RESUMEN
A imunoprofilaxia permanece como uma importante ferramenta para o controle da pandemia tuberculosa. Neste contexto, assume especial importância o estudo de marcadores que possam ser correlacionados à proteção contra a doença, tornando mais viável em termos de custo-benefício a avaliação de novas vacinas e imunoterápicos. A detecção de mediadores solúveis implicados na resposta contra a micobactéria pode revelar potenciais marcadores de proteção, além de constituir um método suficientemente simples para aplicação em grandes grupos populacionais. Escolheu-se avaliar a modulação de mediadores solúveis em duas situações-modelo identificadas com o desenvolvimento de uma resposta eficaz contra o bacilo na infecção humana: a tuberculose pleural, por ser uma forma que apresenta regressão espontânea dos sintomas, e a vacinação com o bacilo de Calmette-Guérin (BCG), que pode ser relacionada a altos índices de proteção pelo menos contra as formas mais graves da doença. Partindo dos pressupostos de que (1) os mecanismos de contenção do bacilo estimulados nestas duas situações estarão também implicados na resposta à infecção primária e (2) mediadores que apresentem uma variação significativa em ambos os estudos poderão ser úteis para estimar a eficácia de novas estratégias vacinais, nós avaliamos a evolução do perfil de mediadores solúveis nestes dois modelos de proteção contra o M. tuberculosis. Nos dois estudos foi possível identificar correlações entre os níveis de citocinas do tipo Th1. Em pacientes com tuberculose pleural, níveis diminuídos de IFN-y e TNF-a foram associados à regressão espontânea dos sintomas e à resolução da reação granulomatosa, sugerindo um papel da modulação negativa da resposta anti-micobacteriana na proteção contra a doença. Também foi evidenciada nos dois estudos a correlação entre os níveis de TNF-a e IL-10, sugerindo um papel para a IL-10 na modulação da resposta imune celular e provavelmente na limitação do dano tecidual associado a esta resposta. O trabalho reforça a aplicabilidade da investigação de mediadores solúveis para a estimativa da eficácia de novas estratégias vacinais, apontando como candidatos de interesse as citocinas IFN-y, TNF-a e IL-10, mediadores implicados em nossos estudos na proteção contra a infecção pelo M. tuberculosis.
Asunto(s)
Vacuna BCG , Citocinas , Linfocinas , Tuberculosis , Tuberculosis PleuralRESUMEN
Lectinas são proteínas de origem não imune que reconhecem de forma específica resíduos de carboidrato. A sua ligação a receptores na superficie celular geralmente tem efeito estimulatório, e em alguns sistemas, tanto in vitro como in vivo, a estimulação intensa promovida por estas moléculas está associada à apoptose. Neste trabalho avaliou-se a capacidade estimulatória in vivo de três lectinas brasileiras da subtribo Diocleinae, extraídas de Canavalia brasiliensis (ConBr), Dioclea violacea (DVioL) e Dioclea grandiflora (DGL), com elevada capacidade estimulatória in vitro sobre linfócitos humanos. Camundongos BALB/c com 8-1 5 semanas foram injetados subcutaneamente no coxim da pata posterior esquerda com ConBr, DGL ou DVioL em salina tamponada com fosfato (PBS). Como controle a pata contralateral foi injetada com a salina. Os linfonodos poplíteos dos animais foram excisados após 1 5 h e analisados segundo diversos parâmetros. O número de células presentes nos linfonodos estimulados foi significativamente maior do que nos linfonodos não estimulados. As lectinas promoveram aumento significativo na capacidade proliferativa espontânea ex vivo das células do linfonodo. avaliada através de cultivo por 24 h. Houve aumento significativo também na expressão de receptor para interleucina 2, um marcador que reflete ativação de células T. A histologia evidenciou grande expansão das áreas T, que nos linfonodos estimulados apresenta numerosos linfoblastos e figuras de apoptose (confirmadas por microscopia eletrônica). A imunohistoquímica para o PCNA, um antígeno nuclear cuja expressão está relacionada ao processo de divisão celular, revelou grande número de células em proliferação também nas áreas T. A distribuição dos focos de apoptose foi visualizada através da técnica de TUNEL. Os focos apresentaram-se menos numerosos e restritos à região subcapsular nos linfonodos estimulados com C onBr. em quantidade intermediária e distribuídos pela região subcapsular nos linfonodos estimulados com DGL e mais abundantes e melhor distribuídos nos linfonodos injetados com DVioL. Os linfonodos estimulados apresentaram ainda infiltrado inflamatório de intensidade maior nos linfonodos estimulados com DVioL, intermediária nos estimulados com DGL e de menor intensidade naqueles estimulados com ConBr. Esta inflamação estava frequentemente associada à necrose de vênulas do endotélio alto nos linfonodos estimulados com DVioL; ocasionalmente este fenômeno foi observado também por estimulação com DGL. [ Os dados sugerem a.ocorrência de um espectro de respostas (compreendendo intensa proliferação celular, o acúmulo de células ativadas e o desencadeamento de apoptose, associados ao progressivo depósito destas moléculas nos linfonodos), cuja cinética de desenvolvimento difere ligeiramente entre as lectinas estudadas.