Comparison of dot-ELISA and standard ELISA for detection of Neisseria meningitidis outer membrane complex-specific antibodies

Dot-ELISA using the outer membrane complex antigens of Neisseria meningitidis as a target was standardized for rapid detection of meningococcal-specific antibodies in human serum. We investigated the level of meningococcal-specific IgG, IgA, and IgM in serum using dot-ELISA with outer membrane antigens prepared from Neisseria meningitidis serotype B:4.19:P1.15,3,7,9 (a strain isolated from a Brazilian epidemic). The dot-ELISA is based on the same principles as the standard ELISA and is useful for detection of anti-N. meningitidis B antibodies in serum of patients with meningococcal infections. For the assay, outer membrane complexes (OMCs) were absorbed by nitrocellulose membrane and blocked with a 5 percent skim milk solution. Serum samples were drawn upon hospital admission and during convalescence from patients with meningococcal septicemia, and single samples were drawn from uninfected controls. We retrospectively examined a total of 57 serum samples: 35 from patients infected with N. meningitidis B, 12 from patients infected with Haemophilus influenzae b, and 10 from health individuals. When performed at room temperature, dot-ELISA took approximately four hours to perform, and the optimum antigen concentration was 0.42 µg per dot. The specificity of IgG, IgM, and IgA demonstrates that dot-ELISA using OMCs from N. meningitidis B as a target is suitable for serologic verification of clinically suspected meningococcal disease in patients and for titer determination of antibodies produced during different phases of natural infection. Furthermore, the sensitivity of dot-ELISA was comparable to that of standard ELISA. Overall, dot-ELISA is simple to perform, rapid, and low cost. Further validation of the test as a screening tool is required.

Immunogenicity of a combined DTPa-HB vaccine co-administered with Haemophilus influenzae type B conjugate vaccine (PRP-T) for primary and booster vaccinations

OBJECTIVE: To evaluate the immunogenicity of a combined DTPa-HB vaccine co-administered with Haemophilus influenzae type b conjugate vaccine (PRP-T) in Brazilian infants. MATERIAL AND METHODS: A prospective and open clinical study, in which 110 infants were immunized with a three-dose primary vaccination regime at two, four and six months of age and with a single booster vaccination. Blood samples were drawn immediately before the first dose, one month after the third dose, at the time of the booster dose and one month after the booster to assess seropositivity and antibody geometric mean titers (GMTs) of antibodies for diphtheria, tetanus, hepatitis B, Haemophilus influenzae type b and for the three pertussis antigens: Pertussis Toxin (PT), Filamentous Hemagglutinin (FHA) and Pertactin (PRN). RESULTS: Among the original 110 infants, 93 completed the study. Seropositivity was 100 percent for all seven involved antibodies, after the primary vaccination course. At the time of the booster dose, all antibodies (except diphtheria 33.7 percent and anti-PT 59 percent) were seropositive for more than 94 percent of subjects. After the booster, seropositivity increased to 100 percent for all antibodies. The GMT of these antibodies followed a similar pattern, with a strong increase after the primary course, followed by a second increase after the booster dose. At this time, GMT was2- to 7-fold higher than after the primary course, for all vaccine components. CONCLUSIONS: Concomitant administration of DTPa-HB and Hib vaccines elicited strong seroprotection for all the antigenic components. No interference with antibody response was evident. The vaccines provided high immunogenicity, following both the primary vaccinations and the booster dose.

Clinical presentation and follow up of children with congenital toxoplasmosis in Brazil

We evaluated the clinical presentation and determined the ocular and neurologic sequelae in children with congenital toxoplasmosis in Brazil, taking into consideration the shortage of national publications on this disease. Follow-up evaluations were made of 43 children with congenital toxoplasmosis referred to Santa Casa de São Paulo, during a period of at least five years. Selection of the cases was based in clinical and laboratory criteria. A clear predominance of children with subclinical presentation of the disease at birth (88 percent) was found. Of the 43 children, 22 (51 percent) developed neurological manifestations. Using skull radiography, we detected neuroradiologic alterations in seven children (16 percent) and with tomography in 33 children (77 percent). Neurological sequelae were identified in 15 children (54 percent) in the group with cerebral calcifications and in 7 (47 percent) in the group without cerebral calcifications. We observed chorioretinitis in 95 percent of the cases. Reactivation of cicatricial lesions and the emergence of new ocular lesions were observed in five cases. The most frequent neurological manifestation was a delay in neuropsychomotor development. Most remarkable was the finding that cerebral calcifications were not associated with a higher incidence of neurological sequelae among the children. Chorioretinitis was the main ocular sequel of the infection, found in nearly all children; it can manifest years from birth, even in children submitted to specific therapy during the first year of life, highligh.ting the importance of a follow-up of these children

S. pneumoniae isolados da nasofaringe de crianças sadias e com pneumonia: taxa de colonização e suscetibilidade aos antimicrobianos / Nasopharyngeal isolates of S. pneumoniae from healthy carriers and children with pneumonia: colonization rates and antimicrobial susceptibility

Objetivos: comparar as taxas de colonizaçäo e a resistência antimicrobiana de pneumococos em nasofaringe de crianças sadias e com pneumonia. Métodos: estudo de tipo transversal. As crianças sadias foram recrutadas em centros de vacinaçäo (CV) e creches públicas (CP), selecionados aleatoriamente, e aquelas com pneumonia em emergências pediátricas. Foram utilizados swabs flexíveis de alginato para a colheita do material de nasofaringe. O isolamento e a identificaçäo dos pneumococos seguiram procedimentos padronizados. As concentraçöes inibitórias mínimas (CIM) foram determinadas por microdiluiçäo em placas. Resultados: foram estudadas 911 crianças, 429 sadias (60 por cento portadoras de pneumococo, sendo 72 por cento destas recrutadas em CP e 49 por cento em CV) e 482 com pneumonia (50 por cento de portadoras) (p=0,002). De 441 isolados com CIM determinadas, 198 (45 por cento) apresentavam resistência intermediária, e 16 (4 por cento) apresentavam resistência plena à penicilina. As taxas de resistência dos pneumococos isolados de portadores sadios e com pneumonia, respectivamente, foram: penicilina 48 por cento (CV 37 por cento e CP 55 por cento) e 50 por cento (p>0,05); eritromicina: 28 por cento e 19 por cento (p=0,05); cotrimoxazol 81 por cento e 76 por cento (p>0,05); cloranfenicol 6 por cento e 7 por cento (p>0,05), rifampicina 5 por cento e 3 por cento (p>0,05), ceftriaxone 2 e 4 por cento (p>0,05) e vancomicina 0 por cento, para ambos grupos. Foi constatada associaçäo entre as resistências do pneumococo à penicilina, eritromicina e ao cotrimoxazol. Conclusöes: a taxa de portador de pneumococos foi maior em crianças sadias do que naquelas com pneumonia. As resistências dos pneumococos à penicilina e ao cotrimoxazol foram elevadas, sobretudo entre os usuários de creches públicas

Estudo multicêntrico aberto do uso de cefprozil no tratamento de sinusite aguda em pediatria / An open multicenter study of the use of cefprozil for the treatment of acute sinusitis in children

O cefprozil é uma nova cefalosporina oral de segunda geraçäo, ativa contra os principais patógenos responsáveis pela sinusite aguda, como o Streptococcus pneumoniae, inclusive cepas com resistência intermediária à penicilina, e o Haemophilus influenzae, incluindo os produtores de ß-lactamases. No presente estudo, os autores avaliaram a eficácia e tolerabilidade do cefprozil no tratamento de 131 crianças com idade entre seis meses e 12 anos, portadoras de sinusite aguda. Em um estudo aberto multicêntrico, o diagnóstico clínico foi baseado em critérios pré-estabelecidos da história clínica, exame físico e radiológico. O cefprozil foi prescrito por dez dias (30 mg/kg/dia em duas tomadas), e os pacientes foram reavaliados nos dias 4-6 e 10-15 após o início do tratamento. Os resultados mostraram que a sintomatologia rapidamente regrediu na maioria dos casos. O índice de cura ou melhora foi de 97,72 por cento, com resoluçäo total dos sintomas em 78,59 por cento dos casos. Os efeitos adversos foram referidos em 4,6 por cento dos pacientes, limitando-se a distúrbios gastrointestinais leves ou moderados (náuseas, diarréia e vômitos). Nenhum caso de reaçäo adversa séria foi relatado

Soroconversäo da vacina tríplice viral em crianças de 9 e 15 meses de idade / Soroconversion of the MMR vaccine in childrens at 9 and 15 month

A resposta sorológica à vacina tríplice viral foi avaliada em 109 crianças de nove meses de idade, sem história prévia de vacinaçäo contra sarampo, e em 98 crianças de 15 meses de idade, que comprovadamente receberam a vacina monovalente contra o sarampo aos nove meses. A vacina trivalente utilizada continha as seguintes cepas de vírus do sarampo, cepa Urabe Am9 de vírus da caxumba e cepa Wistar RA 27/3 de vírus da rubéola. Um número significantemente maior de crianças do grupo de 15 meses de idade apresentava anticorpos pré-vacinais contra sarampo e caxumba. As taxas de soroconversäo para o sarampo, caxumba e rubéola foram elevadas em ambos os grupos, nä havendo diferenças estatisticamente significantes entre os mesmos. Os títulos de anticorpos pós-vacinais contra a rubéola foram significantemente mais elevados no grupo de crianças de 15 meses de idade. Nenhum evento adverso sério imputável à vacinaçäo foi ibservado.

Prevalência de Haemophilus influenzae resistentes a ampicilina, cefaclor, cefotaxime, cloranfenicol e cotrimoxazol isolados de laboratórios na cidade de Säo Paulo / Prevalence of Haemophilus influenzae resistant to ampicillin, cefaclor, cefotaxime, chloramphenicol and cotrimoxazol isolated from laboratories in the city of Säo Paulo, Brazil

Objetivo: Determinar a resistência à ampicilina e outros antimicrobianos de amostras de H. influenzae isoladas de diferentes materiais clínicos. Métodos; As amostras de H. influenzae foram identificadas por cultura com fatores V e X e prova do ácido amino-levulínico. A produçäo de ß-lactamase (ßLac) foi detectada pela nitrocefina. A sensibilidade aos antimicrobianos foi testada por difusäo do disco e diluiçäo em meio sólido. O sorotipo b foi testado por coaglutinaçäo. Resultados: De 245 H. influenzae identificados, 155 foram testados para o sorotipo b e 28 por cento (43/155) mostraram-se positivos...

Viragem sorológica após a vacinaçäo contra o sarampo, realizada em crianças eutróficas e desnutridas, aos nove meses de idade / Comparison of seroconversion rates between well-nourished and malnourished children after measles immunization at nine months of age

O trabalho foi realizado no município do Embú, no Estado de Säo Paulo, no período de outubro de 1979 até junho de 1990. O objetivo foi estudar a viragem sorológica após a vacinaçäo contra o sarampo realizada aos nove meses de idade. Foram comparados dois grupos de crianças nessa faixa etária. O grupo I é composto por crianças eutróficas, e o grupo II por crianças desnutridas. O critério de Gomes foi utilizado para a avaliaçäo do estado nutricional. A dosagem de anticorpos (AC) foi realizada através dos métodos de Inibiçäo de Hemaglutinaçäo (IH) e ELISA. A sensibilidade desses dois métodos laboratoriais também foi comparada. De 130 crianças estudadas, 80 puderam ser avaliadas. Destas, 56 (70 por cento) pertenciam ao grupo I e 24 (30 por cento) ao grupo II. Utilizando-se o método de ELISA, foi encontrado um percentual de soroconversäo significativamente maior (P<0,05 ou 5 por cento) nas crianças do grupo II. Essa diferença näo foi detectada quando utilizamos o método de IH.

BCG-teste em crianças sadias previamente vacinadas com a BCG Moreaux-Rio de Janeiro / BCG teste reaction in previously BCG Moreaux-Rio de Janeiro-vaccinated healthy children

Em outubro de 1990 e dezembro de 1992, foi aplicada a vacina BCG-id em 113 crianças, com idade entre dois e 11 anos incompletos. Destas, foram selecionadas 91 consideradas sadias e sem desnutriçäo para aferiçäo e análise do tamanho do maior diâmetro de enduraçäo produzido após 48 horas. A observaçäo do tipo de distribuiçäo do tamanho da reaçäo cutânea ao BCG assemelhou-se a uma curva unimodal, variando de três a 17 milímetros, com uma mediana próxima de seis milímetros. Demonstrou-se uma tendência de o tamanho da reaçäo mostrar-se menor quanto maior o tempo decorrido entre a primovacinaçäo com BCG e a aplicaçäo do teste. Os resultados mostram uma porcentagem considerável de falsos-positivos, se tomado o valor de dez milímetros como ponto de corte entre os previamente vacinados, com melhora da especificidade, se considerado o mesmo em quinze milímetros

Cefixima - Seu emprego no tratamento de pneumonias comunitárias / Cefixime in the treatment of community-acquired pneumonias

Objetivo - Avaliar a eficácia e a tolerabilidade de cefixima no tratamento de pneumonias bacterianas de origem comunitária. Métodos - Administraçåo de cefixima a 30 pacientes pediátricos na dose de 8 mg/kg de 24/24 horas por 10 dias. Avaliaçåo da eficácia pelos exames clínico, laboratorial e radiológico. Determinaçåo do agente pela detecçåo na urina de antígenos de Streptococcus pneumoniae e Haemophilus influenzae tipo b pelos testes de aglutinaçåo do látex e Dot-ELISA. Resultados - Vinte e nove pacientes ficaram curados ao final do tratamento. Dezoito pacientes foram positivos para Streptococcus pneumoniae e 3 para Haemophilus influenzae tipo b. Nåo foram referidos efeitos colaterais. ConclusÆes - Cefixima mostrou-se uma droga eficaz e bem tolerada no tratamento de pneumonias bacterianas de origem comunitária em pacientes pediátricos