Detección de trazas de soja y de leche en productos libres de gluten: desarrollo de dos enzimoinmunoensayos competitivos / Detection of traces of soy and milk in gluten-free products: development of two competitive enzyme immunoassays / Detecção de vestígios de soja e leite em produtos livres de glúten: desenvolvimento de dois enzimoimunoensaios competitivos

Resumen El objetivo del presente trabajo fue el desarrollo de dos enzimoinmunoensayos competitivos (EIC) para la detección de trazas de soja y de leche en productos libres de gluten. Como anticuerpos primarios se utilizaron antisueros policlonales de conejo específicos contra proteínas de soja o de leche. Se determinaron las concentraciones óptimas de antígenos a inmovilizar en la placa y las concentraciones de anticuerpos primarios a utilizar en la competencia. Las curvas de calibración se ajustaron utilizando concentraciones crecientes de un extracto de producto de soja y de un extracto de leche descremada en polvo. El producto de soja y la leche descremada se extrajeron con buffer Tris-HCl 0,0625 M con dodecilsulfato de sodio al 3% y sulfito de sodio 0,1 M al 2%. Se evaluaron los parámetros de validación: linealidad, límites de detección y de cuantificación, recuperación y precisión en el día y entre días, los cuales resultaron adecuados. Se analizaron 9 productos libres de gluten con los EIC desarrollados y con kits de ELISA comerciales. Ambos EIC se comportaron de manera similar con respecto a los kits comerciales. Los EIC permitieron confirmar la presencia de leche en las muestras que la declaraban. En algunas muestras que no declaraban ni leche ni soja, ambos EIC detectaron su presencia (resultados confirmados con los kits comerciales). Los EIC desarrollados poseen menor costo que los kits y, por lo tanto, éstos podrían utilizarse como métodos de screening. Cuando esta metodología resulte negativa, debe confirmarse con un método más sensible (comercial) para garantizar la ausencia de proteínas de soja o de leche.

Abstract The aim of this study was to develop two competitive enzyme immunoassays (CEI) to detect the presence of traces of soy and milk in gluten-free products. Specific rabbit polyclonal antiserums against soy protein and other against elemilk protein were used as primary antibodies. Optimal antigen concentrations to be immobilized on the plate and primary antibody concentrations to be used in competition were determined. The calibration curves were fitted using increasing concentrations of an extract of soy product and of defatted milk powder. The soy product and the defatted milk were extracted with Tris-HCl buffer 0,0625 M with 3% sodium dodecyl sulfate and 2% sodium sulfite 0.1 M. The validation parameters were evaluated: linearity, limit of detection and quantification, recovery and precision on the day and in between days. They were appropriate. Nine commercial samples of gluten-free products were analyzed with these developed CEI and commercial ELISA kits. It was observed that both CEI behaved similarly with respect to the commercial kits. The enzyme immunoassays confirmed the presence of milk in samples that declared it. In some samples that did not declare the presence of milk or soy, both enzyme immunoassays detected their presence -these results were confirmed using commercial kits. The developed CEI have a lower cost than the commercial kits, so these could be used as screening methods. When this methodology is negative, it should be confirmed with a more sensitive (commercial) method to ensure the absence of soy or milk protein.

Resumo O objetivo do presente trabalho foi o desenvolvimento de dois enzimoimunoensaios competitivos (EIC), para a detecção de vestígios de soja e leite em produtos livres de glúten. Antissoros policlonais de coelho específicos contra proteínas de soja ou de leite foram utilizados como anticorpos primários. Foram determinadas as concentrações ótimas de antígenos a serem imobilizados na placa e as concentrações de anticorpos primários a serem utilizadas na competição. As curvas de calibração foram ajustadas usando concentrações crescentes de um extrato de produto de soja e de um extrato de leite em pó desnatado. O produto de soja e o leite desnatado foram extraídos com tampão Tris-HCl 0,0625 M com dodecil sulfato de sódio a 3% e sulfito de sódio 0,1 M a 2%. Os parâmetros de validação foram avaliados: linearidade, limite de detecção e quantificação, recuperação e precisão no dia e entre os dias, os quais resultaram adequados. Nove produtos livres de glúten foram analisados com os EIC desenvolvidos e com kits de ELISA comerciais. Os dois EICs se comportaram de maneira semelhante em relação aos kits comerciais. Os EIC permitiram confirmar a presença de leite nas amostras que o declararam. Em algumas amostras que declaravam nem leite nem soja, ambos os EIC detectaram sua presença (resultados confirmados usando kits comerciais). Os EIC desenvolvidos têm um custo menor que os kits, portanto, eles poderiam ser utilizados como métodos de triagem. Quando esta metodologia é negativa, deve ser confirmada com um método mais sensível (comercial) para garantir a ausência de proteínasda soja ou do leite.

Efeito do nível nutricional antes e após a ovulação sobre a taxa de gestação e a prolificidade em ovelhas Santa Inês / Effect of the nutritional level before and after ovulation on pregnancy rate and prolificacy in Santa Ines ewes

Quarenta e três ovelhas foram distribuídas em quatro tratamentos em um delineamento de blocos casualizados. Os tratamentos consistiram no fornecimento de dietas de flushing, formuladas com farelo de soja (FFS) ou com glúten de milho e farelo de algodão (FGM+FA) por 28 dias antes da ovulação, seguido pelo fornecimento de dietas de flushing ou de uma dieta de mantença (DM) durante 28 dias após a ovulação: T1 - FFS antes e após a ovulação (n=12); T2 - FFS antes da ovulação e DM após (n=11); T3 - FGM+FA antes e após a ovulação (n=10); T4 - FGM+FA antes da ovulação e DM após (n=10). O ganho de peso e o peso final não diferiram (P>0,05) entre os animais dos tratamentos. O ECC final foi maior (P<0,05) nas ovelhas do tratamento T3 do que nas do tratamento T2. A concentração de N-ureico foi maior (P<0,05) nas ovelhas dos tratamentos T1 e T3 do que naquelas dos tratamentos T2 e T4. A taxa de gestação e a prolificidade não diferiram (P>0,05) entre os animais. As dietas de flushing antes da ovulação, seguidas pelo fornecimento destas mesmas dietas ou de uma dieta de mantença após a ovulação, não alteraram a taxa de gestação e a prolificidade.

Forty-tree ewes were assigned to four treatments in a randomized block design. The treatments consisted of two flushing diets, composed of soybean meal (SMF) or corn gluten and cottonseed meal (CG+CMF) furnished for 28 days before ovulation, and feeding with flushing diets or a maintenance diet (MD) for 28 days after ovulation: T1 - (SMF) before and after ovulation (n=12); T2 - SMF before ovulation and a MD after (n=11); T3 - CG+CMF before and after ovulation (n=10); T4 - CG+CMF before ovulation and MD after (n=10). The gain in BW and the final BW did not differ (P>0,05) between treatments. The final BC was higher (P>0,05) in ewes in T3 treatment than in those in treatment T2. The urea N concentration was higher (P<0,05) in ewes in treatments T1 and T3 than those in treatments T2 and T4. The pregnancy rate and prolificacy did not differ (P>0,05) between treatments. The flushing diets before ovulation and feeding with this same diet or a maintenance diet after ovulation did not alter the pregnancy rate and prolificacy.

Estudo das interações isoflavonas e proteínas da soja: efeitos sobre a digestibilidade e capacidade antioxidante / Study of interactions between isoflavones and soy protein: effect on the digestibility and antioxidant capacity

Embora a soja em grão seja pouco consumida pela população brasileira, seus derivados protéicos são utilizados como ingredientes em diversos alimentos e a tendência é um aumento significativo do seu uso com a aprovação pela FDA e pela ANVISA da alegação funcional referente ao consumo de proteína de soja. Em paralelo, um número crescente de pesquisas sobre as isoflavonas, fitoestrógenos presentes em quantidades significativas na soja, vem demonstrando diversos efeitos benéficos destes compostos, entre os quais a sua ação antioxidante, anticarcinogênica e hipocolesterolêmica. O objetivo foi estudar as interações entre isoflavonas e proteínas da soja, seu efeito na biodisponibilidade in vitro e in vivo e o status antioxidante das isoflavonas. Os resultados sugerem que a presença da proteína reduz a quantidade e leva a um retardo no tempo de absorção das isoflavonas em relação à administração na forma livre. O efeito sobre a capacidade antioxidante do plasma e sobre a atividade e expressão gênica das enzimas CAT, GPx e SOD divergiu para a suplementação de isoflavonas ou proteínas separadamente ou em associação...

Análise da preferência de preparações com derivados de soja e leite de vaca, na cidade de Maringá/PR - 2006 / Analysis of the preference of preparations with derivatives of soy and milk of cow in the city of Maringá/pr - 2006

A soja é considerada um alimento funcional porque, além das funções nutricionais básicas, produz efeitos benéficos à saúde e pode substituir o leite de vaca em caso de intolerâncias e/ou alergias. Este estudo teve como objetivo verificar a aceitação de preparações elaboradas com leite de vaca e com extrato solúvel de soja.A amostra foi composta por 27 adultos não- treinados para realizar a análise sensorial, por meio do Teste deEscala Hedônica (desgostei muitíssimo até gostei muitíssimo). Foram selecionadas preparações culinárias com derivados de leite de vaca, denominadas convencionais e com derivados de soja, denominadas modificadas(cinco doces e cinco salgadas). As preparações convencionais tiveram alteração na composição (retirada do leite de vaca, leite condensado, creme de leite e inclusão de extrato solúvel de soja, creme de soja e condensado de soja) e foram testadas no Laboratório de Técnica Dietética. O resultado da análise sensorial mostra que nenhuma preparação apresentou diferenças significativas (p>0,05) entre as convencionais e as modificadas. Isso mostra que a substituição dos derivados do leite de vaca pelos derivados da soja em preparações caseiras, sejam doces ou salgadas, pode vir a ser uma solução para crianças acometidas poralergias e/ou intolerância à lactose.

Soybean is considered a functional food because, in addition to its basic nutritional functions, it produces beneficial health effects and may replace “regular” milk (predominantly cow’s milk) in case when there are in tolerances and/or allergies. This study aimed to verify the acceptance of dishes prepared with cow’s milk and with water-soluble soybean extract. The sample was composed of 27 adults untrained to perform the sensory analysis using the Hedonic Scale Test (“I disliked it very much” to “I liked it very much”). Culinary preparations with dairy products, denominated “conventional”, and with soy products, denominated “modified”, were selected (five sweet ones and five savory ones). The conventional preparations had their composition altered (removal ofcow’s milk, condensed milk and cream, and the addition of water-soluble soybean extract, soy milk cream and condensed soy milk) and were tested in the Dietary Technique Laboratory. The result of the sensory analysis shows that no preparation presented significant differences (p>0.05) between the conventional and the modified ones. This demonstrates that replacing dairy products with soy products in home-made preparations, whether sweet or savory, may be a solution for children who are allergic to lactose and / or have intolerance to it.

La soja es considerada un alimento funcional porque, además de las funciones nutricionales básicas, produce efectos benéficos a la salud y puede sustituir la leche de vaca en caso de intolerancias y/o alergias. Este estudiotuvo como objetivo averiguar la aceptación de preparaciones elaboradas con leche de vaca y con extractosoluble de soja. La muestra fue compuesta por 27 adultos no entrenados para realizar el análisis sensorial, através del Test de Escala Hedónica (me disgustó muchísimo hasta me gustó muchísimo). Fueron seleccionadas preparaciones culinarias con derivados de leite de vaca, denominadas convencionales y con derivados de soja, denominadas modificadas (cinco dulces y cinco saladas). Las preparaciones convencionales tuvieron alteraciónen la composición (retirada de la leche de vaca, leche condensada, crema de leche e inclusión de extracto soluble de soja, crema de soja y condensado de soja) y fueron testadas en el Laboratorio de Técnica Dietética. El resultado del análisis sensorial muestra que ninguna preparación presentó diferencias significativas (p>0,05) entre las convencionales y las modificadas. Eso muestra que la sustitución de los derivados de la leche de vacapor los derivados de la soja en preparaciones caseras, sean dulces o saladas, puede venir a ser una soluciónpara niños acometidos por alergias e/o intolerancia a la lactosa.

Proteína de soya: alternativa no farmacológica para el tratamiento de niños con hipercolesterolemia / Soybean Protein: a non-pharmacological alternative for the treatment of children with hypercholesterolemia

El tratamiento de la hipercolesterolemia primaria (HCP) se basa en una dieta reducida en grasa saturada y en colesterol, con la cual se puede disminuir entre 10 y 20 por ciento del colesterol total (CT). La proteína de soya tiene el potencial de reducir el lCT, cuando sustituye parcial o totalmente a la proteína animal. El presente estudio reporta los resultados del efecto de una dieta baja en grasa saturada, colesterol y con proteína de soya, sobre el colesterol ligado a lipoproteína de baja densidad (LDL-C en niños costarricenses con HCP. En un ensayo clínico paralelo de asignación aleatoria, 20 niños, entre los 7 y 14 años de edad fueron asignados a uno de los dos tratamientos dietéticos según los criterios de inclusión -grupo experimental: dieta etapa 1 recomendada por el NCEP, más 25 gramos de proteína soya diarios y, -grupo control: dieta etapa 1 INCEP, sin proteína de soya. Despúes de un período de homogenización de diez días, se inició la intervención por ocho semanas. Tanto de niños de grupo experimental como los de grupos control, redujeron el colesterol total y el LDL-C (p<0,05). Sin embargo, a pesar que no hubo diferencias significativas entre los grupos, se notó una mayor reducción en el LDL-C del grupo experimental (10,5 por ciento vs 3,9 por ciento). Los que consumieron más de 20 gramos de proteína de soya diaria, tuvieron reducción en el LDL-C y un efecto negativo menor en el HDL-C.

Determinação dos componentes alergênicos da proteína isolada da soja / Determination of allergenic components of isolated soy protein

O objetivo deste trabalho foi esclarecer qual das frações protéicas da soja é mais alergênica, avaliando-se sua imunogenecidade e alergenicidade por imunoensaios e teste de anafilaxia cutânea passiva. Além desse propósito, este estudo visou a produção de anticorpos monoclonais para utiliz-lo como ferramenta na padronização de um ensaio imunoenzimático com a finalidade de detectar proteínas da soja, em produtos comercializados. A purificação das frações 2S, 7S e 11S da soja foi realizada com base em estudos prévios, padronizando-se a metodologia dentro das condições experimentais do laboratório. A constatação da pureza foi realizada por eletroforese em gel de poliacrilamida (gel de empilhamento a 5 porcento...

Fortificacion y evaluacion de tortillas de nixtamal / Fortification and evaluation of the nixtamal tortillas

The effect of the addition of vitamins and soy protein on the quality characteristics of nixtamal tortillas (TN) and the losses of nutrients during the nixtamalization process were evaluated. Vitamins (0.15 as is) and defatted soy (4 as is) were added to the tortillas without affecting their sensory characteristics. Higher values of those nutrients had a negative effect on the color and flavor of the product. During the production of the tortilla the corn lost approximately 1.5 of proteins. The nixtamal tortilla fortified with 4 of defatted soy (TNS) showed 3 higher protein content than the TN. The calcium content in the samples was 7.7, 114 and 212.5 mg/100 g for the corn, the TN and the TNS respectively. In the process of producing the nixtamal tortillas from corn 28.9 of the niacin, 46.3 of the folic acid, 36.3 of the thiamin and 80 of the riboflavin were lost. During the washing and rinsing of the nixtamal there were losses of 18.2 of the thiamin, 16.6 of the riboflavin and 20.7 of the folic acid. Although the niacin showed a 28.9 loss, the alkaline process caused an important release of that vitamin. The losses during the cooking of the tortillas were high especially for riboflavin which showed a total loss of 80 in comparison with the original corn. Of the total, 63 was lost during cooking and 16.6 was lost during washing of the nixtamal.

Avaliação biológica de soja com baixas atividades de inibidores de tripsina e ausência do inibidor Kunitz / Biological evaluation of soybean line with low trypsin inhibitor activities

The soybean cultivar BR 36 with conventional levels of trypsin inhibitors activity and the soybean line BRM95-5262, which was genetically selected to contain low activity of trypsin inhibitors were used for biological assays with rats. BR 36 and BRM95-5262 contained 40 and 20, and 30 and 20 of relative residual activity of trypsin inhibitors, respectively. The mean values of PER and NPR showed that treatments with crude soybeans were minor than treatments with soybean thermically processed. However, the treatments of thermically processed soybean did not showed significative differences (p > or = 0.05). When the trypsin inhibitors activity were 8.61 and 8.44 UIT/mg of samples or 20 and 30 of relative residual activity of cultivar BR 36 and line BRM95-5262, respectively, it was observed that mean values of PER and NPR were not significatives. The mean values of CDA and CDV of treatments with crude soybeans were minor than treatment with casein and similar to the treatments with soybean thermically processed. So, it can be concluded that the biological evaluation obtained with soybean protein were dependent of initial trypsin inhibitors activities and of its respective thermical treatment. There was advantage in the use of BRM95-5262 soybean line with low trypsin inhibitors activity.

Isolamento e caracterizaçäo de proteínas de soja com potencial alergênico / Isolation and characterization of soy proteins with allergens potential

A soja é um vegetal muito conhecido e utilizado como fonte de alimento para seres humanos e animais, com aproximadamente 50 por cento de proteínas da semente madura. Em algumas situações, as proteínas constituintes da soja podem se revelar como substâncias potencialmente alergênicas, resultando para pessoas e animais que a consomem, em efeitos deletérios. O isolamento, purificaçäo e caracterizaçäo das frações proteícas 2S, 7S e 11S säo conseguidas com o uso de métodos físico-químicos que conduzem a resultados reprodutíveis. A procura pelos derivados proteícos da soja sem os alérgenos potenciais, é hoje uma exigência mundial, pois muitos países compradores dos derivados da soja, exigem que ela seja...

Evaluation of different plant protein concentrates in rabbit feeds

A total number of 24 New Zealand white rabbits were used to evaluate seven plant protein concentrates through eight digestibility trials. These concentratrates were soybean meal [SBM], flaxmeal [FM], decorticated and undecorticated cotton seed meal [DCM], horse beans [HB], corn gluten meal [CGM], [UDCM], and sunflower seed meal [SFM]. The CGM, SBM, and DCM feedstuffs recorded the highest nutritive values followed by the FM and HB, while the UDCM and SFM showed the lowest values

Essential amino acids and antinutritional factors of soybean cotyledon as affected by optimum soaking and blanching time

Using previously optimized time of soaking [4.7hr] and blanching in 0.05% sodium bicarbonate [16min] soybean cotyledons were studied. The influences of these processes on chemical composition, amount of essential amino acids, chemical score [CS], essential amino acid index [EAAI] and some antinutritional factors [trypsin inhibitor, polyphenols, inositol phosphates] were determined. No important changes in most essential amino acids were observed between treated and untreated soybean cotyledons under optimum technological treatments except tryptophan and total sulfur amino acids [cystine + methionine] which were decreased by 34.82 and 19.94% after processing of soybean cotyledon, respectively. The essential amino acid index [EAAI] was reduced from 95.12 to 89.56%, being still satisfactory alter processing. Trypsin inhibitor was inactivated by 98.55%, total polyphenolic compounds were removed by 81.55%, and phytate content [myo-inositol hexaphosphate] was lowered by 19.01%