ABSTRACT
Abstract Phytochemical and antioxidant activity of quinoa flour was evaluated after subjected to gamma irradiation processes at dose 3 and 6 kGy. Both non-irradiated and irradiated quinoa samples were subjected to successive extractions in ethanol solvent. The antioxidant activity after gamma irradiation treatment was investigated via Ferric reducing antioxidant power (FRAP) and radical-scavenging activity (RSA) using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH).Total phenolic and flavonoid content were analyzed using Folin-Ciocalteu micro-method, aluminium chloride (AlCl3) method and High Performance Liquid Chromatography (HPLC). As well as, effect of irradiation treatment on saponin was also evaluated. Irradiation treatment showed slight differences in the saponin content after exposure to 3 and 6 kGy. Irradiation process enhanced both total phenolic content (TPC) and Total flavonoid content (TFC), TPC were 34.52 and 30.92 mg Gallic Acid Equivalent (GAE)/100g compared to 26.25 mg GAE/100g in non-irradiated quinoa. TFC were 67.44 and 62.89 mg Quercetin Equivalents (QE)/100g compared to 53.15 mg QE/100g. Irradiation dose 3 kGy significantly (p> 0.05) decreased the IC50 as DPPH-RSA and increased the FRAP.
Resumo Atividades fitoquímica e antioxidante da farinha de quinoa foram analisadas após submissão a processos de irradiação gama nas doses 3 e 6 kGy. As amostras de quinoa não irradiadas e irradiadas foram submetidas a extrações sucessivas em solvente etanol. A atividade antioxidante, após o tratamento com irradiação gama, foi investigada por meio do poder antioxidante redutor férrico (ARF) e da atividade de eliminação de radicais (AER) usando 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH). O conteúdo fenólico total e o teor de flavonoide foram analisados usando o método de Folin-Ciocalteu, método de cloreto de alumínio (AlCl3) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Além disso, o efeito do tratamento de irradiação na saponina também foi avaliado. O tratamento por irradiação não mostrou diferenças significativas no conteúdo de saponina após exposição a 3 e 6 kGy. O processo de irradiação aumentou o conteúdo fenólico total (CFT) e o teor total de flavonoides (TTF); o CFT foi de 34,52 e 30,92 mg de equivalente de ácido gálico (EAG) / 100 g em comparação com 26,25 mg de EAG / 100 g na quinoa não irradiada. Os TTF foram 67,44 e 62,89 mg de equivalentes de quercetina (EQ) / 100 g em comparação com 53,15 mg de EQ / 100 g. A dose de irradiação de 3 kGy diminuiu significativamente (p > 0,05) o IC50 como DPPH-AER e aumentou o ARF.
Subject(s)
Chenopodium quinoa , Antioxidants , Phenols , Flavonoids , PhytochemicalsABSTRACT
Substances with cytotoxic activity present in vaccines against the foot-and-mouth disease may interfere with methods used to detect residual live virus in the product or cause undesirable postvaccination reactions. This study describes a rapid in vitro test to detect cytotoxic activity in water-in-oil vaccines against foot-and-mouth disease using a commercial saponin as a cytotoxic agent and a solution of sheep's red blood cells as substrate. Hemolytic and cytotoxic activity was analyzed using experimental and commercial vaccines prepared with and without saponin. The hemolytic and cytotoxic potential of preparations containing saponin was evident. In contrast, hemolytic and cytotoxic activities were not observed in vaccines without saponin in their composition. The method described here allows to easily detect if the vaccine under study has cytotoxic activity, making it possible to select the most appropriate method to process the sample to be used for the innocuity test. Additionally, due to undesirable effects that may be observed in animals receiving vaccines containing saponin in their formulation, the use of the rapid test described here allows to identify those vaccines with cytotoxic activity and to verify the presence of saponin on them, through the mass spectrometry method.(AU)
Substâncias com atividade citotóxica presentes em vacinas contra febre aftosa podem interferir com o método utilizado para a detecção de vírus ativo residual no produto ou causar reações pós-vacinais indesejáveis. O presente trabalho descreve uma prova rápida in vitro para detectar atividade citotóxica em vacinas oleosas contra febre aftosa utilizando uma saponina comercial como agente citotóxico e uma solução de hemácias de carneiro como substrato. Analisaram-se as atividades hemolítica e citotóxica utilizando-se vacinas experimentais e comerciais preparadas com e sem saponina. O potencial hemolítico e citotóxico dos preparados que continham saponina na sua formulação foi evidente. Em contraste, não se observou atividade hemolítica e citotóxica nas vacinas sem saponina. O método descrito permite conhecer rapidamente se a vacina em estudo apresenta atividade citotóxica e, dessa maneira, selecionar o método mais adequado para processar a amostra que será utilizada para investigar a presença de vírus ativo residual. Adicionalmente, devido aos efeitos indesejáveis que podem ser observados em animais que recebem vacinas que contêm saponina na sua formulação, o uso da prova rápida descrita permite selecionar aquelas vacinas com atividade citotóxica para posteriormente verificar a presença de saponina através de técnicas analíticas como a espectrometria de massas.(AU)
Subject(s)
Cattle , Vaccines , Foot-and-Mouth Disease Virus , Foot-and-Mouth Disease , Saponins , Mass Spectrometry , In Vitro Techniques , ErythrocytesABSTRACT
Objetivo: Evaluar el efecto protector del champú conteniendo extracto etanólico de corteza y brotes tiernos de Colletia spinosissima J. Gmelin (tacsana), en la irritación inducida en la piel de ratas. Es un estudio experimental, desarrollado en el laboratorio de Farmacología de la Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad Mayor de San Marcos, Lima-Perú. Material y Metodologia: se utilizaron 30 ratas Holtzman (15 hembras y 15 machos), en un peso promedio de 142 - 100 g; asignados en forma aleatoria en cinco grupos de estudio: champú I 50 mg/kg, champú II 250 mg/kg, champú III 500 mg de Colletia spinosissima, champú comercial y champú base (control). En el extracto se determinó la presencia de metabolitos secundario: saponinas, taninos, flavonoides, alcaloides, carbohidratos. Resultados: in vivo se demostró la actividad protectora antiinflamatoria de la planta (50%), p< 0,05 y cicatrizante (50%) p < 0,05 en la piel de ratas, comprobado mediante estudios histológicos de la piel, y sin dermosensibilización, con la formación de fibras de colágeno; reparación de tejidos epiteliales y desaparición de los signos inflamatorios. In vitro se ha observado que la planta en 1 ug/mL induce una reducción del radical DPPH de 71,02%, comparativamente a vitamina C (27,53%) y al trolox (66,93%). Conclusiones: El extracto etanólico de la corteza y brotes tiernos de Colletia spinosissima presenta efectos antiinflamatorios y cicatrizantes sobre la piel de ratas, siendo mejor en dosis de 500 mg/kg; es antioxidante in vitro con mayor actividad que vitamina C y Trolox; no presenta toxicidad en ratas.
Subject(s)
Animals , Rats , Plant Extracts , Protective Agents , Anti-Inflammatory Agents , AntioxidantsABSTRACT
Abstract Phytochemical and antioxidant activity of quinoa flour was evaluated after subjected to gamma irradiation processes at dose 3 and 6 kGy. Both non-irradiated and irradiated quinoa samples were subjected to successive extractions in ethanol solvent. The antioxidant activity after gamma irradiation treatment was investigated via Ferric reducing antioxidant power (FRAP) and radical-scavenging activity (RSA) using 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH).Total phenolic and flavonoid content were analyzed using FolinCiocalteu micro-method, aluminium chloride (AlCl3) method and High Performance Liquid Chromatography (HPLC). As well as, effect of irradiation treatment on saponin was also evaluated. Irradiation treatment showed slight differences in the saponin content after exposure to 3 and 6 kGy. Irradiation process enhanced both total phenolic content (TPC) and Total flavonoid content (TFC), TPC were 34.52 and 30.92 mg Gallic Acid Equivalent (GAE)/100g compared to 26.25 mg GAE/100g in non-irradiated quinoa. TFC were 67.44 and 62.89 mg Quercetin Equivalents (QE)/100g compared to 53.15 mg QE/100g. Irradiation dose 3 kGy significantly (p> 0.05) decreased the IC50 as DPPH-RSA and increased the FRAP.
Resumo Atividades fitoquímica e antioxidante da farinha de quinoa foram analisadas após submissão a processos de irradiação gama nas doses 3 e 6 kGy. As amostras de quinoa não irradiadas e irradiadas foram submetidas a extrações sucessivas em solvente etanol. A atividade antioxidante, após o tratamento com irradiação gama, foi investigada por meio do poder antioxidante redutor férrico (ARF) e da atividade de eliminação de radicais (AER) usando 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH). O conteúdo fenólico total e o teor de flavonoide foram analisados usando o método de Folin-Ciocalteu, método de cloreto de alumínio (AlCl3) e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Além disso, o efeito do tratamento de irradiação na saponina também foi avaliado. O tratamento por irradiação não mostrou diferenças significativas no conteúdo de saponina após exposição a 3 e 6 kGy. O processo de irradiação aumentou o conteúdo fenólico total (CFT) e o teor total de flavonoides (TTF); o CFT foi de 34,52 e 30,92 mg de equivalente de ácido gálico (EAG) / 100 g em comparação com 26,25 mg de EAG / 100 g na quinoa não irradiada. Os TTF foram 67,44 e 62,89 mg de equivalentes de quercetina (EQ) / 100 g em comparação com 53,15 mg de EQ / 100 g. A dose de irradiação de 3 kGy diminuiu significativamente (p > 0,05) o IC50 como DPPH-AER e aumentou o ARF.
ABSTRACT
ABSTRACT: This study aimed to evaluate the inclusion of Yucca schidigera extract and zeolite (Clinoptilolite) added to the diets for dogs and its effect on apparent digestibility coefficients (ADC) of diet components (dry matter, organic matter, crude protein, acid hydrolyzed fat, and energy) and urinary pH. Twenty-one adult Beagles, males and females, body weight mean of 12.5±1.5kg and four and a half years old, distributed in a completely randomized design with seven replicates per treatment within three experimental treatments: control (no addition of Yucca schidigera and zeolite), Yucca schidigera (375ppm) and zeolite (1%), administered in the encapsulated form of the supplement. The ADC of diet components and urinary pH were not affected by the inclusion of additives (P>0.05), except the ADC acid hydrolyzed fat showed reduction with Yucca schidigera supplementation compared to the other treatments (P<0.05). The addition of 375ppm of Yucca schidigera extract reduced the digestibility of dietary fat by dogs and both Yucca schidigera extract and zeolite did not affect the urinary pH of dogs.
RESUMO: O objetivo deste trabalho foi avaliar a inclusão do extrato de Yucca schidigera e da zeólita (Clinoptilolita) nas dietas para cães e seus efeitos sobre os coeficientes de digestibilidade aparente (CDA) dos componentes da dieta (matéria seca, matéria orgânica, proteína bruta, extrato etéreo em hidrólise ácida e energia) e no pH urinário. Foram utilizados 21 cães Beagles, machos e fêmeas, com peso médio de 12,5±1,5kg e quatro anos e meio de idade, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado com sete repetições para cada um dos três tratamentos experimentais: controle (sem adição de Yucca schidigera e zeólita), Yucca schidigera (375ppm) e zeólita (1%), administrados na forma de suplemento encapsulado. Os CDA dos componentes da dieta e o pH urinário não foram afetados pela inclusão dos aditivos (P>0,05), exceto o CDA do extrato etéreo em hidrólise ácida, que reduziu com a suplementação de Yucca schidigera em comparação aos demais tratamentos (P<0,05). A adição de 375ppm de extrato de Yucca schidigera reduziu a digestibilidade da gordura dietética pelos cães e tanto a adição de Yucca schidigera como a de zeólita não alteraram o pH urinário.
ABSTRACT
Brachiaria (signalgrass) is now the most widely used tropical grass genus in Central and South America. However, Brachiaria spp. can cause hepatogenous photosensitization in livestock. Steroidal saponins, specifically protodioscin, present in Brachiaria spp. may be responsible for liver injury and subsequent photosensitization. The objective of this study was to determine the effect of ensiling Brachiaria decumbens and Brachiaria brizantha or making hay from Brachiaria decumbens on the concentrations of steroidal saponin in these grasses. Brachiaria grass had no detectable levels of the saponin protodioscin after 24 days of ensiling. In addition, in Brachiaria decumbens, the concentration of the protodioscin decreased 48% over the first three days after haymaking and then remained constant. These results suggest that livestock consuming Brachiaria either as silage or hay may have reduced risk of intoxication by protodioscin. .
Brachiaria atualmente é o gênero de gramínea tropical mais amplamente utilizado na América Central e do Sul. Entretanto, as espécies de Brachiaria podem causar fotossensibilização hepatógena em animais de produção. Saponinas esteroides, especificamente protodioscina, presentes em Brachiaria, podem ser responsáveis pelo dano hepático e consequentemente fotossensibilização. O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da ensilagem de Brachiaria decumbens e Brachiaria brizantha e fenação de Brachiaria decumbens sobre a concentração de saponina esteroide. As amostras de Brachiaria ensiladas não tiveram concentrações detectáveis de saponina protodioscina depois de 24 dias de ensilagem. Assim como em Brachiaria decumbens, a concentração de protodioscina reduziu 48% nos três primeiros dias após a fenação e posteriormente manteve-se constante. Estes resultados sugerem que animais de produção, ao consumirem Brachiaria tanto como silagem ou feno, podem ter o risco de intoxicação por protodioscina reduzido.
ABSTRACT
O ácido flavona-6-sulfônico, 4'-O-metil-5,7-diidroxi-flavona-6-sulfonato, conhecido como niruriflavona, e a saponina, ácido 3-O-[6'-O-4-hidroxibenzoil]-²-D-galactopiranosil-ursa-12-en-28-óico, foram isolados, respectivamente, de madeira e folhas de Licania arianeae. As estruturas foram estabelecidas através da análise de espectros de massas e RMN incluindo experimentos bidimensionais.
The flavone-6-sulfonic acid, 4'-metil-5,7-dihydroxy-flavone-6-sulfonic acid, known as niruriflavone, and the saponin 3-O-[6'-O-4-hydroxybenzoyl]-²-D-galactopyranosyl-ursa-12-en-28-oic acid were isolated, respectively, from wood and leaves of Licania arianeae. The structures were established from the NMR and mass spectra data analysis including two-dimensional NMR experiments.
ABSTRACT
Brachiaria species contain steroidal saponins and are involved in outbreaks of hepatogenous photosensitization. This research presents the levels of a steroidal saponin, protodioscin, in the seeds and aerial parts of B. brizantha and B. decumbens during different developmental stages (growth, bloom, fructification and seed fall). The butanolic fraction of the ethanolic extract of each stage was submitted to thin layer chromatography (TLC) and spectrophotometric analysis through the Ehrlich reagent in 515nm. The chromatograms in TLC of the butanolic fraction of B. brizantha and B. decumbens showed similar spots as the protodioscin standard. The estimated level of protodioscin isomers in B. brizantha and B. decumbens ranged from 0.5 percent to 2.1 percent, having the highest level at the end of their developmental stages during seed falling comparison with the previous one. Protodioscin was not detected in the seeds. Outbreaks of Brachiaria spp. poisoning in central Western Brazil are frequently observed in pastures that had been more than 30 days without animals grazing, and also during the growing or blooming stage of the pastures. Other saponin determinations in toxic and non toxic pastures are necessary to determine the saponin concentrations that cause intoxication.
As Brachiaria spp contêm saponinas esteroidais envolvidas no desenvolvimento de fotossensibilizacão hepatógena. No presente trabalho foram determinados os teores da saponina esteroidal protodioscina nas partes aéreas de B. brizantha e B. decumbens, durante as diferentes fases do desenvolvimento (crescimento, floração, frutificação e queda das sementes) e nas sementes. A fração butanólica do extrato etanólico de cada fase foi submetida à cromatografia de camada delgada (CCD) e à análise espectrofotométrica por meio do reagente de Ehrlich em 515nm. Os cromatogramas em CCD da fração butanólica de B. brizantha e B. decumbens, de cada fase do desenvolvimento, apresentaram manchas similares ao padrão de protodioscina. Por meio da análise de protodioscina por espectrofotometria, os teores de protodioscina em B. brizantha e B. decumbens variaram entre 0.5 por cento e 2.1 por cento, sendo mais altos na fase de queda das sementes. Nas sementes não foi encontrada protodioscina. Surtos de intoxicação por Brachiaria spp. no Centro-Oeste brasileiro são freqüentemente observados em pastagens diferidas por mais de 30 dias e também durante as fases de crescimento e florescimento. São necessárias outras dosagens de saponinas em pastagens tóxicas e não-tóxicas para determinar as concentrações capazes de causar intoxicação.
ABSTRACT
A pesquisa de antígenos intracelulares por citometria de fluxo é essencial para o estudo imunofenotípico das doenças onco-hematológicas. A utilização de saponina para permeabilização celular tem se mostrado eficaz e de menor custo. Com suas propriedades detergentes, permeabiliza a membrana citoplasmática sem danificá-la ou alterar a expressão dos antígenos de membrana, permitindo a detecção simultânea de antígenos intracelulares e de superfície. O objetivo deste trabalho foi analisar a eficácia da técnica de permeabilização celular com a utilização de saponina como agente permeabilizante. Foram avaliadas 36 amostras de sangue periférico e de medula óssea enviadas ao Laboratório de Imunopatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo para estudo imunofenotípico. Realizamos a técnica de imunofluorescência direta e utilizamos o programa CellQuest (Becton Dickinson, San Jose, CA) do citômetro de fluxo FACSCalibur (Becton Dickinson, San Jose, CA) para aquisição e análise dos dados. Observamos excesso de perda celular quando utilizamos o tampão de lavagem estocado por período superior a sete dias, à temperatura de 2ºC a 8ºC, e perda mínima com tampão de lavagem recém-preparado ou congelado no momento do preparo e descongelado apenas no momento do uso. Para eliminar o excesso de perda celular realizamos análise sistemática das etapas da técnica, o que nos permitiu adequá-la e utilizá-la na rotina de nosso laboratório. Em país de recursos escassos padronizamos uma técnica viável para pesquisar antígenos intracelulares por citometria de fluxo, mais rápida, eficaz e com redução dos custos financeiros em 35 por cento.
Intracellular antigen investigations by means of flow cytometry are essential for immune phenotypical studies of oncohematological diseases. The use of Saponin for cellular permeabilization has proved to be cost-effective. Due to its detergent properties, Saponin permeabilizes the cytoplasmatic membrane without harming it or altering membrane antigen expressions, thus allowing simultaneous detection of intracellular and surface antigens. The objective was to analyze the efficiency of the cell permeabilization technique using Saponin as a permeabilizing agent. Thirty-six samples of peripheral blood and bone marrow underwent an immune phenotypical study at the Immune Pathology Laboratory of the Hospital das Clínicas of the University of São Paulo. Direct immunofluorescence was accomplished using the CellQuest program (Becton Dickinson, San Jose, CA) of the FACSCalibur flow cytometer (Becton Dickinson, San Jose, CA) to acquire and analyze the data. Excessive cell loss was observed when using rinsing buffers stored for more than seven days at temperatures ranging from 2ºC to 8ºC. Minimal cell loss was found when rinsing buffers were used immediately after preparation or frozen at the time of preparation and thawed just before use. In order to eliminate excessive cell loss, a systematic analysis of the technique stages was carried out, allowing us to restructure the technique to our purposes and its use in our laboratory. In a country with scarce resources, a viable, faster, more cost-effective technique (35 percent reduction in cost) aimed at investigating intracellular antigens by flow cytometry has been standardized.