Establishing a stem cell culture laboratory for clinical trials

Adult stem/progenitor cells are found in different human tissues. An in vitro cell culture is needed for their isolation or for their expansion when they are not available in a sufficient quantity to regenerate damaged organs and tissues. The level of complexity of these new technologies requires adequate facilities, qualified personnel with experience in cell culture techniques, assessment of quality and clear protocols for cell production. The rules for the implementation of cell therapy centers involve national and international standards of good manufacturing practices. However, such standards are not uniform, reflecting the diversity of technical and scientific development. Here standards from the United States, the European Union and Brazil are analyzed. Moreover, practical solutions encountered for the implementation of a cell therapy center appropriate for the preparation and supply of cultured cells for clinical studies are described. Development stages involved the planning and preparation of the project, the construction of the facility, standardization of laboratory procedures and development of systems to prevent cross contamination. Combining the theoretical knowledge of research centers involved in the study of cells with the practical experience of blood therapy services that manage structures for cell transplantation is presented as the best potential for synergy to meet the demands to implement cell therapy centers.

Desempenho de testes sorológicos para sífilis, treponêmicos (ELISA) e não treponêmicos (VDRL e RPR), na triagem sorológica para doadores de sangue- confirmação dos resultados por meio de três testes treponêmicos (FTAABS, WB e TPHA) / Evaluation of serological tests for syphilis, treponemal (ELISA) and non-treponemal (VDRL and RPR), in blood donors serological screening: confirmation of results by three treponemal tests (FTAABS, WB and TPHA)

Este estudo constitui uma análise do desempenho do teste sorológico treponêmico ELISA Recombinante Wiener lab. e de seis testes não treponêmicos (Laborclin: VDRL Bras. RPR Bras e RPR TRUST: Wama: VDRL e RPR; Wiener:USR) na triagem sorológica de doadores de sangue. Os resultados repetidamente reagentes (RR) foram confirmados por meio de três testes treponêmicos: FTAabs (Wama), WB (in house) e TPHA (bioMérieux). Foram analisadas 2990 amostras de soro. O teste VDRL (USR), utilizado inicialmente na triagem sorológica, apresentou reatividade em 11 (0,4por cento) amostras, com títulos variando de 1/1 até 1/32. Nos demais testes não treponêmicos, observou-se reatividade em um número de amostras que variou de 4 a 14, num total de 20 (0,7por cento) amostras das 2990 analisadas. O teste treponêmico ELISA apresentou resultados RR em 42 (1,4por cento) das amostras analisadas, entre as quais 8 (0,3por cento) se mostraram reagentes a, pelo menos, um teste não treponêmico. Das 42 amostras RR pelo teste ELISA submetidas aos testes confirmatórios de FTA-abs, TPHA e WB, 9 (21,4por cento) foram negativas para os três testes, 8 (19,1por cento) foram positivas para WB e TPHA e negativas para o FTA-abs e 25 (59,5por cento) foram positivas para os três testes. A especificidade do teste ELISA atingiu 99,7por cento, considerando-se o WB e o TPHA como confirmatórios. As 12 amostras que apresentaram resultados não reagentes no teste ELISA, mas mostraram algum tipo de reatividade para os testes não treponêmicos, tiveram resultado negativo nos testes confirmatórios utilizados. Mesmo que o descarte de bolsas seja maior quando se utiliza teste treponêmico, essa conduta parece ser a mais segura na triagem sorológica de doadores de sangue.

Gemtuzumab Ozogamicina: uma opção no tratamento de Leucemia mielóide aguda CD33+ / Gemtuzumab Ozogamicin: an option in the treatment of acute myeloid leukemia CD33+

Gemtuzumab Ozogamicina (GO) é um derivado semi-sintético de caliqueamicina, um antibiótico citotóxico ligado a um anticorpo monoclonal direcionado contra antígeno CD33 presente nos mieloblastos leucêmicos. O objetivo deste trabalho é avaliar os efeitos colaterais, remissão e a sobrevida de 11 pacientes com leucemia mielóide aguda que utilizaram GO. A maior toxicidade foi atribuída à mielossupressão, a qual esteve presente em todos os pacientes. Um paciente foi a óbito devido a doença hepática veno-oclusiva. Quatro pacientes utilizaram a droga para tratamento de recaída e dois atingiram remissão parcial. Dois pacientes utilizaram a droga para tratamento de doença refratária e um atingiu remissão completa com 12 meses de sobrevida. GO foi utilizada para consolidação de cinco pacientes. Acreditamos que a droga é segura e pode ser uma opção para pacientes que não toleram os esquemas quimioterápicos tradicionais.

Gemtuzumab Ozogamicin consists of a semisynthetic derivate ofcalicheamicin, a cytotoxic antibiotic linked to a recombinantmonoclonal antibody directed against the CD33 antigen presenton leukemic myeloblasts. The aim of this report is to evaluate theside effects, remission and survival of 11 patients with acutemyeloid leukemia that took Gemtuzumab Ozogamicin. The majortoxicity was myelosuppression that was seen in all the patients.One patient died due to hepatic veno-occlusive disease. Fourpatients used the drug for relapse and two achieved partialremission. Two patients used the drug for refractory disease andone achieved complete remission with 12 months survival.Gemtuzumab Ozogamicin was also used for the consolidationtherapy of 5 patients. We believe that Gemtuzumab Ozogamicinis safe and is an alternative for patients that do not respond toconventional therapy.

A rare case of fatal hepatic veno-occlusive disease and rupture of the spleen vein and artery after Gemtuzumab Ozogamicin (Mylotarg®) infusion

Gemtuzumab Ozogamicin (Mylotarg®) targets leukemia cells expressing the CD 33 receptor by means of a monoclonal antibody conjugated to a cytotoxic agent, calicheamicin. It was approved for use in elderly patients with relapsed or refractory acute myeloid leukemia and reversible hepatotoxicity is common after administration. The first case of hepatic veno-occlusive disease was reported after Gemtuzumab Ozogamicin infusion in a patient who had been submitted to hematopoietic stem cell transplantation 8 months earlier. Three phase 2 studies with 188 patients with acute myeloid leukemia in first relapse that used Gemtuzumab Ozogamicin were analysed and the incidence of fatal hepatic veno-occlusive disease in these studies was < 1 percent, and prior hematopoietic stem cell transplantation was the most significant risk factor. The aim of this paper is to report a rare fatal case of hepatic veno-occlusive disease with rupture of the spleen vein and artery in a 68-year-old patient that had received Gemtuzumab Ozogamicin. To the best of our knowledge, it is the first case report of hepatic veno-occlusive disease with rupture of the spleen vein and artery related to Gemtuzumab Ozogamicin.

Gentuzumab Ozogamicina (GO) (Mylotarg®) tem como alvocélulas leucêmicas que expressam CD33 através de um anticorpomonoclonal conjugado a um agente citotóxico, a caliqueamicina.Esta droga foi aprovada para uso em pacientes idosos comleucemia mielóide aguda (LMA) recaída ou refratária ehepatotoxicidade é comum após sua administração. Tack e colaboradoresapresentaram o primeiro caso de doença hepáticaveno-oclusiva (DHVO) após infusão de GO em um paciente quetinha realizado transplante de medula( TMO) há 8 meses. Trêsestudos de fase II com 188 pacientes com LMA foram analisadose a incidência de HVOD fatal foi inferior a 1%, sendo arealização de TMO o fator de risco mais importante. O objetivodeste artigo é relatar um caso raro de DHVO fatal com rupturade veia e artéria hepática em um paciente de 68 anos que recebeuGO. Acreditamos que este é o primeiro relato de HVODcom ruptura de vasos hepáticos relacionado ao uso de GO.