Purification and characterization of cold-adapted beta-agarase from an Antarctic psychrophilic strain

An extracellular β-agarase was purified from Pseudoalteromonas sp. NJ21, a Psychrophilic agar-degrading bacterium isolated from Antarctic Prydz Bay sediments. The purified agarase (Aga21) revealed a single band on sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, with an apparent molecular weight of 80 kDa. The optimum pH and temperature of the agarase were 8.0 and 30 °C, respectively. However, it maintained as much as 85% of the maximum activities at 10 °C. Significant activation of the agarase was observed in the presence of Mg²⁺, Mn²⁺, K⁺; Ca²⁺, Na⁺, Ba²⁺, Zn²⁺, Cu²⁺, Co²⁺, Fe²⁺, Sr²⁺ and EDTA inhibited the enzyme activity. The enzymatic hydrolyzed product of agar was characterized as neoagarobiose. Furthermore, this work is the first evidence of cold-adapted agarase in Antarctic psychrophilic bacteria and these results indicate the potential for the Antarctic agarase as a catalyst in medicine, food and cosmetic industries.

Sensibilidad de hongos miceliares dematiaceos a diez antifungicos empleando un metodo de difusion en agar / In vitro susceptibiblity of dematiaceous fungi to ten antifungal drugs using an agar difussion test

Se ha evaluado la utilidad del metodo de difusion en agar NeoSensitabs para determinar la sensibilidad in vitro de 52 aislamientos de hongos filamentosos dematiaceos a diez antifungicos: anfotericina B.5-fluorocitosina, Ketoconasol, fluconazol, itraconazol, terbinafina, bifonazol, miconazol, clotrimazol, y griseofulvina. Para la preparacion del inoculo se ultilizo un metodo espectrofotometrico empleandose los medios de Shadomy y Casitone agar (CAS), simultaneamente. Todos los aislamientos fueron sensibles, al itraconazol, terbinafina y bifonazol. Al ketonazol el 90,4% resultaron sensibles al miconazol el 71% y al clotrimazol el 46%. El 63% de las cepas fueron sensibles a la anfotericina B y el 28,8% resistente. Por el contrario, el 94,2% de los aislamientos resultaron resistentes a la griseofulvina y el 96% al flucanazol. El 100% de las cepas fueron resistentes a la 5-fluorocitosina. Las zonas de inhibicion no mostraron variaciones en cuanto a la sensibilidad dependiendo del medio; sin embargo, hubo un mejor desarrollo fungico en el medio CAS. Las variaciones en la sensibiblidad observadas con especies como Exophiala spinifera y Fonsecaea pedrosi justificarian el estudio de la sensibiblidad in vitro para valorar el tratamiento clinico con antifungicos. Estos resultados demuestran que el metodo de difusion en agar NeoSensitabs es facil de realizar, rapido y economico por lo que esta al alcance de muchos laboratorios clinicos para el estudio de la sensibilidad in vitro en mochos dematiaceos

Doseamento microbiológico de neomicina: influência do volume de meio de cultura / Microbiological assay of neomycin: influence of the nutrient medium volume

As condiçöes experimentais do método oficial de difusäo em ágar, para a determinaçäo de neomicina, foram modificadas a fim de aumentar sua sensibilidade e simplificar sua execuçäo. O volume de meio de cultura base foi reduzido de 20 ml para 10 ml, mantendo-se 5 ml de meio superfície. Também foi utilizada monocamada inoculada, de 10 ml de meio cultura. Os melhores resultados foram obtidos reduzindo-se o volume de meio de cultura base para 10 ml, conseguindo-se, assim, determinaçöes no intervalo de 2 a 32 microng/ml de neomicina base