Evaluation of the supplementation of a feed additive as a potential protector against the adverse effects of 2. 5 ppm T-2 toxin on growing broiler chickens / Avaliação da suplementação de um aditivo alimentar como um protetor potencial contra os efeitos adversos de 2, 5ppm de toxina T-2 em frangos em crescimento

A trial was conducted to evaluate a feed additive containing epoxidase activity from a bacterium (Mycofix-S) as a potential protection against the adverse effects of 2.5 ppm dietary T-2 toxin in male growing broiler chickens. A total of 144 one-day-old Ross 308 male chicks were individually wing-banded and allotted into each of the four experimental groups. Group 1: negative control, no T-2 toxin or additive; group 2: Mycofix-S, 2.5 g/kg; group 3: positive control, 2.5 ppm T-2 toxin; group 4: 2.5 ppm T-2 toxin + 2.5 g/kg Mycofix-S. Feed and water were provided ad libitum for 28 days (days 1 to 28 of age). Each experimental treatment was replicated 6 times, with 6 birds per replicate pen. Response variables included performance parameters, serum activity of alkaline phosphatase (ALP) and amylase, relative weight of selected organs and histology of the upper digestive system. T-2 toxin at 2.5 ppm significantly (P = 0.016) decreased the 28-day body weight gain and cumulative feed intake without affecting feed conversion. The feed additive counteracted these adverse effects. Serum enzyme activities were not significantly (P>0.05) affected for the four experimental groups but when data from the groups receiving T-2 toxin was pooled and compared against the pooled data from groups without the toxin a significant decrease in amylase activity was observed in chickens receiving T-2 toxin. The histological examination of the upper digestive system revealed lesions in mouth, esophagus, proventriculus, gizzard and duodenum in the chickens fed T-2 toxin without the additive. Chickens fed T-2 toxin plus the additive showed lesions in the same tissues except in the duodenum. The results of the present study show that the addition of 2.5 g/kg of the feed additive tested protects against adverse effects on performance and also the integrity of the duodenal mucosa.(AU)

Foi realizado um experimento com o objetivo de avaliar um aditivo alimentar contendo atividade de epoxidase de uma bactéria (Mycofix-S) como proteção potencial contra os efeitos adversos de uma dieta com 2,5ppm de toxina T-2 em frangos de corte machos. Um total de 144 pintos machos Ross 308 de um dia de idade foram marcados na asa individualmente e alocados em um de quatro grupos experimentais: grupo 1: controle negativo, sem toxina T-2 ou aditivo; grupo 2: 2,5g/kg de Mycofix-S; grupo 3: controle positivo, 2,5ppm de toxina T-2; grupo 4: 2,5ppm de toxina T-2 + 2,5g/kg de Mycofix-S. Alimento e água foram fornecidos ad libitum por 28 dias (dias um a 28 de idade). Cada tratamento experimental foi replicado seis vezes, com seis pintos por gaiola de replicação. As variáveis de resposta incluíram parâmetros de desempenho, atividade sérica de fosfatase alcalina (ALP) e amilase, peso relativo de órgãos selecionados e histologia do sistema digestivo superior. A toxina T-2 a 2,5ppm diminuiu significativamente (P = 0.016) o ganho de peso corporal aos 28 dias e o consumo de alimento acumulado, sem afetar a conversão alimentar. O aditivo diminuiu os efeitos adversos. As atividades séricas das enzimas não foram afetadas significativamente (P>0.05) nos quatro grupos experimentais, porém, quando os dados dos grupos que receberam a toxina T-2 foram combinados e comparados com o pool de dados dos grupos sem toxina, foi observado um decréscimo significativo da atividade de amilase nos frangos que receberam a toxina T-2. O exame histológico do sistema digestivo superior revelou lesões em boca, esôfago, pró-ventrículo, moela e duodeno nos frangos alimentados com toxina T-2 sem aditivo. Frangos alimentados com toxina T-2 mais aditivo mostraram lesões nos mesmos tecidos, exceto no duodeno. Os resultados do presente estudo mostram que a adição de 2,5g/kg do aditivo alimentar testado protege contra os efeitos adversos sobre o desempenho e a integridade da mucosa duodenal.(AU)

Micotoxicosis y micotoxinas: generalidades y aspectos básicos / Mycotoxicosis and mycotoxins: generalities and basic aspects

El término micotoxicosis hace referencia a un amplio grupo de intoxicaciones causadas por la inhalación, el contacto directo o la ingestión de alimentos que han sido contaminados con micotoxinas, las cuales son metabolitos tóxicos producidos por una gran variedad de hongos filamentosos, entre los que se destacan los géneros Aspergillus, Fusarium, Claviceps, Penicillium y Stachybotrys. Esta es una revisión que analiza el impacto clínico de ciertas micotoxinas (aflatoxinas, ocratoxinas, fumonisinas, tricotecenos) en la génesis de las micotoxicosis en los seres humanos.

Mycotoxicosis refers to a large group of poisoning by inhalation, contact or ingestion of food that has been contaminated with mycotoxins, toxic secondary metabolites, produced by a variety of filamentous fungi, Aspergillus, Fusarium, Claviceps, Penicillium and Stachybotrys. This is a review that analyzes the clinical impact of certain mycotoxins (aflatoxins, ochratoxins, fumonisins, trichothecenes) in the genesis of mycotoxicosis in human beings.

Experimental poisoning by Baccharis megapotamica var. weirii in buffalo / Intoxicação experimental por Baccharis megapotamica var. weirii em búfalos

Five male 6-8 month-old Murrah buffalo calves were orally dosed with the fresh aerial parts of Baccharis megapotamica var. weirii at doses of 1, 3, 4, 5 and 10g/kg body weight (bw) (~1-10mg macrocyclic trichothecenes/kg/bw). The B. megapotamica used for the experiment was harvested on a farm where a recent spontaneous outbreak of poisoning caused by such plant had occurred. Clinical signs appeared 4-20 hours and 4 buffaloes died 18-49 hours after the ingestion of the plant. Clinical signs were apathy, anorexia, and watery diarrhea, fever, colic, drooling, muscle tremors, restlessness, laborious breathing and ruminal atony, and dehydration. The most consistent gross findings were restricted to the gastrointestinal (GI) tract consisted of varying degrees of edema and reddening of the mucosa of the forestomach. Histopathological findings consisted of varying degrees of necrosis of the epithelial lining of the forestomach and of lymphocytes within lymphoid organs and aggregates. Fibrin thrombi were consistently found in sub-mucosal vessels of the forestomach and in the lumen of hepatic sinusoids. It is suggested that dehydration, septicemia and disseminated intravascular coagulation participate in the pathogenesis of the intoxication and play a role as a cause of death. A subsample of B. megapotamica var. weirii was frozen-dried and ground and analyzed using UHPLC (Ultra High Performance Liquid Chromatography) with high resolution Time of Flight mass spectrometry and tandem mass spectrometry, it was shown that the plant material contained at least 51 different macrocyclic trichothecenes at a total level of 1.1-1.2mg/g. About 15-20% of the total trichothecenes contents was found to be monosaccharide conjugates, with two thirds of these being glucose conjugates and one third constituted by six aldopentose conjugates (probably xylose), which has never been reported in the literature.

As partes aéreas verdes de Baccharis megapotamica var. weirii foram administradas oralmente a cinco búfalos da raça Murrah de 6-8 meses de idade nas doses de 1, 3, 4, 5 e 10g/kg de peso corporal (pc) (~1-10mg de tricotecenos macrocíclicos/kg/pc). A planta usada no experimento foi colhida numa fazenda onde um surto recente de intoxicação espontânea por essa planta havia ocorrido. Nos búfalos deste experimento, os sinais clínicos apareceram 4-20 horas e 4 búfalos morreram 18-49 horas após a ingestão da planta. Os sinais clínicos consistiram de apatia, anorexia, diarreia aquosa, febre, cólica, salivação, tremores musculares, inquietação, respiração laboriosa, atonia ruminal e desidratação. Os achados macroscópicos mais consistentes estavam restritos ao trato gastrointestinal (GI) e consistiram de graus variados de edema e avermelhamento da mucosa dos pré-estômagos. Os achados histopatológicos consistiam de vários graus de necrose do epitélio de revestimento dos pré-estômagos e de linfócitos em agregados e órgãos linfoides. Trombos de fibrina foram consistentemente encontrados nos vasos da submucosa dos pré-estômagos e na luz dos sinusoides hepáticos. É sugerido que desidratação, septicemia e coagulação intravascular disseminada participem da patogênese da intoxicação e sejam fatores responsáveis pela morte dos animais afetados pela intoxicação. Uma subamostra de B. megapotamica var. weirii foi congelada a seco, moída e analisada usando UHPLC (Cromatografia Líquida de Ultra Alta Performance) com espectrometria de tempo-de-vôo de alta resolução e espectrometria de massa em tandem. Foi demonstrado que o material de planta analisado continha pelo menos 51 tricotecenos macrocíclicos diferentes num nível total de 1,1-1,2mg/g. Cerca de 15-20% do conteúdo total de tricotecenos eram conjugados de monossacarídeos, sendo dois terços desses, conjugados de glicose e um terço constituídos por seis conjugados de aldopentose (provavelmente xilose), o que nunca tinha sido antes relatado na literatura.

Natural occurrence of nivalenol and mycotoxigenic potential of Fusarium graminearum strains in wheat affected by head blight in Argentina

The principal agents of Fusarium head blight in the main cropping area of Argentina were investigated in heavily infected samples. The ability of the isolates to produce trichothecenes was determined by GC and HPLC. Fusarium graminearum was the predominant species and of 33 isolates, 10 produced deoxinivalenol (DON) (0.1- 29 mg kg-1), 13 produced both deoxinivalenol (1.0- 708 mg kg-1) and nivalenol (0.1- 6.2mg kg-1), 12 produced 3-acetyldeoxinivalenol (0.1- 14 mg kg-1), 13 produced 15-acetyldeoxinivalenol (0.1- 1.9 mg kg-1), 10 produced Fusarenone X (0.1- 2.4 mg kg-1) and 7 produced zearalenone (0.1- 0.6 mg kg-1). These results suggest that F. graminearum strains isolated from the wheat growing regions in Argentina belong to DON chemotype. Although some strains produced both deoxinivalenol and nivalenol, nivalenol was produced in lower levels. The natural occurrence of nivalenol in wheat affected by head-blight collected in the main production area during two years (2001-2002) was also determined. From 19 samples 13 were contaminated with deoxinivalenol in a range of 0.3 to 70 mg kg-1and 2 samples with both deoxinivalenol (7.5 and 6.7 mg kg-1) and nivalenol (0.05 and 0.1 mg kg-1), respectively. This is the first report of natural occurrence of nivalenol in wheat cultivate in Argentina.

O principal causador de giberela no trigo na Argentina e sua capacidade de produzir tricotecenos foram estudados por GC e HPLC em amostras altamente infectadas. A espécie predominante foi Fusarium graminearum, sendo que de um total de 33 isolados, 10 produziram deoxinivalenol (0,1-29 mg kg -1), 13 produziram deoxinivalenol (1,0-708 mg kg-1) e nivalenol (0,1-6,2 mg kg-1), 12 produziram 3-acetildeoxinivalenol (0,1-14 mg kg-1), 13 produziram 15-acetildeoxinivalenol (0,1-1,9 mg kg-1), 10 produziram fusarenona X (0,1- 2,4 mg kg-1) e 7 produziram zearalenona (0,1- 0,6 mg kg-1). Esses resultados sugerem que as cepas de F. graminearum isoladas de trigo cultivado na Argentina pertencem ao quimiotipo DON. Embora algumas cepas tenham produzido tanto DON quanto NIV, NIV foi produzido em quantidade inferior ao DON. A ocorrência natural de nivalenol em trigo afetado pela giberela coletado na principal área de produção durante dois anos (2001-2002) foi também determinada. De 19 amostras, 13 estavam contaminadas com deoxinivalenol na faixa de 0,3 a 70 mg kg-1 e 2amostras continham tanto deoxinivalenol (7,5 e 6,7 mg kg-1) quanto nivalenol (0,05 e 0,1 mg kg-1), respectivamente. Esse é o primeiro relato da ocorrência de nivalenol em trigo cultivado na Argentina.

Avaliaçäo de métodos para determinaçäo de tricotecenos em milho por cromatografia gasosa / Evaluation of analytical methods for the determination of trichothecenes in corn by gas chromatography

Sistemas de extraçäo e limpeza foram avaliados para a determinaçäo de tricotecenos em milho por cromatografia gasosa com detector de ionizaçäo de chama. O método de extraçäo e limpeza descrito por Furlong & Soares (1995), combinado com uma coluna de limpeza preconizada pr Romer (1986), foi o sistema que apresentou melhores resultados. Para extraçäo foi usado metanol:cloreto de potássio 4 por cento (9:1) seguido por clarificaçäo com sulfato de amônio 30 por cento e partiçäo com diclorometano. A seguir, o extrato foi passado pela coluna de alumina:carväo (2,3:1,9) e os tricotecenos eluídos com acetonitrila:água (84:16). O extrato, após reaçäo de derivaçäo com anidrido trifluoroacético (TFAA) em piridina, foi injetado em um cromatógrafo a gás com detector por ionizaçäo em chama. As recuperaçöes médias obtidas foram 72 por cento para desoxinivalenol (DON), 88 por cento para diacetoxiscirpenol (DAS) e 87 por centopara toxina T2(T2). Os limites de detecçäo obtidos foram 30 ng/g pra DON, 50 ng/g para DAS e 40 ng/g para toxina foram 9,8,6,3 e 6,6 por cento para DON,DAS e T2, respectivamente. (AU)

Extraction and cleanup systems were evaluated for the determination of trichothecenes incorn by gas chromatography with flame ionization detector. The extraction and cleanup method describedby Furlong & Soares (1995), combined with the Romer (1986) cleanup column exhibited the best results.The extraction used methanol: 4% potassium chloride (9:1), followed by a clarification with 30% ammoniumsulfate, and partition with dichloromethane.The extract was then passed through an alumina:carboncolumn (2.3:1.9) and eluted with acetonitrile:water (84:16). Trifluoroacetic anhydride in the presence ofpyridine was used for derivatization before injection in a gas chromatograph with an ionization detector.The average recoveries were 72% for deoxynivalenol (DON), 88% for diacetoxyscirpenol (DAS) and 87%for toxin T2 (T2). The detection limits were 30 ng/g for DON, 50 ng/g for DAS and 40 ng/g for T2. Theaverage coefficients of variation for spiked samples at the 500 ng/g level were 9.8, 6.3 e 6.6% for DON,DAS, and T2, respectively. (AU)