Avaliaçäo de métodos para determinaçäo de tricotecenos em milho por cromatografia gasosa / Evaluation of analytical methods for the determination of trichothecenes in corn by gas chromatography

Sistemas de extraçäo e limpeza foram avaliados para a determinaçäo de tricotecenos em milho por cromatografia gasosa com detector de ionizaçäo de chama. O método de extraçäo e limpeza descrito por Furlong & Soares (1995), combinado com uma coluna de limpeza preconizada pr Romer (1986), foi o sistema que apresentou melhores resultados. Para extraçäo foi usado metanol:cloreto de potássio 4 por cento (9:1) seguido por clarificaçäo com sulfato de amônio 30 por cento e partiçäo com diclorometano. A seguir, o extrato foi passado pela coluna de alumina:carväo (2,3:1,9) e os tricotecenos eluídos com acetonitrila:água (84:16). O extrato, após reaçäo de derivaçäo com anidrido trifluoroacético (TFAA) em piridina, foi injetado em um cromatógrafo a gás com detector por ionizaçäo em chama. As recuperaçöes médias obtidas foram 72 por cento para desoxinivalenol (DON), 88 por cento para diacetoxiscirpenol (DAS) e 87 por centopara toxina T2(T2). Os limites de detecçäo obtidos foram 30 ng/g pra DON, 50 ng/g para DAS e 40 ng/g para toxina foram 9,8,6,3 e 6,6 por cento para DON,DAS e T2, respectivamente. (AU)

Extraction and cleanup systems were evaluated for the determination of trichothecenes incorn by gas chromatography with flame ionization detector. The extraction and cleanup method describedby Furlong & Soares (1995), combined with the Romer (1986) cleanup column exhibited the best results.The extraction used methanol: 4% potassium chloride (9:1), followed by a clarification with 30% ammoniumsulfate, and partition with dichloromethane.The extract was then passed through an alumina:carboncolumn (2.3:1.9) and eluted with acetonitrile:water (84:16). Trifluoroacetic anhydride in the presence ofpyridine was used for derivatization before injection in a gas chromatograph with an ionization detector.The average recoveries were 72% for deoxynivalenol (DON), 88% for diacetoxyscirpenol (DAS) and 87%for toxin T2 (T2). The detection limits were 30 ng/g for DON, 50 ng/g for DAS and 40 ng/g for T2. Theaverage coefficients of variation for spiked samples at the 500 ng/g level were 9.8, 6.3 e 6.6% for DON,DAS, and T2, respectively. (AU)

Apoptose na depleção linfocitária induzida pela toxina T-2 em frangos de corte. Histomorfometria da bolsa de Fabricius

It was studied by the histomorphometry of the bursa of Fabricius the involvement of apoptosis as a mechanism of lymphoid depletion in broiler chicks, after the intake of feed containing T-2 toxin of Fusarium sporotrichioides. Forty-two one-day-old chicks were distributed randomly in three groups. The treated group (n=15) received contaminated feed with 2.64 mg/kg of the T-2 toxin. The residual group (n=12) received contaminated feed up to 7 and 14 days and noncontaminated feed during the last week. One control group (n=15) received noncontaminated feed. Five animals from each control and treated groups were killed at 7, 14 and 21 days, and six from the residual group at 14 and 21 days, and their bursa of Fabricius (BF) were collected for histomorphometric analysis and determination of apoptotic index. The apoptosis was confirmed by in situ labeling of the fragmentation of the genome (TUNEL) and by electrophoresis of DNA in agarose gel. BF of treated and residual groups showed moderate to intense depletion of the lymphoid follicles and higher apoptotic index than the control group (P 0.05). These results allowed to conclude that apoptosis is involved in the mechanism of lymphoid depletion caused by T-2 toxin in broiler chicks.

Estudou-se, pela histomorfometria da bolsa de Fabrício, o envolvimento da apoptose como mecanismo de depleção linfocitária em frangos de corte, após ingestão de toxina T-2 de Fusarium sporotrichioides veiculada pela ração. Foram utilizados 42 pintos de um dia de idade, distribuídos ao acaso em três grupos. O grupo tratado (n = 15) recebeu diariamente ração contaminada com 2,64 mg/kg da toxina T-2; o grupo residual (n = 12) recebeu ração contaminada por 7 ou 14 dias, passando a receber ração limpa (não contaminada) na semana antecedente ao sacrifício. Um grupo controle (n = 15) recebeu ração não contaminada. Aos 7, 14 e 21 dias de experimento cinco animais de cada um dos grupos controle e tratado e aos 14 e 21dias seis do grupo residual foram sacrificados, colhendo-se as bolsas de Fabrício (BF) para análise histomorfométrica e determinação do índice apoptótico. As características da apoptose foram confirmadas pela técnica de marcação in situ da fragmentação do genoma (TUNEL) e pela eletroforese do DNA, em gel de agarose. As BF nos grupos tratado e residual, aos 14 e 21 dias, apresentaram depleção linfocitária de moderada a intensa e elevado índice apoptótico, significativamente maior do que do grupo controle (P 0,05). Os resultados permitem concluir que a apoptose está envolvida no mecanismo da depleção linfocitária provocada pela toxina T-2, em frangos de corte.