Occurrence of aflatoxin M1 in bovine milk samples consumed in different regions of Brazil / Ocorrência de aflatoxina M1 em amostras de leite bovino consumido em diferentes regiões do Brasil

Two hundred and fifty-seven samples of milk proceeding from different geographical regions of Brazil were analyzed for determining the presence of aflatoxin M1 (AFM1). The AFM1 extraction was carried out using immunoaffinity column, separated by reversed-phase (C-18) high performance liquid chromatography (HPLC), and quantified by fluorescence detector. The Limits of Quantification (LOQ) were 0.008 µg/kg and 0.080 µg/kg to the fluid and the powder milk, respectively. AFM1 were detected in 209 (81.3 %) samples, being 26 (63.4 %), 105 (84.0 %) and 78 (85.7 %) of pasteurized, UHT (Ultra-high Temperature) and powder milk, respectively. The highest concentration of AFM1 in powder milk was found in one sample from Minas Gerais (1.210 µg/kg). In UHT and pasteurized milk, the highest levels were detected in one sample from Sergipe (0.120 µg/kg) and one sample from Goiás (0.050 µg/kg), respectively. None of the samples analyzed in this study exceeded the Brazilian legal limits for AFM1.

Duzentas e cinquenta e sete amostras de leite provenientes das diferentes regiões geográficas do Brasil foram analisadas para realizar a determinação de aflatoxina M1 (AFM1). As AFM1 foram extraídas por meio de colunas de imunoafinidade, separadas por cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (C-18) e quantificadas por detector de fluorescência (CLAE-FL). Os limites de quantificação (LQ) foram de 0,008 µg/kg e 0,080 µg/kg para o leite fluido e em pó, respectivamente. AFM1 foi detectada em 209 (81,3 %) amostras, sendo 26 (63,4 %), 105 (84,0 %) e 78 (85,7 %) para o leite pasteurizado, UHT (Ultra-high Temperature) e em pó, respectivamente. A maior concentração de AFM1 no leite em pó foi encontrada em uma amostra proveniente de Minas Gerais (1,210 µg/kg). No leite UHT e pasteurizado, os maiores níveis foram encontrados em uma amostra de Sergipe (0,120 µg/kg) e Goiás (0,050 µg/kg), respectivamente. Nenhuma amostra analisada ultrapassou os limites da legislação brasileira em vigor para AFM1.

Aflatoxin M1 in pasteurized, UHT milk and milk powder commercialized in Londrina, Brazil and estimation of exposure / Aflatoxina M1 em leite pasteurizado e UHT e leite em po comercializados em Londrina, Brasil e exposicao estimada.

Aflatoxin M1 (AFM1) is found in milk and other excretion products after aflatoxin B1 intake. AFM1 is carcinogenic to humans, and known levels of dairy product contamination is important to understand the risks to which the population is exposed. The occurrence of AFM1 was evaluated in 42 milk samples commercialized in Londrina, Parana State, Brazil and this rate of occurrence was used to estimate this exposure. AFM1 determina tion was ca rried out by ELISA, and was detected in 100 % samples at levels ranging from 0.01 to 0.81 µ g/kg (mean 0.13 µ g/kg). None of the samples p resente d AFM1 above the maximum permitted level by Brazilian Legislation (0.5 µ g/kg for fluid milk and 5 µ g/kg for milk powder). The estimated daily intake (EDI) of AFM1 was evaluated, and the average intake was 0.468 ng/kg body weight (b.w.) for adolescents, 0.384 ng/kg b.w. for adults and 0.559 ng/kg b.w. for the elderly. Values of EDI of AFM1 found in Londrina pose a toxicological risk to the population investigated. To the best of our knowledge, this is the first report on estimat ed AFM1 dietary exposure from Parana, Brazil.

Aflatoxina M1 (AFM1) e encontrada no leite e em outros produtos de excrecao apos o consumo de aflatoxina B1. AFM1 e carcinogenica para humanos, e avaliar os niveis de contaminacao em produtos lacteos e importante para conhecer os riscos aos quais a populacao esta exposta. A ocorrencia de AFM1 foi avaliada em 42 amostras de leite comercializadas em Londrina, Estado do Parana, Brasil, e sua ocorrencia foi utilizada para estimar sua exposicao. A determinacao de AFM1 foi avaliada por ELISA, e foi detectada em 100% das amostras, em niveis variando de 0,01 a 0,81 µ g/kg (media 0,13 µ g kg). Nenhuma das amostras apresentou niveis de AFM1 acima do maximo permitido pela Legislacao brasileira (0,5 µ g/kg para leite fluido e 5 µ g/kg para leite em po). A ingestao diaria estimada (IDE) de AFM1 foi avaliada, e a ingestao media foi de 0,468 ng/kg de peso corporal (p.c.)/dia para adolescentes, 0,384 ng/kg p.c./dia para adultos e 0,559 ng/kg p.c./dia para idosos. Valores de IDE de AFM1 encontrados em Londrina supoem um risco toxicologico para a populacao investigada. Do melhor do nosso conhecimento, este e o primeiro trabalho sobre a exposicao estimada de AFM1 do Parana, Brasil.

Aflatoxin M1 in the urine of non-carriers and chronic carriers of hepatitis B virus in Maringa, Brazil

Exposure to aflatoxins (AFs) in the diet may favour the development of hepatocellular carcinoma (HCC) and the acute exacerbation of hepatitis in chronic hepatitis B virus (HBV) carriers. Measurement of biomarkers such as aflatoxin M1 (AFM1), a metabolite of aflatoxin B1 (AFB1), in urine allows for the assessment of populations exposed to aflatoxins. The aim of this study was to investigate the occurrence of aflatoxin M1 in the urine of HBV carrier and non-carrier patients. One group included 43 randomly selected HBV carriers treated at two hospitals in the city of Maringa, Brazil, from March to June 2008. Control group consisted of 29 healthy adult volunteers with anti-HBs positive and HBsAg negative test results. Detection of AFM1 was performed by fluorescence using high performance liquid chromatography (HPLC) and post-column derivation with the Kobra Cell®. Of the 72 samples analysed, 05/29 (17.2%) AFM1 positive samples were from HBV non-carriers, and 16/43 (37.2%) of samples were from chronic HBV carriers. This study showed AFM1 in the urine of the two surveyed population. However, there is evidence that the chronic HBV carriers have a higher risk of developing HCC due to additive interaction between AFs and HBV.

A exposição às aflatoxinas (AFs) na dieta é um fator de risco para o desenvolvimento do carcinoma hepatocelular (CHC) e a exacerbação da hepatite aguda em indivíduos portadores do vírus da hepatite B (VHB). O uso de biomarcadores, como a aflatoxina M1 (AFM1) na urina, produto de biotransformação da aflatoxina B1 (AFB1), permite avaliar se a população está exposta às AFs. O objetivo do presente estudo foi investigar ocorrência de AFM1 na urina de portadores e não portadores crônicos do VHB. Foi selecionado um grupo, de forma aleatória, representado por 43 portadores do VHB atendidos em dois hospitais da cidade de Maringá, Brasil, no período de Março a Junho/2008. O grupo controle foi composto por 29 voluntários adultos saudáveis anti-HBs positivo e HBsAg negativo. A determinação de AFM1 foi realizada por meio de detecção por fluorescência em sistema de cromatografia a líquido de alta eficiência com derivação pós-coluna utilizando Kobra Cell®. Das 72 amostras analisadas, 05/29 (17,2%) foram positivas para AFM1 em indivíduos não portadores do VHB, e 16/43 (37,2%) de pacientes portadores do VHB. Este estudo demonstrou a ocorrência de AFM1 na urina dos dois grupos estudados. Entretanto, há evidências de que os portadores do VHB possuam alto risco no desenvolvimento do CHC devido ao efeito aditivo pela interação entre aflatoxinas e VHB.

[Determination of the amount of aflatoxin in milk samples delivered to Sanandaj pasteurized milk corporation]

Aflatoxins are toxic mold metabolites produced by toxigenic strains of Aspergillus species. They have an important role in the occurrence of a number of human diseases such as liver cancer, chronic hepatitis and cirrhosis. The aim of this study was to determine the amount of aflatoxin M1 in raw milk samples which had been collected for Sanandaj pasteurized Milk Corporation. A total of 84 raw milk samples from different places in Sanandaj and Tehran were collected randomly during 2 weeks [in February-2007]. After centrifugation of milk samples, upper creamy layer was completely removed and the lower layer was analyzed by using special ELISA kit made by Tecan S.r I corporation for determination of aflatoxin M1. Data were analyzed by means of ANOVA. Aflatoxin M1 was found in 77 of the milk samples examined. In the remaining samples [7 milk samples] aflatoxin was not found. In 67 milk samples the quantity of aflatoxin was within standard limits and in 17 samples aflatoxin level was higher than the maximum accepted limit [based on European Union standard]. There was a significant difference between the rate of milk contamination in different regions [p<0.001]. Presence of aflatoxin in dairy products is a serious problem for the public health, especially in infants and children who consume these products most frequently. Therefore milk and dairy products have to be inspected routinely for aflatoxin M1 contamination. To achieve a low level of aflatoxin Ml in milk, the milch cows' feeding should be under regular inspection for aflatoxin contamination

Aflatoxina M1 em leite em pó distribuído pelo Programa de Alimentaçäo Escolar no município de Säo Paulo, SP - Brasil: utilizaçäo do ensino por enzimas imuno-adsorvidas (ELISA) / Aflatoxin M1 in milk powder distributed by the school food supply program of Säo Paulo, SP, Brazil: utilization of the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

Aflatoxina M1 (AFM1) foi pesquisada em 300 amostras de leite em pó distribuído pelo Programa de Alimentaçäo Escolar do Município de Säo Paulo, SP-Brasil. As análises foram efetuadas através do ensaio por enzimas imuno-adsorvidas (ELISA), mediante o emprego de conjuntos de reativos produzidos em escala comercial. As amostras foram reconstituídas em água a 1:8 e submetidas diretamente ao ensaio, sem etapas de purificaçäo. Os resultados revelaram 72 amostras (24,0 por cento) positivas para AFM1, em concentraçöes de 0,01 - 1,00 ng/ml, com média de 0,15 ng/ml. Concentraçöes acima de 0,10 ng/ml foram observadas em 33 amostras (11,0 por cento). O método de ELISA foi avaliado no laboratório, através da execuçäo de análises repetidas em amostras de leite experimentalmente contaminado com a toxina. Utilizando os dados de consumo de leite, adotados pelo Programa, para crianças de 4 meses de idade (máxima ingestäo), estima-se a ingest ao diária média de 3,7 ng de AFM1/Kg de peso corpóreo/dia. Discute a importância destes dados para a saúde humana, bem como os princípais aspectos relativos ao estabelecimento de limites de tolerância para a AFM1 em leite e derivados