Evaluación de la formación de biopelículas en aislamientos bacterianos y fúngicos por el método semicuantitativo de microtitulación con cristal violeta y el cualitativo de agar con rojo Congo / Assessment of biofilms formation of bacterial and fungal isolates using qualitative Congo red agar and semiquantitative crystal violet microtiter methods

Introducción. El 65 % de las infecciones humanas son producidas por bacterias o levaduras, cuya capacidad de formar biopelículas las hace más resistentes a los antimicrobianos y antifúngicos. Objetivo. Determinar la capacidad de formación de biopelículas en aislamientos bacterianos y fúngicos por medio de los métodos cuantitativo de microtitulación con cristal violeta y cualitativo de cultivo en agar con rojo Congo. Materiales y métodos. Con el método cuantitativo, se utilizaron los medios de cultivo infusión cerebro-corazón, tripticasa de soya y Müeller-Hinton para aislamientos bacterianos; para levaduras, se usaron caldo infusión cerebro-corazón y Sabouraud dextrosa. Para el método cualitativo de cultivo en agar, se utilizaron los mismos medios de cultivo más una solución con 3 % de rojo Congo y 10 % de dextrosa. Cómo método de referencia, se utilizó la propuesta de Stepanovic et al. Resultados. Se evaluaron 103 aislamientos bacterianos y 108 de levaduras. No es recomendable sustituir el caldo infusión cerebro-corazón por los caldos tripticasa de soya y Müeller-Hinton en el método cuantitativo, para evaluar la formación de biopelículas en los aislamientos bacterianos. El medio Sabouraud dextrosa, en caldo y agar, puede sustituir al de infusión de cerebro-corazón para evaluar la formación de biopelículas en levaduras, tanto por el método cuantitativo como por el cualitativo. Conclusión. El estudio de las biopelículas en el laboratorio de microbiología, a partir del método cualitativo de cultivo en agar con rojo Congo, es un procedimiento sencillo, rápido y de bajo costo, que proporciona información útil para el diagnóstico y la terapéutica de infecciones persistentes causadas por bacterias y levaduras.

Introduction. Sixty-five percent of human infections are caused by bacteria or yeasts able to form biofilms. This feature makes them more resistant to antimicrobials and antifungals. Objective. To determine biofilm formation capacity of bacterial and fungal isolates by quantitative crystal violet microtiter and qualitative Congo red agar methods. Materials and methods. Brain-heart infusion, trypticase soy broth and Müeller-Hinton culture media were used in bacterial isolates for the quantitative method; brain-heart infusion broth and Sabouraud dextrose were used for yeasts. The same culture media plus 3% Congo red and 10% dextrose were used to apply the qualitative method in agar. The proposal by Stepanovic, et al. was used as a reference method. Results. We evaluated 103 bacterial isolates and 108 yeasts isolates. We did not recommend substitute brain-heart infusion broth for trypticase soy and Müeller-Hinton broths for biofilm formation assessment in bacterial isolates using the quantitative method. Sabouraud dextrose medium, both broth and agar, can replace brain-heart infusion to assess biofilm formation in yeasts, quantitatively and qualitatively. Conclusion. The study of biofilms in the microbiology laboratory, using Congo red agar qualitative method, is a simple, fast, and inexpensive procedure that provides precise information for the diagnosis and treatment of persistent infections caused by bacteria and yeasts.

Frecuencia de Bacilos Gram Negativos en la cavidad bucal de estudiantes de una Universidad de Asunción

Introducción: La cavidad bucal hospeda una gran cantidad de microorganismos, como los bacilos Gram negativos, y entre ellas, bacterias de gran importancia médica debido a su capacidad de producir enfermedades graves para el ser humano, especialmente en pacientes inmunodeprimidos. El objetivo de este trabajo fue determinar la presencia de Bacilos Gram Negativos y sus patrones de resistencia a antibióticos, en una población estudiantil de la ciudad de Asunción, en los años 2019 y 2020. Materiales y métodos: Se realizó un estudio observacional, descriptivo de corte transversal, donde se realizaron hisopados de la cavidad bucal a 35 alumnos de entre 18 a 24 años, de una universidad privada en la ciudad de Asunción. Se requirió consentimiento informado firmado por los participantes y fueron excluidos quienes tuvieron tratamientos antibióticos. Las muestras fueron obtenidas con un hisopo de algodón, posteriormente se colocaron en un medio de transporte para luego ser cultivadas en Agar MacConkey. El cultivo se realizó por 48 horas a 37° centígrados, luego se procedió a la identificación bacteriana. Por último, se realizó el antibiograma. Resultados: De los 35 alumnos se encontró una frecuencia de 48,57% de bacilos Gram negativos. Cepas de Klebsiella pneumoniae fueron las más frecuentes (35,29%). Se observó que las bacterias eran altamente resistentes a la Amoxicilina/Ácido Clavulánico. Conclusiones: La presencia de estos tipos de microorganismos puede ser peligrosa para la salud general de las personas, específicamente de los pacientes con algún tipo de inmunodepresión, debido a la gran la resistencia a antibióticos presentadas por algunas cepas.

Introduction: The oral cavity hosts a large number of microorganisms, such as Gram negative bacilli, and among them, bacteria of great medical importance due to their capacity to cause serious diseases for humans, especially in immunosuppressed patients. The objective of this work was to determine the presence of Gram Negative Bacilli and their patterns of resistance to antibiotics, in a student population of the city of Asunción, in the years 2019 and 2020. Materials and methods: An observational, descriptive cross-sectional study was carried out, where oral cavity swabs were made from 35 students between 18 and 24 years of age, from a private university in the city of Asunción. Informed consent signed by the participants was required and those who had antibiotic treatments were excluded. The samples were obtained with a cotton swab, later they were placed in a transport medium to later be cultured in MacConkey Agar. The culture was carried out for 48 hours at 37° Celsius, then the bacterial identification was carried out. Finally, the antibiogram was performed. Results: Of the 35 students, a frequency of 48,57% of Gram negative bacilli was found. Klebsiella pneumoniae strains were the most frequent (35.29%). The bacteria were found to be highly resistant to Amoxicillin/Clavulanic Acid. Conclusions: The presence of these types of microorganisms can be dangerous for the general health of people, specifically of patients with some type of immunosuppression, due to the great resistance to antibiotics presented by some strains.

Temporal association between antibiotic use and resistance in Gram-negative bacteria / Associação temporal entre o uso de antibióticos e resistência em bactérias gram-negativas

The β-lactam/lactamase inhibitors (BLBLIs) combination drugs are considered an effective alternative to carbapenems. However, there is a growing concern that the increased use of BLBLIs may lead to increased resistance. This study determined the temporal association between the consumption of BLBLI and the antimicrobial resistance in Gram-negative bacteria. In this retrospective study, electronic data on the Gram-negative bacterial isolates, including A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli, and K. pneumoniae from in-patients and susceptibility testing results were retrieved from the medical records of the clinical laboratory. A linear regression and cross-correlation analysis were performed on the acquired data. Increasing trends (p<0.05) in the consumption of BIBLI and carbapenem with a median use of 27.68 and 34.46 DDD/1000 PD per quarter were observed, respectively. A decreased trend (p=0.023) in the consumption of fluoroquinolones with a median use of 29.13 DDD/1000 PD per quarter was observed. The resistance rate of K. pneumoniae was synchronized with the BIBLI and carbapenem consumptions with a correlation coefficient of 0.893 (p=0.012) and 0.951 (p=0.016), respectively. The cross-correlation analysis against the consumption of BIBLI and meropenem resistant K. pneumoniae was peaked at 0-quarter lag (r=951, p=0.016). There was an increasing trend in the consumption of BLBLI and carbapenems. The increasing trend in the rates of resistance to piperacillin/tazobactam, in line with the increasing consumption of BLBLI, suggests that BLBLI has to be used with caution and cannot be directly considered as a long-term alternative to carbapenems.

Os medicamentos combinados de β-lactâmicos / inibidores da lactamase (BLBLIs) são considerados uma alternativa eficaz aos carbapenêmicos. No entanto, existe uma preocupação crescente de que o aumento do uso de BLBLIs pode levar ao aumento da resistência. Este estudo determinou a associação temporal entre o consumo de BLBLI e a resistência antimicrobiana em bactérias gram-negativas. Neste estudo retrospectivo, os dados eletrônicos sobre as bactérias gram-negativas isoladas, incluindo A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli e K. pneumoniae de pacientes internados e os resultados dos testes de suscetibilidade foram recuperados dos registros médicos do laboratório clínico. Uma regressão linear e análise de correlação cruzada foram realizadas nos dados adquiridos. Foram observadas tendências crescentes (p < 0,05) no consumo de BIBLI e carbapenem com uma mediana de uso de 27,68 e 34,46 DDD/1000 PD por trimestre, respectivamente. Foi observada uma tendência de diminuição (p = 0,023) no consumo de fluoroquinolonas com uma mediana de uso de 29,13 DDD/1000 PD por trimestre. A taxa de resistência de K. pneumoniae foi sincronizada com os consumos de BIBLI e carbapenem com coeficiente de correlação de 0,893 (p = 0,012) e 0,951 (p = 0,016), respectivamente. A análise de correlação cruzada contra o consumo de BIBLI e K. pneumoniae resistente ao meropenem atingiu o pico no intervalo de 0 quarto (r = 951, p = 0,016). Houve uma tendência de aumento no consumo de BLBLI e carbapenêmicos. A tendência crescente nas taxas de resistência a piperacilina/tazobactam, em linha com o consumo crescente de BLBLI, sugere que BLBLI deve ser usado com cautela e não pode ser considerado diretamente como alternativa de longo prazo aos carbapenêmicos.

Temporal association between antibiotic use and resistance in Gram-negative bacteria

Abstract The -lactam/lactamase inhibitors (BLBLIs) combination drugs are considered an effective alternative to carbapenems. However, there is a growing concern that the increased use of BLBLIs may lead to increased resistance. This study determined the temporal association between the consumption of BLBLI and the antimicrobial resistance in Gram-negative bacteria. In this retrospective study, electronic data on the Gram-negative bacterial isolates, including A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli, and K. pneumoniae from in-patients and susceptibility testing results were retrieved from the medical records of the clinical laboratory. A linear regression and cross-correlation analysis were performed on the acquired data. Increasing trends (p 0.05) in the consumption of BIBLI and carbapenem with a median use of 27.68 and 34.46 DDD/1000 PD per quarter were observed, respectively. A decreased trend (p=0.023) in the consumption of fluoroquinolones with a median use of 29.13 DDD/1000 PD per quarter was observed. The resistance rate of K. pneumoniae was synchronized with the BIBLI and carbapenem consumptions with a correlation coefficient of 0.893 (p=0.012) and 0.951 (p=0.016), respectively. The cross-correlation analysis against the consumption of BIBLI and meropenem resistant K. pneumoniae was peaked at 0-quarter lag (r=951, p=0.016). There was an increasing trend in the consumption of BLBLI and carbapenems. The increasing trend in the rates of resistance to piperacillin/tazobactam, in line with the increasing consumption of BLBLI, suggests that BLBLI has to be used with caution and cannot be directly considered as a long-term alternative to carbapenems.

Resumo Os medicamentos combinados de -lactâmicos / inibidores da lactamase (BLBLIs) são considerados uma alternativa eficaz aos carbapenêmicos. No entanto, existe uma preocupação crescente de que o aumento do uso de BLBLIs pode levar ao aumento da resistência. Este estudo determinou a associação temporal entre o consumo de BLBLI e a resistência antimicrobiana em bactérias gram-negativas. Neste estudo retrospectivo, os dados eletrônicos sobre as bactérias gram-negativas isoladas, incluindo A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli e K. pneumoniae de pacientes internados e os resultados dos testes de suscetibilidade foram recuperados dos registros médicos do laboratório clínico. Uma regressão linear e análise de correlação cruzada foram realizadas nos dados adquiridos. Foram observadas tendências crescentes (p 0,05) no consumo de BIBLI e carbapenem com uma mediana de uso de 27,68 e 34,46 DDD/1000 PD por trimestre, respectivamente. Foi observada uma tendência de diminuição (p = 0,023) no consumo de fluoroquinolonas com uma mediana de uso de 29,13 DDD/1000 PD por trimestre. A taxa de resistência de K. pneumoniae foi sincronizada com os consumos de BIBLI e carbapenem com coeficiente de correlação de 0,893 (p = 0,012) e 0,951 (p = 0,016), respectivamente. A análise de correlação cruzada contra o consumo de BIBLI e K. pneumoniae resistente ao meropenem atingiu o pico no intervalo de 0 quarto (r = 951, p = 0,016). Houve uma tendência de aumento no consumo de BLBLI e carbapenêmicos. A tendência crescente nas taxas de resistência a piperacilina/tazobactam, em linha com o consumo crescente de BLBLI, sugere que BLBLI deve ser usado com cautela e não pode ser considerado diretamente como alternativa de longo prazo aos carbapenêmicos.

Temporal association between antibiotic use and resistance in Gram-negative bacteria / Associação temporal entre o uso de antibióticos e resistência em bactérias gram-negativas

Abstract The β-lactam/lactamase inhibitors (BLBLIs) combination drugs are considered an effective alternative to carbapenems. However, there is a growing concern that the increased use of BLBLIs may lead to increased resistance. This study determined the temporal association between the consumption of BLBLI and the antimicrobial resistance in Gram-negative bacteria. In this retrospective study, electronic data on the Gram-negative bacterial isolates, including A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli, and K. pneumoniae from in-patients and susceptibility testing results were retrieved from the medical records of the clinical laboratory. A linear regression and cross-correlation analysis were performed on the acquired data. Increasing trends (p<0.05) in the consumption of BIBLI and carbapenem with a median use of 27.68 and 34.46 DDD/1000 PD per quarter were observed, respectively. A decreased trend (p=0.023) in the consumption of fluoroquinolones with a median use of 29.13 DDD/1000 PD per quarter was observed. The resistance rate of K. pneumoniae was synchronized with the BIBLI and carbapenem consumptions with a correlation coefficient of 0.893 (p=0.012) and 0.951 (p=0.016), respectively. The cross-correlation analysis against the consumption of BIBLI and meropenem resistant K. pneumoniae was peaked at 0-quarter lag (r=951, p=0.016). There was an increasing trend in the consumption of BLBLI and carbapenems. The increasing trend in the rates of resistance to piperacillin/tazobactam, in line with the increasing consumption of BLBLI, suggests that BLBLI has to be used with caution and cannot be directly considered as a long-term alternative to carbapenems.

Resumo Os medicamentos combinados de β-lactâmicos / inibidores da lactamase (BLBLIs) são considerados uma alternativa eficaz aos carbapenêmicos. No entanto, existe uma preocupação crescente de que o aumento do uso de BLBLIs pode levar ao aumento da resistência. Este estudo determinou a associação temporal entre o consumo de BLBLI e a resistência antimicrobiana em bactérias gram-negativas. Neste estudo retrospectivo, os dados eletrônicos sobre as bactérias gram-negativas isoladas, incluindo A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli e K. pneumoniae de pacientes internados e os resultados dos testes de suscetibilidade foram recuperados dos registros médicos do laboratório clínico. Uma regressão linear e análise de correlação cruzada foram realizadas nos dados adquiridos. Foram observadas tendências crescentes (p < 0,05) no consumo de BIBLI e carbapenem com uma mediana de uso de 27,68 e 34,46 DDD/1000 PD por trimestre, respectivamente. Foi observada uma tendência de diminuição (p = 0,023) no consumo de fluoroquinolonas com uma mediana de uso de 29,13 DDD/1000 PD por trimestre. A taxa de resistência de K. pneumoniae foi sincronizada com os consumos de BIBLI e carbapenem com coeficiente de correlação de 0,893 (p = 0,012) e 0,951 (p = 0,016), respectivamente. A análise de correlação cruzada contra o consumo de BIBLI e K. pneumoniae resistente ao meropenem atingiu o pico no intervalo de 0 quarto (r = 951, p = 0,016). Houve uma tendência de aumento no consumo de BLBLI e carbapenêmicos. A tendência crescente nas taxas de resistência a piperacilina/tazobactam, em linha com o consumo crescente de BLBLI, sugere que BLBLI deve ser usado com cautela e não pode ser considerado diretamente como alternativa de longo prazo aos carbapenêmicos.

Comparação do mecanismo de heterorresistência em Serratia marcescens por time kill curve frente ao meropeném / Comparison of heteroresistance mechanism in Serratia marcescens by time kill curve against meropenem

Serratia marcescens pertence à Família Enterobacteriaceae, é Gram-negativa e anaeróbica facultativa, sendo bem distribuída na natureza; pode ser isolada como saprófita do solo e da água. Possui um significado clínico relevante, pois acarreta infecções nosocomiais e pulmonares em determinados setores da saúde, como unidades neonatais, maternidades e UTIs, além de sepse, meningite, choque endotóxico e infecções do trato urinário. O intuito desse estudo foi analisar o mecanismo de heterorresistência em linhagens sensíveis de Serratia marcescens diante das concentrações testadas de meropeném. As linhagens SR1 e SR2 apresentaram perfil heterorresistente, ao passo que a SR6 demonstrou ser não heterorresistente, com CIM elevado (32µg/mL). Os isolados de Serratia marcescens são suscetíveis ao meropenem, por testes de sensibilidade padrão, mas contêm subpopulações resistentes ao mesmo.

Serratia marcescens belongs to the Enterobacteriaceae family, it is optional anaerobic gram-negative, being well distributed in nature and it might be isolated as saprophytic from soil and water. It has a meaningful clinical significance, because it causes nosocomial and lung infections in certain healthcare sectors, such as neonatal units, maternity units and UTIs; septicemia, meningitis, endotoxin shock and urinary tract infections. The aim of this study was to analyze the mechanism of heteroresistance in susceptible strains of Serratia marcescens in the presence of the tested concentration of meropenem. The lineages SR1 and SR2 presented heteroresistant profile, while the SR6 showed to be nonheterorresistente, with CIM (32 µg/mL). The Isolates of Serratia marcescens are susceptible to meropenem, by standard sensitivity testing, but there are subpopulations resistant to it.

Tolerancia al triclosán en cepas de Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli de origen clínico / Triclosan tolerance in Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli strains of clinical origin / Tolerância a Triclosan em cepas de Klebsiella pneumoniae e Escherichia coli de origem clínica

Introducción: Los biocidas son compuestos químicos que se emplean comúnmente para inhibir o eliminar el crecimiento microbiano. El triclosán es un agente biocida que afecta la estructura y función microbiana. Es am-pliamente utilizando como desinfectante y antiséptico en suturas quirúrgicas, exfoliantes, implantes y dispositivos médicos, pero se ha observado el desarrollo de múltiples mecanismos de tolerancia bacteriana a este agente. Objetivo: Determinar la tolerancia al triclosán en cepas de Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae. Materiales y métodos: Se llevó a cabo un estudio descriptivo de corte transversal, de tipo observacional, a partir de cepas de origen clínico que presentaran algunos genotipos de resistencia a los antibióticos como blaTEM, blaCTXM1 y blaSHV. Se determinó la concentración mínima inhibitoria (C1, C2, C3, C4 y C5) al triclosán. Resultados: De los 32 aislamientos recuperados, 17 fueron de E. coli y 15 de K. pneumoniae. Se evidenció que el 25 % de los aislamientos evaluados presentó tolerancia a concentraciones más bajas C1 (0,00025 %) de triclosán y que el 12 % fue tolerante a la concentración más alta C1 (1 %). Adicionalmente, un mayor número de cepas de E. coli presentó mayor tolerancia al triclosán que las cepas de K. pneumoniae. Así mismo, se evidenció que la mayoría de las cepas fueron tolerantes a las concentraciones evaluadas más bajas. Conclusiones: El 37 % de los aislados presentaron tolerancia al triclosán, con predominio de la E. coli. Palabras clave: triclosán; tolerancia; bacterias; gramnegativas

Introduction: Biocides are chemical compounds that are commonly used to inhibit or eliminate mi-crobial growth. Triclosan is a biocidal agent that affects microbial structure and function. It is widely used as a disinfectant and antiseptic in surgical sutures, exfoliants, implants and medical devices. The development of multiple mechanisms of bacterial tolerance to this agent has been observed. Target. To determine the tolerance to triclosan in strains of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae. Materials and methods: A descriptive, cross-sectional, observational study was carried out using strains of clinical origin, which presented some genotypes of resistance to antibiotics such as blaTEM, blaCTXM1, and blaSHV. The Minimum Inhibitory Concentration (C1, C2, C3, C4, and C5) to triclosan was determined. Results: Of the 32 isolates recovered, 17 were E. coli and 15 were K. pneumoniae. It was evidenced that 25% of the evaluated isolates presented tolerance to lower concentrations C1 (0.00025%) of triclosan and 12% were tolerant to the highest concentration C1 (1%). Additionally, a greater number of E. coli strains presented greater tolerance to triclosan than the K. pneumoniae strains, likewise, it was evidenced that most of the strains were tolerant to the lowest concentrations evaluated.

Introdução: Os biocidas são compostos químicos comumente usados para inibir ou eliminar o cres-cimento microbiano. O Triclosan é um agente biocida que afeta a estrutura e função microbiana. É amplamente utilizado como desinfetante e anti-séptico em suturas cirúrgicas, esfoliantes, implantes e dispositivos médicos, mas foram observados múltiplos mecanismos de tolerância bacteriana a este agente. Objetivo: Determinar a tolerância ao Triclosan nas cepas Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae. Materiais e métodos: Foi realizado um estudo descritivo, transversal, observacional, em cepas de origem clínica com alguns genótipos de resistência a antibióticos como blaTEM, blaCTXM1 e blaSHV. A concentração inibitória mínima (C1, C2, C3, C4 e C5) de Triclosan foi determinada. Resultado: Dos 32 isolados recuperados, 17 eram E. coli e 15 eram K. pneumoniae. Verificou-se que 25% dos isolados testados eram tolerantes a menores concentrações de C1 (0,00025%) de Triclosan e 12% eram tolerantes à maior concentração C1 (1%). Além disso, um maior número de cepas de E. coli foram tolerantes a Triclosan, do que às cepas de K. pneumoniae. Foi também evidente que a maioria das cepas foi tolerante às menores concentrações testadas

Prevalência de bastonetes Gram-negativos não fermentadores isolados em amostras de hemoculturas / Prevalence of non-fermenter Gram-negative bacilli isolated in blood culture samples

Objetivos: Avaliar a prevalência de bactérias não fermentadoras em amostras de hemoculturas provenientes das Unidades de Terapia Intensiva (UTI's) adulto e neonatal e da Unidade Coronariana (UC); definir o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos das cepas bacterianas prevalentes. Métodos: Foram coletados dados de todas as hemoculturas positivas das UTIs Adulto, Neonatal e UC de um hospital privado, em Juiz de Fora, Minas Gerais, Brasil, de janeiro de 2017 a janeiro de 2019. Resultados: Foram analisados 3.535 resultados de amostras de hemoculturas onde 2.464 (69,7%) foram negativas e 1.071 (30,3%) positivas para algum microrganismo. Dentre as amostras positivas foram encontrados 77 bastonetes Gram-negativos não fermentadores (6,9%), com a prevalência de Acinetobacter baumannii (51,9%) seguido de Pseudomonas aeruginosa (32,5%). As cepas de A. baumannii foram resistentes aos carbapenêmicos e às quinolonas. Quanto às cepas de P. aeruginosa, as drogas testadas que apresentaram maior resistência foram a ampicilina, ampicilina com tazobactam, as cefalosporinas de segunda e terceira geração, exceto ceftazidima; e a tigeciclina. As drogas que apresentaram boa atividade na inibição do crescimento das cepas analisadas foram tigeciclina para A. baumannii e colistina para ambas as cepas. Conclusão: o presente estudo alerta para a resistência a múltiplas classes de antimicrobianos das cepas advindas das UTIs e UC, demonstrando um cenário preocupante e a necessidade de desenvolvimento de novas drogas e novas medidas de controle.

Objectives: To evaluate the prevalence of non-fermenting bacteria in blood culture samples from the adult and neonatal intensive care units (ICUs) and the Coronary Care Unit (UC); define the antimicrobial susceptibility profile of prevalent bacterial strains. Methods: Data were collected on all positive blood cultures from the Adult, Neonatal and UC ICUs of a private hospital in Juiz de Fora, Minas Gerais, Brazil, from January 2017 to January 2019. Results: 3535 results of blood culture samples were analyzed, where 2464 (69.7%) were negative and 1071 (30.3%) positive for some microorganism. Among the positive samples, 77 non-fermenting Gram negative rods (6.9%) were found, with the prevalence of Acinetobacter baumannii (51.9%) followed by Pseudomonas aeruginosa (32.5%). A. baumannii strains were resistant to carbapenems and quinolones. As for strains of P. aeruginosa, the drugs tested that showed greater resistance were ampicillin, ampicillin with tazobactam, second and third generation of cephalosporins, except ceftazidime; and tigecycline. The drugs that showed good activity in inhibiting the growth of the strains analyzed were tigecycline for A. baumannii and colistin for both strains. Conclusion: the present study warns of resistance to multiple classes of antimicrobial strains from the ICUs and UC, demonstrating a worrying scenario and the need to develop new drugs and new control measures.

Factores pronósticos de mortalidad por agente infeccioso en un hospital de alta complejidad de Cartagena-Colombia / Prognostic factors for mortality caused by an infectious agent in a high complexity hospital in Cartagena-Colombia

Introducción: La identificación de los principales factores clínico-epidemiológicos que determinan causas de mortalidad en pacientes hospitalizados es una necesidad apremiante, principalmente cuando los esfuerzos realizados en la actualidad no permiten asumir acciones fundamentadas en la identificación de las causas de dicho evento. Objetivo: Establecer cuáles son los factores pronósticos de mortalidad por agente infeccioso en un hospital de alta complejidad de la ciudad de Cartagena- Colombia. Material y Métodos: Se realizó un estudio de casos y controles retrospectivo, con muestra proyectada de 86 casos y 258 controles, en una relación 1:3, que cumplieron con los criterios de elegibilidad respectivos y en los que realizaron análisis bivariados y posteriormente un análisis multivariado que incluyó métodos de regresión logística binaria. Resultados: El riesgo de mortalidad en el análisis multivariado está determinado por variables como sexo masculino (ORa 1,695 IC 95 por ciento: 1,005-2,856); Cáncer (ORa 2,389 IC 95 por ciento 1,230-4,642); inmunosupresión (ORa 3,211 IC 95 por ciento 1,004-10,26); Ventilación mecánica (ORa 2,541 IC 95 por ciento 1,128-5,722); Estancia en la UCI (ORa 2,331 IC 95 por ciento1,227-4,425) e Infección por bacterias productoras de carbapenemasas (ORa 4,778 IC95 por ciento 1,313-17,38). Conclusiones: En pacientes masculinos con cáncer o cualquier otra forma de inmunosupresión, en los que se requiera el uso del ventilador mecánico o estancia en la unidad de cuidado intensivo y que además desarrollen infecciones por bacterias productoras de carbapenemasas existe mayor riesgo de muerte por agente infeccioso(AU)

Introduction: The identification of the main epidemiological clinical factors that determine the causes of mortality in hospitalized patients is a pressing need, mainly when the efforts made at present do not allow us to take actions based on the identification of the causes of the aforementioned event. Objective: To identify the prognostic factors for mortality caused by infectious agents in a high complexity hospital in the city of Cartagena, Colombia. Material and Methods: A retrospective case-control study was conducted in 86 cases and 258 control samples that met the eligibility criteria, at the 1: 3 ratio. Bivariate analyses and a subsequent multivariate analysis that included binary logistic regression methods were also performed. Results: In the multivariate analysis, the risk of mortality is determined by variables such as male sex (ORa 1,695 95 percent CI: 1.005-2.856); cancer (ORa 2,389 95 percent CI 1,230-4,642); immunosuppression (ORa 3.211 95 percent CI 1.004-10.26); mechanical ventilation (ORa 2.541 95 percent CI 1.128-5.722); stay in the ICU (ORa 2,331 95 percent CI 1,227-4,425) and infection caused by carbapenemase-producing bacteria (ORa 4,778 95 percent CI 1,313-17.38). Conclusions: Male patients with cancer or any other form of immunosuppression who require the use of a mechanical ventilator or admission to the intensive care unit who also develop infections caused by carbapenemase-producing bacteria, are at greater risk of death from an infectious agent(AU)

Tratamiento exitoso de la ventriculitis por Acinetobacter baumanii multidrogo resistente con colistina intravenosa e intraventricular / Successful treatment of ventriculitis due to multidrug resistant Acinetobacter baumanii with intravenous and intraventricular colistin

RESUMEN Las infecciones del sistema nervioso central asociadas a dispositivos como el drenaje ventricular externo son frecuentes. Sin embargo, la ventriculitis por bacterias Gram negativas y resistentes a antibióticos genera un reto para el tratamiento médico y quirúrgico. Se presenta el caso de un paciente con diagnóstico de malformación arteriovenosa rota con hemorragia intraventricular que requirió la colocación de un dren ventricular externo. En la evolución posterior, desarrolló ventriculitis por Acinetobacter baumanii multidrogo resistente (MDR) confirmada por cultivos de líquido cefalorraquídeo y se procedió a tratamiento antibiótico dirigido por antibiograma, usando colistina endovenosa e intraventricular asociando meropenem, logrando la normalización de los valores de LCR. Además describimos la evolución clínica, tratamiento médico-quirúrgico y complicaciones asociadas durante su estancia en la unidad de cuidados intensivos.

SUMMARY Central nervous system infections associated with devices such as external ventricular drains are frequent. Ventriculitis due to multi drug resistant (MDR) Gram-negative bacteria represent a surgical and medical challenge. We present the case of a patient who presented with intraventricular hemorrhage due to a rupture of an arteriovenous malformation that needed the insertion of an external ventricular drainage. The patient subsequently developed ventriculitis due to a MDR Acinetobacter baumanii confirmed by isolation from the cerebral spinal fluid (CSF) hat was treated based on the drug susceptibility test with intravenous and intraventricular colistin plus meropenem achieving normalization of the CSF parameters. We report the clinical evolution, complications and medical-surgical treatment in the intensive care unit.

Desenvolvimento e validação de um aplicativo móvel para identificação de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas / Development and validation of a mobile application to identify Gram-positive and Gram-negative bacteria

Objetivo: A internet e os smartphones estão fortemente presentes no cotidiano mundial. Além de proporcionarem comunicação e lazer, os smartphones, por meio de aplicativos, são portas de entrada para as tecnologias da informação e comunicação, recursos utilizados por docentes e discentes como metodologia científica de ensino-aprendizado. Além disso, atuam como ferramenta de apoio para profissionais. As evoluções científicas também abrangem a microbiologia clínica, onde é possível observar a inclusão de recursos tecnológicos com o objetivo de minimizar o tempo de análise e assegurar a qualidade dos resultados; entretanto, a automatização ainda é uma realidade distante em muitos laboratórios do Brasil, portanto, o objetivo desta pesquisa foi desenvolver e validar a funcionalidade de um aplicativo como ferramenta de apoio para discentes e profissionais de microbiologia clínica. Métodos: Pesquisa metodológica, aplicada e de produção tecnológica, realizada de abril a outubro de 2019. Foi escolhida a metodologia de Galvis-Panqueva, que compõe as etapas de construção e validação. Ao final das etapas que compõem a validação, 16 discentes da Ulbra Canoas e oito profissionais de microbiologia clínica avaliaram o aplicativo quanto às percepções como usuários. Após esta avaliação, obteve-se o Índice de Validade de Conteúdo. Resultados: O Índice de Validade de Conteúdo entre os profissionais foi de 0,97 e entre os discentes foi de 0,94, valores aceitáveis para validação. Conclusão: Os resultados atingiram o objetivo proposto e corrobora com demais pesquisas da mesma linha metodológica. O aplicativo atendeu aos critérios de desenvolvimento e validação e mostrou-se uma boa ferramenta de apoio para discentes e profissionais de microbiologia clínica.

Objective: The internet and smartphones are strongly present in the daily world. In addition to providing communication and leisure, smartphones, through applications, are the gateway to Information and Communication Technologies, a resource used by teachers and students as a scientific teaching-learning methodology. In addition, they act as a support tool for professionals. Scientific developments also include clinical microbiology, where it is possible to observe the inclusion of technological resources in order to minimize the analysis time and ensure the quality of the results. However, automation is still a distant reality in many laboratories in Brazil, therefore, the objective of this research was to develop and validate the functionality of an application as a support tool for students and professionals in clinical microbiology. Methods: Methodological, applied and technological production research, carried out from April to October 2019. The GalvisPanqueva methodology was chosen, which comprises the stages of construction and validation. At the end of the steps that make up the validation, 16 students from the Ulbra Canoas and eight professionals of clinical microbiology evaluated the application regarding their perceptions as users. Afterwards, the Content Validity Index was obtained. Results: The Content Validity Index among professiona was 0,97 and among students it was 0,94, acceptable values for validation. Conclusion: The results achieved the proposed objective and corroborates with other researches of the same methodological line. The application met the development and validation criteria and proved to be a good support tool for students and professionals in clinical microbiology.

Colistina en el tratamiento de infecciones por pseudomonas aeruginosa y acinetobacter baumannii extensivamente resistentes (XDR) en un hospital de tercer nivel / Colistin-based treatment for extensively drug resistant (XDR) Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii infection at a third level hospital

Resumen Objetivo: Describir la respuesta clínica y mortalidad general de Colistina en infecciones por Pseudomonas XDR y Acinetobacter XDR en el Hospital Nacional Arzobispo Loayza in Lima, Peru. Métodos: Estudio observacional, descriptivo y retrospectivo. Se incluyeron los registros de pacientes > 18 años, desde junio del 2014 a junio del 2016, que tuvieron infección por Pseudomonas XDR o Acinetobacter XDR confirmada por cultivo, y que recibieron colistina. Se realizó análisis univariado de las características generales de los pacientes; un análisis bivariado con test de Chi2 , t-student o ANOVA según corresponda, y además se describió los factores asociados a mortalidad. Resultados. Se incluyeron 56 registros de pacientes, la mediana de la edad fue 46,5 [31,5 a 63,5]. El 48,2% tuvo un cultivo positivo para Pseudomonas XDR y el 51,8% para Acinetobacter XDR. La respuesta clínica favorable fue 85,7% a los 15 días y de 78,6% a los 30 días. La mortalidad intrahospitalaria a los 30 días fue 21,4%, la mortalidad en UCI fue de 30,8% y la nefrotoxicidad fue de 5,4%. Conclusiones. Colistina combinada con otro antimicrobiano tuvo una respuesta clínica favorable en infección por Pseudomonas XDR o Acinetobacter XDR.

Abstract Objective: To describe the clinical response and overall mortality of Colistin in infections by Pseudomonas XDR and Acinetobacter XDR at the Hospital Nacional Arzobispo Loayza in Lima, Peru. Methods: Observational, descriptive, retrospective study. Records of all patients > 18 years old, from June 2014 to June 2016, who had infection by Pseudomonas XDR or Acinetobacter XDR confirmed by culture, and who received colistin, were included. A univariate analysis of the general characteristics of the patients was performed; a bivariate analysis with a Chi2, t-student or ANOVA test as appropriate, and the factors associated with mortality were also determined. Results: 56 patient records were included; the median age was 46,5 [31,5 to 63,5]. The Culture was positive for Pseudomonas XDR in 48,2% and for Acinetobacter XDR in 51,8%. The favorable clinical response was 85,7% at 15 days and 78,6% at 30 days. In-hospital mortality at 30 days was 21,4%, ICU mortality was 30,8% and nephrotoxicity was 5,4%. Conclusions: Colistin combined with another antimicrobial had a favorable clinical response in infection with Pseudomonas XDR and Acinetobacter XDR.

Infecciones por bacilos Gram-negativos multirresistentes en neonatología / Multidrug resistant Gram-negative infections in neonatology

Introducción. Las infecciones por bacilos Gram-negativos multirresistentes (BGN-MR) constituyen un problema creciente en las unidades de cuidado intensivo neonatal. El objetivo del estudio fue conocer las características epidemiológicas, clínicas, microbiológicas, evolutivas y los factores de riesgo de infección por BGN-MR resistentes a carbapenemes en el Servicio de Neonatología de un hospital de alta complejidad. Población y método. Se realizó un estudio de cohorte retrospectivo en dicho Servicio, donde se incluyeron los pacientes con infección documentada por BGN-MR del 24/4/2013 al 29/4/2015. Resultados. Se incluyeron 21 pacientes. La mediana de edad gestacional y peso de nacimiento fue 35 semanas y 2070 gramos, respectivamente. Dieciocho pacientes (86 %) tuvieron hemocultivos positivos y el aislamiento microbiológico más frecuente fue Acinetobacter baumannii (17 pacientes, 81 %), seguido por Klebsiella pneumoniae productora de carbapenemasa (3 pacientes, 14 %) y Enterobacter cloacae (1 paciente, 5 %). La mediana de edad al momento del diagnóstico fue de 28 días y todos tenían factores de riesgo para la infección, como cirugía, asistencia respiratoria mecánica, nutrición parenteral, catéter central y antibióticos. El tratamiento antibiótico definitivo fue colistina en todos los casos, combinado en el 84 %. Cinco pacientes (24 %) fallecieron por la infección. La prematurez y el peso < 2000 g fueron factores de riesgo estadísticamente significativos asociados a la mortalidad (p = 0,03 y 0,01, respectivamente). Conclusión. Las infecciones por BGN-MR se presentaron en pacientes con factores predisponentes. Acinetobacter baumannii fue el primer agente etiológico. La mortalidad fue elevada y relacionada con prematurez y bajo peso al nacer.

Introduction. Multidrug resistant Gramnegative (MDRGN) infections are an increasing problem in neonatal intensive care units. The objective of this study was to establish the epidemiological, clinical, microbiological, and evolutionary characteristics of carbapenem-resistant MDRGN infections and the risk factors for them at the Division of Neonatology of a tertiary care hospital. Population and method. A retrospective cohort study was done in this Division in patients with a documented MDRGN infection between 4/24/2013 and 4/29/2015. Results. Twenty-one patients were included. Their median gestational age and birth weight were 35 weeks and 2070 g, respectively. Eighteen patients (86 %) had a positive blood culture; the most commonly isolated microorganism was Acinetobacter baumannii (17 patients, 81 %), followed by carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae (3 patients, 14 %) and Enterobacter cloacae (1 patient, 5 %). The median age at diagnosis was 28 days and all patients had risk factors for infection, including surgery, assisted mechanical ventilation, parenteral nutrition, central venous line, and antibiotics. The definite antibiotic therapy included colistin in all cases; in combination, in 84 %. Five patients (24 %) died due to the infection. Prematurity and a birth weight < 2000 g were statistically significant risk factors associated with mortality (p = 0.03 and 0.01, respectively). Conclusion. MDRGN infections were observed in patients with predisposing factors. Acinetobacter baumannii was the main etiologic agent. Mortality was high and related to prematurity and a low birth weight.

Economic burden of inpatients infected with Klebsiella pneumoniae carbapenemase / Impacto econômico do tratamento de pacientes infectados com Klebsiella pneumoniae carbapenemase

ABSTRACT Objective: To estimate the direct medical costs of drug therapy of Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) infection patients in hospital-based context. Methods: A cost-of-illness study conducted with a prospective cohort design with hospitalized adults infected by KPC. Data collection was performed using an instrument composed of sociodemographic data, clinical and prescription medication. Estimates of the direct costs associated to each treatment were derived from the payer's perspective, in the case of federal public hospitals from Brazil, and included only drug costs. These costs were based on the average price available at the Brazilian Price Database Health. No discount rate was used for the cost of drugs. The costs are calculate in American Dollar (US$). Results: A total of 120 inpatients participated of this study. The total drug cost of these inpatients was US$ 367,680.85. The systemic antimicrobial group was responsible for 59.5% of total costs. The direct drug cost per patients infected by KPC was conservatively estimated at nearly US$ 4,100.00, and about of 60% of costs occurred during the period of infection. Conclusion: The findings of our study indicate a thoughtful economic hazard posed by KPC that all healthcare sectors have to face. The increasing worldwide incidence of these bacteria represents a growing burden that most health systems are unable to deal with. There is an imperative need to develop protocols and new antimicrobials to treatment of KPC, aiming to rearrange resources to increase the effectiveness of healthcare services.

RESUMO Objetivo: Estimar os custos médicos diretos da terapia medicamentosa de pacientes com infecção por carbapenemase por Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) em contexto hospitalar. Métodos: Estudo de custo de doença realizado com desenho de coorte prospectiva, com adultos hospitalizados infectados por KPC. A coleta de dados foi realizada usando instrumento composto por dados sociodemográficos, medicamentos clínicos e prescritos. As estimativas dos custos diretos associados a cada tratamento foram derivadas da perspectiva dos pagadores, no caso dos hospitais públicos federais do Brasil, e incluíram apenas custos de medicamentos, os quais basearam-se no preço médio disponível na Price Database Health do Brasil. Nenhuma taxa de desconto foi utilizada para o custo dos medicamentos. Os custos foram calculados em dólares norte-americanos (US$). Resultados: Um total de 120 pacientes hospitalizados participou do estudo. O custo total da droga desses pacientes internados foi de US$ 367,680.85. O grupo antimicrobianos de uso sistêmico foi responsável por 59,5% dos custos totais. O custo direto estimado de forma conservadora, por paciente, foi de aproximadamente US$ 4,100.00, e cerca de 60% destes se deram durante o período de infecção. Conclusão: Os achados deste estudo apontam um risco econômico importante relacionado a KPC, o qual todos os setores de saúde terão que enfrentar. A incidência mundial em elevação destas bactérias representa carga crescente, e a maioria dos sistemas de saúde é incapaz de resolvê-la. Há necessidade imperativa de se desenvolverem protocolos e novos antimicrobianos para o tratamento de KPC, com o objetivo de reorganizar os recursos para aumentar a efetividade dos serviços de saúde.

Perfil e prevalência de resistência aos antimicrobianos de bactérias Gram-negativas isoladas de pacientes de uma unidade de terapia intensiva / Profile and prevalence of antimicrobial resistance of negative-Gram bacteria isolated from intensive care patients

Objetivo: Verificar a prevalência de infecção bacteriana e analisar o perfil de resistência aos antimicrobianos dos principais BGN isolados em pacientes internados na UTI. Métodos: Foi realizado um estudo descritivo e retrospectivo de 222 prontuários de pacientes internados na Unidade de Terapia Intensiva do Hospital Santa Casa de Misericórdia de Goiânia, obtendo-se dados de 245 amostras biológicas, no período de janeiro a dezembro de 2016. Resultados: A maioria dos pacientes era do sexo feminino, e foram isolados microrganismos principalmente de urocultura (48,6%). Das 13 espécies de BGN isoladas, Klebsiella pneumoniae foi o microrganismo mais prevalente (35,5%), seguido de Escherichia coli (24,1%), Acinetobacter baumannii (14,3%) e Pseudomonas aeruginosa (11,0%). Em relação às classes de antimicrobianos, houve resistência significativa para quinolonas (88,0%). Considerando o perfil de resistência dos principais BGN isolados, K. pneumoniae apresentou maior resistência para ampicilina e cefalosporinas; em E. coli, a resistência foi maior para ampicilina e ciprofloxacino; já para A. baumannii, cefalosporinas, quinolonas e carbapenêmicos obtiveram os maiores índices de resistência; em P. aeruginosa, a maior resistência foi observada para cefalosporinas e carbapenêmicos. Além disso, foram encontrados três BGN pan-resistentes, sendo eles K. pneumoniae, E. coli e A. baumannii. Conclusão: Observou-se maior prevalência de K. pneumoniae, a resistência foi mais elevada para as quinolonas e a maioria dos BGN apresentou uma importante e elevada multirresistência aos antimicrobianos.

Carbapenem Resistance in Gram-negative Bacteria in South-western Nigeria: The Role of Extended-spectrum lactamase CTX-M-15 / Resistencia al carbapenem en las bacterias gramnegativas en Nigeria Suroccidental: papel de la betalactamasa de espectro extendido tipo CTX-M-15

ABSTRACT Objective: To determine the role of extended-spectrum β-lactamases in carbapenem-resistant Gram-negative bacteria from south-western Nigeria. Methods: Twenty-seven carbapenem-resistant isolates that were found to be non-carbapenemase producers (15 Escherichia coli, 9 Klebsiella pneumoniae and 3 Pseudomonas aeruginosa) were further studied. These isolates were subjected to analysis including phenotypic and genotypic detection of various β-lactamases, efflux activity, outer membrane protein, plasmids replicon typing, detection of transferable genes and resistances and typing using random amplified polymorphic DNA tests. Results: No isolates demonstrated de-repression of efflux, but all showed either complete loss or reduced production of outer membrane proteins. Transconjugants from these strains contained various genes including plasmid-mediated quinolone resistance and extended-spectrum beta-lactamases. All the transconjugants carried the blaCTX-M-15 gene. The transconjugants had varying minimum inhibitory concentrations of carbapenems ranging from 0.03 μg/ml to 8 μg/ml. Varying resistances to other antimicrobial agents were also transferred with the plasmids. The donor isolates were not clonally related by molecular typing. Conclusion: Resistance to carbapenem antibiotics in this sample was not mediated only by carbapenemases but also by production of extended-spectrum β-lactamases (largely CTX-M-15), accompanied by protein loss. This was an important mechanism underpinning carbapenem resistance in these clinical isolates of various species.

RESUMEN Objetivo: Determinar el papel de las betalactamasas de espectro extendido en la resistencia al carbapenem en las bacterias gramnegativas en Nigeria. Métodos: Veintisiete aislados resistentes al carbapenem que fueron hallados productores de no carbapenemasas (15 Escherichia coli, 9 Klebsiella pneumoniae, y 3 Pseudomonas aeruginosa) fueron estudiados con mayor profundidad. Estos aislados fueron sometidos a análisis incluyendo la detección fenotípica y genotípica de varias betalactamasas, la actividad de eflujo, las porinas de la membrana externa, la tipificación del replicón plasmídico, la detección de genes transferibles y resistencias y tipificación usando pruebas de ADN polimórficas amplificadas aleatorias. Resultados: Ninguno de los aislamientos mostró desrepresión de eflujo, pero todos demostraron la pérdida completa o la producción reducida de porinas externas de la membrana. Los transconjugantes de estas cepas contenían varios genes incluyendo resistencia a la quinolona mediada por plásmidos y betalactamasas de espectro extendido. Todos los transconjugantes portaban el gen blaCTX-M-15. Los transconjugantes tenían diversas concentraciones inhibitorias mínimas de carbapenemas que oscilaban entre 0.03 μg/ml y 8 μg/ml. Varias resistencias a otros agentes antimicrobianos fueron también transferidas con los plásmidos. Los aislamientos del donante no estuvieron relacionados clonalmente por tipificación molecular. Conclusión: La resistencia al antibiótico carbapenem en esta muestra no fue mediada solamente por las carbapenemasas, sino también por la producción de betalactamasas de espectro extendido (en gran parte CTX-M-15), acompañado por pérdida de porina. Éste era un mecanismo importante que sustentaba la resistencia al carbapenem en estos aislados clínicos de varias especies.

Análise da eficácia da higiene oral de pacientes internados em unidade de terapia intensiva em um hospital de alta complexidade do sul do Brasil / Analysis of the effectiveness of oral hygiene of interned patients in intensive therapy unit in a high-complexity hospital in the south of Brazil

As infecções orais, na Unidade de Terapia Intensiva (UTI), deveriam ser preocupações constantes dos profissionais da área da Saúde ali inseridos, devido às consequências que podem causar na saúde geral dos pacientes debilitados sistemicamente. A criação de um protocolo-padrão de higiene oral é de suma importância para impedir ou tratar tais infecções, o que possibilita ao paciente conforto e qualidade de vida, devendo ser realizada por profissionais qualificados. Métodos: Foi realizado um estudo transversal e descritivo, cuja análise foi descritiva e se desenvolveu na Unidade de Terapia Intensiva de um hospital de alta complexidade no Sul do Brasil, no período de fevereiro de 2016 a fevereiro de 2017. A amostra total foi composta por 35 pacientes, com idade mínima de 18 anos, que estavam internados na UTI do referido hospital, portadores de prontuários e Termo de Consentimento livre e Esclarecido. Resultados: Dentre os microrganismos achados nos exames laboratoriais dos pacientes, apresentaram-se em maior quantidade Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus coagulase negativo e Escherichia coli. Apenas dois pacientes adquiriram o Acinetobacter baumannii. A maioria dos pacientes obtiveram bactérias Gram-negativas presentes em sua microbiota oral. Conclusões: As bactérias patogênicas presentes no meio oral devem ser tratadas e erradicadas. Isso pode ser alcançado por meio de um protocolo-padrão de higiene oral. A participação da Odontologia na equipe multidisciplinar no ambiente hospitalar é de fundamental importância para a indicação da terapêutica adequada.

Oral infections in the Intensive Care Unit (ICU) should be a constant concern of the health professionals inserted there, due to the consequences that can cause in the general health of systemically debilitated patients. The creation of a standard protocol of oral hygiene is of paramount importance to prevent or treat such infections, allowing the patient comfort and quality of life and should be performed by qualified professionals. Methods: A cross-sectional and descriptive study was carried out, which was descriptive and developed in the Intensive Care Unit of a highly complex hospital in the South of Brazil, from February 2016 to February 2017. The total sample was composed by 35 patients with a minimum age of 18 years who were hospitalized in the ICU of the referred hospital, patients with medical records and a Consent Form, free and clear. Results: Among the microorganisms found in the laboratory exams of the patients, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus coagulase negative and Escherichia coli were present. Only two patients acquired Acinetobacter baumannii. Most of the patients obtained Gram-negative bacteria present in their oral microbiota. Conclusions: The pathogenic bacteria that are present in the oral environment must be treated and eradicated. This can be achieved through a standard oral hygiene protocol. The participation of Dentistry in the multidisciplinary team in the hospital environment is of fundamental importance for the indication of the appropriate therapy

Klebsiella variicola and Klebsiella quasipneumoniae with capacity to adapt to clinical and plant settings / Klebsiella variicola y Klebsiella quasipneumoniae con capacidad para adaptarse al ambiente clínico y a las plantas

Abstract: Objective: To compare the genetic determinants involved in plant colonization or virulence in the reported genomes of K. variicola, K. quasipneumoniae and K. pneumoniae. Materials and methods: In silico comparisons and Jaccard analysis of genomic data were used. Fimbrial genes were detected by PCR. Biological assays were performed with plant and clinical isolates. Results: Plant colonization genes such as cellulases, catalases and hemagglutinins were mainly present in K. variicola genomes. Chromosomal β-lactamases were characteristic of this species and had been previously misclassified. K. variicola and K. pneumoniae isolates produced plant hormones. Conclusions: A mosaic distribution of different virulence- and plant-associated genes was found in K. variicola and in K. quasipneumoniae genomes. Some plant colonizing genes were found mainly in K. variicola genomes. The term plantanosis is proposed for plant-borne human infections.

Resumen: Objetivo: Comparar genes de colonización de plantas o de virulencia en los genomas reportados de K. variicola, K. quasipneumoniae y K. pneumoniae. Material y métodos: Se utilizaron análisis in silico y de Jaccard. Por PCR se detectaron genes de fimbrias. Se realizaron ensayos biológicos con aislados de plantas y clínicos. Resultados: Los genes de colonización de plantas como celulasas, catalasas y hemaglutininas se encontraron principalmente en genomas de K. variicola. Las β-lactamasas cromosómicas son características de la especie y en algunos casos estaban mal clasificadas. K. variicola y K. pneumoniae producen hormonas vegetales. Conclusiones: Se encontró una distribución en mosaico de los genes de asociación con plantas y de virulencia en K. variicola y K. quasipneumoniae. Principalmente en K. variicola se encontraron algunos genes involucrados en la colonización de plantas. Se propone el término plantanosis para las infecciones humanas de origen vegetal.

Genome misclassification of Klebsiella variicola and Klebsiella quasipneumoniae isolated from plants, animals and humans / Clasificación errónea de aislados de Klebsiella variicola y Klebsiella quasipneumoniae obtenidos de plantas, animales y humanos

Abstract: Objective: Due to the fact that K. variicola, K. quasipneumoniae and K. pneumoniae are closely related bacterial species, misclassification can occur due to mistakes either in normal biochemical tests or during submission to public databases. The objective of this work was to identify K. variicola and K. quasipneumoniae genomes misclassified in GenBank database. Materials and methods: Both rpoB phylogenies and average nucleotide identity (ANI) were used to identify a significant number of misclassified Klebsiella spp. genomes. Results: Here we report an update of K. variicola and K. Quasipneumoniae genomes correctly classified and a list of isolated genomes obtained from humans, plants, animals and insects, described originally as K. pneumoniae or K. variicola, but known now to be misclassified. Conclusions: This work contributes to recognize the extensive presence of K. variicola and K. quasipneumoniae isolates in diverse sites and samples.

Resumen: Objetivo: Identificar genomas mal clasificados de K. variicola, y K. quasipneumoniae en la base de datos del GenBank. Material y métodos: En el presente estudio se usaron tanto análisis filogenéticos usando rpoB como la identidad media de nucleótidos (ANI, por sus siglas en ingles) para identificar un número significativo de genomas del género Klebsiella. Resultados: Se reportó una actualización de genomas de K. variicola y K. quasipneumoniae correctamente clasificados y una lista de aquellos aislamientos obtenidos de seres humanos, plantas, animales e insectos, descritos originalmente como K. pneumoniae o K. variicola pero ahora se conoce que están mal clasificados. Conclusiones: Este trabajo contribuye a la presencia extensiva de aislamientos de K. variicola y K. quasipneumoniae en diversos sitios y muestras.

Efeito Inibitório De Monoterpenos Frente A Klebsiella Pneumoniae Produtoras de ESBL / The Inhibitory Effect of Monoterpenes against ESBL-Producing Klebsiella pneumoniae

Introdução: Klebsiella pneumoniae é um bacilo Gram negativo membro da família Enterobacteriaceae, em que seus principais sítios de infecção se encontram no trato respiratório e urinário. Devido ao crescimento desenfreado da automedicação, vários microrganismos vem desenvolvendo mecanismos de resistência com maior frequência, desta forma tornando o tratamento cada vez difícil, sendo necessária a pesquisa de novas alternativas terapêuticas mais eficientes. Diversos produtos naturais têm sido estudados, a exemplo dos óleos essências e dos monoterpenos que vem apresentando ação bastante promissora frente aos microrganismos. Objetivo: Nessa perspectiva, este trabalho teve como objetivo avaliar a ação antibacteriana dos fitoconstituintes citral, citronelal e citronelol contra as cepas de K. pneumoniae produtora de betalactamase de amplo espectro (ESBL) e determinar a concentração inibitória mínima (CIM) destes monoterpenos. Materiais e Métodos: Foi realizada a técnica de microdiluição seriada a uma razão de dois, nas concentrações de 2048, 1024, 512, 256, 128, 64 a 32 µg/ mL , utilizando como meio de cultura o caldo Mueller Hinton, reservando a última coluna para o controle do crescimento microbiano, testando também a esterilidade do meio de cultura. Os experimentos foram realizados em triplicata e incubados na estufa a uma temperatura de 37 CÚ ± 2 CÚ, por um período de 24 horas, tendo como avaliação dos ensaios o método visual. Resultados: Através dos experimentos realizados, notouse que os fitoconstituintes citral, citronelal e citronelol não inibiram o crescimento das cepas de K. pneumonia nas condições e concentrações testadas. Conclusão: Os monoterpenos não apresentaram atividade antibacteriana contras cepas testadas. (AU)

Introduction: Klebsiella pneumoniae is a Gram-negative bacillus of the Enterobacteriaceae family which may infect primarily the respiratory and urinary tracts. Due to the uncontrolled growth of self-medication, various microorganisms have been developing resistance mechanisms with a greater frequency, thus making infections increasingly difficult to treat. Further research is then required to develop new, more effective treatment options. Several natural products have been studied, such as essential oils and monoterpenes, which have shown promising activity against selected microorganisms. Objective: This study aimed to evaluate the antibacterial activity of the phytochemicals citral, citronellal and citronellol against K. pneumoniae strains producing extended-spectrum beta-lactamases (ESBL), and to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of these monoterpenes. Material and Methods: A serial microdilution technique was performed to test the samples at concentrations of 2048, 1024, 512, 256, 128, 64 and 32 ìg/ mL. Mueller Hinton broth was employed as the culture medium, and the last column was used for the control of microbial growth and medium sterility. The experiments were carried out in triplicate and incubated at 37 CÚ ± 2 CÚ for 24 hours, followed by visual reading. Results: The phytochemicals citral, citronellal and citronellol did not inhibit the growth of K. pneumonia strains under the conditions and concentrations tested. Conclusion: The monoterpenes presented herein showed no antibacterial activity against the tested strains.(AU)