Infective larvae of Haemonchus contortus found from the base to the top of the grass sward / Larvas infectantes de Haemonchus contortus são encontradas da base até o topo da forragem

Abstract The resistance of gastrointestinal nematodes (GIN) of sheep to anthelmintic treatment has motivated researchers to seek alternatives to reduce the use of these drugs in sheep farming and decontaminate pastureland based on knowledge about the survival dynamics of larvae. The aim of this work was to evaluate the migration of the infective larvae (L3) of Haemonchus contortus at different times of the day, strata, and sward heights, with and without shade after the deposition of contaminated sheep feces. The grass species used here was Cynodon dactylon cv. Tifton 85 in four treatments: low sward height shade; low sward height sunshine; high sward height shade; and high sward height sunshine. The number of L3 recovered from the pasture at different times of the day did not differ. The highest number of L3 recovered was in shade. The number of L3 at different times and strata occurred uniformly, confirming that L3 remain in the same place after migrating from dung at the hottest times of the day. Infective larvae of H. contortus were able to migrate across all the strata regardless of the time of day in the summer season in humid subtropical climate.

Resumo A resistência dos nematódeos gastrintestinais (NGI) de ovinos aos tratamentos com anti-helmíntico tem estimulado os pesquisadores a buscar alternativas para reduzir o uso desses medicamentos na ovinocultura e descontaminar pastagens com base no conhecimento sobre a dinâmica de sobrevivência das larvas. O objetivo do trabalho foi avaliar a migração das larvas infectantes (L3) de Haemonchus contortus em diferentes horários do dia, estratos, e alturas do pasto, com e sem sombra, após a deposição de fezes de ovinos contaminadas. A espécie forrageira utilizada foi Cynodon dactylon cv. Tifton 85 em quatros tratamentos: pasto baixo sombra; pasto baixo sol; pasto alto sombra; e pasto alto sol. Não houve diferença na recuperação de L3 no pasto nos diferentes horários. As maiores recuperações foram encontradas na sombra. O número de larvas recuperadas nos diferentes horários e estratos ocorreu de forma uniforme, confirmando que as L3 podem permanecer no mesmo local, após migrar do bolo fecal, nos horários mais quentes do dia. Larvas infectantes de H. contortus foram capazes de migrar por todos os estratos, independentemente da hora do dia no verão em clima subtropical úmido.

Anthelmintic resistance of Haemonchus contortus from sheep flocks in Brazil: concordance of in vivo and in vitro (RESISTA-Test©) methods / Resistência anti-helmíntica de Haemonchus contortus em rebanhos ovinos no Brasil: concordância de métodos in vivo e in vitro (RESISTA-Test©)

Abstract This study evaluated the resistance status of Haemonchus contortus from sheep flocks in the state of São Paulo, Brazil, through comparison between the fecal egg count reduction test (FECRT) and the larval development test (LDT). For the FECRT, 35 sheep were selected in each of five flocks and divided into groups treated with: benzimidazole, levamisole, ivermectin, monepantel and control. Feces were collected for EPG and fecal cultures. The LDT was performed using thiabendazole (TBZ), levamisole (LEV), ivermectin aglycone (IVM-A) and Zolvix (ZLV). Resistance to all drugs was detected using FECRT in 100% of the flocks, except in relation to ZLV (40% resistant and 20% suspected of resistance). LDT indicated resistance to TBZ and IVM-A in all flocks, to LEV in 80% of flocks and to ZLV in 10%. Total agreement was obtained between the two tests for TBZ and IVM (k = 1.0), while for LEV (k = 0.8) and ZLV (k = 0.9), substantial and almost perfect agreement were obtained, respectively. The concordance between the tests was significant, thus showing that it is possible to use the outcome of the LDT to predict the FECRT, and hence validating the former as a fast diagnostic test for use by sheep farmers in Brazil.

Resumo Este estudo avaliou o status de resistência de Haemonchus contortus em rebanhos ovinos do estado de São Paulo, Brasil, através de um estudo comparativo entre o teste de redução da contagem de ovos nas fezes (TRCOF) e o teste de desenvolvimento larvar (TDL). Para o TRCOF, 35 ovinos foram selecionados em cada um dos cinco rebanhos e divididos em grupos tratados com: benzimidazol, levamisol, ivermectina, monepantel e controle. Fezes foram coletadas para OPG e coproculturas. O TDL foi realizado com tiabendazol-TBZ, levamisol-LEV, ivermectina aglicona-IVM-A e Zolvix-ZLV. Resistência a todos os fármacos foi detectada por meio do TRCOF em 100% dos rebanhos, exceto para ZLV (40% resistentes e 20% suspeitos de resistência). O LDT indicou resistência ao TBZ e IVM-A em todos os rebanhos; em 80% dos rebanhos ao LEV e 10% ao ZLV. Foi obtida concordância total entre os dois testes para TBZ e IVM (k = 1,0), enquanto para LEV (k = 0,8) e ZLV (k = 0,9) foram obtidas concordância substancial e quase perfeita, respectivamente. A concordância entre os testes foi significante, sendo possível usar o resultado do LDT para prever o do TRCOF, validando-se o primeiro como um teste diagnóstico rápido para criadores de ovinos no Brasil.

Resistance of Haemonchus contortus to monepantel in sheep: first report in Espírito Santo, Brazil / Resistência de Haemonchus contortus ao monepantel em ovinos: primeiro relato no Espírito Santo - Brasil

Abstract The objective of this study was to provide the first report of resistance of Haemonchus contortus to monepantel in sheep in Espírito Santo. The study was conducted in a property with history of monepantel use since 2014 and register of low efficacy in studies conducted over the past few years with fecal egg count reduction test. Lambs born on the property (males and females aged approximately 100 days) were selected and after eggs per gram of feces (EPG) analysis on fecal samples, these were divided into two groups: a group treated with monepantel (2.5 mg / Kg) and a control group without anthelmintic treatment. Seven days later, the animals were euthanized to recover parasites from the gastrointestinal tract. The efficacy of the treatment was 61.35% against H. contortus, thus proving that anthelmintic resistance to monepantel was present.

Resumo O objetivo deste estudo foi fornecer o primeiro relato de resistência de Haemonchus contortus ao monepantel em ovinos no Espírito Santo. O estudo foi conduzido em uma propriedade com histórico de uso de monepantel, desde 2014, e registro de baixa eficácia em estudos conduzidos nos últimos anos, utilizando-se testes de redução de contagem de ovos por grama de fezes (OPG). Cordeiros nascidos na propriedade (machos e fêmeas com idade aproximada de 100 dias) foram selecionados e, após contagem de OPG, foram divididos em dois grupos: um grupo tratado com monepantel (2,5 mg / kg) e um grupo controle, sem tratamento com anti-helmíntico. Após 7 dias, os animais foram eutanasiados para a recuperação dos parasitos no trato gastrointestinal. O tratamento apresentou eficácia de 61,35% para H. contortus, comprovando que a resistência anti-helmíntica ao monepantel foi presente.

Performance of lambs under four levels of dietary supplementation and artificially mix-infected with Haemonchus contortus and Trichostrongylus colubriformis / Efeito de quatro dietas na performance de cordeiros artificialmente infectados com Haemonchus contortus e Trichostrongylus colubriformis

Abstract The effect of four diets on the performance of Dorper lambs that were artificially mix-infected with 1000 infective larvae (L3) of Haemonchus contortus and 1000 L3 of Trichostrongylus colubriformis every three days for 12 weeks was evaluated. For each diet, one infected group (n = 7) and one control group (n = 4) were set up. The four diets contained the following proportions of hay (H) and concentrate (C): Diet 1 - 100%H; Diet 2 - 75%H:25%C; Diet 3 - 50%H:50%C; Diet 4 - 25%H:75. All the infected groups showed decreases in mean packed cell volume (PCV) and total plasma protein, especially the Diet 1-infected, which was also the group with the highest fecal egg count. The diets and infection had significant effects (P < 0.05) on daily body weight gain (DBWG), cold carcass weight and daily food consumption. The control and infected groups had mean DBWG (in kg), respectively, of 0.048 and 0.025 with Diet 1; 0.082 and 0.067 with Diet 2; 0.188 and 0.189 with Diet 3; and 0.303 and 0.221 with Diet 4. In conclusion, the infection affected the productive performance regardless of the diet; however, with increased metabolizable protein and energy, the risk of occurrence of anemia and hypoproteinemia diminished.

Resumo Avaliou-se o efeito de quatro dietas sobre o desempenho de cordeiros Dorper infectados artificialmente, a cada três dias, durante 12 semanas, com 1.000 larvas infectantes (L3) de Haemonchus contortus e 1.000 L3 de Trichostrongylus colubriformis. Um grupo infectado (n=7) e um controle (n=4) foram constituídos para cada uma das dietas, que continham a seguinte proporção de feno (F) e concentrado (C): Dieta 1 - 100%F; Dieta 2 - 75%F:25%C; Dieta 3 - 50%F:50%C; Dieta 4 - 25%F:75%C. Todos os grupos infectados apresentaram redução nas médias de hematócrito (VG) e proteína plasmática total (PPT), principalmente o grupo Dieta 1 infectado, que também apresentou maior contagem de ovos nas fezes. Houve efeito significativo da dieta e da infecção (P <0,05) no ganho em peso médio diário, peso da carcaça e consumo diário de alimento. Os grupos controle e infectado tiveram ganho em peso médio diário (em kg), respectivamente, de 0,048 e 0,025 na Dieta 1; 0,082 e 0,067 na Dieta 2; 0,188 e 0,189 na Dieta 3; e 0,303 e 0,221 na Dieta 4. Concluiu-se que a infecção afetou o desempenho produtivo independentemente da dieta, porém, com o aumento da proteína e da energia metabolizável, o risco de ocorrência de anemia e hipoproteinemia diminuiu.

Haematological variables of Santa Ines and Ile de France suckling lambs: Influence of Haemonchus contortus infection / Variáveis hematológicas de cordeiros lactentes Santa Inês e Ile de France: influência da infecção por Haemonchus contortus

Haemonchus contortus is the major gastrointestinal parasite of sheep raised in tropical and subtropical areas worldwide. This trial aimed to evaluate the influence of H. contortus infection on the bone marrow response of Santa Ines (SI) and Ile de France (IF) suckling lambs experimentally infected with H. contortus. Fourteen SI lambs and 12 IF lambs were randomized in four groups: infected SI (n=8), non-infected SI (n=6), infected IF (n=8) and non-infected IF (n=4). Lambs of infected groups were submitted to 27 infections, conducted every two days, from 14 to 68 days of age, and each lamb received a total of 5400 H. contortus infective larvae (L3). Ten blood samples were obtained during the experimental period to be used for erythrocyte and leukocyte counts, packed cell volume and total plasma protein estimation. Additionally, it was carried out a differential leukocyte count. Lambs from control groups did not shed eggs in faeces all over the experiment, while infected Santa Ines and Ile de France lambs presented means of 2963 EPG (Eggs Per Gram of faeces) and 8175 EPG in the last sampling (P<0.05), respectively. Infected Santa Ines lambs had an increase in eosinophil release, however differences (P<0.05) on circulation number in comparison with infected Ile de France lambs were identified only in the last sampling (54 days post first infection). The mild H. cortortus infection did not produce significant changes in the blood variables of the Ile de France and Santa Ines suckling lambs.(AU)

Haemonchus contortus é o principal parasita gastrintestinal de ovinos criados em áreas tropicais e subtropicais. Este estudo objetivou avaliar a influência da infecção por H. contortus na resposta medular de cordeiros lactentes das raças Santa Inês (SI) e Ile de France (IF) infectados experimentalmente com H. contortus. Quatorze cordeiros SI e 12 cordeiros IF, foram distribuídos em quatro grupos: SI infectado (n=8), SI não infectado (n=6), IF infectado (n=8) e IF não infectado (n=4). Cordeiros dos grupos infectados foram submetidos a 27 infecções, realizadas a cada dois dias, do 14º até 68º dia de vida, com um total de 5400 larvas infectantes (L3) de H. contortus por animal. Foram realizadas 10 coletas de sangue ao longo do período experimental para determinação do volume globular, proteínas plasmáticas totais, contagem de eritrócitos e leucócitos, além do diferencial de leucócitos. Cordeiros controles não infectados não eliminaram ovos nas fezes durante todo o experimento, enquanto que os cordeiros Santa Ines e Ile de France infectados apresentaram em média 2963 ovos por grama de fezes (OPG) e 8175 OPG na última coleta (P<0,05), respectivamente. Cordeiros Santa Inês infectados tiveram um aumento na produção de eosinófilos, mas diferenças (P<0.05) no número de eosinófilos sanguíneos em comparação a cordeiros Ile de France infectados foram detectadas somente na última coleta (54 dias após a primeira infecção). A infecção leve por H. cortortus não induziu alterações significativas nas variáveis sanguíneas de cordeiros lactentes Ile de France e Santa Inês.(AU)

Doenças do sistema digestório de pequenos ruminantes no norte do Paraná / Digestive disorders of small ruminants in northern Paraná

As doenças do sistema digestório de ovinos e caprinos no norte do Paraná foram avaliadas por meio de um estudo retrospectivo de 427 pequenos ruminantes atendidos no Ambulatório de Grandes Animais, do Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Londrina, no período de janeiro de 2006 a dezembro de 2015. Para isso, foi realizada revisão das fichas clínicas dos pequenos ruminantes com afecções do sistema digestório, determinando a ocorrência, principais características clínicas, tratamentos instituídos e evolução dos casos. Os dados foram tabulados e submetidos a um estudo descritivo das variáveis, observando a distribuição das frequências (%) das condições analisadas. As afecções do sistema digestório foram diagnosticadas em 38,64% (165/427) dos atendimentos realizados. Vinte e seis animais apresentaram duas afecções no momento do atendimento, totalizando 191 enfermidades diagnosticadas. Dentre essas enfermidades, as mais comumente diagnosticadas foram: hemoncose (27,7%; 53/191), acidose láctica ruminal aguda (18,8%; 36/191), eimeriose (13,6%; 26/191) e indigestão simples (6,8%; 13/191). O aumento da criação de ovinos e caprinos no estado do Paraná reitera a importância do desenvolvimento de estudos como o presente trabalho, a fim de identificar as enfermidades mais frequentes e preparar o médico veterinário para o diagnóstico e tratamento correto.

Sheep and Goat's digestive disorders in northern Paraná were evaluated by a retrospective study of 427 small ruminants treated at the State University of Londrina's Veterinary Hospital (HV-UEL), from January 2006 to December 2015. Analysis of medical records of small ruminants with digestive disorder were performed, determining the occurrence, main clinical signs, established treatments and outcome of cases. Data were tabulated and submitted to a descriptive study of variables, observing frequency distribution (%) of analyzed conditions. Digestive disorders occurs in 38,6% (165/427) of cases in small ruminants at the studied period. Among these diseases, the most common were: hemoncose (27.7%; 53/191), acute rumen lactic acidosis (18.8%; 36/191), eimeriosis (13.6%; 26/191) and simple indigestion (6.8%; 13/191). The increase in sheep and goats' flock in the state of Paraná reiterates the importance of developing studies such as the present study, in order to identify the most frequent diseases and prepare the veterinarian for the correct diagnosis and treatment.

Chemical constituents of Calotropis procera latex and ultrastructural effects on Haemonchus contortus / Constituintes químicos do látex de Calotropis procera e efeitos ultraestruturais em Haemonchus contortus

Abstract This study aimed to evaluate the anthelmintic and ultrastructural effects of Calotropis procera latex on Haemonchus contortus. C. procera latex was twice centrifuged at 10,000×g and dialyzed to obtain a fraction rich in proteins, named LP (latex protein), and at 3,000 rpm to obtain a fraction rich in secondary metabolites, named LNP (latex non-protein). Specimens of H. contortus exposed to LNP, LP and PBS in the Adult Worm Motility Test (AWMT) were submitted to scanning (SEM) and transmission (TEM) electron microscopy to verify changes in their ultrastructure. Phytochemical tests in the LNP indicated the presence of phenols, steroids, alkaloids and cardenolides. High-Performance Liquid Chromatography (HPLC) characterized the presence of the compounds gallic acid and quercetin in the LNP. The protein content in the LP was 43.1 ± 1.1 mg/mL and 7.7 ± 0.3 mg/mL in LNP. In AWMT, LNP and LP inhibited the motility of 100% of the nematodes, with LNP being more effective than LP and ivermectin more effective than both (p <0.05). Cuticle changes were observed by SEM and TEM in nematodes treated with LP and LNP. Calotropis procera latex has anthelmintic effects against H. contortus, causing damage to its cuticle and other alterations in its ultrastructure.

Resumo Este estudo objetivou avaliar os efeitos anti-helmínticos e ultraestruturais do látex de Calotropis procera sobre Haemonchus contortus. Látex de C. procera foi centrifugado duas vezes à a 10.000xg e dialisado para obter uma fração rica em proteínas, denominada proteínas do látex (LP). E centrifugado e centrifugado a 3.000 rpm, para obter uma fração rica em metabólitos secundários, denominada LNP (látex não proteico). Espécimes de H. contortus expostos à LNP, LP e PBS no Teste de Motilidade dos Nematoides Adultos (TMNA) foram submetidos a microscopia eletrônica de varredura (MEV) e de transmissão (MET), para verificar alterações em sua ultraestrutura. Testes fitoquímicos em LNP indicaram a presença de fenóis, esteroides, alcaloides e cardenolídeos. A presença dos compostos ácido gálico e quercetina em LNP foi caracterizada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). O conteúdo de proteínas em LP foi de 43,1 ± 1,1 mg/mL e de 7,7 ± 0,3 mg/mL em LNP. No TMNA, LNP e LP inibiram a motilidade de 100% dos nematoides, sendo LNP mais eficaz que LP, e a ivermectina mais eficaz que ambos (p <0,05). Alterações na cutícula de nematoides tratados com LP e LNP foram observadas por MEV e MET. O látex de C. procera apresenta efeito anti-helmíntico sobre H. contortus, causando danos à sua cutícula e outras alterações em sua ultraestrutura.

Anthelmintic activity of Eucalyptus citriodora essential oil and its major component, citronellal, on sheep gastrointestinal nematodes / Atividade anti-helmíntica do óleo essencial de Eucalyptus citriodora e seu componente majoritário, citronelal, sobre nematoides gastrintestinais de ovinos

Abstract This study aimed to evaluate the anthelmintic activity of Eucalyptus citriodora essential oil and citronellal on sheep gastrointestinal nematodes. Essential oil composition was determined by gas chromatography mass spectrometry. The substances were evaluated in vitro using adult worm motility test (AWMT) and transmission electron microscopy (TEM). The acute toxicity test in mice and the fecal egg count reduction test (FECRT) in sheep were performed. Citronellal was confirmed as the essential oil major constituent (63.9%). According to the AWMT, 2 mg/mL of essential oil and citronellal completely inhibited Haemonchus contortus motility at 6 h post exposure. H. contortus exposed to essential oil and citronellal exhibited internal ultrastructural modifications. The lethal dose 50 values in mice were 5,000 and 2,609 mg/kg for essential oil and citronellal, respectively. E. citriodora essential oil reduced sheep epg at 14 days post treatment by 69.5% (P<0.05). No significant differences were observed in epg between the citronellal and negative control groups (P>0.05). The interaction between citronellal and other constituents in the essential oil may be relevant for its in vivo anthelmintic activity. Thus, E. citriodora essential oil and citronellal pharmacokinetic studies may help elucidate the anthelmintic activity of these compounds.

Resumo Este trabalho objetivou avaliar a atividade anti-helmíntica do óleo essencial de Eucalyptus citriodora e citronelal sobre nematoides gastrintestinais de ovinos. A composição do óleo essencial foi determinada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas. As substâncias foram avaliadas in vitro utilizando-se teste de motilidade de vermes adultos (AWMT) e microscopia eletrônica de transmissão (TEM). Teste de toxicidade aguda em camundongos e teste de redução da contagem de ovos fecais (FECRT) em ovinos foram realizados. Citronelal foi confirmado como componente majoritário do óleo essencial (63,9%). No AWMT, 2 mg/mL de óleo essencial e citronelal inibiram completamente a motilidade de H. contortus 6 h pós-exposição. H. contortus expostos ao óleo essencial e citronelal exibiram modificações ultraestruturais internas. Os valores da dose letal 50 em camundongos foram 5.000 e 2.609 mg/kg para óleo essencial e citronelal, respectivamente. Óleo essencial de E. citriodora reduziu opg de ovinos 14 dias pós-tratamento em 69,5% (P<0,05). Não houve diferença significativa de opg entre grupo controle negativo e citronelal (P>0,05). A interação entre citronelal e outros constituintes do óleo essencial pode ser relevante na atividade anti-helmíntica in vivo. Portanto, avaliação farmacocinética do óleo essencial de E. citriodora e citronelal pode auxiliar a elucidar a atividade anti-helmíntica desses compostos.

Losses caused by gastrointestinal nematode infections in Dorper lambs under two nutritional status / Prejuízos causados pelas infecções por nematoides gastrintestinais em cordeiros Dorper submetidos a dois manejos nutricionais

Abstract The aim of this study was to evaluate the effect of two nutritional statuses on the productive performance of Dorper lambs naturally infected with gastrointestinal nematodes. Thirty-two lambs, grazing together on the same pasture, were allocated into four experimental groups: (G1) infected-supplemented diet, (G2) control-supplemented diet, (G3) infected-basal diet, and (G4) control-basal diet. Control animals received suppressive treatment with monepantel every two weeks, while precautionary anthelmintic treatments were given to all lambs of the infected groups with packed cell volume (PCV) <23%. There was reduction in the PCV means of all groups, which was more pronounced in the infected lambs that also presented reduction in total plasma protein values in comparison with the controls. Weight gain was affected by diet and infection status (P < 0.05). Daily body weight gain was 0.170 kg in the G1, 0.205 kg in the G2, 0.085 kg in the G3, and 0.116 kg in the G4. The cold carcass weight was 4.1% and 13.7% higher in controls in comparison with infected lambs, respectively, in the supplemented and basal diets. The infected groups, despite receiving precautionary anthelmintic treatments to prevent deaths due to haemonchosis, presented reduction in the production parameters in comparison with the controls.

Resumo O experimento teve por objetivo determinar o efeito de dois níveis de nutrição no desempenho produtivo de cordeiros Dorper naturalmente infectados por nematoides gastrintestinais. Trinta e dois cordeiros, mantidos juntos na mesma pastagem, foram alocados em quatro grupos experimentais: (G1) infectado-suplementado, (G2) controle-suplementado, (G3) infectado-dieta basal e (G4) controle-dieta basal. Os cordeiros suplementados receberam diariamente concentrado em quantidade equivalente a 2% do peso corporal (PC), enquanto na dieta basal receberam apenas uma pequena quantidade de concentrado (0,35% do PC). Os animais controles receberam tratamento supressivo com anti-helmíntico a cada duas semanas e os infectados foram tratados individualmente quando apresentaram volume globular (VG) <23%. Houve redução nas médias de VG em todos os grupos, as quais foram mais pronunciadas nos animais dos grupos infectados, que também apresentaram redução nos valores de proteína plasmática total em comparação com os controles. Houve efeito significativo da dieta e da infecção no ganho de peso (P <0,05). O ganho em peso diário foi de 0,170 kg no G1, 0,205 kg no G2, 0,085 kg no G3 e 0,116 kg no G4. Os grupos infectados, apesar de receberem tratamentos anti-helmínticos preventivos que evitaram mortes por haemonchose, apresentaram redução nos parâmetros produtivos em comparação com os controles.

Galectins and collectinis expression are increased in Haemonchus contortus-infected corriedale sheep / Aumento da expressão gênica de colectinas e galectinas em ovinos corriedale infectados por Haemonchus contortus

Galectins and collectins are proteins classified in the lectin family that have the ability to recognize molecular patterns associated with pathogens. Studies on cattle have demonstrated high expression of these proteins during infection with gastrointestinal nematodes. The aim of this study was to investigate whether the level of Haemonchus contortus infection would alter the expression of galectins (Gal11 and Gal14) and collectins (SPA and CGN) in sheep. Twelve Corriedale sheep exposed to natural infection with nematodes were divided into two groups: group 1 (G1, n = 7) and group 2 (G2, n = 5), with low and high parasite burdens, respectively, based on fecal egg counts and abomasal parasite counts. The fecal egg counts and abomasal parasite counts were significantly different (p < 0.05) between the groups. Galectin and collectin gene expression was observed in all sheep abomasal samples. However, animals with lower infection levels showed lower expression of the genes Gal14, SPA and CGN (p < 0.05). Expression of lectins was associated with the abomasal H. contortus burden, thus suggesting that these proteins may have a role in controlling of this infection.

Colectinas e galectinas são proteínas da família das lectinas que possuem a capacidade de reconhecer padrões moleculares associados aos patógenos. Estudos em bovinos têm demonstrado a alta expressão dessas proteínas durante a infecção por nematoides gastrintestinais. O objetivo deste estudo foi investigar se o nível de infecção de Haemonchus contortus altera a expressão de colectinas (SPA e CGN) e galectinas (Gal11 e Gal14) de ovinos. Doze ovinos da raça Corriedale expostos a infecção natural com nematoides foram separados em dois grupos: grupo 1 (G1, n=7) com menor grau de parasitismo; e grupo 2 (G2, n=5) com maior grau, a partir da contagem do número de parasitos recuperados do abomaso e OPG. A contagem de OPG e de parasitos recuperados do abomaso dos grupos G1 e G2 apresentaram diferença estatística (p<0,05). A expressão dos genes de colectinas e galectina foi observada em todas as amostras de abomaso dos ovinos, porém animais com menor grau de infecção apresentaram menor expressão dos genes de Gal14, SPA e CGN (p<0,05). A expressão de lectinas foi associada ao número de H. contortus encontrados no abomaso de ovinos, indicando um possível papel dessas proteínas no controle da infecção.

Anthelmintic activity of Cymbopogon citratus against Haemonchus contortus / Atividade anti-helmíntica de Cymbopogon citratussobre Haemonchus contortus

Parasitic nematodes are of major economic importance in livestock. An alternative for the control of parasites is phytotherapy. This study evaluated the efficacy of Cymbopogon citratus decoction (CcD), C. citratus essential oil (CcEo) and citral against Haemonchus contortus using in vitro egg hatch test (EHT) and larval development test (LDT) and an in vivo test using a Meriones unguiculatus (gerbil) model. The effect of 800 mg/kg CcEo was evaluated in gerbils that had been artificially infected with 5,000 third-stage H. contortus larvae. The effective concentrations required to inhibit 50% (EC50) of egg hatching were 0.46, 0.14 and 0.13 mg/mL for CcD, CcEo and citral, respectively. The EC50 values in the LDT were 5.04, 1.92 and 1.37 mg/mL for CcD, CcEo and citral, respectively. H. contortus population in the group treated with C. citratus essential oil was reduced by 38.5% (P< 0.05) in comparison to the control group. These results suggest that it may be possible to use C. citratusessential oil to control of H. contortus parasite of small ruminant.

O parasitismo por nematoides tem grande importância econômica no rebanho. Uma alternativa para o controle de parasitas é a fitoterapia. Este estudo avaliou a eficácia do decocto de Cymbopogon citratus (DCc), do óleo essencial de C. citratus (OECc) e do citral contra Haemonchus contortus utilizando o teste in vitro de eclosão dos ovos (TEO) e o teste de desenvolvimento larval (TDL) e um teste in vivo com modelo Meriones unguiculatus (gerbil). O efeito de 800 mg/kg de OECc foi avaliado em gerbils infectados artificialmente com 5000 larvas de terceira fase de H. contortus. As concentrações efetivas necessárias para inibir 50% (CE50) da eclosão dos ovos foram 0,46; 0,14 e 0,13 mg/mL para DCc, OECc e citral, respectivamente. Os valores da CE50 no TDL foram de 5,04; 1,92 e 1,37 mg/mL para DCc, OECc e citral, respectivamente. No grupo tratado com óleo de C. citratus a população H. contortus foi reduzida em 38,5% (P < 0,05) em comparação com o grupo controle. Estes resultados sugerem que pode ser possível a utilização de óleo essencial de C. citratus para controle de H. contortus, parasita de pequenos ruminantes.

Frequency of benzimidazole resistance in Haemonchus contortus populations isolated from buffalo, goat and sheep herds / Frequência da resistência ao benzimidazol em populações de Haemonchus contortus isoladas de rebanhos de bubalinos, caprinos e ovinos

Anthelmintic resistance is an increasing problem that threatens livestock production worldwide. Understanding of the genetic basis of benzimidazole resistance recently allowed the development of promising molecular diagnostic tools. In this study, isolates of Haemonchus contortus obtained from goats, sheep and buffaloes raised in Brazil were screened for presence of the polymorphism Phe200Tyr in the β-tubulin 1 gene, which confers resistance to benzimidazole. The allelic frequency of the mutation conferring resistance ranged from 7% to 43%, and indicated that resistance to benzimidazole could be found in nematodes isolated from all the ruminant species surveyed. Although significant variation in the frequency of the F200Y mutation was observed between different herds or host species, no significant variation could be found in populations isolated from animals within the same herd. These findings suggest that screening of samples from a few animals has the potential to provide information about the benzimidazole resistance status of the entire herd, which would enable a considerable reduction in the costs of diagnosis for the producer. Molecular diagnosis has practical advantages, since it can guide the choice of anthelmintic drug that will be used, before its application in the herd, thus reducing the economic losses driven by anthelmintic resistance.

A resistência aos anti-helmínticos é um problema crescente que ameaça a produção pecuária em todo o mundo. A compreensão da base genética da resistência ao benzimidazol permitiu, recentemente, o desenvolvimento de métodos diagnósticos moleculares promissores. Neste estudo, isolados de Haemonchus contortus obtidos a partir de rebanhos de caprinos, ovinos e bubalinos criados no Brasil foram avaliados quanto à presença do polimorfismo F200Y no gene da β-tubulina1, o qual confere resistência ao benzimidazol. A frequência alélica da mutação variou de 7% a 43%, indicando que a resistência ao benzimidazol pode ser encontrada em nematoides isolados a partir de todas as espécies de ruminantes pesquisadas. Embora tenha sido observada variação significativa das frequências de mutação F200Y entre rebanhos/espécies hospedeiros distintos, não foi encontrada variação significativa entre populações isoladas de animais dentro de um mesmo rebanho. Estes achados sugerem que a avaliação de amostras de alguns poucos animais tem o potencial de fornecer informações sobre o nível de resistência ao benzimidazol de todo o rebanho, possibilitando uma redução considerável dos custos de diagnóstico para o produtor. O diagnóstico molecular apresenta vantagens práticas, uma vez que pode guiar a escolha da base anti-helmíntica a ser utilizada antes da sua aplicação no rebanho, reduzindo, portanto, as perdas ocasionadas pela resistência aos fármacos anti-helmínticos.

Patrón espacio-temporal de larvas y huevecillos de nemátodos gastrointestinales en pastizales ganaderos de Veracruz, México / Spatio-temporal pattern of larvae and eggs of gastrointestinal nematodes in cattle pastures in Veracruz, Mexico

The spatial and temporal distribution of gastrointestinal nematodes of cattle has been little studied in Mexico. Previous studies have described periods of higher larval presence, vertical and horizontal migration in grasslands, and the frequency of adult nematodes; as well as the effect of pasture trichomes on the migration and survival of Haemonchus larvae. The aim of this study was to determine the time-space layout and spread of gastrointestinal nematode larvae on pasture, and to estimate the effect of ivermectin applied to cattle on the time-dependent abundance of their eggs in a ranch in Veracruz. To determine the spatio-temporal arrangement, monthly morning grass samples were obtained from 30 sampling points from July 2008 to June 2009. Third stage larvae (L3) from each point were counted, and aggregation patterns were estimated through variance/mean and negative binomial K indices. Additionally, the number of eggs per gram in cattle feces was determined, from samples with (CI) and without ivermectin (SI), using standard techniques. A total of 20 276L3 larvae were recovered in the pasture, of which an 80% corresponded to Haemonchus contortus. The highest nematode density with more than 5 000L3/kgDM was detected in October 2008, and the lowest in February and March 2009. The L3 showed an aggregated spatial pattern of varying intensity throughout the year. The number of eggs in the stool was not reduced with the ivermectin application to cattle, which suggested a failure of control. However, the highest parasite loads were observed from July to November 2008. We concluded that the application of ivermectin was not effective to control nematodes eggs, and that L3 populations fluctuated on pasture for ten months, providing an infection source to grazing animals afterwards. Rev. Biol. Trop. 61 (4): 1747-1758. Epub 2013 December 01.

El conocer la disposición espacio-temporal y diseminación de las larvas de nematodos gastrointestinales en los pastizales, y estimar el efecto de la ivermectina aplicada a bovinos sobre la abundancia de sus huevecillos, permite estimar dónde y cuándo se presentan las poblaciones más altas, que puede servir para establecer planes de muestreo y orientar medidas de control, así como para definir el riesgo de contaminación de los pastizales de manera diferencial. Para la determinación de la disposición espacio-temporal de L3 en el pastizal, se recolectaron, contaron e identificaron mensualmente las larvas en 30 puntos de muestreo, posteriormente se generaron mapas de disposición espacial con los datos obtenidos de los conteos de L3 en cada punto y mes de muestreo, y se calculó el patrón de disposición mediante los índices varianza/media y K binomial negativa. El número de huevecillos por gramo de heces de los bovinos con (CI) y sin ivermectina (SI), se calculó con la técnica de McMaster. En el pastizal se recuperaron 20 276L3, correspondiendo el 80% a H contortus. En octubre 2008 se detectó la más alta densidad de nematodos con más de 5 000L3/kgMS. Las L3 presentaron un patrón espacial agregado de intensidad variable durante todo el año. Las mayores densidades poblacionales de nematodos fueron en octubre 2008 y las menores en febrero y marzo 2009. La aplicación de ivermectina a los bovinos no redujo el número de huevecillos presentes en las heces, debido a que los tratamientos fueron estadísticamente iguales. De julio a noviembre 2008, se observaron las mayores cargas parasitarias.

Doenças de caprinos diagnosticadas na região Central no Rio Grande do Sul: 114 casos / Diseases of goats diagnosed in the Central region of Rio Grande do Sul, Brazil: 114 cases

A retrospective study of the goat necropsies performed over a period of 48 years (1964 to 2011) at the Laboratório de Patologia Veterinária, Universidade Federal de Santa Maria, Rio Grande do Sul (RS) state, Brazil, was performed. A total of 114 reports of goat necropsies were analyzed. Ninety five necropsies (83.33%) had a conclusive diagnosis and 19 (19.66%) had inconclusive diagnosis. Out of the conclusive cases, infectious and parasitary diseases were the most prevalent, followed, in decreasing order of prevalence, by metabolic and nutritional diseases, poisonings and toxi-infections, and developmental diseases. Other conditions or lesions that did not fit any of the above groups of diseases affected about 10% of the necropsied goats. Hemonchosis was the most prevalent cause of death in this study. Eimeriosis and listeriosis were also important causes of goat deaths. Among the metabolic and nutritional diseases, urolithiasis, osteoporosis, pregnancy toxemia, malnutrition, and white muscle disease were the most prevalent. Mostly the infectious and parasitary diseases and the metabolic and nutritional diseases occurred many times as outbreaks, causing even more important economic losses.

Foi realizado um estudo retrospectivo dos arquivos do LPV-UFSM e examinados os laudos de necropsias de caprinos realizadas num período de 48 anos (1964 a 2011). Foram analisados 114 laudos de necropsias de caprinos. Deste total, 95 (83,33%) tinham diagnóstico conclusivo e 19 (19,66%) tinham diagnóstico inconclusivo. Dos 95 casos conclusivos, as doenças infecciosas e parasitárias foram as mais prevalentes, seguidas em ordem decrescente de prevalência, pelas doenças metabólicas e nutricionais, intoxicações e toxi-infecções e alterações do desenvolvimento. Outras alterações de diferentes naturezas e etiologias que não se enquadravam nos grupos de doenças acima afetaram cerca de 10% dos caprinos examinados. A hemoncose foi a principal causa de morte de caprinos na área de abrangência do LPV-UFSM. Eimeriose e listeriose também foram causas importantes de morte. Dentre as doenças metabólicas e nutricionais, urolitíase, osteoporose, toxemia da prenhez, desnutrição e doença dos músculos brancos foram as mais prevalentes. Principalmente as doenças infecciosas e parasitárias e as metabólicas e nutricionais ocorreram muitas vezes na forma de surtos, acarretando maiores perdas econômicas associadas.

Doenças de ovinos diagnosticadas no Laboratório de Anatomia Patológica Animal da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (1996-2010) / Sheep diseases diagnosed at the Laboratory of Animal Pathology, Federal University of Mato Grosso do Sul, Brazil (1996-2010)

Nas últimas décadas a pecuária ovina cresceu significativamente no Brasil. Concomitantemente, grupos de pesquisas e laboratórios de diagnósticos realizam estudos retrospectivos com a finalidade de fornecer subsídios técnico-científicos para os médicos veterinários. Desta forma, realizou-se um estudo de prevalência nos arquivos do Laboratório de Anatomia Patológica Animal (LAP) da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (UFMS) no período de Janeiro de 1996 a Dezembro de 2010. O Laboratório de Bacteriologia da UFMS e o Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul forneceram apoio diagnóstico nos casos de mannheimiose pulmonar e scrapie, respectivamente. Os laudos da espécie ovina foram revisados e agrupados em conclusivos e inconclusivos, dos quais foram excluídos os casos experimentais e de outros estados e países. Os casos conclusivos foram classificados de acordo com a etiologia da doença. Os exames da espécie ovina somaram 331 laudos (3,97 %) de um total de 8.333 casos diagnosticados no período. Destes, foram excluídos sessenta e quatro (19,3%) casos experimentais e materiais oriundos de outros estados ou países. Dos 267 casos remanescentes, 87 (32,6%) foram inconclusivos e 180 (67,4%) considerados conclusivos, sendo 60 (33,3%) doenças infecciosas e parasitárias; 45 (25%) intoxicações e toxi-infecções; 41 (22,8%) "lesões sem causa definida"; 22 (12,2%) doenças metabólicas e nutricionais; 10 (5,6%) foram classificadas como "outros distúrbios" e 2 (1,1%) neoplasmas. A hemoncose, intoxicação por Brachiaria spp., pleuropneumonias, broncopneumonias, pneumonias fibrinonecrosante ou fibrinossupurativa sem causa definida e a intoxicação por cobre foram as doenças mais prevalentes no período estudado. Dois casos de scrapie foram diagnosticados no período.

Sheep farming has increased significantly in Brazil during the last decades. Concurrently, research groups and diagnostic laboratories compile data and perform retrospective studies to provide important insight for professionals. A prevalence study from January 1996 to December 2010 was carried out in the archives of Laboratório de Anatomia Patológica Animal (LAP), Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (UFMS). Laboratório de Bacteriologia, UFMS, and Setor de Patologia Veterinária at Universidade Federal do Rio Grande do Sul helped on the diagnostic of pulmonary mannheimiosis and scrapie respectively. The reports for sheep were reviewed and grouped into conclusive and inconclusive ones. The conclusive cases were classified according to the etiology of the disease. In the period, 331 exams (3.97%) were done. Sixty-four experimental cases and materials from other states or countries (19.3%) were excluded. Remaining cases (267), eighty-seven (32.6%) were inconclusive and 180 (67.4%) were considered conclusive reports, were classified according to the etiology: 60 (33.3%) infectious and parasitary diseases; 45 (25%) were poisonings and toxi-infections; 41 (22.8%) were summarized as "injuries without apparent cause"; 22 (12.2%) cases of metabolic and nutritional diseases; 10 (5.6%) were classified as "other disorders" and 2 (1.1%) case of neoplasms. Haemonchosis, fibrinonecrotic or fibrinopurulent pleuropneumonia, bronchopneumonia and pneumonia, poisonings by Brachiaria spp. and copper poisoning were the most prevalent diseases in sheep. Two cases of scrapie have been diagnosed in this period.

Surto de Oestrus ovis em ovinos em Mato Grosso / Outbreak of Oestrus ovis in sheep in Mato Grosso, Brazil

Oestrus ovis é um parasito cosmopolita que pode acometer ovinos e caprinos. A fase parasitária inicia-se após as fêmeas adultas depositarem suas larvas nas narinas dos hospedeiros. O objetivo deste trabalho foi de descrever os aspectos clínicos, epidemiológicos, macroscópicos e microscópicos de um surto de oestrose em ovinos no estado de Mato Grosso. Os principais sinais clínicos observados foram espirros e descarga nasal. Macroscopicamente havia hiperemia e edema da mucosa nasal. Os achados microscópicos eram caracterizados por hiperemia e edema moderado a acentuado e difuso, associados a infiltrado leve a moderado predominante de mastócitos e eosinófilos na submucosa. Embora a doença fosse observada em um grande número de animais a mortalidade observada nos surtos ocorreu devido à infestação por Haemonchus contortus e pneumonia.

Oestrus ovis is a cosmopolitan agent of myiasis in sheep and goats. The parasitic phase begins after adult females deposit first stage larvae into the nostrils of hosts. The aim of this study was to describe the epidemiological data, clinical signs, gross and microscopical findings of an outbreak of O. ovis myiasis in sheep in state of Mato Grosso. Sneezing and nasal discharges was the major clinical signs in infected sheep. The main gross findings include hyperemia and oedema of the nasal mucosa. At the microscopic exam there was moderate infiltration of mast cells and eosinophils in the nasal mucosa with moderate to severe oedema and hyperemia. Although affecting a large number of sheep, the mortality occurred due to other causes such as Haemonchus contortus infection and pneumonia.

Utilização do método Famacha no diagnóstico clínico individual de haemoncose em ovinos no Sudoeste do Estado de Minas Gerais / Utilization of the Famacha method in individual clinic diagnostic of haemonchosis in sheep of south-west of Minas Gerais State

O objetivo deste estudo foi observar a eficácia do método Famacha no diagnóstico clínico individual de haemoncose em ovinos provenientes do Sudoeste de Minas Gerais. Cinquenta ovelhas mestiças Santa Inês foram avaliadas durante 5 meses quanto à coloração da mucosa conjuntiva (método Famacha), volume globular (VG), ovos por grama de fezes (OPG), escore corporal e alterações clínicas. O escore Famacha observado variou de 1 a 3; o escore corporal de 2 a 5; o VG de 20 a 47 por cento; e o OPG de 0 a 7.750. As correlações entre os parâmetros avaliados, exceto Famacha com escore corporal, foram altamente significativas (P < 0,0001). O principal gênero identificado nas coproculturas foi Haemonchus (87 a 100 por cento do total de larvas, ± 93,5 por cento). Constatou-se redução de 87,33 por cento na utilização de anti-helmínticos na propriedade. Conclui-se que o método Famacha, associado a outros métodos de diagnóstico, é ferramenta útil na detecção da haemoncose em ovinos.

The aim of this study was to evaluate the efficacy of Famacha method in individual clinical diagnosis of haemonchosis in sheep from the south-west of Minas Gerais. Fifty crossbred Santa Inês ewes were evaluated during 5 months as for conjunctival mucous colour (Famacha method), Packed Cell Volume (PCV), Faecal Egg Counts (FEC), body score and clinic alterations. The score Famacha observed was from 1 to 3, the body score from 2 to 5, the PCV from 20 to 47 percent, and FEC from 0 to 7,750. The correlations between the parameters evaluated, except Famacha with body score, were highly significant (P < 0.0001). The main genus identified in the coprocultures was Haemonchus (87 - 100 percent of total larvae, ± 93.5 percent). We observed reduction of 87.33 percent in the use of anthelmintics on the property. It was concluded that the Famacha method, associated with other diagnostic methods, is a useful tool to detect hemonchosis in sheep.

Haemonchus contortus-sheep relationship: a review

La hemoncosis, causada por el nematodo del abomaso de rumiantes Haemonchus contortus, constituye una de las enfermedades parasitarias más notables del ganado ovino en todo el mundo. Las infecciones provocan síndromes anémicos y de mala digestión/absorción que pueden causar la muerte en los casos agudos y disminución de la producción en las formas crónicas. Las claves principales para la aparición de esta enfermedad son el comportamiento biológico del helmito, su patogenia, además de la respuesta del hospedador. El conocimiento actualizado de estos aspectos permitirá una mayor eficaciencia de los métodos de diagnóstico y contro del proceso y, como consecuencia, la disminución de los riesgos de aparición de esta enfermedad. La presente revisión analiza y discute algunos aspectos de la relación ganado ovino-H. contortus de interés para disminuir el impacto de esta parasitosis sobre la salud y producción ganaderas.

Haemonchosis, caused by the abomasal nematode Haemonchus contortus, is among the most relevant parasitic diseases of small ruminants all over the world. The infections are responsible for anemic and bad digestion/absorption syndromes causing the death of severely infected animals in acute cases and the reduction of production scores in the chronic forms of the disease. The keys for the appearance of the disease include the biological behavior of the helminth and mechanisms of pathogenesis, besides the host’s response. The updated knowledge of these aspects would result in a higher efficiency of diagnostic and control methods, thus reducing the risks of appearance of the disease. In the present review, several aspects of the sheep - H. contortus relationship are analyzed with the aim of reducing the impact of this parasitosis on livestock health and productivity.

Effect of Anthlmintics on control of haemonchus contortus in experimentally infected sheep

The present study was conducted to determine the effect of some anthelmintics namely:- Cydectin,Toloxan plus and Toloxan on the control of Haemonchus contortus in infected sheep.Twenty four Lambs were experimentally infected with 200L3H. contortus / k g body weight. After appearing eggs in the feces, all animals were allocated into 4 equal groups. Each group included 6 animals. Three groups [1,2 and 3] were treated with Cydectin,Toloxan plus and Toloxan respectively and the fourth group left untreated as a control. Results of this study indicated that the anthelmintics were reduced infection rate and control the level of the abomasal nematode H. contortus. The efficiency of anthelmintics was first indicated by a reduction in fecal egg count [e.p.g.] Rising pcv% of treated animals and in addition to increase the cumulative body weight of treated animals.The result was revealed that H. contortus was sensitive to all anthelmintics used in this study

Potency of three Haemonchus contortus antigens in the diagnosis of ovine haemonchosis

One hundred faecal specimens and corresponding blood samples were evaluated for Haemonchus contortus infection in sheep by ELISA utilizing somatic, circulating and copro-antigens. Results proved that coproantigen was more potent than the others in diagnosis of sheep haemonchosis. SDS-poly-acrylamide gel electrophoresis demonstrated that the three antigens are structurally related. Immunoblot analysis revealed that somatic antigen contained 6 polypeptides of molecular weights 234, 205, 178, 83, 48 and 14 kDa, while, coproantigen showed 4 immunogenic polypeptides of 234, 205, 85 and 45 kDa. In circulating antigen only 2 polypeptides of molecular weights 165 and 99 kDa were immunoreactive. The potency of coproantigen may be attributed partially to one polypeptide of molecular weight 45 kDa. This low molecular weight polypeptide was only expressed in coproantigen as an immunogen, probably increases the immunogenicity, and may have potential diagnostic and protective values