Study of surface carbohydrates in Galba truncatula tissues before and after infection with Fasciola hepatica

The presence and distribution of surface carbohydrates in the tissues of Galba truncatula snails uninfected or after infection with Fasciola hepatica as well as on the surface of the snail-pathogenic larval stages of the parasite were studied by lectin labelling assay. This is an attempt to find similarities that indicate possible mimicry, utilised by the parasite as an evasion strategy in this snail-trematode system. Different binding patterns were identified on head-foot-mantle, hepatopancreas, genital glands, renopericardial complex of the host as well as of the snail-pathogenic larval stages of F. hepatica. The infection with F. hepatica leads to changes of labelling with Glycine max in the head-mantle cells and Arachis hypogaea in the tubular epithelium of the hepatopancreas. The lectin binding on the other snail tissues is not changed by the development of the larvae. Our data clearly demonstrated the similarity in labelling of G. truncatula tissues and the surface of the snail-pathogenic larval stages of F. hepatica. The role of glycosylation of the contact surfaces of both organisms in relation to the host-parasite interactions is also discussed.

Hospederos intermediarios de fasciola hepática en el Perú / Intermediate hosts of in Peru fasciola hepatica

Se demostró la infección natural y experimental de los caracoles limneídos peruanos con estadios larvales de Fasciola hepatica. Los índices de infección natural y experimental fueron del 12% y 28% en Lymnaea columella y del 27% y 70% en Lymnaea viatrix, respectivamente. Lymnaea diaphana y Lymnaea cousini no presentaron infección natural y demostraron no ser susceptibles a la infección experimental.

The natural and experimental infection of Peruvian lymnaeid snails with larval stages of Fasciola hepatica was demonstrated. The index of natural and experimental infection was of 12% and 28% in Lymnaea columella and of 27% and 70% in Lymnaea viatrix, respectively. Lymnaea diaphana and Lymnaea cousini did not present natural infection and demonstrated not to be prone to experimental infection.

The molluscicidal activities of some Euphorbia milii hybrids against the snail Indoplanorbis exustus.

The objective of this study was to observe the molluscicidal activities of Euphorbia milli, known as "poysean" in Thailand, against Indoplanorbis exustus. Latex from 12 different E. milii hybrids was screened for its molluscicidal activities. Indoplanorbis exustus were exposed for 24 and 48 hours to the latex at various concentrations ranging from 6 to 25 ppm and mortality rates were recorded. Eight hybrids of latex were effective. The six most effective hybrids were E. milii Dang-udom, E. milii Arunroong, E. milii Raweechotchuong, E. milii Srisompote, E. milii Sri-umporn and E. milii Tongnopakun, which killed all snails after 24 hours of exposure. Under the same conditions, latex of E. milii Dowpraket and E. milii Promsatid killed 50% of the snails. Such results indicate that these 6 hybrids seem promising as natural molluscicidal agents.

Uso do Sm14 recombinante (sm14r) na vacinação contra infecção experimental por Fasciola hepatica em coelhos

A proteína Sm14, Sm de Schistosoma mansoni e 14 representando o peso molecular aproximado em kDa, que pertence a família das proteínas que se ligam aos ácidos graxos (fatty acid binding proteins – FABP) é considerada um dos candidatos à vacina contra esquistossomose humana. Dado o grau de homologia entre a Sm14 e a Fh15 (fração de baixo peso molecular isolada da Fasciola hepatica), a sugestão lógica foi avaliar a eficácia imunogênica do antígeno recombinante, Sm14r, na infecção experimental por F. hepatica. Coelhos Nova Zelândia (NZ) foram imunizados com 80 microgramas do Sm14r e posteriormente desafiados com 40 metacercárias de F. hepatica. Foram utilizadas duas amostras do Sm14r sendo que o lote 1 foi expresso no vetor pRSET A (Sm14r – 1) e o lote 2 no vetor pAE (Sm14r – 2). As seqüências de aminoácidos dos lotes utilizados neste estudo possuem o aminoácido treonina na posição 20 (Sm14-T20). Os ensaios imunoenzimáticos (ELISA) para detecção de anticorpos IgG contra os antígenos recombinantes revelaram que os grupos de animais imunizados com as proteínas associadas ao adjuvante (Sm14r – 1 + ACF e Sm14r – 2 + ACF) apresentaram níveis altos e significativos de anticorpos até o final do experimento. A produção de anticorpos anti-F. hepatica em coelhos NZ, experimentalmente infectados com esse trematódeo, foi acompanhada através da técnica de ELISA, utilizando o antígeno SOM (antígeno somático de vermes adultos de F. hepatica) e SE (extrato salino de F. hepatica). Anticorpos IgG anti-SOM e anti-SE foram detectados no período de 30 dias após a infecção

Paralelamente foram realizados exames coproparasitológicos individuais, sendo os primeiros ovos detectados nas fezes 90 dias após a infecção. Cento e trinta dias após a infecção, os animais foram necropsiados para contagem dos vermes de F. hepatica. Houve uma total correlação entre os níveis de anticorpos anti-SOM detectados por ELISA nos soros dos animais infectados, presença de ovos nas fezes, recuperação de vermes e danos hepáticos (através de análises macroscópica e microscópica). Com o objetivo de estudar o perfil imunofenotípico dos leucócitos circulantes do sangue periférico de coelhos imunizados e desafiados com metacercárias de F. hepatica (avaliação da resposta imune no contexto ex vivo) foram utilizados anticorpos monoclonais usados em ensaios de citometria de fluxo: CD4, CD8, CD44, CD18 e CD25. Os resultados permitiram observar que o protocolo vacinal onde houve associação das proteínas com o adjuvante favoreceu um maior número de alterações imunológicas. As proteínas Sm14r – 1 e Sm14r – 2 se mostraram antigênicas, mas no entanto, não foi possível avaliar a atividade protetora dos antígenos recombinantes através da redução da carga parasitária e danos hepáticos pela falta de viabilidade das metacercárias utilizadas neste estudo

Uso do Sm14 recombinante (sm14r) na vacinação contra infecção experimental por Fasciola hepatica em coelhos / Use of recombinant Sm14 (rSm14) vaccination against experimental infection with Fasciola hepatica in rabbits

A proteína Sm14, Sm de Schistosoma mansoni e 14 representando o peso molecular aproximado em kDa, que pertence a família das proteínas que se ligam aos ácidos graxos (fatty acid binding proteins – FABP) é considerada um dos candidatos à vacina contra esquistossomose humana. Dado o grau de homologia entre a Sm14 e a Fh15 (fração de baixo peso molecular isolada da Fasciola hepatica), a sugestão lógica foi avaliar a eficácia imunogênica do antígeno recombinante, Sm14r, na infecção experimental por F. hepatica. Coelhos Nova Zelândia (NZ) foram imunizados com 80 microgramas do Sm14r e posteriormente desafiados com 40 metacercárias de F. hepatica. Foram utilizadas duas amostras do Sm14r sendo que o lote 1 foi expresso no vetor pRSET A (Sm14r – 1) e o lote 2 no vetor pAE (Sm14r – 2). As seqüências de aminoácidos dos lotes utilizados neste estudo possuem o aminoácido treonina na posição 20 (Sm14-T20). Os ensaios imunoenzimáticos (ELISA) para detecção de anticorpos IgG contra os antígenos recombinantes revelaram que os grupos de animais imunizados com as proteínas associadas ao adjuvante (Sm14r – 1 + ACF e Sm14r – 2 + ACF) apresentaram níveis altos e significativos de anticorpos até o final do experimento. A produção de anticorpos anti-F. hepatica em coelhos NZ, experimentalmente infectados com esse trematódeo, foi acompanhada através da técnica de ELISA, utilizando o antígeno SOM (antígeno somático de vermes adultos de F. hepatica) e SE (extrato salino de F. hepatica). Anticorpos IgG anti-SOM e anti-SE foram detectados no período de 30 dias após a infecção. Paralelamente foram realizados exames coproparasitológicos individuais, sendo os primeiros ovos detectados nas fezes 90 dias após a infecção. Cento e trinta dias após a infecção, os animais foram necropsiados para contagem dos vermes de F. hepatica. Houve uma total correlação entre os níveis de anticorpos anti-SOM detectados por ELISA nos soros dos animais infectados, presença de ovos nas fezes, recuperação de vermes e danos hepáticos (através de análises macroscópica e microscópica). Com o objetivo de estudar o perfil imunofenotípico dos leucócitos circulantes do sangue periférico de coelhos imunizados e desafiados com metacercárias de F. hepatica (avaliação da resposta imune no contexto ex vivo) foram utilizados anticorpos monoclonais usados em ensaios de citometria de fluxo: CD4, CD8, CD44, CD18 e CD25. Os resultados permitiram observar que o protocolo vacinal onde houve associação das proteínas com o adjuvante favoreceu um maior número de alterações imunológicas. As proteínas Sm14r – 1 e Sm14r – 2 se mostraram antigênicas, mas no entanto, não foi possível avaliar a atividade protetora dos antígenos recombinantes através da redução da carga parasitária e danos hepáticos pela falta de viabilidade das metacercárias utilizadas neste estudo.

Fasciolasis hepática: ¿Un problema diagnóstico? / Hepatic Fasciolasis: A diagnosis problem?

La fasciolasis humana es una infección parasitaria causada por el tremátode Fasciola hepática que afecta principalmente al ganado ovino y vacuno, siendo el hombre un hospedero accidental. La situación epidemiológica ha cambiado en los últimos años, habiéndose reportado un incremento en el número de casos en diferentes países alrededor del mundo. En la mayoría de los casos el diagnóstico de la infección en la fase aguda o invasiva y en la fase crónica o de estado, es difícil por la superposición de síntomas de ambas fases, por la escasez de síntomas o por la eliminación intermitente de huevos por el parásito adulto. La determinación de la fase en que se encuentra el paciente, va a depender de la sospecha clínica y de la elección de métodos serológicos o coproparasitológicos adecuados en las fases aguda o crónica respectivamente, así como también de determinar si éste proviene de una zona endémica. En el presente trabajo, se reportan 6 casos de pacientes que fueron hospitalizados en el Hospital Nacional Arzobispo Loayza, en Lima entre los años de 1990 a 1999, cuyos diagnósticos presuntivos fueron diferentes del diagnóstico final y que presentaron problemas de diagnóstico. Se establece la importancia de la correlación entre el dato de procedencia, los hallazgos físicos y de laboratorio para el diagnóstico de esta parasitosis.

Fasciolíase humana na Brasil diagnosticada por colangiografia endoscópica retrógrada / Human fascioliasis in BRasil diagnosed with endoscopic retrograde cholangiography

A fasciolíase humana é rara. O homem é um hospedeiro acidental da Fasciola hepatica. O parasita se instala nos canais bibliares e na vesícula bibliar simulando um cálculo biliar. Neste relato, descrevemos situaçäo em que a infestaçäo pela F. hepatica resultou em complicaçöes biliares, como icterícia e cólica biliar. O diagnóstico por imagem foi realizado por meio de colangiografia endoscópica retrógrada, que demonstrou a presença de estrutura no ducto bibliar extra-hepático. Foi efetuada esfincterotomia e remoçäo da mesma com cesta, havendo resoluçäo dos sintomas. O diagnóstico laboratorial demonstrou que o parasita era F. hepatica

Obtención de metacercarias de Fasciola hepatica en Lymnaea cubensis y relación parásito-hospedero en ratas Wistar y ratones Balb/c / Fasciola hepatica metacercarie collection in Lymnaea cubensis, and parasite-host-relation in Winstar rats an Balb/c mice

Fueron realizados dos experimentos, en experimento I con dos métodos (necropsia y bolsa de polietileno) para colectar y comparar las metacercarias obtenidas, el experimento II que fue desarrollado para determinar la potencia invasiva de las metacercarias obtenidas en un biotipo artificial, usando ratas Wistard y ratones Balb/c inoculados con 20 y 5-10 metacercarias, respectivamente. Se encontró que el número de metacercarias obtenidas con el uso de las bolsas de polietileno es considerablemente superior (P< 0.01) a las obtenidas por disección con un total de 1 442 metacercarias y una media de 12.87 por hospederos, mientras que en el método de las bolsas de polietileno la media fue de 29.31 y el total de 3 313. La potencia invasiva (PI) y la extensión de la invasión (EI) en las ratas fue más alta en la tercera semana (PI, 23 por ciento; EI, 80 por ciento), similar a los ratones inoculados con 10 metacercarias (PI, 23 por ciento; EI, 80 por ciento). Hubo 100 por ciento de hígados afectados por ambas dosis en la tercera semana. Se concluye que el método de las bolsas de polietileno es más efectivo que la disección facilitando la obtención de gran número de formas invasivas con alta calidad, limpieza y fácil desprendimiento de las metacercarias desde la superficie de enquistamiento: así como el hecho de que la potencia invasiva y la extensión de la invasión obtenida valida su uso en las investigaciones con modelos de Fasciola hepatica en ratas y ratones con dosis apropiadas de 20 y 10 metacercarias por ratas y ratones, respectivamente

Scanning eleectron micropical studies on cercaria and metacercariae of fasciola gigantica

The surface topography of Fasciola gigantica cercariae and metacercariae was studied by scanning electron microscopy. The head of F. gigantica cercaria is covered with several small knobs and its tail is provided with two lateral folds, fused ventrally, near the distal end of the tail. The oral sucker is smaller than the ventral one and possesses a characteristic surface structure. The outermost layer [layer I] of the outer cyst wall of the metacercaria is roughened with irregular furrows. The inner surface of the outer cyst wall [layer II] is more homogeneous and nearly smooth. The outermost layer of the inner cyst wall [layer III] is smooth and lacks any furrows or tubercles. The differences between F. gigantica and F. hepatica cercariae and metacercariae were discussed

Studies on the liver fluke fasciola morphometrical studies

A comparative scanning electron microscopy and morphometric study of the two geographically isolated species of Fasciola [F. heptica European isolate and F. gigantica from Egypt] was studied in order to Clarify their genetic relationships and specific identification. Although the present study revealed that most of the diagnostic morphological and morphometric criteria in the two species are highly variable, the position of the ventral sucker relative to the whole body length produced the most significant differentiating criterion, in addition to the presence of markedly larger tegumental papillae on the ventral surface of F. gigantica

Eficacia fasciolicida de dos compuestos de sintesis química in vitro e in vivo en ovinos / In vitro and in vivo fascioliscide efficacy of two chemical compounds in sheep

Se evaluó la eficacia fascioliscida del 6-cloro-5-(1-naphtoxy)-2-methyltiobencimidazol, denominado compuesto alfa, y del 6-cloro-5-(2-naphtoxy)-2-methyltiobencimidazol, denominado beta, bajo condiciones in vitro e in vivo. Para ambos compuestos la eficacia in vitro se evaluó a concentraciones de 50, 10, 3.33, 1.11 y 0.37 mg/L, utilizando metacercarias de Fasciola hepática desenquistadas. La eficacia se determinó con base en la sobrevivencia de estos cuatro días posexposición a los químicos. El compuesto alfa mostró una eficacia de 100 por ciento, 100 por ciento, 77.5 por ciento, 0.0 por ciento y 0.0 por ciento y el compuesto beta de 100 por ciento, 67.5 por ciento, 1.75 por ciento, 0.0 por ciento y 0.0 por ciento, respectivamente. Para la evaluación in vivo, se utilizaron 45 ovinos criollos, los cuales fueron infectados cada uno con 150 metacercarias de Fasciola hepática. Dos meses después, cuando todos lo ovinos se diagnosticaron positivios a los huevos del parásito mediante la prueba de sedimentación, los borregos se subdividieron en 5 grupos de 9 animales cada uno. Los grupos 1 y 2 fueron tratados con 10 y 15 mg/kg/vía oral del producto alfa, respectivamente. Los grupos 3 y 4 fueron dosificados con 10 y 15 mg/kg/vía oral del compuesto beta, respectivamente. El grupo 5 fungió como testigo sin tratamiento. Quince días posteriores al tratamiento, los ovinos se sacrificaron para colectar y cuantificar las fasciolas en el hígado. La eficacia fue determinada como porcentaje de reducción de fasciolas en los grupos tratados con respecto al testigo. Los resultados indicaron una eficacia de 80.6 y 86.9 por ciento para los grupos 1 y 2, respectivamente, y de 0.0 por ciento para los grupos 3 y 4, respectivamente. Mediciones de la longitud de fasciolas y peso del hígado, no mostraron algún efecto adverso atribuible a los tratamientos. Se concluye que el compuesto alfa bajo condiciones in vitro e in vivo, mostró una eficacia fasciolicida altamente promisoria y el compuesto beta solamente eficacia aceptable en el escrutinio in vitro

DIG-ELISA: Estandarización y evaluación serodiagnóstica en fasciolosis bovina experimental y natural / DGI-ELISA: Standardization and serodiagnostic evaluation in experimental and natural bovine fascioliasis

Los objetivos del presente estudio fueron: Determinar la sensibilidad y especificidad de DIG-ELISA y establecer el valor de corte para realizar diagnóstico de fasciolosis bovina; determinar la capacidad diagnóstica de la prueba en bovinos infectados en forma experimental; valorar la seroprevalencia bimensual y durante un año de los títulos IgG anti-Fasciola hepatica en suero de bovinos infectados en forma natural; y comparar la variación con la presencia de huevos del trematodo identificados en el análisis coproparasitoscópico. Con el propósito de estandarizar la prueba, además de las correspondientes titulaciones de sueros, antígeno y conjugado, se utilizaron 80 sueros de bovinos, de estos últimos 40 pertenecían a animales provenientes del estado de Sonora (zona libre de fasciolosis) y 40 del estado de Hidalgo (zona enzoótica de fasciolosis). La prueba mostró una sensibilidad de 97.5 por ciento y una especificidad de 80.0 por ciento, obteniendo un valor de corte de 7 mm. En otro estudio, se infectaron 15 bovinos jóvenes de sexo indistinto, cada uno con 600 metacercarias del Fasciola hepatica. Los animales fueron sangrados semanalmente y durante 14 ocasiones para obtención de suero. La prueba fue capaz de detectar anticuerpos anti-F. Hepatica desde la segunda semana posinfección, logrando sus mayores incrementos expresados en diámetro de la zona de reacción (DZR) entre la séptima y décima semanas. En otro experimentos se utilizaron 85 bovinos criollos, hembras, de un rancho ubicado en un área enzoótica de fasciolosis en Nautla, Veracruz, en donde se colectó sangre para obtención de suero, así como heces de cada uno de los bovinos. Los animales fueron muestreados bimensualmente y durante un año para correr los cueros con DIG-ELISA y las heces para realizar análisis por sedimentación. Los porcentajes de seroprevalencia fueron del 58 por ciento, 73 por ciento, 80 por ciento, 100 por ciento, 96 por ciento y 79 por ciento para los meses de marzo, mayo, julio, septiembre, enero y marzo, respectivamente, mostrando porcentajes de positividad similares a aquellos obtenidos en el análisis coproparasitoscópico (P>0.01). Se concluye que DIG-ELISA mostró alta sensibilidad y fácil montaje para utilizarse bajo condiciones de campo en el diagnóstico temprano de fasciolisis bovina, generando resultados reproducibles que pueden ser de gran utilidad para estudios seroepidemiológicos

Tiempo de normalización de los niveles de gammaglutamil transpeptidasa en ovinos con fasciolosis experimental tratados con triclabendazol / Normalization period of gammaglutamyl transpeptidase serum levels in sheep with fasciolosis treated with triclabendazole

Se determinaron los niveles séricos de gammaglutamil transpoptidasa (GGT) en ganado ovino infectado experimentalmente con Fasciola hepatica, con el objetivo de valorar el tiempo en que se normalizan después del tratamiento con triclabendazol. Se empleó un lote de corderos adultos y se conformaron 3 lotes de 5 animales cada uno. Los lotes 1 y 2 fueron infectados con 60 metacarcarias de Fasciola hepatica, los días 1, 30 y 75 del experimento. A los 90 días de la infección, se trató el lote 1 con triclabendazol a una dosis de 10 mg/kg; el lote 3 no fue infectado ni tratado, fue el testigo negativo. Los niveles séricos de GGT fueron cuantificados 8 días antes de la infección y posteriormente cada 30 días durante 165. Se encontró un incremento significativo (P< 0.05) de GGT en los lotes 1 y 2 en relación con el 3 posinfección, con una x de 35.4 y de 44.7 UY, y un pico a los 90 días con una x de 71.7 y 57.3 unidades internacionales, respectivamante. Los niveles séricos de GGT se normalizaron en los ovinos a los 75 días de haber sido tratados con triclabendazol

Estudo comparativo entre técnicas coproparasitológicas para diagnóstico de Fasciola hepática em bovinos / Comparative study among coproparasitologic technics for the diagnosis of Fasciola hepatica in cattle

A comparação entre três técnicas coproparasitológicas para o diagnóstico de ovos de Fasciola hepática em fezes de bovinos, testadas para o mesmo grupo de animais, demonstrou convergência de resultados nos 1439 de 37 propriedades rurais. As pequenas diferenças observadas foram estatisticamente não significativas. O estudo concluiu que as três técnicas podem ser utilizadas como rotina para o diagnóstico da fasciolose, mas sugere que em condições de campo, a técnica de Girão ou dos quatro tamises seja a indicada.

The comparison of the three coproparasitological technics for diagnosis of Fasciola hepatica eggs in cattle faeces, performed at the same groups of animais, gave highly convergent results in 1439 bovines from 67 farms. In weak difference the results were no discordant significant. The study concluded that the three technics can be used in routine procedure for the diagnosis of F. hepatica, but allow to suggest that in field situation, the Girão's technics must be indicated and used.

Ocorrência de Fasciola hepatica, (Linnaeus, 1758) (Trematoda, Fasciolidae) no Estado de Goiás / Occurrence of FFasciola hepatica (Linnaeus, 1758) in the State of Goiás

Os autores relatam a ocorrência de bovinos parasitados por Fasciola hepatica, (L.) abatidos em matadouro, após terem sido submetidos ao regime de engorda no município de Santa Helena, Estado de Goiás. Estes animais eram provenientes do Estado do Rio Grande do Sul, onde o parasitismo é freqüente. Os autorees alertam para a possibilidade de instalação de focos do parasitismo no Estado, uma vez ssque no município de Goiânia, onde foram abatidos os animais, foi identificado recentemente o molusco transmissor

Ocorrência de Lymnaea columella (Say, 1817)(Mollusca, Pulmonata, Lymnaeidae), no Estado de Goiás. Consideraçöes sobre os parasitos por ela transmitidos / Occurrence of Lymnaea columella (Say, 1817)(Mollusca, Pulmonata, Lymnaeidae) in the State of Goiás and commentes about the ralationships of the molluc with the transmission of some parasites

Os autores relatam a primeira ocorrência de Lymnaea columella (Say, 1817) no Estado de Goiás, ressaltando a importância da espécie como hospedeiro intermediário de vários parasitos dos animais domésticos, dos quais, alguns são agentes de zoonoses no Brasil e em outros países. Também fazem considerações sobre os parasitos transmitidos ou possivelmente transmitidos por este molusco, já assinalados no Brasil

Aislamiento e identificación in situ de antígenos de Fasciola hepatica / Iosolation and in situ identification of Fasciola hepatica antigens

La identificación y localización de los sitios antigénicos de los parásitos son de gran importancia para conocer los procesos inmunológicos y para mejorar los procedimientos serodiagnósticos de las enfermedades parasitarias. Fasciola hepatica es un tramatodo de gran complejidad antigénica, por lo que se identificaron, por electroforesis e inmunoelectrotransferencia, los principales antígenos inmunodominantes de F. hepatica de 30 días de edad. Se realizó el aislamiento de tres polipéptidos antigénicos (PA) por medio de cromatografía de líquidos de baja presión, teniendo pesos moleculares de 24, 26 y 66 kD. Posteriormente, se produjo antisuero específico en contra de estos tres PA para determinar los sitios antigénicos en cortes histológicos del trematodo, utilizando la técnica de inmunoperoxidasa. Se determinó que los antisueros detectan el PA de 24 kD en el tegumento de F. hepatica, el de 29 kD en las células de la ventosa ventral y, por último, el de 66 kD se localizó en las células del tracto intestinal. Se concluye y fácil de usar, para determinar sitios antigénicos en cortes histológicos de F. hepatica y otros helmintos