Pesquisa de anticorpos anti-endomísio no laboratório de imunopatologia da UFPR: dez anos de experiência na triagem de doença celíaca em pacientes, grupos de risco e populações / Antiendomysium antibodies evaluation in the laboratory of immunopathology of the UFPR: ten years of experience in the screening of celiac disease in patients, groups ato risk and in the general population

O laboratório de imunopatologia do Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná, através da pesquisa do anticorpo anti-endomísio (EmA-IgA), tem contribuído ao longo dos últimos dez anos com a triagem e diagnóstico diferencial da doença celíaca (DC) em pacientes, grupos de risco e populações do sul do Brasil. No presente estudo, tem-se uma síntese das investigações mais relevantes que foram realizadas e que possibilitaram diagnóstico da doença e no monitoramento da dieta isenta de glúten, assim como sua correlação com os anticorpos anti-transgluta-minase e o grau de lesão na mucosa intestinal. O EmA-IgA tem sido avaliado por imunofluorescência indireta, utilizando cordão umbilical humano como substrato, e conjugado fluorescente anti-IgA. O compilamento de dados dos estudos com familiares de celíacos (n=200), pacientes com síndrome de Down (n=150), diabetes mellitus (n=104), cardiomiopatias (n=74), artrite reumatóide (n=85), doadores de banco de sangue (n=2000) e indivíduos da população sadia (n=180), permitiu demonstrar significativa diferença na freqüência do EmA-IgA no grupo de familiares (p<0,001), pacientes síndrome de Down (p=0.0024) e diabetes mellitus (p<0.001), em relação à população sadia. Os dados obtidos nos últimos dez anos de pesquisa nessa área indicam os familiares de celíacos como ogrupo de maior risco ao desenvolvimento da doença, e ressaltam a importância de screenings periódicos para DC em pacientes com doenças autoimunes e/ou outras afecções.

Genetic variability of hepatitis A virus strain HAF-203 isolated in Brazil and expression of the VP1 gene in Escherichia coli

The hepatitis A virus (HAV) HAF-203 strain was isolated from an acute case of HAV infection. The primary isolation of HAF-203 in Brazil and its adaptation to the FRhK-4 cell lineage allowed the production of large amounts of viral particles enabling molecular characterization of the first HAV isolate in Brazil. The aim of our study was to determine the nucleotide sequence of the HAF-203 strain genome, compare it to other HAV genomes and highlight its genetic variability. The complete nucleotide sequence of the HAF-203 strain (7472 nucleotides) was compared to those obtained earlier by others for other HAV isolates. These analyses revealed 19 HAF-specific nucleotide sequence differences with 10 amino acid substitutions. Most of the non-conservative changes were located at VP1, 2C, and 3D genes, but the 3B region was the most variable. The availability of HAF-203 complementary DNA was useful for the production of the recombinant VP1 protein, which is a major determinant of viral infectivity. This recombinant protein was shown by enzyme-linked immunoassay and blotting, to be immunogenic and resemble the native protein, therefore suggesting its value as a reagent for incorporation into diagnostic tests.

In situ hybridization of hepatitis C virus RNA in liver cells of an experimentally infected rhesus macaque

The liver tissue of a rhesus macaque inoculated with hepatitis C virus (HCV) has been analyzed for the presence of HCV RNA using the technique of in situ hybridization, both at light and electron microscopy levels. The animal was inoculated by the intrasplenic route using a HCV infected autogenic hepatocyte transplant. The serum sample used to infect the hepatocyte cells was characterized by polymerase chain reaction technique and shown to be positive for HCV RNA, genotype 3 with 10(7) RNA copies/ml. In situ hybridization was performed using a complementary negative strand probe made with the specific primer. We were able to detect and localize viral RNA in altered membranes of the rough endoplasmic reticulum of infected liver cells, showing evidence of virus replication in vivo.

Ocorrência de hepatites näo-A näo-B em unidade de hemodiálise / Occurrence of non-A non-B hepatitis in hemodyalisis unit

A monitorizaçäo mensal de alanina aminotransferase (ALT) sérica de pacientes em hemodiálise e os testes sorológicos para exclusöes de infecçöes por vírus da hepatite A (HAV), vírus da hepatie B (HBV), citomegalovirus (CMV) e vírus Epstein-Barr (EBV), permitiu-nos identificar 11 casos de hepatites näo-B em 111 indivíduos avaliados durante o período de 12 meses e acompanhados por 2 anos. Foram observados 3 padröes de atividade de ALT: elevaçäo em pico monofásico em 2, bifásico ou polifásico em 6 e em platô em 3 pacientes. Individuos com padräo monofásico exibiram os níveis amis elevados de ALT. Cinco pacientes apresentaram normalizaçäo bioquímica persistente 4,8 meses em média após o início da elevaçäo aguda e seis evoluíram com ascensäo crônica de ALT durante o período de estudo. A hepatite näo-A, näo-B foi, predominantemente, assintomática e anictérica, sempre antecedida por transfusöes sangüíneas e com maior incidência nos seis primeiros meses de terapia dialítica dos pacientes