Surveillance of hemorrhagic fever and/or neuroinvasive disease: challenges of diagnosis

ABSTRACT OBJECTIVE To evaluate the performance of post mortem laboratory analysis in identifying the causes of hemorrhagic fever and/or neuroinvasive disease in deaths by arbovirus infection. METHODS Retrospective cross-sectional study based on the differential analysis and final outcome obtained in patients whose samples underwent laboratory testing for arboviruses at the Pathology Center of the Adolfo Lutz Institute, in São Paulo, Brazil. RESULTS Of the 1355 adults clinically diagnosed with hemorrhagic fever and/or neuroinvasive disease, the most commonly attributed cause of death and the most common final outcome was dengue fever. Almost half of the samples tested negative on all laboratory tests conducted. CONCLUSION The failure to identify the causative agent in a great number of cases highlights a gap in the diagnosis of deaths of unknown etiology. Additional immunohistochemical and molecular assessments need to be added to the post-mortem protocol if all laboratory evaluations performed fail to identify a causative agent. While part of our findings may be due to technical issues related to sample fixation, better information availability when making the initial diagnosis is crucial. Including molecular approaches might lead to a significant advancement in diagnostic accuracy.

Surveillance of hemorrhagic fever and/or neuroinvasive disease: challenges of diagnosis

OBJECTIVE: To evaluate the performance of post mortem laboratory analysis in identifying the causes of hemorrhagic fever and/or neuroinvasive disease in deaths by arbovirus infection. METHODS: Retrospective cross-sectional study based on the differential analysis and final outcome obtained in patients whose samples underwent laboratory testing for arboviruses at the Pathology Center of the Adolfo Lutz Institute, in São Paulo, Brazil. RESULTS: Of the 1355 adults clinically diagnosed with hemorrhagic fever and/or neuroinvasive disease, the most commonly attributed cause of death and the most common final outcome was dengue fever. Almost half of the samples tested negative on all laboratory tests conducted. CONCLUSION: The failure to identify the causative agent in a great number of cases highlights a gap in the diagnosis of deaths of unknown etiology. Additional immunohistochemical and molecular assessments need to be added to the post-mortem protocol if all laboratory evaluations performed fail to identify a causative agent. While part of our findings may be due to technical issues related to sample fixation, better information availability when making the initial diagnosis is crucial. Including molecular approaches might lead to a significant advancement in diagnostic accuracy. DESCRIPTORS: Autopsy. Hemorrhagic Fevers, Viral, etiology. Arbovirus Infections, mortality

Valores normais da atividade da colinesterase plasmática em anseriformes, com destaque para Alopochen aegyptiacus / Normal values of plasma cholinesterase activity in anseriformes, with emphasis on Alopochen aegyptiacus

A inibição da enzima colinesterase plasmática (BChE) pode ser utilizada como biomarcador para os efeitos da intoxicação por organofosforados e carbamatos. Nas aves, esta inibição ocorre de forma mais acentuada que nos mamíferos, porém poucos são os trabalhos publicados nestas espécies. O objetivo do estudo fo a dosagem da BChE em gansos-egípcios (Alopochen aegyptiacus) e nos anseriformes domésticos: gansos-domésticos (Anser anser domesticus) e marrecos (Anas platyrhynchos domesticus), para o estabelecimento de valores de referência normais. O trabalho possui ineditismo com relação à determinação desta enzima nos gansos-egípcios e domésticos. Os gansos e marrecos são mantidos em confinamento com fornecimento de alimentos e água ad libitum e em espaço adequado à sua manutenção no Instituto Adolfo Lutz (IAL), com a finalidade de fornecimento de sangue para a alimentação de triatomídeos do insetário de criação no Núcleo de Parasitoses Sistêmicas. Nos Alopochen aegyptiacus a média e o desvio padrão da BChE foram de 1.868 + 263,6 U/L, nos Anser anser domesticus 2.311 + 673,2 U/L e nos Anas platyrhynchos domesticus 4.290 + 86,11 U/L. (AU)

The inhibition of the plasma cholinesterase enzyme (BChE) can be used as a biomarker for the effects of intoxication by organophosphates and carbamates. In birds, this inhibition is more pronounced than in mammals, however there are few specific studies were conducted in this field. The aim of this study was to measure BChE in Egyptian geese (Alopochen aegyptiacus) and domestic anseriforms: domestic geese (Anser anser domesticus) and mallards (Anas platyrhynchos domesticus), not exposed to pesticides, for the establishment of normal values. The work is unprecedented regarding the determination of this enzyme in egyptian geese and domestic geese. Geese and mallards are kept in confinement with ad liditum food and water supply and in adequate space for their maintenance at the Adolfo Lutz Institute (IAL), for the purpose of supplying blood for the feeding of triatomines from the insectary of the Nucleus of Systemic Parasitoses. In Alopochen aegyptiacus the mean and standard deviation of BChE were 1,868 + 263,6 U/L, in Anser anser domesticus 2,311 + 673,2 U/L and in Anas platyrhynchos domesticus 4,290 + 86.11 U/L. (AU)

Cardiac structural and functional findings in Persian cats with autosomal dominant polycystic kidney disease / Achados estruturais e funcionais cardíacos em gatos persas com doença renal policística autossômica dominante

ABSTRACT: Autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) has been related to left ventricular structural and functional abnormalities in human patients. The present study aimed to evaluate the cardiac structural and functional findings in Persian cats with ADPKD. Client-owned ADPKD (n=12) and non-ADPKD (n=12) Persian cats were enrolled in this study. The animals underwent echo- and electrocardiographic (ECG) examinations, and non-invasive measurements of systolic blood pressure (SBP) were obtained. Both groups were similar regarding hematological and biochemical parameters, including white blood cell count and levels of blood urea nitrogen, creatinine, total protein and thyroxine. There were no differences related to ECG parameters between ADPKD and non-ADPKD cats. Left ventricular hypertrophy (LVH) was demonstrated in 6/12 (50%) normotensive ADPKD cats with preserved renal function. There were no differences between animal groups regarding the echocardiographic parameters, including left ventricular ejection fraction and shortening fraction; however, basal interventricular septal thickness at end-diastole near the left ventricular outflow tract and aortic artery flow velocity showed slightly elevated values in ADPKD-cats. Our study revealed that Persian cats with ADPKD do not reproduce the functional and structural cardiac phenotype reported in human patients; however, large-scale cohort studies are necessary to distinguish the possibilities of a true linkage between ventricular myocardial hypertrophy and ADPKD in this breed.

RESUMO: A doença renal policística autossômica dominante (DRPAD) tem sido relacionada a anormalidades estruturais e funcionais de ventrículo esquerdo em pacientes humanos. O objetivo do presente estudo foi avaliar os achados estruturais e funcionais cardíacos em gatos persas com DRPAD. Gatos persas pertencentes à clientes com DRPAD (n=12) e sem DRPAD (n=12) foram envolvidos neste trabalho. Os animais foram submetidos aos exames de eco e eletrocardiografia (ECG) e foram obtidas medições não-invasivas da pressão arterial sistólica (PAS). Ambos os grupos apresentaram valores semelhantes em relação aos parâmetros hematológicos e bioquímicos, incluindo contagem de glóbulos brancos e níveis séricos de ureia, creatinina, proteína total e tiroxina. Não houve diferença em relação aos parâmetros do ECG entre os gatos com ou sem DRPAD. A hipertrofia ventricular esquerda foi demonstrada em 6/12 (50%) dos gatos normotensos com DRPAD e função renal preservada. Não houve diferenças entre os grupos em relação aos parâmetros ecocardiográficos, incluindo fração de ejeção e fração de encurtamento do ventrículo esquerdo, entretanto a espessura septal interventricular basal na diástole na via de saída do ventrículo esquerdo e a velocidade do fluxo da artéria aórtica mostraram valores ligeiramente elevados em gatos com DRPAD. Nosso estudo revelou que gatos persas com DRPAD não reproduzem o fenótipo cardíaco funcional e estrutural encontrado em pacientes humanos. No entanto, estudos de coorte em larga escala são necessários para distinguir as possibilidades de uma verdadeira ligação entre a hipertrofia ventricular do miocárdio e a DRPAD nesta raça.

Fatal pulmonary parafilaroidiasis in a free-ranging subantarctic fur seal (Arctocephalus tropicalis) coinfected with two gammaherpesviruses and Sarcocystis sp / Parafilaroidose pulmonar fatal em um lobo-marinho-subantártico (Arctocephalus tropicalis) de vida livre coinfectado com dois gammaherpesvírus e Sarcocystis sp

Abstract A juvenile subantarctic fur seal (Arctocephalus tropicalis) found dead in Santa Catarina state, southern Brazil, presented with disseminated verminous pneumonia due to Parafilaroides sp. A concomitant infection with two different gammaherpesviruses was identified by PCR in different tissues; one of them possibly a novel species (tentatively named Otariid herpesvirus 7). Sarcocystis sp. DNA was identified molecularly in skeletal muscle samples with intrasarcoplasmic bradyzoites and no apparent tissue response. All analyzed samples (mandibular, laryngeal, tracheal, and mesenteric lymph nodes, and lung) were PCR-negative for Brucella spp. The most likely cause of death was severe pulmonary parafilaroidiasis. The pathogenic role of the gammaherpesviruses in several of the tissues was not evident. This study describes the pathogenicity of Parafilaroides sp. in a subantarctic fur seal, widens the host range of herpesvirus in pinnipeds, and reports the first molecular identification of Sarcocystis sp. in this species.

Resumo Um lobo-marinho-subantártico (Arctocephalus tropicalis) juvenil foi achado morto no Estado de Santa Catarina, sul do Brasil, apresentando pneumonia parasitária disseminada por Parafilaroides sp. Infecção concomitante por dois gammaherpesvírus diferentes foi identificada pela PCR em diversos tecidos, um desses herpesvírus possivelmente uma nova espécie (denominada provisoriamente Otariid herpesvirus 7). DNA de Sarcocystis sp. foi identificado molecularmente em amostras de músculo esquelético que apresentavam bradizoítos intra-sarcoplasmáticos sem aparente resposta tecidual. Todas as amostras analisadas (linfonodo mandibular, laríngeo, traqueal e mesentérico, e pulmão) pela PCR para Brucella spp. foram negativas. A causa mais provável da morte do animal foi parafilaroidose pulmonar severa. O papel patogénico dos gammaherpesvírus em vários tecidos não foi evidente. Este estudo descreve a patogenicidade de Parafilaroides sp. em um lobo-marinho-subantártico, amplia a variedade de hospedeiros de herpesvírus em pinípedes e reporta a primeira identificação molecular de Sarcocystis sp. para essa espécie.

Patologia morfológica e molecular aplicadas à inovação diagnóstica e vigilância da leishmaniose visceral / Morphological and molecular pathology applied to diagnostic innovation and surveillance of visceral leishmaniasis

O conceito de Saúde Única surgiu para ressaltar a união indissociável entre a saúde animal, humana e ambiental. Nesse contexto, a leishmaniose visceral americana (LVA) é considerada uma importante doença de saúde pública no Brasil, devido a sua crescente expansão geográfica e aumento na incidência de casos humanos. A LVA é uma doença parasitária, zoonótica, causada pela Leishmania (Leishmania) infantum (syn. chagasi) e transmitida por flebotomíneos do gênero Lutzomyia. Os cães são considerados os principais reservatórios do parasito nas áreas urbanas. O diagnóstico da LVA é baseado em aspectos epidemiológicos, clínicos e laboratoriais. A demonstração da presença do parasito através de exames diretos em tecidos biológicos do hospedeiro é o diagnóstico de escolha, principalmente, em municípios em que a transmissão de LVA ainda não tenha sido confirmada. Diversas metodologias podem ser aplicadas com essa finalidade. O objetivo desse trabalho é apresentar as técnicas citológicas, anatomo-patológicas e moleculares em amostras fixadas em formalina e incluídas em parafina para o diagnóstico da leishmaniose visceral em humanos e cães. Esses dados são complementares à apresentação realizada no I Simpósio Internacional de Leishmaniose Visceral, realizado nos dia 23 e 24 de Abril de 2018, e organizado pelo Instituto Adolfo Lutz em São Paulo-SP, Brasil. (AU)

The One Health concept emerged to highlight the inseparable link between animal, human and environmental health. In this context, American Visceral Leishmaniasis (AVL) is considered an important public health disease in Brazil, due to its increasing geographic expansion and in the incidence of human cases. AVL is a parasitic and zoonotic disease caused by Leishmania (Leishmania) infantum (syn. chagasi) and transmitted by sandflies of the genus Lutzomyia. Dogs are considered the main reservoirs of the parasite in urban areas. The diagnosis of AVL is based on epidemiological, clinical and laboratory aspects. The demonstration of the presence of the parasite through direct examinations in biological tissues of the host is the diagnosis of choice, mainly in municipalities where the transmission of AVL has not yet been confirmed. Several methodologies can be applied for this purpose. The objective of this work is to present the cytological, anatomopathological and molecular techniques in formalin fixed and paraffin embedded samples for the diagnosis of visceral leishmaniasis in humans and dogs. These data are complementary to the present study at the First International Symposium on Visceral Leishmaniasis, held on April 23 and 24, 2018, and organized by Adolfo Lutz Institute in São Paulo, Brazil. (AU)

Avaliação da efetividade do uso de coleiras impregnadas com deltametrina no controle da leishmaniose visceral no município de Votuporanga, Estado de São Paulo, Brasil, 2014 ­ 2016 / Evaluation of the effectiveness of using deltamethrinimpregnated collars to control visceral leishmaniasis in the municipality of Votuporanga, State of São Paulo, Brazil, 2014 ­ 2016

O objetivo deste artigo é apresentar os principais resultados do Projeto de Inovação Tecnológica em Saúde realizado entre 2014 e 2015, destacando-se o uso de coleiras impregnadas com deltametrina a 4% em cães em uma região endêmica para leishmaniose visceral (LV), o município de Votuporanga, São Paulo, Brasil. Neste município, anterior à realização do projeto, eram registrados muitos casos caninos e humanos da doença, com elevada taxa de letalidade. Durante o projeto, foram monitorados cerca de 16,5 mil cães, examinadas 25.700 amostras de sangue, considerando-se as perdas e as entradas de novos animais durante os quatro inquéritos sorológicos. Após sua finalização, verificou-se uma diminuição da prevalência e incidência de LV canina, assim como do número de casos humanos. A diminuição dos casos caninos foi correlacionada positivamente aos casos humanos no período de 2011 a 2016 (Correlação de Pearson de 0.914, p-valor<0.05). Além disso, a análise espacial dos resultados corrobora a diminuição ou desaparecimento da concentração de casos caninos e, consequentemente, de fontes e de infecção nas áreas endêmicas à medida que avançaram no tempo e espaço as diferentes etapas de desenvolvimento do projeto. Apesar da drástica redução na incidência da LV canina, ainda permaneceram algumas áreas críticas. Os resultados delineados sugerem a revisão de protocolos e manuais demonstrando a efetividade do uso das coleiras como medida preventiva e potencial no controle da LV. (AU)

This paper aims to present the main results of the Health Technology Innovation Project carried out between 2014 and 2015, which evaluates the use of 4% deltamethrin-impregnated collars in dogs, in an endemic region for visceral leishmaniasis (VL), the municipality of Votuporanga, São Paulo, Brazil. Before this project, Votuporanga had notified canine and human cases of the disease, with a high case fatality rate. We monitored approximately 16.5 thousand dogs, 25,700 blood samples analyzed, considering losses and entrances of new animals during the four serological surveys. After the project, the prevalence and incidence of canine VL decreased as well as the number of human cases. We found a positive correlation between the decrease of infected dogs and human cases from 2011 to 2016 (Pearson correlation of 0.914, p-value <0.05). Furthermore, the spatial analysis of the results indicated areas with canine cases concentration that decreased its intensity or disappeared concomitantly to the project levels in the space-time. Despite the drastic reduction in the incidence of canine VL, some critical areas remain. The current results suggest the review of protocols and manuals demonstrating the effectiveness of the use of collars as a preventive measure and potential in the control of VL. (AU)

Patologia morfológica e molecular aplicadas à inovação diagnóstica e vigilância da leishmaniose visceral / Morphological and molecular pathology applied to diagnostic innovation and surveillance of visceral leishmaniasis

O conceito de Saúde Única surgiu para ressaltar a união indissociável entre a saúde animal, humana e ambiental. Nesse contexto, a leishmaniose visceral americana (LVA) é considerada uma importante doença de saúde pública no Brasil, devido a sua crescente expansão geográfica e aumento na incidência de casos humanos. A LVA é uma doença parasitária, zoonótica, causada pela Leishmania (Leishmania) infantum (syn. chagasi) e transmitida por flebotomíneos do gênero Lutzomyia. Os cães são considerados os principais reservatórios do parasito nas áreas urbanas. O diagnóstico da LVA é baseado em aspectos epidemiológicos, clínicos e laboratoriais. A demonstração da presença do parasito através de exames diretos em tecidos biológicos do hospedeiro é o diagnóstico de escolha, principalmente, em municípios em que a transmissão de LVA ainda não tenha sido confirmada. Diversas metodologias podem ser aplicadas com essa finalidade. O objetivo desse trabalho é apresentar as técnicas citológicas, anatomo-patológicas e moleculares em amostras fixadas em formalina e incluídas em parafina para o diagnóstico da leishmaniose visceral em humanos e cães. Esses dados são complementares à apresentação realizada no I Simpósio Internacional de Leishmaniose Visceral, realizado nos dia 23 e 24 de Abril de 2018, e organizado pelo Instituto Adolfo Lutz em São Paulo-SP, Brasil.

The One Health concept emerged to highlight the inseparable link between animal, human and environmental health. In this context, American Visceral Leishmaniasis (AVL) is considered an important public health disease in Brazil, due to its increasing geographic expansion and in the incidence of human cases. AVL is a parasitic and zoonotic disease caused by Leishmania (Leishmania) infantum (syn. chagasi) and transmitted by sandflies of the genus Lutzomyia. Dogs are considered the main reservoirs of the parasite in urban areas. The diagnosis of AVL is based on epidemiological, clinical and laboratory aspects. The demonstration of the presence of the parasite through direct examinations in biological tissues of the host is the diagnosis of choice, mainly in municipalities where the transmission of AVL has not yet been confirmed. Several methodologies can be applied for this purpose. The objective of this work is to present the cytological, anatomopathological and molecular techniques in formalin fixed and paraffin embedded samples for the diagnosis of visceral leishmaniasis in humans and dogs. These data are complementary to the present study at the First International Symposium on Visceral Leishmaniasis, held on April 23 and 24, 2018, and organized by Adolfo Lutz Institute in São Paulo, Brazil.

Avaliação da efetividade do uso de coleiras impregnadas com deltametrina no controle da leishmaniose visceral no município de Votuporanga, Estado de São Paulo, Brasil, 2014 – 2016 / Evaluation of the effectiveness of using deltamethrinimpregnated collars to control visceral leishmaniasis in the municipality of Votuporanga, State of São Paulo, Brazil, 2014 – 2016

O objetivo deste artigo é apresentar os principais resultados do Projeto de Inovação Tecnológica em Saúde realizado entre 2014 e 2015, destacando-se o uso de coleiras impregnadas com deltametrina a 4% em cães em uma região endêmica para leishmaniose visceral (LV), o município de Votuporanga, São Paulo, Brasil. Neste município, anterior à realização do projeto, eram registrados muitos casos caninos e humanos da doença, com elevada taxa de letalidade. Durante o projeto, foram monitorados cerca de 16,5 mil cães, examinadas 25.700 amostras de sangue, considerando-se as perdas e as entradas de novos animais durante os quatro inquéritos sorológicos. Após sua finalização, verificou-se uma diminuição da prevalência e incidência de LV canina, assim como do número de casos humanos. A diminuição dos casos caninos foi correlacionada positivamente aos casos humanos no período de 2011 a 2016 (Correlação de Pearson de 0.914, p-valor<0.05). Além disso, a análise espacial dos resultados corrobora a diminuição ou desaparecimento da concentração de casos caninos e, consequentemente, de fontes e de infecção nas áreas endêmicas à medida que avançaram no tempo e espaço as diferentes etapas de desenvolvimento do projeto. Apesar da drástica redução na incidência da LV canina, ainda permaneceram algumas áreas críticas. Os resultados delineados sugerem a revisão de protocolos e manuais demonstrando a efetividade do uso das coleiras como medida preventiva e potencial no controle da LV.

This paper aims to present the main results of the Health Technology Innovation Project carried out between 2014 and 2015, which evaluates the use of 4% deltamethrin-impregnated collars in dogs, in an endemic region for visceral leishmaniasis (VL), the municipality of Votuporanga, São Paulo, Brazil. Before this project, Votuporanga had notified canine and human cases of the disease, with a high case fatality rate. We monitored approximately 16.5 thousand dogs, 25,700 blood samples analyzed, considering losses and entrances of new animals during the four serological surveys. After the project, the prevalence and incidence of canine VL decreased as well as the number of human cases. We found a positive correlation between the decrease of infected dogs and human cases from 2011 to 2016 (Pearson correlation of 0.914, p-value <0.05). Furthermore, the spatial analysis of the results indicated areas with canine cases concentration that decreased its intensity or disappeared concomitantly to the project levels in the space-time. Despite the drastic reduction in the incidence of canine VL, some critical areas remain. The current results suggest the review of protocols and manuals demonstrating the effectiveness of the use of collars as a preventive measure and potential in the control of VL.

Efficacy of a series of alpha-pyrone derivatives against Leishmania (L. ) infantum and Trypanosoma cruzi

The neglected tropical diseases Chagas disease and leishmaniasis affect together more than 20 million people living mainly in developing countries. The mainstay of treatment is chemotherapy, however the drugs of choice, which include benznidazole and miltefosine, are toxic and have numerous side effects. Safe and effective therapies are urgently needed. Marine alpha-pyrones have been previously identified as scaffolds with potential antiprotozoan activities. In this work, using a phenotypic screen, twenty-seven examples of 3-substituted 4-hydroxy-6-methyl alpha-pyrones were synthesized and their antiparasitic efficacy evaluated against Leishmania (L.) infantum and Trypanosoma cruzi in order to evaluate structure-activity relationships within the series. The mechanism of action and the in vivo efficacy of the most selective compound against T. cruzi were evaluated using different techniques. In vitro data indicated that compounds 8, 15, 25, 26 and 28 presented IC50 values in the range between 13 and 54 µM against L. infantum intracellular amastigotes. Among them, hexanoyl substituted pyrone 8 was the most selective and potent, with a Selectivity Index (SI) > 14. Fifteen of the alpha-pyrones were effective against T. cruzi trypomastigotes, with 3-undecanoyl (11) and 3-tetradecanoyl (12) substituted pyrones being the most potent against trypomastigotes, with IC50 values of 1 and 2 µM, respectively, and SI higher than 70. Using flow cytometry and fluorescent-based assays, pyrone 12 was found to

As doenças tropicais negligenciadas A doença de Chagas e a leishmaniose afetam juntas mais de 20 milhões de pessoas que vivem principalmente nos países em desenvolvimento. O suporte principal do tratamento é a quimioterapia, no entanto, os medicamentos de escolha, que incluem benznidazol e miltefosina, são tóxicos e têm inúmeros efeitos colaterais. Terapias seguras e eficazes são urgentemente necessárias. As alfa-pironas marinhas foram previamente identificadas como andaimes com potenciais atividades antiprotozoárias. Neste trabalho, usando uma tela fenotípica, sintetizaram-se 27 exemplos de 4-hidroxi-6-metil alfa-pironas 3-substituídas e avaliou-se sua eficácia antiparasitária contra Leishmania (L.) infantum e Trypanosoma cruzi para avaliar a estrutura relações de atividade dentro da série. O mecanismo de ação e a eficácia in vivo do composto mais seletivo contra T. cruzi foram avaliados por diferentes técnicas. Dados in vitro indicaram que os compostos 8, 15, 25, 26 e 28 apresentaram valores de IC50 na faixa entre 13 e 54 µM contra amastigotas intracelulares de L. infantum. Entre elas, a pirona 8 substituída com hexanoílo foi a mais seletiva e potente, com um índice de seletividade (SI)> 14. Quinze das alfa-pironas foram eficazes contra as tripomastigotas de T. cruzi, com 3-undecanoil (11) e 3-tetradecanoil ( 12) pironas substituídas sendo as mais potentes contra tripomastigotas, com valores de IC50 de 1 e 2 µM, respectivamente, e SI superiores a 70. Usando citometria de fluxo e ensaios à base de fluorescência, a pirona 12 foi encontrada para

Fatal haemorrhage and neoplastic thrombosis in a captive African lion (Panthera leo) with metastatic testicular sex cord­stromal tumour

Background: The study of neoplasia in wildlife species contributes to the understanding of cancer biology, management practices, and comparative pathology. Higher frequencies of neoplasms among captive non-domestic felids have been reported most commonly in aging individuals. However, testicular tumours have rarely been reported. This report describes a metastatic testicular sex cord­stromal tumour leading to fatal haemorrhage and thrombosis in a captive African lion (Panthera leo). Case presentation: During necropsy of a 16-year-old male African lion, the left testicle and spermatic cord were found to be intra-abdominal (cryptorchid), semi-hard and grossly enlarged with multiple pale-yellow masses. Encapsulated haemorrhage was present in the retroperitoneum around the kidneys. Neoplastic thrombosis was found at the renal veins opening into the caudal vena cava. Metastases were observed in the lungs and mediastinal lymph nodes. Histology revealed a poorly differentiated pleomorphic neoplasm comprised of round to polygonal cells and scattered spindle cells with eosinophilic cytoplasm. An immunohistochemistry panel of inhibin-α, Ki-67, human placental alkaline phosphatase, cytokeratin AE1/AE3, cKit, vimentin and S100 was conducted. Positive cytoplasmic immunolabeling was obtained for vimentin and S100. Conclusions: The gross, microscopic and immunohistochemical findings of the neoplasm were compatible with a poorly differentiated pleomorphic sex cord­stromal tumour. Cause of death was hypovolemic shock from extensive retroperitoneal haemorrhage and neoplastic thrombosis may have contributed to the fatal outcome. To our knowledge, this is the first report of sex cord­stromal tumour in non-domestic felids.

Antecedentes: O estudo da neoplasia em espécies silvestres contribui para a compreensão da biologia do câncer, manejo práticas e patologia comparada. Maiores frequências de neoplasias em felinos não domésticos em cativeiro foram relatados mais comumente em indivíduos idosos. No entanto, tumores testiculares raramente foram relatados. este O relatório descreve um tumor estromal do cordão sexual testicular metastático, levando a hemorragia fatal e trombose em um leão africano em cativeiro (Panthera leo). Apresentação do caso: Durante a necropsia de um leão africano de 16 anos, o testículo esquerdo e o cordão espermático foram encontrado intra-abdominal (criptorquídeo), semi-rígido e grosseiramente aumentado com várias massas amarelo-pálidas. Encapsulado hemorragia estava presente no retroperitônio ao redor dos rins. Trombose neoplásica foi encontrada em as veias renais se abrem para a veia cava caudal. Metástases foram observadas nos pulmões e na linfa mediastinal nós. A histologia revelou uma neoplasia pleomórfica pouco diferenciada composta por células redondas a poligonais e células fusiformes dispersas com citoplasma eosinofílico. Um painel de imuno-histoquímica de inibina-α, Ki-67, humano foram realizadas fosfatase alcalina placentária, citoqueratina AE1 / AE3, cKit, vimentina e S100. Citoplasmático positivo a marcação imunológica foi obtida para vimentina e S100. Conclusões: Os achados macroscópicos, microscópicos e imuno-histoquímicos da neoplasia foram compatíveis com tumor estromal do cordão sexual pleomórfico pouco diferenciado. A causa da morte foi choque hipovolêmico de extensa hemorragia retroperitoneal e trombose neoplásica podem ter contribuído para o desfecho fatal. Para nosso conhecimento, este é o primeiro relato de tumor do cordão sexual estroma em felinos não domésticos.

Outbreak of Yellow Fever among Nonhuman Primates, Espirito Santo, Brazil, 2017

In January 2017, a yellow fever outbreak occurred in Espirito Santo, Brazil, where human immunization coverage is low. Histologic, immunohistologic, and PCR examinations were performed for 22 deceased nonhuman New World primates; typical yellow fever features were found in 21. Diagnosis in nonhuman primates prompted early public health response.

Em janeiro de 2017, ocorreu um surto de febre amarela no Espírito Santo, Brasil, onde a cobertura de imunização humana é baixa. Os exames histológico, imuno-histológico e PCR foram realizados para 22 primatas não humanos do Novo Mundo falecidos; características típicas da febre amarela foram encontradas em 21. O diagnóstico em primatas não humanos levou a uma resposta precoce da saúde pública.

Human Cytomegalovirus DNA Quantification and Gene Expression in Gliomas of Different Grades

Gliomas are the most common type of primary brain tumors. The most aggressive type, Glioblastoma multiforme (GBM), is one of the deadliest human diseases, with an average survival at diagnosis of about 1 year. Previous evidence suggests a link between human cytomegalovirus (HCMV) and gliomas. HCMV has been shown to be present in these tumors and several viral proteins can have oncogenic properties in glioma cells. Here we have investigated the presence of HCMV DNA, RNA and proteins in fifty-two gliomas of different grades of malignancy. The UL83 viral region, the early beta 2.7 RNA and viral protein were detected in 73%, 36% and 57% by qPCR, ISH and IHC, respectively. Positivity of the viral targets and viral load was independent of tumor type or grade suggesting no correlation between viral presence and tumor progression. Our results demonstrate high prevalence of the virus in gliomas from Brazilian patients, contributing to a better understanding of the association between HCMV infection and gliomas worldwide and supporting further investigations of the virus oncomodulatory properties.

Avaliação do exame imuno-histoquímico para o diagnóstico de Leishmania spp. em amostras de tecidos caninos / Evaluation of immunohistochemical technique for the diagnosis of Leishmania spp. in canine tissues samples

No Brasil, as leishmanioses representam um importante problema de saúde pública pela sua elevada incidência, ampla distribuição geográfica e marcante aumento na transmissão associados à urbanização da doença. Cães são considerados os principais reservatórios da leishmaniose visceral (LV) no ambiente urbano, tornando-se fundamental o aprimoramento do diagnóstico dadoença nessa espécie. Este estudo objetivou a avaliação da técnica de imuno-histoquímica (IHQ) para o diagnóstico de Leishmania spp. em amostras de diferentes tecidos de cães recebidas no Núcleo de Patologia Quantitativa do Instituto Adolfo Lutz (NPQ-IAL). Amostras de tecidos coletadas de 134 cães, provenientes de municípios do Estado de São Paulo, positivos para LV por teste rápido(TR DPP®-Bio-Manguinhos), ensaio imunoenzimático-EIE/Elisa (Bio-Manguinhos) e pela reação em cadeia de polimerase, foram submetidas a marcação IHQ específica, em duplicata. A reação de IHQ apresentou sensibilidade de 98,51 %, especificidade de 100,00 % e acurácia de 98,61 %. A maior positividade foi detectada nas amostras de baço. O índice Kappa foi de 0,84 entre os resultados da análise dos tecidos em duplicata. A técnica de IHQ pode ser utilizada como uma técnica rotineirapara o diagnóstico das leishmanioses caninas, sendo padronizada e implantada no NPQ-IAL.

In Brazil, leishmaniasis represents an important public health problem due to its high incidence, wide geographic distribution and marked increase in transmission associated to the urbanization of the disease. Dogs are considered the main reservoirs of visceral leishmaniasis (VL) in the urban environment, making it fundamental to improve the diagnosis of this species. This study aimed at the evaluation of the immunohistochemical technique (IHC) for the diagnosis of Leishmania spp. In samples of different dog tissues received at the Adolfo Lutz Institute's Quantitative Pathology Center (NPQ-IAL). Tissue specimens collected from 134 dogs, from municipalities in the State of São Paulo, positive for LV by rapid test (TR DPP®-Bio-Manguinhos), enzyme-linked immunosorbent assay (EIE / Elisa (Bio-Manguinhos) and the chain reaction of Polymerase, were subjected to specific IHQ labeling, in duplicate. The IHQ reaction showed sensitivity of 98.51%, specificity of 100.00% and accuracy of 98.61%. The highest positivity was detected in spleen samples. The Kappa index was 0.84 between the results of the tissue analysis in duplicate. The IHC technique can be used as a routine technique for the diagnosis of canine leishmaniasis, being standardized and implanted in the NPQ-IAL.

Evaluation of immunohistochemical technique for the diagnosis of Leishmania spp. in canine tissues samples / Avaliação do exame imuno-histoquímico para o diagnóstico de Leishmania spp. em amostras de tecidos caninos

In Brazil, leishmaniasis represents a major public health problem due to its high incidence, wide distribution and remarkable increase in transmission associated with the disease urbanization. Dogs are considered as the main reservoirs of visceral leishmaniasis (VL) in the urban environment and diagnosis improvement was fundamental in this species. This study aimed at evaluating the immunohistochemical technique (IHC) for diagnosing Leishmania spp. in differents tissues samples collected from dogs. This investigation was performed at the Quantitative Pathology Center of the Institute Adolfo Lutz (NPQ-IAL). Tissue samples collected from 134 dogs, derived from municipalities of São Paulo State, positive for VL by rapid testing (TR DPP® - Bio-Manguinhos), enzyme-linked immunosorbent assay (EIA/ELISA - Bio-Manguinhos), and polymerase chain reaction, were analyzed by specific IHC in duplicate. These dogs were previously diagnosed as VL. IHC showed sensitivity of 98.51 %, specificity of 100.00 %, positive predictive value of 100.00 %, negative predictive value of 83.33 % and accuracy of 98.61 %. The major positivity was detected in spleen samples. Kappa index between the tissues duplicate results was of 0.84. IHC technique, standardized and implemented at NPQ-IAL, showed to be suitable to be used as routine test for diagnosing canine leishmaniasis effectivelly.

No Brasil, as leishmanioses representam um importante problema de saúde pública pela sua elevada incidência, ampla distribuição geográfica e marcante aumento na transmissão associados à urbanização da doença. Cães são considerados os principais reservatórios da leishmaniose visceral (LV) no ambiente urbano, tornando-se fundamental o aprimoramento do diagnóstico da doença nessa espécie. Este estudo objetivou a avaliação da técnica de imuno-histoquímica (IHQ) para o diagnóstico de Leishmania spp. em amostras de diferentes tecidos de cães recebidas no Núcleo de Patologia Quantitativa do Instituto Adolfo Lutz (NPQ-IAL). Amostras de tecidos coletadas de 134 cães, provenientes de municípios do Estado de São Paulo, positivos para LV por teste rápido (TR DPP®-Bio-Manguinhos), ensaio imunoenzimático-EIE/Elisa (Bio-Manguinhos) e pela reação em cadeia de polimerase, foram submetidas a marcação IHQ específica, em duplicata. A reação de IHQ apresentou sensibilidade de 98,51 %, especificidade de 100,00 % e acurácia de 98,61 %. A maior positividade foi detectada nas amostras de baço. O índice Kappa foi de 0,84 entre os resultados da análise dos tecidos em duplicata. A técnica de IHQ pode ser utilizada como uma técnica rotineira para o diagnóstico das leishmanioses caninas, sendo padronizada e implantada no NPQ-IAL.

Esporotricose em cão Yorkshire Terrier na cidade de São Paulo, SP – Brasil: relato de caso / Sporotrichosis in Yorkshire Terrier dog in the city of São Paulo, SP – Brazil: case report

A esporotricose é uma micose subcutânea de implantação causada pelo fungo dimórfico Sporothrix spp. que acomete seres humanos e animais, sendo rara em cães e com baixo potencial zoonótico. O presente relato refere-se a um cão da raça Yorkshire Terrier, fêmea, com um ano de idade, sem histórico de contato com felinos, que apresentou lesão cutânea em membro torácico direito, resistente ao tratamento com antibiótico. A amostra obtida da biópsia excisional da lesão foi enviada para realização de exame histopatológico (H&E, PAS e Grocott) e análise imuno-histoquímica para a investigação de dermatozoonoses. Os resultados confirmaram o diagnóstico de Sporothrix spp. O animal foi tratado com itraconazol (10 mg/kg/dia via oral durante 120 dias). Não foram observadas lesões após 11 meses do início do tratamento. Atualmente, a esporotricose não é considerada como doença de notificação compulsória. Entretanto, é importante conscientizar os profissionais veterinários quanto ao potencial zoonótico da doença, e quanto às características clínicas, que podem ser sutis e semelhantes à outras dermatopatias comuns...

Biorrepositórios e Biobancos: inovação estratégica em Saúde Pública / Biorepository and Biobank: strategic inovation in the Public Health Service

Os avanços tecnológicos das últimas décadas catalisaram transformações sociais e econômicas, que influenciaram decisivamente nos padrões da morbimortalidade populacional. No Brasil, a heterogeneidade deste padrão é muito visível e complexa, em função de sua grande extensão territorial, do significativo número de habitantes e das diferenças socioeconômicas e culturais. Com o aumento da expectativa devida e o envelhecimento da população brasileira, observa-se o aparecimento cada vez mais frequente de doenças crônicas não transmissíveis. As mudanças climáticas e as condições higiênico-sanitárias, ainda deficientes em algumas regiões, podem propiciar o recrudescimento das doenças infectocontagiosas. Em face dessas transformações, faz-se necessário que o sistema de vigilância epidemiológica seja reestruturado para adequar aos novos cenários epidemiológicos, identificar novos riscos, prever e conter a expansão de áreas com riscos preexistentes de disseminação, propagação e redução das doenças. Um dos pontos cruciais desta reestruturação é o armazenamento correto e adequado das amostras biológicas, por meio da criação de biorrepositórios e biobancos, que possibilitará a aplicação de novas tecnologias para detecção, investigação e respostas às situações de surtos, epidemias e pandemias, com benefícios à pesquisa e assistência na área de saúde. Esta revisão demonstra a importância dos biobancos e biorrepositórios em Saúde Pública.