A model for preservation of thymocyte-depleted thymus

DiGeorge syndrome is a disorder caused by a microdeletion on the long arm of chromosome 22. Approximately 1% of patients diagnosed with DiGeorge syndrome may have an absence of a functional thymus, which characterizes the complete form of the syndrome. These patients require urgent treatment to reconstitute T cell immunity. Thymus transplantation is a promising investigational procedure for reconstitution of thymic function in infants with congenital athymia. Here, we demonstrate a possible optimization of the preparation of thymus slices for transplantation through prior depletion of thymocytes and leukocyte cell lineages followed by cryopreservation with cryoprotective media (5% dextran FP 40, 5% Me2SO, and 5% FBS) while preserving tissue architecture. Thymus fragments were stored in liquid nitrogen at -196°C for 30 days or one year. The tissue architecture of the fragments was preserved, including the distinction between medullary thymic epithelial cells (TECs), cortical TECs, and Hassall bodies. Moreover, depleted thymus fragments cryopreserved for one year were recolonized by intrathymic injections of 3×106 thymocytes per mL, demonstrating the capability of these fragments to support T cell development. Thus, this technique opens up the possibility of freezing and storing large volumes of thymus tissue for immediate transplantation into patients with DiGeorge syndrome or atypical (Omenn-like) phenotype.

Fluorometría; un método rápido y sencillo para evaluar la Actividad Antipalúdica / Fluorometers; a rapid and simple method for evaluating the Antimalarial Activity

La Malaria es una enfermedad que oscila entre 250 y 300 millones de casos y aproximadamente dos millones de muertes anualmente1. Esta enfermedades causada por cuatro especies de Plasmodium (P.falciparum, P. vivax, P.ovale y P. malariae) que son transmitidas a los humanos por picadura de las hembras del mosquito Anopheles. El aumento de la resistencia del parásito al tratamiento con agentes antimaláricos conocidos como la cloroquina se convierte en uno de los aspectos responsables del crecimiento de esta enfermedad. Además de este problema también se cuenta con la resistencia delvector a los insecticidas y la limitación de una potencial vacuna antimalárica, todo esto contribuye a la necesidad urgente de encontrar nuevos agentes para el tratamiento de la malaria, en particular agentes efectivos contra P. falciparum, que es la responsable de la forma más severa de malaria.

Establecimiento de células en suspensión de Stevia rebaudiana Bertoni / Establishhment of cells in suspension of stevia rebaudiana Bertoni

Stevia rebaudiana B., es un arbusto de origen paraguayo que posee en sus hojas, glucósidos diterpenos conocidos comúnmente como steviosidos totales (Molinas, S. 1989).. Es empleada comoedulcorante natural de alta potencia, (± 300 veces más dulce que el azúcar), termoestable, hipoglisemiante, no produce caries, es hipotensiva, no calórica, inocua para la salud y con actividad antimicrobiana contraalgunos microorganismos.

Establecimiento de las condiciones para la producción de Biogas a partir de ácidos grasos volátiles obtenidos de la Hidrólisis anaeróbica de la papa (Solanum tuberosum) a nivel de laboratorio / Establishment of the conditions for the production of biogas based on obtained volatile fatty acids of the anaerobic Hydrolysis of the potato (Solanum tuberosum) at the level of laboratory

En este trabajo se ha estudiado las condicionesnecesarias para la producción de Biogas utilizando como fuente de carbono los Ácidos Grasos Volátiles, los cuales son obtenidos de la hidrólisis anaeróbica de la papa. Se han establecido Cultivos Batch metanogénicos y se ha determinado la influencia de los AGVs en la cinética de producción de Metano. De esta manera se observ que el Cultivo que tenía 11,68mg/ml de AGVs Totales tuvo una producción de 6,9% de Metano y 3,6% de Dióxido de Carbono, a los 45 días de haberse establecido el cultivo.Posteriormente, se estableci el cultivo continuo, en el cual la producción de biogás empez a los 11 días deestablecerse el cultivo, se obtuvo 1200 ml de Gas donde el 6,9% era Metano y 3,7% era Dióxido de carbono. La composición de gases fue medida con el detector portátil G3.16k – LT 1522 LMSx.

Estudio biodirigidos de Solanum argentinum sobre plasmodium falciparum / I study biodirigidos of Solanum argentinum it has more than enough plasmodium falciparum

El presente trabajo es parte del proyecto "Flora Regional como fuente de fármacos antiparasitarios, antifúngicos y anticancerígenos" financiado por la Organización de Estados Americanos (OEA) que se ejecuta en el Instituto de Investigaciones Farmaco Bioquímicas, desde el año 2001. Los principios activos de las partes aéreas de la planta Solanum argentinum, fueron extraídos medianate maceración alchohólica (70 por ciento) y parcialmente purificados por Cromatografia líquida al vació, obteniéndose 9 fracciones con valores de IC50 (concentración inhibitoria del 50 por ciento aceptables (11<10 ug/ml), en la inhibición sobre la maduración de los esquizontes (prueba in vitro). Los valores de IC50 en el Test de Inhibición de la Biomineralización de la Ferriprotoporfirina IX (FBIT), como indicadores de su posible mecanismo de acción también fueron hallados con resultados aceptables (<10mg/ml). Las fracciones activas contra esquizontes se subfraccionaron por cromatografía en columna donde se obtubieron 5 subfracciones activas F3-7, F4-10, F4-12, F5-17 y F5-18.

Actividad Leishmanicida y tripanocida de algunas plantas reportadas como medicinales en Colombia / Activity Leishmanicida and tripanocida of some plants reported as medicinal in Colombia

Ocho extractos crudos y dos fracciones de alcaloides obtenidos de siete especies vegetales provenientes de la flora colombiana, (abuta grandifolia, Piper holtonii, Acnistus arborescens, Croton leptostachys, Piper cumanense, Acacia farnesiana y Xilopia aromática) fueron evaluadas in vitro frente a tres especies de Leishmania danovanni y Leismania braziliensis y epimastigotes de Trypanosoma cruzi (tulahuen); dos de estas epecies (Acnistus arborescens y Piper cumanense) mostraron alta actividad en los ensayos realizados con valores de concentración inhibitoria 50 (CL50) menores de 12,5 ug/mL; cercanos a los obtenidos con el fármaco de referencia pentamidina 10 ug/mL.

Actividad antipalúdica de plantas procedentes de la Amazonía peruana / Activity antipalúdica of plants coming from the Peruvian Amazonía

El presente trabajo fue realizado con el objetivo de plantear la búsqueda de nuevos agentes antipalúdicos de origen natural a través de pruebas biológicas. Para la realización del mismo se utilizaron extractos crudos de plantas recolectadas en la Amazonia peruana. La evaluacion fue realizada por un método directo que es el modelo in vitro, en cultivo de Plasmodium falciparum F32 sensible a la Cloroquina y por un modelo indirecto que es el ensayo de la inhibición de la Biomineralización de la Ferriprotoporfina IX (FBIT). Los resultados obtenidos nos permiten clasificar a 7 extractos como activos en la prueba de Evaluación de la Actividad Antipalúdica por el método directo in vitro, y 14 por el método indirecto (FBIT), de todos estos solo a 4 presentan actividad por ambos métodos por lo que podemos afirmar que su mecanismo de acción es similar al de la Cloroquina, y los 3 restantes son los que mas interesan pues su mecanismo de acción es diferente al de la Cloroquina, y pordría ser de gran beneficio en cepas resistentes a esta droga. Todos estos extractos se encuentran actualmente en un proceso de purificación para una nueva evaluación a través de estudios químicos y biológicos.

Estudio de especies vegetales Bolivianas con actividad Antimalarica / Study of Bolivian vegetal species with antimalarica activity

El presente trabajo forma parte del proyecto financiado por la OEA "Aprovechamiento de la Flora Regional de Bolivia como Fuente de Farmacos Contra Parasitos y Cancer" realizado en el Instituto de Investigaciones Farmaco Bioquimicas de la Facultad de Ciencias Farmaceuticas y Bioquimicas (UMSA). Se obtuvieron 36 extractos crudos de especies medicinalesde la etnia Guarani, las que fueron evaluadas a traves del test de inhibicion de la biomineralizacion de la ferro-protoporfirina-IXFBIT, metodos in vitro (no directo), utilizando para la deteccion y evaluacion de la actividad antimalarica. Los resultados dela actividad antimalarica se reportaron de acuerdo al valor de las IC50 (concentracion inhibidora del 50 porciento de la biominerilizacion de la FP-IX, el 64.8 porciento de los extractos resultaron ser activos

Aislamiento y caracterización de los principios antifúngicos y leishmanicidas del Matico-Piper elongatum Vahl / Insulation and characterization of the principles antifungicos and leishmanicidad of the matico-piper slongatiun vahl

El presente trabajo ha formado parte del proyecto IFS Grant F/265-1. El extracto de diclorometano de hojas de Piper elongatum Vahl fue evaluado in vitro por su actividad antifúngica contra Neurospora crassa yantiparasitaria contra Leishmania braziliensis, L. donovanti, L. amazonensis. Se han aislado y caracterizado seis compuestos: los inactivos identificado como B sitosterol y asarona y los biológicamente activos identificados como: el ácido 3-(3', 7' -dimetil-3', 6'-octadienil)-4-metoxi-benzoico 2', 4', 6' -trihidroxidihidrochalcona, 2', 6', 4-trihidroxi-4'-metoxi-dihidro-chalcona y un metabolito no evaluado identificado como el ácido 3-(3', 7'-dimetil-3', 6'-octadienil) -4-hidroxi-benzoico. El derivado metoxilado del ácido benzoico presentó actividad contra N. crassa y moderada actividad contra los parásitos de Leishmania, las dihidrochalconas presentaron una marcada actividad contra los parásitos de Leishmania y una marcada relación de estructura-actividad contra el moho. Las estructuras fueron establecidas sobre la base de sus datos espectroscópicos de UV, IR, RMN de 1H y 13C y espectrometría de masas

Perfil antimicrobiano de fermentos producidos por microorganismos aislados de tierra de distintas regiones de Bolivia / Profile ant microbial of ferments produced by microorganisms isolated of groynd of distinct regions of Bolivia

Se aislaron 24 hongos a partir de 8 muestras de tierra, mediante el método de dilución sobre agar y se determinó la viabilidad de 225 hongos del cepario del Instituto de Investigaciones Fármaco Bioquímicas (IIFB) encontrándose viable el 81,7 por ciento. De las 208 colonias de hongos evaluadas, el 28,5 por ciento presentaron actividad antimicrobiana en medio sólido. Por su actividad antimicrobiana de amplio espectro fueron seleccionados 7 hongos por duplicado en condiciones de iluminación, pH y concentración de glucosa controladas. La cepa productora de antibióticos, Aspergillus sp, fue seleccionado para estudios cinéticos en cultivo batch (100ml), detectándose actividad contra Staphylococcus aureus (50ul/ml) y Escherichia coli (200ul/ml). Posteriormente, se realizaron cultivos a 1,000 ml en fermentador con agitación controlando el pH, la producción de antibiótico y la concentración de glucosa en el medio. Una vez filtrado el sobrenadante, fue sometido a una cromatografía en columna con la resina HP21 lipofílica, deluida con mezclas de agua y metanol para su purificación, resultando activa la fracción obtenida con metanol al 80 por ciento, contra S. aureus (25ul/ml) y E. coli (2000ul/ml)

Inhibición de germinación de semillas y toxicidad en Artemia salina, como indicadores de actividad antitumoral / Inhibition of germination of seeds and toxicity in artenia salina, as indicators of activity antitumoral

Dos ensayos biológicos sencillos, baratos y rápidos: inhibición de germinación de semillas de tomate y lechuga y Toxicidad en A. salina, han sido evaluados en su eficiencia y selectividad como indicadores de posible actividad antitumoral, para lo cual se los ha confrontado con antitumorales comerciales, antibióticos de uso habitual, extractos vegetales orgánicos de plantas de uso etnobotánico y fracciones de extractos seleccionados. El bioensayo de Inhibición de germinación ha mostrado una eficiencia del 83 por ciento al detectar 5 de 6 antitumorales y 100 por ciento al asociarse a la prueba de Toxicidad en A. salina, con un criterio de indicador de actividad positiva cuando el CI50 o DL50 es inferior a 10 ppm. Con el mismo parámetro, ninguno de los antibióticos probados ha clasificado como posible antineoplásico. Del tamizaje de 147 plantas de uso medicinal por la etnia Tacana, se han seleccionado 5 por tener C150<10 ppm., se han fraccionado 2 de ellas Phyllantus acuminatus y Leretia cordata, en cuyas fracciones, en ambos casos, se evidencia la correlación de actividad inhibitoria de semillas y toxicidad en A. salina

Aceites esenciales con propiedades antimicrobianas / Essencial oils propweties antimicrobial

El presente estudio trata sobre la extracción y evaluación del perfil biológico antimicrobiano in vitro de aceites esenciales de especies vegetales aromáticas. Los aceites fueron obtenidos mediante destilación por arrastre de vapor de agua de diferentes órganos: partes aéreas (hojas y tallos) y dermis de cítricos (cáscara). El crecimiento del hongo saprófito Neurospora crassa fue inhibido por el aceite de Citrus limetta (Lima) a concentraciones de 0,5 mg/ml. El aceite de Rosmarinus oficinalis (Romero), a una concentración de 1 mg/ml, inhibió el crecimiento de la bacteria Staphylococcus aureus. Mientras que los aceites de Petroselium sativum (Perejil), Satureja boliviana (Khoa), Schinus molle (Molle) Citrus aurantium (Naranja), Citrus paradisii (Toronja) y Citrus nobilis (Mandarina), inhibieron el crecimiento tanto de hongos a 0,5 mg/ml, como bacterias a 1 mg/ml. Entre estas últimas esencias, las del Perejil y Molle a 3.7 mg/ml y la Khoa a 7.5 mg/ml inhibieron el crecimiento de Sigella flexneri

Aceites esenciales con actividad citotóxica como indicador de propiedades insecticidas / Essential oils activity citotoxic as indicador of properties insecticides

El presente estudio trata sobre la extracción y evaluación de la toxicidad general contra Artemia salina de aceites esenciales de especies vegetales aromáticas. Los aceites fueron obtenidos mediante destilación por arrastre de vapor de agua de diferentes órganos: partes áreas (hojas y tallos) y dermis de cítricos (cáscara). Como indicador de toxicidad se ha calculado la Dosis Letal Media (DL-50) de los aceites contra el camarón salino, considerando que la evaluación biológica contra A. salina, es también utilizada como una prueba preliminar orientada al descubrimiento de nuevos insecticidas y dado que todos los aceites en estudio han presentado valores de Dl-50 menores a 100ppm, podriamos indicar que los aceites estudiados son potenciales insecticidas naturales y considerando sus índices de toxicidad presentaron el siguiente orden: Ruda graveolen (Ruda, Dl-50=2.7ppm), aceite de Wakataya saiko (Wakataya, Dl-50=3.9ppm), cariophyllus aromáticus (Clavo, Dl-50=33.9ppm), Juniperus communis (Pino, Dl-50=38.5ppm), Piper sp. (Matico, Dl-50=41.3ppm) y Eucaliptus globulus (Eucalipto, Dl-50=85.6ppm)

Pruebas biológicas destinadas a evaluar citotóxicos como indicadores de potenciales antitumorales / Biologics test destined to evaluate citotoxicos as indicators of potential antitumoral

En el presente trabajo de investigación se presentan los resultados contra Artemia salina y citostática, como inhibidores de germinacion de semillas de tomate y lechuga, de: Cisplatino, Citarabina, Fluoruracilo, Metotrexato y Vincristina, drogas comerciales utilizadas en la terapia de procesos cancerígenos. La combinación de estas evaluaciones citotóxicas/citostáticas se utilizan en el IIFB, como indicadores de potenciales antitumorales y entre las plantas utilizadas en las farmacopeas tradicionales, por su comportamiento análogo a las drogas patrón utilizadas, nos ha permitido seleccionar 5 especies vegetales, de un total de 147 evaluadas, para estudios de citotoxicidad en cultivos con lineas celulares cancerígenas

Aislamiento, identificación y perfil biológico de especies fúngicas de tierras / Insulation, identification and biologic profile of species fungicas of ground

En este trabajo se presenta el aislamiento de 153 colonias de microorganismos de 40 muestras de tierras recolectadas de diferentes sistemas ecológicos. Todas las colonias aisladas se evaluaron con la producción de metabolitos secundarios biológicamente activos, producidos en medio sólido mediante pruebas biológicas utilizando Staphylococcus aureaus, shigella flexneri, Neurospora crassa, Candida albicans, Artemia salina y por inhibición del crecimiento de semillas germinadas de lechuga. En cuanto a la atividad antibacteriana de las colonias aisladas: el 9 por ciento mostraron actividad contra Staphylococcus aureus y 5.2 por ciento fueron activas contra Shigella flexneri. Respecto a la actividad antifúngica: el 21.5 por ciento de las colonias aisladas presentaron actividad contra Neurospora crassa, y 1.3 por ciento fueron activas contra Candida albicans. Finalmente en las pruebas de toxicidad contra Artemia salina, los resultados no fueron confiables. Mientras que en la prueba de germinación de semillas de lechuga, 10.4 por ciento de las colonias aisladas presentaron actividad muy toxica (inhibición del 100 por ciento), 30 por ciento mostraron actividad tóxica, 41.8 por ciento dió actividad poco tóxica y el 17.6 por ciento presentaron actividad promotora del crecimiento

Evaluación in vitro de la actividad antibacteriana de plantas medicinales utilizadas por la etnia tacana / Evaluation in vitro of the activity antibacteriana of medicinal plants utilized by ethnical group Tacana

En el presente estudio se trabajó con muestras de plantas medicinales pertenecientes a la Etnia Tacana, Provincia Abel Iturralde del Departamento de La Paz. Los extractos crudos de estas plantas fueron evaluadas por su Actividad antibacteriana "in vitro", contra bacterias causales de infecciones como: Staphylococcus aureus y Shigella flexneri. El resultado de los tamizajes preliminares de la prueba antibacteriana por el método de difusión, indica que del total de 147 plantas probadas a 1 mg, fueron positivos 78.2 por ciento de los extractos orgánicos crudos, y el 14.9 por ciento de los extractos acuosos. Las plantas que tuvieron actividad en el primer tamizaje contra Staphylococcus aureus y Shigella flexneri, se evaluaron en una segunda prueba, se escogieron 5 extractos orgánicos para la separación química por exclusión molecular, de los cuales se eligió el extracto de Tapirira guianensis (Anacardiaceae). Mediante un seguimiento biodirigido se aisló y purificó el principio activo de la Tapirira guianensis, determinándose la concentración Mínima Inhibitoria y Concentración Mínima Bactericida que fue 625 ug/ml contra Staphylococcus aureus y se realizaron estudios espectroscopicos de RMN

Neurospora Crassa como tamizaje biológico para la detección de sustancias naturales con actividad antifúngica / Neurospora crassa as tamizaje biologic for the detection of natural substances with activity antifungica

En este artículo se describe y detalla la prueba biológica utilizando el moho Neurospora crassa para la detección de sustancias naturales con actividad antifúngica. Se detalla el aislamiento biodirigido de naphtoquinonas obtenidas de la planta medicinal Chacobo, Nisho, clasificada sistemáticamente como Tabebuia serratifolia (Bignonacea) y se confirma que los compuestos antifúngicos aislados también presentan actividad antibacteriana y leishmanicida

Metodología y potencial del tamizaje de plantas medicinales utilizando la prueba de la Artemia Salina / methodology and potential of the taminaje of medicinal plants utilizing the tenst of the Artemia Salina

La prueba biológica de la Artemia salina es una prueba preliminar y económica, utilizada en la evaluación de la actividad tóxica general no específica de extractos vegetales que ha sido utilizada en el descubrimiento de susbstancias insecticidas y antitumorales. En el Instituto de Investigaciones Fármaco Bioquímicas, hemos visto necesario llevar a cado la estandarización de esta prueba para ser utilizada rutinariamente en la evaluación de la toxicidad general no específica de extractos orgánicos y acuosos, así como de los aceites esenciales, de plantas medicinales y aromáticas nativas. En este artículo detallamos las condiciones experimentales, bajo las cuales se ha realizado esta prueba en nuestros laboratorios, para obtener resultados repetitivos y además discutimos las variables más relevantes en la interpretación de los datos para realizr el cálculo de la DL-50 de los extractos analizados y obtener datos estadísticamente confiables