1-CONT ou TIPO1-SIA (cães não infectados ou sem infecção ativa e com polpa branca organizada), TIPO1-INF (cães infectados com polpa branca organizada) e TIPO3-INF (cães infectados com polpa branca desorganizada). No capítulo 2 e 3, as secções de baço foram marcadas através de imunoistoquímica com anticorpos anti-CD3 (linfócitos T), anti-CD79-α (linfócitos B), anti-S100 (célula dendrítica folicular), anti-Ki-67...

Visceral leishmaniasis is associated with splenic architectural changes and redistribution of cell populations involved in the immune response. The objectives of this thesis was to study the disruption of the white pulp of the spleen in canine visceral leishmaniasis and which cells and cytokines are involved in this process. For this, samples of spleens of dogs from an endemic area for VL were grouped into three categories: TYPE1-CONT or TYPE1-NIF (non-infected dogs or without active infection with organized white pulp), TYPE1-INF (infected dogs with pulp organized white) and TYPE3-INF (infected animals with disorganized white pulp). In Chapter 2 and 3 the spleens sections were stained by immunohistochemistry with anti-CD3 (T lymphocytes), anti-CD79 (B lymphocytes), anti-S100 (follicular dendritic cells), anti-Ki-67...

Chemokine receptor 7 implications of spleen dendritic cells in multiple-organ dysfunction syndrome in mice / Implicaciones del receptor de la quimiocina de tipo 7 de las células dendríticas del bazo en el síndrome de disfunción orgánica múltiple en ratones

OBJECTIVE: This study aims to explore the chemokine receptor 7 (CCR7) expression of spleen dendritic cells (DCs) and their role in the changes of migration and activity of spleen DCs in multiple-organ dysfunction syndrome (MODS). METHODS: The MODS model of mice was reproduced. The mice were randomly assigned to the following groups: normal, three-hour to six-hour, 24-hour to 48-hour, and 10-day to 12-day postzymosan injection. CD11c and CD205 were analysed by immunohistochemistry; the expressions of CD86 and CCR7 of DCs were studied using flow cytometry analyses. RESULTS: In normal mice, many DCs were found at the margin between the red and white pulp. In the three-hour to six-hour and 24- to 48-hour group, DC effectively upregulated CD86 and CCR7, and they were distributed in T-cell areas. In the 10-day to 12-day group, DCs were distributed at the margin by the immature form. CONCLUSION: The CCR7 expression level of DCs had close correlations with the migration of DCs. Chemokine receptor 7 can be used to evaluate the migration and functional activity of DCs in MODS.

OBJETIVO: Este estudio persigue explorar la expresión del receptor de la quimiocina 7 (CCR7) de células dendríticas del bazo (CD), y su papel en los cambios de la migración y la actividad del las células DC del bazo en el síndrome de disfunción orgánica múltiple (SDOM). MÉTODOS: Se reprodujo el modelo SDOM de los ratones. Los ratones fueron asignados aleatoriamente a los siguientes grupos de inyección de post-zymosan: hora normal, tres a seis horas, 24 horas a 48 horas, y de 10 a 12 días. CD11c y CD205 fueron analizados mediante inmunohistoquímica. Las expresiones de CD86 y CCR7 de CD se estudiaron mediante análisis de citometría de flujo. RESULTADOS: En los ratones normales, muchas células CD fueron encontradas en el margen entre la pulpa roja y la blanca. En el grupo de tres a seis horas y el grupo de 24 a 48 horas, CD86y CCR7 fueron efectivamente sobre-regulados en CD, y distribuidos en las áreas de células T. En el grupo de 10 a 12 días, las CDs fueron distribuidas en el margen por la forma inmadura. CONCLUSIÓN: El nivel de expresión CCR7 de las CDs tuvo estrecha correlación con la migración de las CDs. El receptor de la quimiocina de tipo 7 puede utilizarse para evaluar la migración y la actividad funcional de las CDs en SDOM.

Influência de materiais odontológicos na capacidade de resposta de fibroblastos cultivados de polpa dental humana / Influence of dental materials on the response capability of cultured fibroblasts from human dental pulp

O presente trabalho tem como objetivo investigar a influência de materiais utilizados na prática odontológica (Single Bond, HEMA, Vitrebond, Ketac Molar e Dycal) na resposta inflamatória de fibroblastos cultivados de polpa dental humana de dentes permanentes em relação à expressão e produção de mediadores da inflamação. As culturas primárias de fibroblastos foram estabelecidas a partir do tecido pulpar de terceiros molares hígidos. Após a quarta passagem, os fibroblastos foram estimulados pelos materiais e pelos materiais seguidos por LPS de E. coli pelos tempos de 6 e 24 horas. Os testes utilizados foram: MTT, Trypan Blue, Análise de Griess, PCR quantitativo e ELISA. Os dados foram analisados estatisticamente aplicando-se o teste ANOVA a 1 critério e pós-teste de Tukey e ANOVA a 2 critérios e teste de correção de Bonferroni (p<0,05). Os materiais SB10 (Single Bond 1:100) e DY (Dycal) afetaram a viabilidade celular com diminuição do metabolismo. Os materiais SB1 (Single Bond 1:1.000), SB10 (Single Bond 1:100) e VB (Vitrebond) seguidos de LPS de E. coli diminuíram o metabolismo celular de maneira estatisticamente significativa. Os níveis de óxido nítrico produzidos foram diminuídos quando os fibroblastos foram estimulados pelo KM (Ketac Molar). A expressão gênica para pró-colágeno tipo I foi diminuída quando os fibroblastos foram estimulados pelos materiais SB10 (Single Bond 1:100), SB (Single Bond polimerizado) e DY (Dycal). Para o SDF-1_/CXCL12 houve um aumento da expressão para o grupo estimulado apenas por LPS de E. coli, SB10 (Single Bond 1:100) e DY (Dycal). Para o IL-6 notou-se uma diminuição significativa para o grupo estimulado por H1000 (HEMA 1000 nM) e um aumento para o grupo SB10 (Single Bond 1:100). A expressão gênica de IL- 8/CXCL8 diminuiu para os fibroblastos estimulados pelas três concentrações de HEMA e de Single Bond, VB (Vitrebond) e DY (Dycal) no período de 6 horas e houve um aumento para os materiais SB10 (Single Bond 1:100) e VB...

The aim of the present study is to investigate the influence of dental materials (Single Bond, HEMA, Vitrebond, Ketac Molar e Dycal) in the inflammatory response of human dental pulp fibroblasts from permanent teeth in relation to inflammatory mediators expression. and production. Primary cultures were established from third molars pulp tissue. After the fourth passage, the fibroblasts were stimulated only by materials and also by the materials followed by LPS from E. coli for 6 and 24 hours. Data were statistically analyzed using Oneway ANOVA and Tukey post-test and Two-way ANOVA followed by Bonferroni post-test (p<0.05). SB10 (Single Bond 1: 100) and DY (Dycal) affected cell viability and consequently decreased cell metabolism. SB1 (Single Bond 1:1,000), SB10 (Single Bond 1:100) and VB (Vitrebond) followed by LPS E. coli decreased cell metabolism. Nitric oxide levels were reduced when fibroblasts were stimulated by KM (Ketac Molar). Pro-collagen type I expression was reduced when fibroblasts were stimulated by SB10 (Single Bond 1:100), SB (polymerized Single Bond) and DY (Dycal). SDF-1_/CXCL12 expression was increased for the group stimulated only by LPS from E. coli, SB10 (Single Bond 1:100) and DY (Dycal). IL-6 expression had a significant decrease in the group stimulated by H1000 (HEMA 1000 nM) and an increase for SB10 (Single Bond 1:100) group. The expression of IL-8/CXCL8 decreased when fibroblasts were stimulated by the three concentrations of HEMA and of Single Bond, VB (Vitrebond) and DY (Dycal) at 6 hours and increased for SB10 (Single Bond 1:100) and VB (Vitrebond) at 24 hours. There was decrease in SDF-1_/CXCL12 production for the three concentrations of HEMA and DY (Dycal) and a declining trend for the other materials tested. The production of IL-6 was increased by VB (Vitrebond) and KM (Ketac Molar). The production of IL-8/CXCL8 increased by SB1 (Single Bond 1:1,000), VB...

Influência de materiais odontológicos na capacidade de resposta de fibroblastos cultivados de polpa dental humana / Influence of dental materials on the response capability of cultured fibroblasts from human dental pulp

O presente trabalho tem como objetivo investigar a influência de materiais utilizados na prática odontológica (Single Bond, HEMA, Vitrebond, Ketac Molar e Dycal) na resposta inflamatória de fibroblastos cultivados de polpa dental humana de dentes permanentes em relação à expressão e produção de mediadores da inflamação. As culturas primárias de fibroblastos foram estabelecidas a partir do tecido pulpar de terceiros molares hígidos. Após a quarta passagem, os fibroblastos foram estimulados pelos materiais e pelos materiais seguidos por LPS de E. coli pelos tempos de 6 e 24 horas. Os testes utilizados foram: MTT, Trypan Blue, Análise de Griess, PCR quantitativo e ELISA. Os dados foram analisados estatisticamente aplicando-se o teste ANOVA a 1 critério e pós-teste de Tukey e ANOVA a 2 critérios e teste de correção de Bonferroni (p<0,05). Os materiais SB10 (Single Bond 1:100) e DY (Dycal) afetaram a viabilidade celular com diminuição do metabolismo. Os materiais SB1 (Single Bond 1:1.000), SB10 (Single Bond 1:100) e VB (Vitrebond) seguidos de LPS de E. coli diminuíram o metabolismo celular de maneira estatisticamente significativa. Os níveis de óxido nítrico produzidos foram diminuídos quando os fibroblastos foram estimulados pelo KM (Ketac Molar). A expressão gênica para pró-colágeno tipo I foi diminuída quando os fibroblastos foram estimulados pelos materiais SB10 (Single Bond 1:100), SB (Single Bond polimerizado) e DY (Dycal). Para o SDF-1_/CXCL12 houve um aumento da expressão para o grupo estimulado apenas por LPS de E. coli, SB10 (Single Bond 1:100) e DY (Dycal). Para o IL-6 notou-se uma diminuição significativa para o grupo estimulado por H1000 (HEMA 1000 nM) e um aumento para o grupo SB10 (Single Bond 1:100). A expressão gênica de IL- 8/CXCL8 diminuiu para os fibroblastos estimulados pelas três concentrações de HEMA e de Single Bond, VB (Vitrebond) e DY (Dycal) no período de 6 horas e houve um aumento para os materiais SB10 (Single Bond 1:100) e VB...

The aim of the present study is to investigate the influence of dental materials (Single Bond, HEMA, Vitrebond, Ketac Molar e Dycal) in the inflammatory response of human dental pulp fibroblasts from permanent teeth in relation to inflammatory mediators expression. and production. Primary cultures were established from third molars pulp tissue. After the fourth passage, the fibroblasts were stimulated only by materials and also by the materials followed by LPS from E. coli for 6 and 24 hours. Data were statistically analyzed using Oneway ANOVA and Tukey post-test and Two-way ANOVA followed by Bonferroni post-test (p<0.05). SB10 (Single Bond 1: 100) and DY (Dycal) affected cell viability and consequently decreased cell metabolism. SB1 (Single Bond 1:1,000), SB10 (Single Bond 1:100) and VB (Vitrebond) followed by LPS E. coli decreased cell metabolism. Nitric oxide levels were reduced when fibroblasts were stimulated by KM (Ketac Molar). Pro-collagen type I expression was reduced when fibroblasts were stimulated by SB10 (Single Bond 1:100), SB (polymerized Single Bond) and DY (Dycal). SDF-1_/CXCL12 expression was increased for the group stimulated only by LPS from E. coli, SB10 (Single Bond 1:100) and DY (Dycal). IL-6 expression had a significant decrease in the group stimulated by H1000 (HEMA 1000 nM) and an increase for SB10 (Single Bond 1:100) group. The expression of IL-8/CXCL8 decreased when fibroblasts were stimulated by the three concentrations of HEMA and of Single Bond, VB (Vitrebond) and DY (Dycal) at 6 hours and increased for SB10 (Single Bond 1:100) and VB (Vitrebond) at 24 hours. There was decrease in SDF-1_/CXCL12 production for the three concentrations of HEMA and DY (Dycal) and a declining trend for the other materials tested. The production of IL-6 was increased by VB (Vitrebond) and KM (Ketac Molar). The production of IL-8/CXCL8 increased by SB1 (Single Bond 1:1,000), VB...

Envolvimento das quimiocinas CCL2 e CCL5 na patogênese do câncer de mama / Involvement of CCL2 and CCLS chemokines in breast cancer pathogenesis

No Brasil, o câncer de mama é o que mais causa mortes entre as mulheres com um risco de 51 casos a cada 100 mil mulheres. A metástase, principal causa de morte pelo câncer de mama, e dirigida a urna variedade de órgaos vitais, como ossos, pulmões, cerebra e fígado. Ocorre quando células tumorais geneticamente instáveis adaptam-se ao microambiente do tecido que esta distante do tumor primário. A natureza heterogênea da metástase no câncer de mama dificulta não apenas a cura, mas também a estimativa dos fatores de risco. A disseminação das células tumorais é realizada através da circulação sanguínea sistêmica atingindo outros órgãos. Tern sido verificado que essas células utilizam-se da expressão dos receptores de quimiocinas, para encontrar órgaos alvo que produzem um particular conjunto de quimiocinas. Mais recentemente, foi estabelecido que as células do câncer aproveitam-se da sinalização através dos receptores para quimiocinas para a iniciação e progressão do tumor primário e da metástase. Embora grande número de moléculas tenha sido implicada na metástase do câncer de mama, o mecanismo exato que determina a direção da migração parece incerto. Tem sido demonstrado que CCL2 e CCL5 estão expressas em grande quantidade pelas células tumorais do câncer de mama e são a causa da malignidade e metástase neste órgão. A expressão dessas duas quimiocinas pelas células do tumor de mama acompanha eventos de transformação maligna, e está associada com o curso avançado e progressão da doença. Desse modo, vários estudos sugerem que a determinação e o prognóstico das quimiocinas CCL2 e CCL5 será de grande para uma melhor identificação do risco de progressão e determinação das implicações terapêuuticas em pacientes com câncer de mama.

In Brazil, breast cancer is the major cause death among women with a risk of 51 cases to 100 thousand women. The metastasis, the main cause of death by breast cancer, is directed to a variety of vital organs such as bones, lungs, brain and liver. Occurs when genetically unstable tumor cells adapt to the microenvironment of the tissue that is distant from the primary tumor. The heterogeneous nature of metastasis in breast cancer is difficult not only for the definition of cure for this disease, but also to estimate their risk factors. The spread of tumor cells is achieved through the systemic bloodstream to reach other organs. It has been verified that these cells are used the expression of chemokine receptors to find on target organs that produce a particular set of chemokines. It was established that the cancer cells use the signaling through the receptors for chemokines in the initiation and progression of primary tumor and metastasis. Although large number of molecules has been implicated in metastasis of breast cancer, the exact mechanism that determines the direction of migration seems uncertain. In a review conducted recently, the authors argue that CCL2 and CCL5 are expressed in large amounts by tumor cells of breast cancer and are the cause of malignancy and metastasis in this organ. The expression of these chemokines by the tumor cells of breast accompanying events of malignant transformation, and is associated with the advanced course and progression of disease. Thus several studies suggest that the determination and validation of the prognostic value of the chemokines CCL2 and CCL5 will be of great value for better identification of risk of progression and determine the therapeutic implications in patients with breast cancer.

Doença enxerto contra hospedeiro crônica em mucosa bucal: relação da concentração de células de Langerhans com a expressão da quimiocina CCL20 e de seu receptor CCR6 / Chronic graft versus host disease in the oral mucosa: concentration of Langerhans cells and its relationship with the chemokine CCL20 and its receptor CCR6

A doença enxerto contra hospedeiro (GVHD) é uma complicação comum nos pacientes submetidos ao transplante de células-tronco hematopoiéticas (TCTH), sendo considerada a maior causa de morbidade e mortalidade nesses pacientes. O principal objetivo do presente estudo foi relacionar a concentração de células de Langerhans em mucosa bucal de pacientes com GVHDc bucal com a expressão da quimiocina CCL20 e de seu receptor CCR6 no epitélio bucal, a fim de elucidar os mecanismos biológicos envolvidos no recrutamento das células de Langerhans na GVHDc. Foram selecionados fragmentos obtidos por biópsia de mucosa bucal de 60 pacientes onco-hematológicos e hematológicos submetidos previamente ao transplante de células tronco hematopoiéticas no Hospital Amaral Carvalho, Jaú SP, onde 30 pacientes desenvolveram GVHDc em mucosa bucal (Grupo 1) e 30 não desenvolveram GVHDc (Grupo 2). Amostras obtidas a partir de 30 biópsias de lesões não inflamatórias em mucosa bucal constituíram o Grupo Controle (Grupo 3). Cortes microscópicos foram avaliados em coloração de rotina Hematoxilina e Eosina, e submetidos à técnica imuno-histoquímica, utilizando-se anticorpos monoclonais anti-CD1a e anti-CCR6, e anticorpos policlonais anti-CCL20. As células de Langerhans CD1a+ foram quantificadas no epitélio da mucosa bucal, e os resultados demonstraram um maior número destas células nos pacientes com GVHDc quando comparados àqueles sem GVHDc e ao Grupo Controle (p<0,001). A análise da imunomarcação das moléculas CCR6 e CCL20 foi subjetiva com aplicação de escores. Quanto à molécula CCR6, houve maior expressão no Grupo 1 (p<0,001) em comparação aos outros Grupos; porém, quanto à expressão de CCL20, não houve diferença estatística entre os três Grupos (p=0,108). Estes resultados sugerem que o aumento das células de Langerhans, na doença enxerto contra hospedeiro crônica, em mucosa bucal, pode estar associado a maior expressão do receptor CCR6. Possivelmente, o maior recrutamento de células de...

The graft versus host disease (GVHD) is a common complication in patients undergoing hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), and considered a major cause of morbidity and mortality in these patients. The main objective of this study was to compare the concentration of Langerhans cells in oral mucosa of patients with oral chronic GVHD (GVHDc) with the expression of the chemokine CCL20 and its receptor CCR6 in oral epithelium, in order to clarify the biological mechanisms involved in the recruitment of Langerhans cells in GVHDc. We selected 60 biopsies of oral mucosa from onco-hematological and hematological patients submitted to prior hematopoietic stem cell transplantation at Hospital Amaral Carvalho, Jaú - SP from which 30 patients developed GVHDc in the oral mucosa (Group 1) and 30 did not develop GVHDc (Group 2). The Control Group (Group 3) was obtained from 30 biopsies of non-inflammatory lesions of oral mucosa. Microscopic sections were evaluated in routine Hematoxylin and Eosin staining, and submitted to immunohistochemistry using anti-CD1a and anti-CCR6 monoclonal antibodies, and anti-CCL20 polyclonal antibody. The Langerhans cells (CD1a+) were quantified in the epithelium of the oral mucosa, and the results showed a greater number of these cells in patients with GVHDc compared to those without GVHDc and the Control Group (p<0.001). Analysis of immunostaining of molecules CCL20 and CCR6 were subjective with application of scores. The expression of CCR6 molecule was more significant in Group 1 (p<0.001) compared to other groups, but in relation to CCL20 expression, there was no statistical difference between the three groups (p=0.108). These results suggest that the increase of Langerhans cells in GVHDc affecting oral mucosa may be associated with increased expression of the receptor CCR6. We suggest that the increased recruitment of Langerhans cells to the oral mucosa in patients with transplanted bone marrow contributes...

Interferón gamma recombinante como alternativa terapéutica en niños con artritis idiopática juvenil / Recombinant gamma Interferon as a therapeutical alternative in children with juvenile idiopathic arthritis

INTRODUCCIÓN. La artritis idiopática juvenil (AIJ) es una enfermedad del colágeno caracterizada por sinovitis crónica y síntomas extraarticulares, de inicio antes de los 16 años de edad. El interferón gamma (INFγ) mostró eficacia en un ensayo anterior con pacientes resistentes o intolerantes a las otras terapias disponibles, por lo que se decidió evaluar su eficacia y seguridad como medicamento modificador de la evolución de esta enfermedad. MÉTODOS. Se realizó un ensayo clínico abierto, no controlado, en el que se administró INFγ por vía intramuscular en dosis de 50 000 UI/kg (hasta 1 x 10(6) UI) durante 2 años. En el ensayo se incluyeron 20 pacientes con AIJ: 5 tenían la forma pauciarticular; 9, la poliarticular y 6, la sistémica. RESULTADOS. Al final del tratamiento, 13 pacientes (65 por ciento) se evaluaron como respondedores. El número de articulaciones afectadas, los síntomas sistémicos y los valores de eritrosedimentación y del cuestionario de calidad se redujeron significativamente. Igualmente disminuyó el número de pacientes que continuó consumiendo esteroides, así como la dosis de éstos. El tratamiento fue bien tolerado, excepto en 2 pacientes. CONCLUSIONES. El INFγ disminuye la expresión de la quimiocina CCR-4 en los niños, pero no en los adultos con la enfermedad. Es posible concluir que esta citocina puede ser una alternativa terapéutica eficaz en pacientes con AIJ; para confirmarlo se necesitan estudios controlados más extensos

INTRODUCTION: The juvenile idiopathic arthritis (JIA) is a collagen entity characterized by chronic synovitis and extra-articulation symptoms appearing before the 16 years old. Gamma Interferon (gamma-INF) showed its effectiveness in a prior trial with resistant and intolerant patients to other available gamma-INF therapies, thus authors assessed its effectiveness and safety as a modifier drug of the course of this entity. METHODS: An open clinical, no-controlled trial was carried out administering gammaINF by intramuscular route in doses of 50 000 IU/kg (up to 1 x 10(6) IU) during two years. Trial included 20 patients with JIA: five had the pauciarticular type; nine had the polyarticular one and six had the systemic one. RESULTS: At treatment termination, 13 patients (65 percent) were assessed as respondents. Figure of involved joints, the systemic symptoms and the erythrosedimentation values, and the quality questionnaire significantly decreased, as well as the figure of patients to continue consuming steroids and its dosage. Treatment was well tolerated, except 2 patients. CONCLUSIONS: Gamma-INF decrease the expression of CCR-4 chemokine in children, but not in adults ones presenting this entity. We conclude that this cytokine may be an efficient therapeutical alternative in patients with JIA; for its confirmation it is necessary more extent controlled studies

Correlação entre mediadores inflamatórios na secreção nasofaríngea e no soro de crianças com infecção do trato respiratório inferior por vírus sincicial respiratório e a gravidade da doença / Correlation between inflammatory mediators in the nasopharyngeal secretion and in the serum of children with lower respiratory tract infection caused by respiratory syncytial virus and disease severity

OBJETIVO: Avaliar se as concentrações dos mediadores inflamatórios (CCL5, soluble intercellular adhesion molecule type 1 [sICAM-1], TNF-α, IL-6 e IL-10) na secreção nasofaríngea e no soro de crianças com infecção do trato respiratório inferior (ITRI) por vírus sincicial respiratório (VSR) apresentam correlação com os marcadores clínicos de gravidade da doença. MÉTODOS: Entre julho de 2004 e dezembro de 2005, 30 crianças com idade inferior a três meses, diagnosticadas com ITRI por VSR e admitidas em uma UTI neonatal foram incluídas neste estudo. RESULTADOS: Houve uma correlação positiva significante entre a gravidade da doença na admissão hospitalar, determinada por um sistema de escore clínico modificado, e as concentrações de sICAM-1 e de IL-10 na secreção nasofaríngea e de IL-6 no soro dos pacientes. Houve também uma correlação positiva significante entre a concentração de IL-6 no soro e o tempo de oxigenoterapia e a duração da internação. CONCLUSÕES: As concentrações de sICAM-1 e IL-10 na secreção nasofaríngea e de IL-6 no soro determinadas na admissão poderiam ser usadas como marcadores de gravidade da ITRI por VSR. Os níveis de IL-6 determinados no soro na admissão também poderiam ser usados para predizer o prolongamento da oxigenoterapia e da duração da internação.

OBJECTIVE: To determine whether the concentrations of inflammatory mediators (CCL5, soluble intercellular adhesion molecule type 1 [sICAM-1], TNF-α, IL-6 and IL-10) in the nasopharyngeal secretion and in the serum of children with lower respiratory tract infection (LRTI) caused by respiratory syncytial virus (RSV) correlate with the clinical markers of disease severity. METHODS: Between July of 2004 and December of 2005, 30 children less than three months of age, diagnosed with LRTI caused by RSV and admitted to a neonatal ICU, were included in this study. RESULTS: The severity of disease at hospital admission, as determined with a modified clinical scoring system, presented a significant positive correlation with sICAM-1 and IL-10 concentrations in the nasopharyngeal secretion, as well as with IL-6 concentrations in the serum, of the patients. In addition, serum IL-6 concentrations presented a significant positive correlation with the duration of oxygen therapy and with the length of hospital stay. CONCLUSIONS: At hospital admission, the concentrations of sICAM-1 and IL-10 in the nasopharyngeal secretion, as well as the concentration of IL-6 in the serum, could be used as markers of severity in patients with LRTI caused by RSV. The serum levels of IL-6 determined at admission could also be used to predict prolonged oxygen supplementation and hospital stay.

Análise de receptores de quimiocinas na superfície de leucócitos circulantes de indivíduos infectados pelo Mycobacterium leprae: resultados preliminares / Analysis of chemokine receptors on the surface of circulating leukocytes of individuals infected with Mycobacterium leprae: preliminary results

Neste estudo, a expressão de receptores de quimiocinas na superfície dos leucócitos circulantes foi feita pela citometria de fluxo. Houve aumento da porcentagem de linfócitos CCR2+CD4+ no sangue periférico dos pacientes com hanseníase. Este resultado preliminar sugeriu alteração do perfil dos receptores de quimiocinas desses pacientes.

In this study, the expression of chemokine receptors on the surface of circulating leukocytes was determined using flow cytometry. An increase in the percentage of CCR2+CD4+ lymphocytes was observed in the peripheral blood of leprosy patients. This preliminary data suggests that alterations occur in the chemokine receptor profile of these patients.