No detection of c-kit gene mutations in exons 9, 11, 13 and 17 and low CD117 expression in plaque-stage mycosis fungoides

Abstract: The growth factor receptor c-kit (CD117) is expressed in immature T-cells and in some advanced forms of mycosis fungoides. c-kit gene mutation results in unrestricted neoplastic proliferation. We aimed to detect by PCR the most frequent exon mutations in seventeen plaque-stage MF patients, in their perilesional skin and in healthy skin donors. We secondarily evaluated CD117 expression by immunohistochemistry in plaque-stage and tumor-stage MF. We detected no mutation in c-kit gene and low CD117 expression was confirmed on atypical cells in one patient. Complete c-kit exon and intron sequences should be assessed and more sensitive sequencing method could be also applied.

Morphometric study of lymphoid cells in mycosis fungoides and its simulators.

The distinction of early stages of mycosis fungoides from benign lymphoid disorders of skin is difficult by conventional histological techniques. We studied 10 cases of mycosis fungoides, 10 cases of large plaque parapsoriasis, 10 cases of other benign lymphoid disorders of skin and 5 cases of lymph nodes. Nuclear area, perimeter of the nucleus, nuclear contour index, cytoplasmic area, form factor and nuclear cytoplasmic ratio as well as DNA-ploidy were determined by image analysis. There were statistically significant difference (P value < 0.05) between all parameters except nuclear cytoplasmic ratio of the lymphoid cells of Mycosis Fungoides and benign lymphoid disorders of skin. Aneuploidy was found in 50% cases of Mycosis Fungoides. Histopathological parameters like epidermotropism pautrier micro-abscess and atypical lymphocytic infiltrate in both epidermis and dermis were more marked in aneuploid than diploid cases. So, the determination of nuclear contour index and DNA-ploidy is of importance to differentiate between Mycosis Fungoides and benign lymphoid disorders of skin.

Regiones organizadoras del nucleolo (NORs) en neoplasias linfoides / Nucleolar organizer regions (NORs) in lymphoid neoplasias

Las regiones organizadoras del nucleolo (NORs) se encuentran ubicadas, en humanos, a nivel de las constricciones secundarias de los cromosomas acrocéntricos y corresponden a la localización de los genes de ARNr. Existen evidencias de modificaciones de la expresión de ADNr en diferentes tumores. En este trabajo se estudió la expresión de NORs en células de médula ósea (MO) de pacientes con neoplasias linfoides: mieloma múltiple (MM), micosis fungoides (MF) y leucemia linfoblástica aguda (LLA) y de 10 individuos sanos. Se efectuó cultivo de MO de corto plazo (24 hs) a 37º en medio F-10 suplementado con suero fetal bovino, empleándose la técnica de Howell y Black (1980) para medir la actividad NOR. El análisis estadístico mostró incrementos significativos en el número de cromosomas Ag-NORs para las tres patologías (p < 0,001) y en la proporción de células marcadas con plata en MF (p < 0,005) y en LLA (p < 0,00025), respecto de los controles, encontrándose correlación entre este parámetro y la edad de los individuos sanos (rK = 0,59, p < 0,02). No se observaron diferencias en la frecuencia de Asociaciones de Satélites. Estos estudios mostraron la relación entre la actividad NOR y las características proliferativas y de diferenciación /maduración de las patologías estudiadas.

Determinação da viabilidade do Paracoccidioides loboi em biopsias de pacientes portadores de doença de Jorge Lobo / Determination of the viability of the Paracoccidioides loboi in biopsias of carrying patients of illness of Jorge Wolf

Fundamentos- Na doença de Jorge Lobo, devido ao não cultivo do P.loboi, utiliza-se material obtido de biopsias de pacientes, sendo a determinação da viabiliadade imprescindivel para os estudo experimentais da doença. Objetivos- Determinar a viabilidade do P. loboi, por meio de diferentes metodos de coloração, e investigar a influencia da temperatura e de diferentes soluções na viabilidade do fungo. Casuistica e Metodos- Biopsias de 15 pacientes foram processadas em solução salina 0,85%(SS), solução salina de Hank´s(SSH) e solução salina glicerinada a 30% com vitamina B(SSG). A viabilidade foi determinada no momento da coleta da biopsia (tempo 0), empregando-se os corantes diacetato de fluoresceina-brometo de etideo (DF-BE), lactofenol azul-algodão, azul-tripan e verde-janus. As suspensões foram mantidas a 4°C, 23°C e 37°C, e a viabilidade foi determinada a cada tres dias, utilizando-se a coloração DF-BE. Resultados - A viabilidade do P. loboi no tempo 0 variou de 21 a 46%, utilizando-se a coloração de DF-BE. A viabilidade com os demais corantes não foi satisfatoria, devido a dificuldades em separar os fungos viaveis dos não viaveis. A temperatura de 4°C foi mais eficaz em manter a viabilidade do fungo (ate 15 dias). Por outro lado, nenhuma das soluções empregadas conseguiu manter a viabilidade do fungo ou favorecer sua multiplicação. Conclusões - A determinação da viabilidade do P. loboi com DFG-BE podera auxiliar nas tentativas de cultura do fungo, nas inoculações em animais e no controle terapeutico da doença. Alem disso, a temperatura parece ser fator importante no crescimento do P. loboi.