Qualidade físico-química e microbiológica do leite UHT comercializado no município de São Luís - MA / Physical-chemical and microbiologic quality of UHT milk commercialized at São Luís – MA

O leite é um dos alimentos mais consumidos no mundo por possuir um alto teor nutritivo. É composto de proteínas, carboidratos, gorduras, sais minerais e vitaminas. Apesar disto, este alimento constantemente é alvo de fraudes que alteram a sua composição e podem trazer riscos à saúde dos consumidores. Assim, este trabalho objetivou pesquisar a presença de substâncias adulterantes (formaldeído, amido, hipoclorito de sódio e cloro livre) e avaliar a qualidade físico-química e microbiológica em 36 amostras do leite UHT comercializadas no município de São Luís, Maranhão. Para detecção destas substâncias, utilizou-se a metodologia indicada pelo Instituto Adolfo Lutz para pesquisa de formaldeído, e a utilizada pelos laboratórios oficiais do MAPA para pesquisa das demais substâncias e análises físico-químicas e microbiológicas. Após a realização da pesquisa, constatou-se a ausência de substâncias adulterantes, e parâmetros físico-químicos e microbiológicos de acordo com aqueles preconizados pela legislação brasileira nas 4 marcas de lotes diferentes analisadas de leite UHT.

Avaliação da qualidade microbiológica e físico-química do leite comercializado no Distrito Federal no período de janeiro de 2015 a julho de 2017 / Evaluation of the microbiological and physical-chemical quality of milk marketed in the Federal District from January 2015 to July 2017

Introdução: O leite é um alimento de grande importância na alimentação, pois possui elevado valor nutritivo e fornece macro e micronutrientes indispensáveis ao crescimento,desenvolvimento e manutenção da saúde. Contudo, a presença de alto teor de água, proteínas, gorduras, carboidratos, minerais e vitaminas o torna vulnerável a alterações físicoquímicas e microbiológicas. O monitoramento da qualidade do leite no comércio cabe ao Sistema Nacional de Vigilância Sanitária. A execução dessa ação é responsabilidade dos órgãos de Vigilância Sanitária estaduais, distrital e municipais em articulação com os Laboratórios Centrais de Saúde Pública (Lacen). Objetivo: Avaliar parâmetros microbiológicos e físicoquímicos dos leites pasteurizados e UHT comercializados no Distrito Federal (DF), por meio de laudos emitidos pelo Lacen-DF. Método: Foram analisadas 276 amostras, 228 de leites UHT e 48 de leites pasteurizados, coletadas entre 2015 e 2017. Resultados: Estavam insatisfatórias 0,4% das amostras de leite UHT, por apresentarem teor de proteína abaixo do valor de referência, e 37,5% das amostras de leite pasteurizado não atenderam aos padrões físico-químicos e microbiológicos, apresentando problemas na prova de cocção (2,1%), acidez (12,5%), teor de gordura (6,3%), SNG (12,5%), índice crioscópico (14,6%), coliformes (13,5%), rotulagem (13,5%) e avaliação sensorial (6,3%). Conclusões: Há necessidade de ação fiscalizadora permanente da Vigilância Sanitária em parceria com outros órgãos, no sentido de realizar medidas de controle de qualidade, visando garantir um alimento seguro ao consumidor.

Introduction: Milk is a food of great importance in human nutrition. Its high nutritional value provides macro and micronutrients indispensable for growth, development and maintenance of health. However, the presence of high water contents, proteins, fats, carbohydrates, minerals and vitamins makes it vulnerable to physico-chemical and microbiological changes. Monitoring of the quality of milk in trade is the responsibility of the National Health Surveillance System. The execution of this action is the responsibility of the state, district and municipal Sanitary Vigilance organs in liaison with the Central Public Health Laboratories (Lacen). Objective: To evaluate the microbiological and physico-chemical parameters of the pasteurized and UHT milks sold in the Federal District (DF), through reports issued by Lacen-DF. Methods: We analyzed 276 samples, 228 of UHT milks and 48 of pasteurized milks, collected between 2015 and 2017. Results: 0,4% of the UHT milk samples presented a protein content below the reference value and 37.5% of the pasteurized milk samples did not reach physico-chemical and microbiological standards, presenting problems in the heating test (2.1%), acidity (12.5%), fat content (6.3%), nonfat milk solids (12.5%), cryoscopic index (14.6%), coliform (13.5%), labeling (13.5%) and sensory evaluation (6.3%). Conclusions: There is a need for permanent inspection by the Sanitary Surveillance in partnership with other agencies, to promote and carry out quality control measures, ensuring a safe food product for the consumer.

Desenvolvimento de um modelo preditivo para identificação de perda de estabilidade e ocorrência de proteólise em leite UAT / Development of a predicative model for identification of loss of stability and proteolysis occurrence in UHT milk

Este trabalho se propôs a desenvolver um modelo preditivo para identificação de perda de estabilidade e de sedimentação em leite UAT por determinação da atividade enzimática de aminopeptidase no leite por espectrofotometria. Foram analisadas amostras de leite cru, pasteurizado e UAT após envase durante seis meses, na região Sul do Brasil. Acidez, crioscopia, gordura, extrato seco total, extrato seco desengordurado e densidade foram analisados nos leites cru e pasteurizado. Amostras de leite cru foram ainda submetidas à análise de contagem de psicrotróficos e à atividade de aminopeptidase, e amostras de leite UAT estocadas foram analisadas quanto ao grau de proteólise mediante análises sensoriais e atividade de aminopeptidase. Alterações sensoriais foram observadas em tempos de estocagem menores para amostras originadas de leite cru com contagem de psicrotróficos acima de 107 UFC mL-1. Não houve correlação entre a atividade de aminopeptidase e proteólise e também não foi observada correlação significativa entre os parâmetros físico-químicos e a ocorrência de proteólise no leite estocado. O modelo estudado não foi apto para predizer perda de estabilidade e ocorrência de proteólise no leite UAT.(AU)

The aim of this work was to develop a predictive model for identifying loss of stability and sedimentation in UHT milk by determining the enzymatic activity of aminopeptidasis in milk by spectrophotometry. Samples of raw milk, pasteurized and UHT after filling for 6 months in Southern Brazil were analyzed. Acidity, freezing point, fat, total solids, nonfat solids and density were analyzed in raw and pasteurized milk. Raw milk samples were also subjected to psychrotrophic count analysis and aminopeptidasis activity and UAT samples of stored milk were analyzed for degree of proteolysis through sensory analysis and aminopeptidasis activity. Sensory changes were observed in smaller storage time for samples of raw milk originated with psychrotrophic count above 107 CFU ml-1. There was no correlation between aminopeptidasis activity and proteolysis and there was also no significant correlation between physicochemical parameters and the occurrence of proteolysis in stored milk. The model was unable to predict loss of stability and occurrence of proteolysis in UHT milk.(AU)

Detection of Bacillus cereus isolated during ultra high temperature milk production flowchart through random amplified polymorphic DNA polymerase chain reaction / Detecção de Bacillus cereus isolado durante o fluxograma de produção do leite tratado por ultra alta temperatura através do DNA polimórfico amplificado ao acaso através da reação em cadeia pela polimerase

ABSTRACT: The present study focused on isolation Bacillus cereus during the UHT milk production and shelf life, to assess the enterotoxigenic production capacity of isolates and to evaluate the use of the RAPD-PCR technique to verify whether Bacillus cereus isolated at different phases of UHT milk processing belongs to the same strain. For this, six groups of milk samples composed of raw, pasteurized and UHT milk were collected from a processing plant. The results revealed that bacteria belonging to the Bacillus cereus group were isolated from 51.6%, 81.6% and from 13.8% of raw, pasteurized and UHT milk samples, respectively. About 50.0% of isolates from raw milk, 19.2% isolates from pasteurized milk and 70.7% isolates from UHT milk were capable of producing enterotoxins. It was confirmed the genetic similarity among Bacillus cereus isolates from raw, pasteurized and UHT milk, therefore demonstrating that the microorganism is able to withstand UHT treatment. These results should serve as a warning to health authorities, given that 13.8% of samples were not in accordance with standards established by the Department of Health for containing a potentially pathogen agent, therefore indicating that contamination of milk by sporulating bacteria should be avoided.

RESUMO: Objetivou-se realizar o isolamento de bactérias do grupo do Bacillus cereus e verificação da semelhança genética entre elas, através da PCR-RAPD, durante a produção e vida de prateleira do leite UAT, bem como verificar sua capacidade enterotoxigência. Para isso, foram colhidas em uma usina de beneficiamento seis grupos de amostras de leite compostos cada um por amostras de leite cru, pasteurizado e UAT. Os resultados obtidos evidenciaram que bactérias do grupo do Bacillus cereus foram isoladas de 51,6% das amostras de leite cru, de 81,6% das de leite pasteurizado e de 13,8% das de leite UAT. Demonstraram-se capazes de produzir enterotoxinas 50,0% dos isolados de leite cru, 19,2% de leite pasteurizado e 70,7% de leite UAT. Também se pode constatar a semelhança genética entre as cepas de Bacillus cereus isoladas do leite cru, pasteurizado e UAT, evidenciando assim que o micro-organismo é capaz de resistir ao tratamento por UAT. Tais resultados devem servir de alerta às autoridades sanitárias, tendo em vista que 13,8% deles estavam em desacordo com o estabelecido pelo Ministério da Saúde, por serem capazes de veicular um agente potencialmente patogênico, demonstrando assim que a contaminação do leite por bactérias esporuladas deve ser motivo de preocupação.

Consumo de produtos lácteos e a estimativa da ingestão de sódio por crianças brasileiras de 4 a 8 anos / Dairy consumption and an estimated sodium intake by Brazilian children aged 4 to 8 years

O consumo de produtos lácteos (bebidas lácteas, compostos lácteos e leites líquidos e em pó) por crianças tem se constituído em uma das principais fontes de consumo excessiva de sódio na infância, tanto no Brasil quanto no mundo, se configurando num sério problema de saúde pública. Objetivo: Determinar o padrão de concentração de metais essenciais (Na, K, Ca, Fe, P, Mg, Zn e Se) contido no leite fluido integral UHT, leite em pó integral, compostos lácteos e bebidas lácteas não fermentadas UHT sabor chocolate das marcas comercializadas na cidade de São Luís/MA, relacionando as quantidades de sódio informadas nos rótulos, com aquelas encontradas nos produtos e as concentrações tabeladas pela Pesquisa de Orçamento Familiar (POF/IBGE). Estimar a ingestão diária de sódio de acordo com o consumo teórico de leite fluido integral UHT, leite em pó integral, compostos lácteos e bebidas lácteas não fermentadas UHT sabor chocolate numa dieta padrão de crianças brasileiras de 4-8 anos, em relação às recomendações de ingestão diária de sódio recomendadas pela OMS. Métodos: O presente estudo foi realizado em duas etapas: A primeira foi uma análise química do teor de sódio contido em amostras de bebidas lácteas não fermentadas UHT sabor chocolate, leite fluido integral UHT, leite em pó integral e compostos lácteos, das marcas disponíveis em diferentes supermercados no município de São Luís, Maranhão, utilizando os métodos Espectrometria de Emissão Óptica por Plasma Acoplado Indutivamente (ICP-OES) e Espectrometria de Emissão Atômica por Chama (fotometria de chama). Em seguida foi estimada a ingesta diária de sódio e outros metais essenciais com base no consumo teórico dos produtos lácteos numa dieta padrão de crianças de 4-8 anos da região Nordeste do Brasil, comparando com as recomendações OMS e Dietary Reference Intakes (DRI)...

The consumption of dairy products (milk, drinks milk compounds and liquid and powder milk) by children has been constituted in one of the main sources of excessive sodium consumption in childhood, both in Brazil and in the world, shaping up a serious public health problem. Objective: To determine the pattern of concentration of essential metals (Na, K, Ca, Fe, P, Mg,Zn and Se) contained in integral fluid milk, UHT full milk powder, milk and dairy drinks compounds non-fermentable UHT chocolate flavor of the brands sold in the city of São Luís/MA, relating the quantities of sodium informed on labels, with those found in products and standardized concentrations by POF. Estimate the daily sodium intake according to the theoretical consumption of fluid milk UHT full, full milk powder, milk and dairy drinks compounds not UHT chocolate flavored fermented in a standard diet of Brazilian children of 4-8 years, in relation to recommendations of daily sodium intake recommended by who. (...) Conclusion: it was observed that the concentration of sodium in 200 mL of milk foods analyzed integrals were statistically higher than the values declared on the labels and values tables by POF, independent of the analytical method used. The foods with the highest concentrations of sodium were not necessarily higher concentrations of other essential minerals analyzed (Ca, Fe, K, Mg, P and Zn). The Photometry method proved more effective and accurate than the ICP-OES method for determination of sodium and potassium concentrations in all foods. In addition, it was found that the consumption of dairy food amount recommended by who for children 4 to 8 years (600 mLl), could lead to the ingestion of a sodium concentration of 10 percent to 86.5 percent greater than that recommended by WHO and DRI (up to 2000 mg)...

Caracterización de la microbiota de leche ultra alta temperatura (UAT, UHT) analizada en Bogotá / Characterization of the microbiota of ultra-high temperatura (UHT) milk scrutinized in Bogotá / Caracterização da microbiota no leite ultra-alta temperatura (UAT) analisada em Bogotá

En los últimos años, las leches ultra alta temperatura (UAT, o UHT por sus siglas en inglés) ­definidas en el Decreto 616 de 2006­ analizadas en el Laboratorio de Salud Pública de Bogotá han venido presentando resultados no satisfactorios respecto a la prueba de esterilidad comercial, debido a que se han detectado microorganismos productores de esporas altamente resistentes a los tratamientos de ultrapasteurización (HHRS). A escala mundial, se informa como principal causa de esta clase de contaminación al Bacillus sporothermodurans. Con este estudio se determinó si las leches UAT de distribución en Bogotá presentan la misma contaminación detectada por bacterias HHRS del género Bacillus, y principalmente B. sporothermodurans. Las muestras de leches UAT que ingresaron al Laboratorio de Salud Pública de Bogotá se utilizaron para análisis microbiológico, como parte de la vigilancia rutinaria realizada por el Hospital de Fontibón durante 2010 y 2011. Como resultado de la prueba de esterilidad comercial aplicada a las leches UAT se recuperaron 36 cepas de muestras analizadas durante 2010-2011, a las que se les realizó la identificación bioquímica con el test BCL de Biomerieux, en el equipo Vitek ®2 Systems. Los microorganismos recuperados morfológicamente correspondieron a bacilos grampositivos, pertenecientes al género Bacillus, así: Bacillus smitii, 66,67 %; Bacillus sphaericus/fusiformis, 8,33 %; Bacillus choshinensis y Geobacillus stearothermophilus, 8,33 %. Esto permite concluir que no toda la contaminación de las leches UAT (UHT) analizadas en Bogotá se debe a una sola especie de Bacillus; por tanto, no se debe enfocar únicamente en B. sporothermodurans como contaminante único de leches higienizadas a escala nacional

In recent years, ultra-high temperature milk categories (enforced by Decree 616 of 2006 and scrutinized by Public Health Laboratory of Bogota) have reported unsatisfactory results regarding a commercial sterility test because of highly heat-resistant spores ­HHRS­ produced by microorganisms. Globally, Bacillus sporothermodurans has reported as the main cause of this kind of pollution. This study established whether these delivery milks in Bogota have the same pollution detected by HHRS bacteria of the genus Bacillus and mainly B. sporothermodurans. For this purpose, we used microbiological samples as a portion of the repetitive surveillance performed by the Hospital de Fontibon during 2010 and 2011, division of Environment and Consumer Surveillance. Because of the commercial sterility test, 36 sample strains were recovered and biochemically identified using Biomerieux BCL test, supported by Vitek ®2 Systems. The morphologically recovered microorganisms were Gram-positive bacilli belonging to Bacillus type, as follows: Bacillus smitii 66,67 %, Bacillus sphaericus/ fusiformis 8,33 %, Bacillus choshinensis and Geobacillus sterarothermophilus 8,33 %. This lets us to conclude that not all of the pollution is due to single species of Bacillus and should not focus only on B. sporothermodurans as a single contaminant of domestic sanitized milks

Nos últimos anos, as categorias de leite ultra-alta temperatura (UAT) ­ definidas no Decreto 616 de 2006 e analisados no Laboratório de Saúde Pública de Bogotá ­ têm vindo apresentando resultados não satisfatórios respeito à prova de esterilidade comercial, isso devido a que se têm afetado microrganismos produtores de esporas altamente resistentes aos tratamentos de ultra- pasteurização (HHRS). Mundialmente reporta-se como principal causa deste tipo de contaminação ao Bacillus sporothermodurans. Com este estudo determinou-se se esses leites de distribuição em Bogotá apresentam a mesma contaminação detectada por bactérias HHRS do gênero Bacillus e principalmente o B. sporothermodurans. Para tal fim, utilizaram-se amostras de análise microbiológico como parte da vigilância costumeira realizada pelo Hospital de Fontibón durante 2010 y 2011 na área de Vigilância do Ambiente e Consumo. Resultados da prova de esterilidade comercial foram recuperadas 36 cepas de amostras nas quais, a seguir, foram realizada a identificação bioquímica com o teste BCL de Biomerieux na equipe Vitek ®2 Systems. Os microrganismos recuperados morfologicamente corresponderam a bacilos Gram positivos, pertencentes ao gênero Bacillus, deste jeito: Bacillus smitii 66.67 %, Bacillus sphaericus/ fusiformis 8.33 %, Bacillus choshinencis e Geobacillus sterarothermophilus 8.33 %. O anterior permite concluir que não toda a contaminação é devida a uma só espécie de bacilos e não deve se enfocar unicamente em B. sporothermodurans como contaminante único nacional dos leites higienizados

ATP-Bioluminescence as a method to evaluated microbiological quality of UHT milk / ATP-Bioluminescência como método para avaliação da qualidade microbiológica de leite UAT

New approaches are needed to quickly indicate possible contamination of UHT milk, among them the technique of ATP-Bioluminescence. Therefore, the aim of this study was to compare the results of culture methods with the results of ATP-Bioluminescence technique of 102 UHT whole milk samples incubated at 48, 72, and 168 hours. UHT milk samples were analyzed for the presence of mesophilic and psychrotrophic aerobic microorganisms using Plate Count Agar (PCA), Brain-Heart Infusion (BHI) media and PetrifilmTM Aerobic Count (AC) plates. The ATP-Bioluminescence technique was applied through the Microbial Luminescent Screening (MLS) system. Significant correlations were found between counts of aerobic mesophilic microorganisms on PCA, PetrifilmTM AC, BHI and results of ATP bioluminescence technique (P≤0.05). The ATP-Bioluminescence technique had higher correlation with counting method in PCA than BHI media. At lower pass/fail limits of Relative Light Units (60, 50, 45 and 40 RLU), the number of samples identified as positive increased and statistically agreed with aerobic mesophilic microorganism counts (P>0.05). For the dairy industry, the ATP-Bioluminescence technique may become an important tool that assists the official methods to quickly monitor the microbiological quality of UHT milk though this will likely require a threshold below 150 RLU...

Novos métodos são necessários para detectar de forma rápida a contaminação do leite UAT, entre eles, a técnica de ATP-Bioluminescência. Portanto, objetivou-se comparar os resultados de métodos de cultura tradicionais com os resultados de ATP-Bioluminescência de 102 amostras de leite UAT integral incubadas por 48, 72 e 168 horas. Os leites UAT foram analisados quanto à presença de micro-organismos aeróbicos mesófilos e psicrotróficos usando os ágares PCA, BHI e placas PetrifilmTM AC. A técnica de ATP-Bioluminescência foi aplicada por meio do sistema Microbial Luminescent Screening (MLS). Significantes correlações foram obtidas entre as contagens de micro-organismos mesófilos aeróbios em PCA, PetrifilmTM AC, BHI e os resultados da técnica de ATP-Bioluminescência (p<0,05). A técnica de ATP-Bioluminescência tem maior correlação com o método de contagem em meio PCA que BHI. Quando valores limites de Unidades Relativas de Luz (60, 50, 45 e 40 RLU) foram menores, o número de amostras identificadas como positivas aumentou e concordou estatisticamente com a contagem de micro-organismos mesófilos aeróbios (P>0,05). Para as indústrias de laticínios, a técnica de ATP-Bioluminescência pode se tornar uma ferramenta auxiliar aos métodos oficiais para o monitoramento rápido da qualidade microbiológica do leite UAT, desde que sejam utilizados limites abaixo de 150 RLU...

Caseinomacropeptide index in UHT whole milk stored under different conditions of temperature and time / Efeito das condições de armazenamento no índice de caseinomacropeptídeo de amostras de leite integral ultra alta temperatura (UAT)

Caseinomacropeptide (CMP) index is a method used to detect adulteration of milk by addition of cheese whey, since CMP is a glycopeptide characteristic produced during cheesemaking, and soluble in the whey phase. The objective of this work was to evaluate the caseinomacropeptide index of UHT milk stored under different temperatures. Six batches of recently processed UHT milk were collected and stored under three temperatures (21ºC, 6ºC, and -12ºC) and analyzed by HPLC in the day of the milk collection (day 0) and at 30, 60, 90, and 120 days of storage. The experiment was run as a randomized block design with a 3x5 factorial arrangement, and the Student-Newman-Keuls (SNK) method was used as the post-hoc test (p = 0.05). There was a progressive increase of the CMP index during the storage period of 120 days, and this indicates the possibility of false positive results if the CMP index is used as an adulteration test for long term stored UHT milk. The validity of the CMP index as an adulteration indicator is only possible soon after packaging, and sample freezing is the only alternative when immediate analysis is not possible. The method was found to be precise, with robust CV of 1.9% even with high CMP levels.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da temperatura e do tempo de armazenamento de amostras de leite UAT, em relação ao índice de caseinomacropeptídeo, por cromatografia líquida de alta eficiência, e a precisão do método de detecção. Seis lotes foram coletados e armazenados em três temperaturas (21ºC, 6ºC e -12ºC ± 1ºC) e analisadas durante o armazenamento nos dias 0, 30, 60, 90 e 120 dias. Utilizou-se o delineamento em blocos casualizados com os tratamentos em arranjo fatorial 3x5 e os resultados foram comparados por meio do teste Student-Newman-Keuls (SNK) a 5% de significância. Houve aumento progressivo do índice de CMP por CLAE durante os 120 dias; portanto, um produto conforme pode se tornar não conforme sem que ocorra adulteração. A detecção de fraude por adição de soro lácteo em leite UAT pode ser detectada somente após o envase. Caso não seja possível a análise imediata, recomenda-se que as amostras sejam congeladas. O método é muito preciso (CV=1,9%) e indiferente aos níveis de CMP encontrados nas amostras.

Avaliação da qualidade microbiológica de bebida láctea e creme de leite UAT por ATP-Bioluminescência / Evaluation of microbiological quality of UHT milk drink and UHT milk cream by ATP-Bioluminescence

Embora métodos tradicionais sejam utilizados na avaliação microbiológica de produtos UAT, metodologias rápidas, baseadas em ATP-Bioluminescência, têm sido desenvolvidas. Os resultados da aplicação dessa técnica em 54 amostras de bebida láctea UAT achocolatada e 12 de creme de leite UAT foram comparados com os resultados de métodos microbiológicos, utilizando-se diferentes meios de cultura e tempos de incubação das referidas amostras. A técnica de ATP-Bioluminescência foi aplicada por meio do sistema MLS, e os resultados foram expressos em unidades relativas de luz (RLU). Em todos os tempos de incubação - 48, 72 e 168 horas - , as amostras apresentaram contagens baixas de microrganismos mesófilos e psicrotróficos aeróbios quando analisadas em meio PCA, BHI, PetrifilmTM AC e por ATP-Bioluminescência (<150 RLU), demonstrando alta especificidade da técnica. Apenas uma amostra de creme de leite UAT apresentou contagem de mesófilos aeróbios acima do padrão estabelecido pela legislação brasileira (<100 UFC/mL) quando analisada em meio PCA (260 UFC/mL) e PetrifilmTM AC (108 UFC/mL), no tempo de 168 horas. Essa alta contagem de microrganismos mesófilos aeróbios também foi detectada pela técnica de ATP-Bioluminescência (416 RLU). Os resultados da técnica de ATP-Bioluminescência foram iguais aos resultados em meio PCA, BHI e PetrifilmTM AC.

Although traditional methods are used for the microbiological evaluation of UHT products, rapid methodologies based on ATP-Bioluminescence have been developed. The results of applying this technique in 54 samples of chocolate UHT milk drink and 12 of UHT milk cream were compared with the results of microbiological methods, using different culture media and incubation times for the referred samples. The ATP-Bioluminescence technique was applied through the MLS system and the results were expressed as relative light units (RLU). In all incubation times - 48, 72, and 168 hours - , the samples showed lower counts of mesophilic and psychrotrophic aerobic microorganisms when analyzed using PCA, BHI, PetrifilmTM AC and ATP-Bioluminescence (<150RLU), demonstrating the technique's high specificity. Only one sample of UHT milk cream showed a mesophilic aerobic count above the standard established by Brazilian legislation (<100CFU/mL) when analyzed in PCA (260 CFU/mL) and PetrifilmTM AC (108CFU/mL) at 168 hours. This high count of aerobic mesophilic microorganisms was also detected by the ATP-Bioluminescence (416 RLU) technique. The results of the ATP-Bioluminescence technique were equal to the results in PCA, BHI and PetrifilmTM AC.

Sedimentação em leite UHT integral, semidesnatado e desnatado durante armazenamento / Particle sedimentation in semi-skimmed, skimmed on whole milk UHT, during storage

Um dos maiores problemas do leite UHT é a sedimentação que ocorre durante o período de armazenamento, o que é muito reclamado pelos consumidores. O objetivo deste trabalho foi determinar a sedimentação em leite UHT integral, semidesnatado e desnatado, armazenados a 20°C e 30°C (±1°C) durante 120 dias. Nos leites pasteurizados que deram origem aos leites UHT, foram efetuadas análises físico-químicas e microbiológicas (bactérias mesófilas, psicrotróficas e láticas) e, nos leites UHT integral, semidesnatado e desnatado, avaliaram-se a acidez, pH, fervura, sensorial, integridade das embalagens e sedimentação, logo depois de embalados e no 30°, 60°, 90° e 120° dia de armazenamento. Os leites pasteurizados integral, semidesnatado e desnatado apresentaram resultados dentro dos padrões estipulados pela indústria para as bactérias mesófilas (log10 4,37 a log10 4,08UFC mL-1), psicrotróficas (log10 3,06 a log10 2,77UFC mL-1) e lácticas (log10 3,10 a log10 2,42UFC mL-1), que diferiram significativamente (P<0,05) das contagens dos leites in natura que lhes deram origem. Os valores de acidez (0,15% ácido láctico), crioscopia (-0,535 a -0,540°H), gordura, densidade (1,031 a 1,034g mL-1), ESD (8,65 a 8,93%) e pH (6,70 a 6,80) também ficaram dentro dos padrões. A partir do 60° dia de armazenamento foi observada sedimentação nos três tipos de leites UHT a 20°C (0,80 a 1,10g) e a 30°C (1,0 a 1,40g).

One of the biggest problems of UHT milk is the sedimentation of protein particles that occurs during the storage period, which faces rejection by the consumers. The aim of this study was to evaluate the particle sedimentation in semi-skimmed, skimmed and wholemilk, stored at 20°C, 30°C (±1) for 120 days. In pasteurized milk that yielded UHT milk physico-chemical and microbiological analisys (mesophilic, psychrotrophic and lactic acid bacteria) were carried out. In semi-skimmed, skimmed and whole milk, the acidity, pH, boiling, sensory analysis, integrity of packaging and sedimentation tests were carried out shortly after packing and at 30th, 60th, 90th and 120th days of storage. The pasteurized whole milk, semi skimmed and skimmed milk showed results within the required standards by the industry for mesophilic bacteria(log10 4.37 a log10 4.08UFC mL-1), psychrotrophic (log10 3.06 a log10 2.77UFC mL-1) and lactic acid (log10 3.10 a log10 2.42UFC mL-1) bacteria, that differed significantly (5%) of value of fresh milk from which they originate. The values of acidity (0.15% ác. láctic), freezing point (-0.535 a -0.540°H), fat, density (1.031 a 1.034g mL-1), pH (6.70 a 6.80) and degreased dry extract (8.65 a 8.93%) also were within the standards. From the 60th day of storage on, particle sedimentation was observed in the three types of UHT milk at the 20°C (0.80 a 1.10g) at the 30°C (1.0 a 1.40g).

Microbiological profile of milk: Impact of household practices.

Background: Milk is susceptible to contamination by many microorganisms including microbial pathogens responsible for causing diseases. Various processes including pasteurization, boiling or storage under refrigerated conditions are undertaken to minimize the microbial contamination of milk. Objective: This study was undertaken with an objective to evaluate the effect of household practices on the microbiological profile of milk. Materials and Methods: Milk samples of pasteurized, ultra heat treated (UHT) as well as unpasteurized milk (Vendor's milk) were collected. The effect of different storage practices and treatments on the microbiological profile (standard plate count (SPC), coliform, E. coli, Salmonella, Shigella, Staphylococcus aureus, yeast and moulds, anaerobic spore count, and Listeria monocytogenes) of milk was studied using National/ International Standard Test Methods. Results: Average SPC in vendor's milk was found very high as compared to pasteurized milk. Coliform, yeast and moulds, E. coli, and Staphylococcus aureus were detected in the samples of vendor's as well as pasteurized milk. Boiling the milk reduces SPC and kills the other microorganisms. Storage of boiled milk under room temperature or refrigerated condition resulted in a similar increase in SPC at the end of 24 h, but storage of un-boiled milk even under refrigerated conditions increased SPC manifold after 24 h. Conclusion: The pasteurization process and hygienic conditions at the milk processing units along with cold chain of milk from suppliers to end users needs improvement. Currently, even pasteurized milk does not match the microbiological standards. It is recommended that milk should be boiled before consumption and refrigerated for storage to improve its shelf life/keeping quality.

Características microbiológicas de leite integral e bebida láctea processados por UAT (Ultra Alta Temperatura) ao longo do período de validade / Microbiological characteristics of whole milk and dairy drink processed by UHT (Ultra-High Temperature) during its shelf life

O leite integral e a bebida láctea UAT são submetidos ao mesmo tratamento térmico, mas são produtos diferentes, já que na bebida láctea é permitida a adição de até 50% de soro lácteo. Neste estudo, objetivou-se avaliar as características microbiológicas destes produtos com relação à legislação vigente do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) e, ainda, da população psicrotrófica, ao longo do período de validade. Foram analisadas 150 amostras, 75 de cada produto, a partir de cinco diferentes marcas comerciais nacionais. As 15 amostras de cada marca foram subdivididas em três lotes: início, meio e final do período de validade, cada qual com cinco amostras do mesmo lote. Verificou-se para o leite que todas as amostras de leite UAT estavam de acordo com a legislação vigente. A população de psicrotróficos aumentou em 26,6% das amostras depois que foram abertas e mantidas sob refrigeração por 48 horas. Os resultados para a bebida láctea evidenciaram que 12% das amostras estavam em desacordo com o estabelecido pela legislação vigente. A população de psicrotróficos aumentou em 36% das amostras depois que foram abertas e mantidas sob refrigeração por 48 horas. Tais resultados devem servir de alerta para a necessidade de fiscalização mais rigorosa da bebida láctea UAT, pois parte das amostras não atenderam aos padrões microbiológicos estabelecidos pela legislação.

UHT milk and dairy drinks are submitted to the same heat treatment, but they are different products, since the addition of up to 50% of whey is allowed in dairy drinks. The aim of this study was to evaluate the microbiological characteristics of these products in relation to current legislation, during the course of their shelf life. In the present study, 150 samples, 75 of each type of product, from 5 different national brands were analyzed. The 15 samples of each brand were separated into 3 lots containing 5 samples each, analyzed at the beginning, middle and end of the validity period. Upon microbiological analysis all UHT milk samples were in conformance with current legislation. After the samples were opened and chilled for 48 hours, 26.6% of them presented an increased psychrotrophic population. The dairy drink results showed that 12% of the samples were out of conformance with the current legislation. After the samples were opened and chilled for 48 hours, 36% of them presented an increased psychrotrophic population. These results should be considered as an alert in regard to the need for rigorous inspection of UHT milk and dairy drink products.

Atividade de plasmina e plasminogênio no leite longa vida com alta e baixa contagem de células somáticas durante o armazenamento / Activity of plasmin and plasminogen in ultra high temperature milk with high and low somatic cell counts during storage

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da contagem de células somáticas (CCS) do leite na atividade de plasmina e plasminogênio durante o período de armazenamento do leite longa vida integral. Os leites crus foram categorizados em grupos de CCS de baixa (342.000-487.000 células mL-1) e alta contagem (603.000-808.000 células mL-1). Dois lotes de leite longa vida em cada categoria de CCS foram analisados para determinação de plasmina e plasminogênio após 10, 30, 60, 90 e 120 dias de armazenamento em temperatura ambiente. Para a fabricação do leite longa vida, o leite cru foi submetido à pasteurização rápida seguida da esterilização industrial do leite por injeção de vapor pelo método direto e embalagem asséptica do produto. A CCS não apresentou efeitos sobre as características físico-químicas do leite cru, e nem sobre a atividade de plasmina e plasminogênio nos leites cru e longa vida, armazenados por 120 dias. Entretanto, independentemente da CCS, a atividade de plasmina e plasminogênio aumentou no leite longa vida ao longo do armazenamento, indicando a possibilidade de aumento da proteólise no produto durante sua vida de prateleira.

This study aimed to evaluate the effect of somatic cell counts (SCC) in milk on plasmin and plasminogen activities of ultra high temperature (UHT) milk during storage. Raw milks were categorized in SCC groups of low (342,000-487,000 cells mL-1) and high cells (603,000-808,000 cells mL-1). Two replicates of UHT milks within each SCC category were analyzed for plasmin and plasminogen activities after 10, 30, 60, 90 and 120 days of storage at room temperature. For manufacture of UHT milk, raw milk was pasteurized and sterilized by direct vapor injection process, followed by aseptic packaging. SCC had no effect on physical-chemical characteristics of raw milk, and on plasmin or plasminogen activities in raw and UHT milks during 120 days of storage. However, independently of the SCC in raw milk, the activity of plasmin and plasminogen increased in UHT milk during storage, hence indicating a possible increase in proteolysis in the product during its shelf-life.

Avaliação físico-química e microbiológica do leite UHT comercializado em três países do Mercosul (Brasil, Argentina e Paraguai) / Physico-chemical and microbiological evaluation of UHT milk commercialized in three Mercosul countries (Brazil, Argentina and Paraguay)

Com o objetivo de avaliar a qualidade físico-química e microbiológica do leite UHT comercializado em três países do Mercosul, as amostras de 04 marcas diferentes vendidas nas cidades de Foz do Iguaçu (Brasil), de Puerto Iguazú (Argentina) e de Ciudad del Este (Paraguai) foram submetidas a determinação de matéria gorda, acidez, estabilidade ao etanol 68%, 72%, 76% e 80%, extrato seco total e extrato seco desengordurado, pH, densidade e crioscopia, além da contagem de microrganismos mesófilos e psicrotróficos. Na avaliação físico-química do leite UHT conclui-se que um número significativo de amostras apresentou-se fora dos padrões de qualidade para gordura, extrato seco desengordurado, densidade e crioscopia; os leites analisados exibiram resistência (estabilidade) ao etanol a 68%, salvo uma das marcas do Brasil; médias de valores de pH estavam adequados para as marcas de leite do Brasil, e valores elevados nas marcas de leite do Paraguai. Quanto aos resultados das análises microbiológicas, 37,5% das amostras do Brasil, 62,5 % das amostras da Argentina e 12,5% das amostras do Paraguai apresentaram valores acima dos valores limites para microrganismos mesófilos. Quanto às análises de psicrotróficos, 50% das amostras do Brasil e da Argentina, assim como 100% das amostras do Paraguai apresentaram-se fora dos padrões estabelecidos pela legislação.

With the aim to evaluate the physico-chemical and microbiological quality of UHT milk commercialized in three countries of Mercosul, samples of four different brands were acquired in each city (Foz do Iguaçu - Brazil, Puerto Iguazú - Argentina and Ciudad del Este - Paraguay) and submitted to the following analysis: fat content, titratable acidity, milk ethanol stability (with the following ethanol concentrations: 68, 72, 76 and 80%), total dry extract and no fat dry extract, pH, density and freezing point. Counts of mesophilic and psychrotrophic microorganisms were already done. In the physico-chemical evaluation of UHT milk, a significant number of samples were in disagree with the established patterns for fat content, no fat dry extract, density and freezing point. Except one brand from Brazil, milk samples showed stability to 68% ethanol. pH averages of Brazilian milk were in agree with the patterns and highest values were observed in samples acquired on Paraguay. Observing the microbiological analysis, 37.5%, 62.5% and 12.5% of samples acquired from Brazil, Argentina and Paraguay, respectively, showed counts above the established patterns for mesophilic microorganisms. Counts of psychrotrophic microorganisms were in disagree with the established patterns in 50%, 50% and 100% of samples from Brazil, Argentina and Paraguay, respectively.

Efeito da temperatura sobre a produção de enterotoxina estafilocócica em leite / Effect of temperature on production of staphylococcal enterotoxin in milk

Muitos estudos têm investigado as condições nas quais Staphylococcus aureus está apto para produzir enteroxinas. As necessidades nutricionais (presença ou ausência de aminoácidos e glicose), bem como variações de pH e temperatura, podem resultar na produção de enterotoxinas capazes de causar doenças. Neste estudo foram usadas cepas de S. aureus produtoras de enterotoxinas A e C2 (respectivamente FRI 722 e FRI 361) e um isolado no qual foi detectada a presença concomitante dos genes de enterotoxina A e da Síndrome do Choque Tóxico (TSST-1) em estudo anterior. As cepas foram inoculadas em leite UHT e as amostras submetidas a diferentes situações de estresse térmico (tempo e temperatura). Em nosso trabalho, houve produção das enterotoxinas A e C2 e de TSST-1 quando o leite UHT foi exposto a temperaturas elevadas, na faixa de 37 a 42ºC e/ou quando o leite foi exposto a temperaturas oscilantes. Os resultados obtidos neste estudo parecem alertar para os métodos de conservação do leite, uma vez que o mesmo pode ser responsável por intoxicações alimentares causadas pela presença de S. aureus e suas enterotoxinas se não houver correta manipulação do produto, em todas as fases de produção.

Aplicación de tres métodos analíticos para la detección de suero de quesería en leche UHT comercializada en la ciudad de México / Application of three analytic methods for the detection of cheese serum in UHT milk commercialized in Mexico city / Aplicação de três métodos analíticos para a detecção de soro de queijo oriundo de queijaria em leite UHT comercializado na cidade do México

Se determinó la presencia de suero de quesería en leches ultrapasteurizadas (UHT) comercializadas en la Ciudad de México mediante electroforesis en gel de poliacrilamida-dodecilsulfato de sodio (PAGE-SDS), cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y la cuarta derivada del espectro de absorción (UV-4ªDS). Se analizaron un total de 30 muestras de leche UHT descremada durante los meses de septiembre, octubre y noviembre a razón de 10 muestras por mes, contrastando los valores encontrados por los tres métodos con los de leche cruda auténtica adicionada con suero de quesería en diferentes niveles. El porcentaje de muestras positivas a suero de quesería analizadas por electroforesis, HPLC y UV-4ªDS fue de 70, 50 y 90% respectivamente. Las técnicas utilizadas relacionadas con la detección y estimación del glicomacropéptido (GMP) por electroforesis o por HPLC y los resultados obtenidos indicaron que la cuantificación de la relación proteínas de suero/proteína total (PS/PT) por UV-4ªDS fue un indicador más sensible a adiciones de suero de quesería.

The presence of cheese serum was detected in ultra pasteurized milks (UHT) commercialized in Mexico City. This was achieved through sodium dodecyl sulphate poliacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), by high performance liquid chromatography (HPLC) and by the calculation of the fourth derivative of the absorption spectrum (UV-4thDS). Monthly, ten (10) skimmed UHT milk samples were analyzed during September, October and November, and the values obtained through the three methods were compared against those from authentic raw milk with addition of cheese serum in different amounts. The percentage of positive samples to cheese serum analyzed through electrophoresis, HPLC and UV-4thDS was 70.50 and 90%, respectively. The applied techniques related to the detection and estimation of the glycomacropeptide (GMP) by electrophoresis or by HPLC, and the results obtained indicated that the quantification of the serum protein/total protein (PS/PT) relationship by UV-4thDS was a more sensitive indicator of cheese serum additions.

Determinou-se a presença de soro de queijo proveniente de queijaria em leites ultrapasteurizados (UHT) comercializados na Cidade do México mediante electroforese em gel de poliacrilamida-dodecilsulfato de sódio (PAGE-SDS), cromatografia líquida de alta resolução (HPLC) e a quarta derivada do espectro de absorção (UV-4ªDS). Analizaram-se um total de 30 amostras de leite UHT descremado durante os meses de setembro, outubro e novembro, média de 10 amostras por mês, contrastando os valores encontrados pelos três métodos com os de leite cru auténtico adicionada com soro de queijaria em diferentes níveis. A porcentagem de amostras positivas a soro de queijaria analizadas por electroforese, HPLC e UV-4ªDS foi de 70, 50 e 90% respectivamente. As técnicas utilizadas relacionadas com a detecção e estimação do glicomacropeptídeo (GMP) por electroforese ou por HPLC e os resultados obtidos indicaram que a quantificação da relação proteínas de soro/proteína total (PS/PT) por UV-4ªDS foi um indicador mais sensível a adições de soro de queijaria.

Detección de suero de quesería en leches ultrapasteurizadas mexicanas mediante la cuarta derivada del espectro de absorción / Rennet whey solids detection in Mexican ultrapasteurized milk using fourth derivative absortion spectrum

Presence of rennet whey solids in ultrapasteurized milk (UHT) commercialized in Mexico City was determined using fourth derivative of absorption spectrum method, which allows to know the variation in whey protein/total protein ratio (WP/TP). The quantification of WP/TP ratio was used as an indicator of adulteration with rennet whey solids. The method was standardized to evaluate the accuracy, linearity and repeatability by rennet whey addition in concentrations between 0-15%, in raw milk. Thirty samples of skim ultrapasteurized milk were analyzed during September, October and November; found values were compared to the ones of raw milk added with rennet whey solids (0-15%, in levels of 2.5%). A marginal difference was found in the WP/TP ratio for the 0% concentration between the two types of milk, while the rest of the concentrations showed a high significance (P < 0.01). Values above 13.5% of WP/TP showed rennet whey solids addition; 36.7% of the UHT milk samples were between 5% and 12% positive to rennet whey solids addition. The results indicated that fourth derivative of the absorption spectrum of the WP/TP ratio was a sensitive indicator to rennet whey solids additions.

Se determinó la presencia de suero de quesería en leches ultrapasteurizadas (UHT) comercializadas en la Ciudad de México mediante el método de la cuarta derivada del espectro de absorción, el cual permite conocer la variación de la relación proteínas de suero/proteína total (PS/PT). La cuantificación de la relación PS/PT se utilizó como indicador de la adulteración con suero de quesería. El método fue estandarizado evaluando la exactitud, linealidad y repetibilidad mediante la adición de suero en concentraciones entre 0%-15% a leche cruda. Se analizaron 30 muestras de leche ultrapasteurizada descremada durante septiembre, octubre y noviembre; los valores encontrados se contrastaron con los de leche cruda adicionada con suero de quesería (0%-15%, en niveles de 2.5%. Se encontró una diferencia marginal en la relación PS/PT para la concentración 0% entre los dos tipos de leche, mientras que el resto de las concentraciones mostró una significancia alta (P < 0.01). Valores por encima de 13.5% de PS/PT expresaron adición de suero; 36.7% de las muestras de leche UHT fueron positivas a la adición de suero entre 5% y 12%. Los resultados indicaron que la cuarta derivada del espectro de absorción de la relación PS/PT fue un indicador sensible a adiciones de suero de quesería.