Detección de casos submicroscópicos de Plasmodium spp, utilizando técnicas clásicas y moleculares en pacientes gestantes de Córdoba, Colombia / Detection of submicroscopic infection with Plasmodium spp, using classical and molecular techniques in pregnant patients from Córdoba, Colombia

Introducción: la malaria gestacional afecta a las madres y al embrión o feto en desarrollo; requiere diagnóstico rápido y tratamiento oportuno y efectivo para evitar las complicaciones y muertes. Objetivo: comparar las técnicas de gota gruesa, PCR anidada y PCR en tiempo real (qRT-PCR), para diagnosticar infecciones submicroscópicas por Plasmodium falciparum y P. vivax. Metodología: se estudiaron 21 mujeres con manifestaciones clínicas de malaria, incluyendo gestantes y no gestantes, en Puerto Libertador, Córdoba, Colombia; de todas se obtuvieron muestras de sangre periférica y, en las gestantes, de placenta y cordón umbilical. Se extrajo el ADN y se lo amplificó por PCR anidada y cuantitativa (qRT-PCR). Para el análisis estadístico se usaron los programas Graphpad PRISM y EPIDAT. Resultados: las tres técnicas diagnosticaron satisfactoriamente la presencia de P. falciparum y P. vivax en sangre periférica, cordón y placenta. Las pruebas moleculares presentaron sensibilidad y especificidad del 100%; dos casos de infección por P. falciparum no identificados por gota gruesa (submicroscópicos) se diagnosticaron con las dos técnicas de PCR. Conclusión: la qRT-PCR es ventajosa en comparación con la PCR anidada porque su estandarización es más corta, requiere menos infraestructura y permite cuantificar el ADN.

Introduction: Gestational malaria affects both the mother and the development of her embryo or fetus. Rapid diagnosis and timely and effective treatment are required to prevent complications and deaths. Objective: To compare thick blood smear with nested PCR and real-time PCR (qRT-PCR) for the diagnosis of submicroscopic infections with Plasmodium falciparum and P. vivax. Methodology: 21 women with clinical manifestations of malaria, including both pregnant and non-pregnant, were studied in Puerto Libertador, Córdoba, Colombia. Peripheral blood specimens were obtained from all of them; umbilical cord and placenta blood specimens were taken in the pregnant ones. DNA was extracted and amplified for nested PCR or qRT-PCR. Statistical analysis was done using Graphpad PRISM and EPIDAT softwares. Results: The three techniques were satisfactory for the detection of Plasmodium falciparum and P. vivax in peripheral blood and in the umbilical cord and placenta specimens. Molecular tests were 100% sensitive and specific. Two submicroscopic cases of P. falciparum infection were detected with the two PCR techniques. Conclusion: qRT-PCR is advantageous over nested PCR because its standardization is shorter, it requires lesser infrastructure and it allows the quantification of DNA.

Status of allele frequency and diversity of Plasmodium falciparum msp1, msp2 and glurp before implementation of an artemisinin-based combined therapy in Northwestern Colombia / Estado de la frecuencia alélica y la diversidad de Plasmodium falciparum msp1, msp2 y glurp antes de la implementación de terapia combinada con artemisina en el Noroccidente de Colombia

Introduction: The status of msp1, msp2 and glurp allele frequency and the diversity of Plasmodium falciparum in Northwestern Colombia before the implementation of an artemisinin-combined therapy have been explored only by a few authors and in a relatively small number of samples from this highly endemic region. Objective: To evaluate the frequency of msp1, msp2, and glurp alleles and the diversity of P. falciparum in two Colombian regions before the use of an artemisinin-combined therapy. Methods: This study was part of a major anti-malarial efficacy trial designed as a random, clinically-controlled study for which 224 subjects were recruited. Region 2 of msp1 and msp2 (central region) were amplified by a nested PCR; glurp (region R2) was amplified by a semi-nested PCR. Results: For msp1, five genotypes were observed, representing the K1, MAD20, and RO33 allelic families. All samples corresponded to a MAD20 150 bp allele. For msp2 (IC family), two alleles were detected and for glurp, eight were observed. A total 33 haplotypes were detected. Conclusions: Analysis of glurp can be used to successfully genotype parasite populations in the new studies in Colombia aimed at exploring Plasmodium spp population dynamics. In addition, analysis of msp1 and msp2 can also be of value for comparisons with past studies, but not when the objective is to study parasites obtained from the same patient in a reduced period of time; for instance, during treatment efficacy studies.

Introducción: La frecuencia alélica y la diversidad de msp1, msp2 y glurp de Plasmodium falciparum en el Noroccidente de Colombia antes de la introducción de la terapia combinada con artemisinina, han sido exploradas por pocos autores y en números relativamente bajos de muestras clínicas de esta región de alta endemicidad. Objetivo: Evaluar la frecuencia alélica y la diversidad de msp1, msp2 y glurp de P. falciparum en dos regiones colombianas antes del uso de la terapia combinada con artemisinina. Métodos: El estudio fue parte de un ensayo mayor sobre la eficacia de la terapia antimalárica con un diseño clínico aleatorio controlado, en el cual 224 sujetos fueron reclutados. La región 2 de msp1 y msp2 (región central) se amplificaron por medio de una PCR anidada; glurp (región RII) fue amplificada con una PCR semi-anidada. Resultados: En msp1, se observaron 5 genotipos que representaron las familias alélicas K1, MAD20, y RO33. Todas las muestras correspondieron al alelo 150 bp de MAD20. En msp2 (familia IC), se detectaron 2 alelos y en glurp, se observaron 8. Un total de 33 haplotipos fueron detectados. Conclusiones: El análisis de glurp puede ser utilizado para genotipificar exitosamente poblaciones parasitarias en nuevos estudios en Colombia con el objeto de explorar la dinámica de las poblaciones de Plasmodium spp. Adicionalmente, el análisis de msp1 y msp2 puede también ser de valor para comparar con estudios pasados, pero no cuando el objetivo es estudiar parasitos obtenidos de un mismo paciente en un periodo reducido de tiempo, por ejemplo, durante estudios de eficacia terapéutica.

The effects of Plasmodium vivax gestational malaria on the clinical and immune status of pregnant women in Northwestern Colombia / Efectos de la malaria gestacional por Plasmodium vivax sobre el estado clínico e inmune en gestantes del Noroccidente de Colombia

Abstract Objetive: The study explored the effects of Plasmodium vivax infection on the balance of pro- versus anti- inflammatory cytokines and chemokines and their relationship with some clinical and epidemiology outcomes. Methods: Thirty-five pregnant women were recruited. Of these, 15 subjects had malaria at delivery (GM+), and 20 had no exposition to infection throughout the pregnancy (GM-) and at delivery. Epidemiological and clinical data were recorded after reviewing the clinical records. At delivery, whole blood from the mother as well as placental tissue was collected. Diagnosis of infection was performed by thick smear and a polymerase chain reaction (PCR). Expression of pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines and chemokines was measured by a real time PCR. Results: The clinical and epidemiological variables explored were similar in both groups, with the exception of gestational age. When comparing the GM+ group with the GM- group, it is clear that although the differences generally are not significant, pro- inflammatory cytokines are elevated in both maternal blood and placental; anti-inflammatory ones are elevated in the mother and reduced in the placenta, and the chemokines are reduced in both compartments, except for MCP-1 which is elevated in all. Conclusion: The results appear to be strongly affected by the small number of women with GM by P. vivax at childbirth. Additional studies are needed with larger groups in this and other regions of the country.

Resumen Objetivo: En este estudio se determinó el efecto de la infección por Plasmodium vivax en el balance de citoquinas pro-inflamatorias/anti-inflamatorias y quemoquinas y su relación con algunas variables epidemiológicas y clínicas. Métodos: Se reclutaron 35 gestantes, 15 con malaria en el momento del parto (GM+) y 20 sin malaria en ningún momento de la gestación (GM-) Los datos epidemiológicos y clínicos fueron colectados a partir de la historia clínica. En el momento del parto fueron tomadas muestras de sangre periférica materna y tejido placentario. El diagnóstico fue realizado mediante gota gruesa y reaccion en cadena de la polimerasa (PCR). La expresión de citoquinas pro-inflamatorias/anti-inflamatorias y quimioquinas, fueron medidas por PCR en tiempo real. La expresión de citoquinas pro-inflamatorias/anti-inflamatorias y quemoquinas, fueron medidas por PCR en tiempo real. Resultados: En las variables epidemiológicas y clínicas, los datos fueron similares en ambos grupos. Al comparar el grupo GM+ con el grupo GM-, resulta claro que, aunque las diferencias, en general, no son significativas, las citoquinas proinflamatorias están elevadas tanto en sangre materna como placentaria, las antiinflamatorias están elevadas en la madre y reducidas en la placenta, y las quimioquinas están reducidas en ambos compartimentos, excepto la MCP-1 que está elevada en ambos. Conclusión. Los resultados parecen estar fuertemente afectados por la cantidad pequeña de mujeres con MG por P. vivax en el parto. Es necesario adelantar estudios adicionales con más mujeres tanto en esta región como en otros lugares.

Status of dhps and dhfr genes of Plasmodium falciparum in Colombia before artemisinin based treatment policy / Estado de los genes dhps y dhfr de Plasmodium falciparum en Colombia antes de la recomendación de tratamiento basado en artemisinina

Introduction: Surveillance of the genetic characteristics of dhps and dhfr can be useful to outline guidelines for application of intermittent preventive therapy in Northwest Colombia and to define the future use of antifolates in artemisinin-based combination therapy schemes. Objective: To evaluate the frequency of mutations in dhps and dhfr and to characterize parasite populations using msp-1, msp-2 and glurp in historic samples before artemisinin-based therapy was implemented in the country. Methods: A controlled clinical study was carried out on randomly selected Plasmodium falciparum infected volunteers of Northwest Colombia (Turbo and Zaragoza). A sample size of 25 subjects per region was calculated. Treatment efficacy to antifolates was assessed. Molecular analyses included P. falciparum genotypes by msp-1, msp-2 and glurp and evaluation of the status of codons 16, 51, 59, 108 and 164 of dhfr and 436, 437, 540, 581 and 613 of dhps. Results: In total 78 subjects were recruited. A maximum number of 4 genotypes were detected by msp-1, msp-2 and glurp. Codons 16, 59 and 164 of the dhfr gene exhibited the wild-type form, while codons 51 and 108 were mutant. In the dhps gene, the mutant 437 glycine was detected in 85% on day 0, while codons 436, 540, 581 and 613 were wild-type. Conclusions: Plasmodium falciparum populations were very homogeneous in this region of Colombia, and the triple mutants of dhfr and dhps Asn108, Ile51 and Gly437 were predominant in clinical isolates.

Introducción. La vigilancia de las características genéticas de dhps y dhfr puede utilizarse para delinear guías de aplicación de terapia preventiva intermitente en el nordeste de Colombia y para definir el uso futuro de los antifolatos en esquemas terapéuticos basados en artemisinina. Objetivo. Evaluar la frecuencia de mutaciones en dhps y dhfr, y caracterizar las poblaciones parasitarias usando msp-1, msp-2 y glurp, en muestras históricas obtenidas antes de la implementación en el país de la terapia basada en artemisinina. Métodos. Se llevó a cabo un estudio clínico controlado en voluntarios infectados con Plasmodium falciparum seleccionados aleatoriamente y provenientes del nordeste de Colombia (Turbo y Zaragoza). Se calculó una muestra de 25 sujetos por región. Se evaluó la eficacia al tratamiento con antifolatos. Los análisis moleculares incluyeron la obtención de genotipos de msp-1, msp-2 y glurp y el estado de los codones 16, 51, 59, 108 y 164 de dhfr, y 436, 437, 5540, 581 y 613 de dhps. Resultados. Se estudiaron 78 sujetos. Se detectó un número máximo de 4 genotipos con msp-1, msp-2 y glurp. Los codones 16, 59 y 164 del gen dhfr se encontraron en su forma silvestre, mientras que los codones 51 y 108 estaban mutados. En el gen dhps, la forma mutante (glicina) en el codón 437, se detectó en 85% el día 0, mientras que los codones 436, 540, 581 y 613 se encontraron silvestres. Conclusiones. Las poblaciones de P. falciparum son muy homogéneas en esta región de Colombia y las triple mutantes de dhfr y dhps Asn108, Ile51 and Gly437, predominaron en los aislamientos clínicos.

Efecto de la infección submicroscópica o policlonal de Plasmodium falciparum sobre la madre y el producto de la gestación: revisión sistemática / Effect of submicroscopic or polyclonal Plasmodium falciparum infection on mother and gestation product: systematic review

ANTECEDENTES: La malaria gestacional es causa importante de morbi-mortalidad materno-infantil y puede transcurrir con parasitemias no detectadas con microscopía; además, por la diversidad genética parasitaria, es común encontrar infecciones policlonales. OBJETIVOS: Conocer la frecuencia de infecciones submicroscópicas (ISM) y/o policlonales (IP) durante la gestación y analizar el impacto que tienen en la presentación clínica y el desarrollo de inmunidad y sus consecuencias en la madre y el producto de gestación. METODOLOGÍA: Se hizo búsqueda en Medline con los términos (MeSH) "pregnancy", "malaria", "PCR", "microscopy", "genotype", "clones". Se seleccionaron los estudios que diagnosticaron la infección por microscopía y PCR. RESULTADOS: Se incluyeron 16 estudios, todos realizados en África. El promedio ponderado (PP) de ISM en el total de mujeres fue del 36 por ciento y según fuese la infección microscópica (IM), submicroscópica o negativa, los PP de anemia materna y bajo peso al nacer (BPN) fueron 51 por ciento, 42 por ciento y 33 por ciento y 19 por ciento, 16 por ciento y 11 por ciento, respectivamente. Con referencia al grupo sin infección, los riesgos (OR) fueron: a) para anemia materna 2,12 en IM y 1,48 en ISM; b) para BPN 1,89 en IM y 1,56 en ISM. El PP de IP fue 75 por ciento y el promedio de clones por muestra fue tres. CONCLUSIONES: Las ISM y policlonales con P. falciparum son muy comunes durante la gestación, pero poco estudiadas y su impacto debe evaluarse en cada región, porque depende de la intensidad y estabilidad de la transmisión, la edad y paridad maternas, entre otras variables, que son influenciadas por las condiciones socioeconómicas y ambientales específicas.

BACKGROUND: Malaria in pregnancy causes substantial maternal and infant morbidity-mortality, even at submicroscopic parasite levels. In addition, the presence of polyclonal infections secondary to high parasite genetic diversity is a common finding. OBJECTIVES: To determine the frequency of submicroscopic and/or polyclonal plasmodial infection during pregnancy and to establish their impact on clinical presentation, immunity acquisition, and consequences on mother and gestation product. METHODS: A search on Medline was performed using key words (MeSH): pregnancy, malaria, PCR, microscopy, genotype, and clones. Studies on plasmodial infection diagnosed by microscopy and PCR were selected. RESULTS: A total of 16 studies were included, all carried out in Africa. The weighted mean (WM) of submicroscopic infection was 36 percent. According to type of infection (microscopic, submicroscopic or negative), the WM of maternal anemia and low birth weight (LBW) were 51 percent, 42 percent, 33 percent, and 19 percent, 16 percent, 11 percent, respectively. Risks (OR), using the negative group as reference, were: a) for maternal anemia 2.12 in microscopic infection and 1.48 in submicroscopic; b) for LBW 1.89 in microscopic and 1.56 in submicroscopic infection. The WM of polyclonal infection was 75 percent and the mean number of clones by sample was three. CONCLUSIONS: Submicroscopic and polyclonal P. falciparum infections during pregnancy are very common, but have been little studied and their impact must be assessed in each specific region because they depend on malaria transmission intensity and stability, maternal age and parity, among other variables, which are influenced by environmental and socio-economic conditions of each region.

Respuesta terapéutica a mefloquina, estado nutricional y variantes alélicas del gen CYP3A4 en pacientes con malaria falciparum no complicada; Antioquia (Colombia) / Malaria: efficacy of mefloquine according to nutritional status and alellic variations of the CYP3A4 gen

Introducción: hay poca información sobre las relaciones entre la falla de la terapia antimalárica y algunos factores del hospedero (estado nutricional, fenotipo y genotipo del citocromo CYP450 que metaboliza el medicamento antipalúdico). Objetivo: explorar si la falla terapéutica de la mefloquina dada a pacientes con malaria falciparum no complicada se puede explicar por la influencia del estado nutricional del enfermo y del fenotipo y genotipo de su citocromo CYP3A4. Materiales y métodos: estudio de casos y controles no pareado. Pacientes: hombres y mujeres adultos, de Turbo y El Bagre (Antioquia, Colombia). Resultados: se evaluó la respuesta terapéutica en 46 enfermos; hubo solo tres fallas (6,5%); por la muy baja ocurrencia de falla terapéutica (n = 3/46), los resultados se presentan en forma descriptiva para los 46 pacientes. La relación dextrometorfano/3-metoximorfinano fue 0,39 (mediana); 20% fueron metabolizadores lentos. Las concentraciones sanguíneas medianas de mefloquina a las 24 horas (C24h) y al día 14 (Cd14) fueron 1.363 + 397 ng/mL y 978 + 106 ng/mL, respectivamente. Los 46 pacientes presentaron el alelo CYP3A4*2 (silvestre). Conclusión: no se pudo evaluar con profundidad la relación entre la respuesta a la terapia antimalárica, por una parte y, por otra, la actividad del CYP450 y el estado nutricional, pero hubo hallazgos que justifican la evaluación y control de las características del hospedero en estudios posteriores de farmacocinética antimalárica.

Introduction: Information on the relationship between treatment failure in malaria and factors of the host (nutritional status, phenotype and genotype of cytochrome CYP450) involved in the metabolism of antimalarials is scarce. Objective: To explore whether treatment failure of mefloquine administered to patients with noncomplicated falciparum malaria can be explained in terms of the patient’s nutritional status and the CYP3A4 phenotype and genotype. Materials and methods: Non-matched case-control study. Patients were adult males and females, inhabitants of Turbo and El Bagre (Antioquia, Colombia). Results: The therapeutic response was assessed in 46 patients, and there were only three failures (6.5%); due to the rare occurrence of therapeutic failure (n = 3/46), results are presented in a descriptive way for the 46 patients. The dextrometorphan/3-methoxymorphinan ratio was 0.39 (median); 20% of the patients were slow metabolizers. The blood concentrations of mefloquine at 24 hours (C24h) and at day 14 (Cd14) were (median) 1.363 ± 397 ng/mL and 978 ± 106 ng/mL, respectively. All 46 patients had the wild CYP3A4*2 allele. Conclusion: We were unable to assess in depth the relationship between the response to mefloquine, on the one hand and, on the other, CYP450 activity and nutritional status. However, there were findings that justify the assessment and control of the characteristics of the host in subsequent studies of antimalarial pharmacokinetics.

Alta frecuencia de mutaciones puntuales en pfcrt de Plasmodium falciparum y emergencia de nuevos haplotipos mutantes en Colombia / Plasmodium falciparum: high frequency of pfcrt point mutations and emergence of new mutant haplotypes in Colombia

Introducción. Los estudios en epidemiología molecular de resistencia a antipalúdicos constituyen una herramienta útil para comprender eventos involucrados en la falla al tratamiento y la resistencia en paludismo por Plasmodium falciparum en Colombia. Diversos autores han informado sobre la eficacia de algunos marcadores moleculares para predecir resistencia a fármacos en P. falciparum y el gen pfcrt ha sido ampliamente caracterizado en este contexto. Objetivo. Estudiar la frecuencia de mutaciones en el gen pfcrt de P. falciparum y su asociacióncon falla al tratamiento con cloroquina, mefloquina, amodiaquina y sulfadoxina/pirimetamina, en dos regiones muy endémicas para paludismo del noroeste de Colombia: Turbo y Bajo Cauca. Materiales y métodos. Una muestra representativa de pacientes con paludismo por P. falciparum no complicado fue seleccionada de cada localidad para la evaluación de la respuesta al tratamiento y la determinación del estado de los codones 72, 74, 75 y 76 de pfcrt, usando una aproximación basada en PCR-RFLP. Resultados. Se confirmó una alta frecuencia de falla al tratamiento con cloroquina (82 por ciento) y amodiaquina (29 por ciento), mientras que la mefloquina y la rapia combinada fueron eficaces para eliminar la infección. La presencia de la mutación T76 en pfcrt fue confirmada en todas las 172 muestras; el haplotipo más común fue CMNT (67 por ciento). Conclusiones. No se observó asociación significativa entre un haplotipo particular y la respuesta al tratamiento en cualquiera de los grupos. Se reporta por primera vez en Colombia la presencia de dos haplotipos, SMET y SMNT; se encontraron alelos mutantes y silvestres simultáneamente en 12 por ciento de las muestras.

Retinol, estado del hierro, malaria y parasitos intestinales: relación por medio de las citocinas TH1/TH2 / Retinol levels, iron status, malaria and intestinal parasites: TH1/TH2 cytokines relationship

Introducción: La malaria, la anemia y la parasitosis intestinal coexisten y constituyen problemas de salud pública en Colombia. Datos disponibles en la literatura biomédica llevan a pensar que estos problemas no son aislados sino que estßn interrelacionados. Por otra parte, los suplementos de retinol han sido efectivos para reducir la mortalidad infantil, con disminución de complicaciones en niños palúdicos, posiblemente por efectos del retinol sobre la función inmune, desviando la respuesta de citocinas hacia un patrón TH2, que también protege de desarrollar anemia grave. Esta revisión tiene como objetivo describir parte de las relaciones vistas en la literatura biomédica mundial, entre retinol y malaria, retinol y anemia, retinol, malaria y parasitosis intestinal, anemia y malaria y mostrar la mediación de estas interrelaciones por el patrón de citocinas TH1/TH2 en sujetos con malaria. Metodología: Se consultaron las siguientes bases de literatura biomédica: Medline, Lilacs, Spingerlik, Md Consultant, Web of Science, Ovid, Scient Direct, Ebsco y Cochrane. También se buscó información para documentar la prevalencia de desnutrición, deficiencia subclínica de retinol, anemia y malaria en niños colombianos, lo mismo que sobre el papel antinfeccioso del retinol.Resultados: Existe asociación entre parasitosis intestinal y malaria; algunos estudios indican que los helmintos predisponen a contraer malaria en niños. De otro lado, los parßsitos mencionados, también se han relacionado con anemia y bajas concentraciones plasmßticas de retinol, que a la vez se asocian con malaria. Sin embargo, no se encontró información que relacione simultaneamente todos estos tópicos y que muestre la respuesta de citocinas TH1/TH2 como la articulación de todos ellos.

Introduction: Malaria infection, anaemia and intestinal parasitism, are important public health problems in Colombia. Available data suggests that these are not separate conditions, but interrelated. On the other hand, retinol supplementation successfully decreases mortality in children. In malaria endemic areas, this supplement reduces severe malaria in children, due to immune modulation by retinol. For example, retinoic acid induced a bias towards a TH2 immune response, an event that is associated with protection against severe anaemia. This review aimed at describing some relationships, reported in global biomedical literature, between retinol and malaria; retinol and anaemia; retinol, malaria and intestinal parasites; anaemia and malaria; and to how the TH1/TH2 cytokine pattern in individuals with malaria changes according to retinol supplementation. Methods: The following biomedical literature databases were consulted: Medline, Lilacs, Spingerlik, Md. Consultant, Web of Science, Ovid, Scient Direct, Ebsco and Cochrane. Information documenting prevalence of malnutrition, subclinical retinol deficiency, anaemia and malaria in Colombian children, as well as papers on the anti-infectious role of retinol were also. Results: A relationship between malaria and intestinal parasitic infections was reported. Some studies indicate that helminth infection predispose children to suffer malaria. On the other hand, these intestinal parasites have also been associated with anaemia and low retinol plasma concentrations, which in turn are associated with malaria. No co-relation regarding a simultaneous link between all these conditions, and the TH1/TH2 balance was observed. Conclusions: The study of associations between malaria, anaemia, intestinal parasite infections and low retinol level, with the TH1/TH2 cytokine response as centerpiece is essential to prevent or provide early treatment.

Polimorfismos del gen pfmdr1 en muestras clínicas de Plasmodium falciparum y su relación con la respuesta terapéutica a antipalúdicos y paludismo grave en Colombia / Polymorphisms of the pfmdr1 gene in field samples of Plasmodium falciparum and their association with therapeutic response to antimalarial drugs and severe malaria in Colombia

Introducción. El gen pfmdr1 de Plasmodium falciparum se describió como un gen de resistencia a diversos antipalúdicos. Sin embargo, no se han estudiado el papel de su polimorfismo en la respuesta terapéutica al tratamiento con antipalúdicos en Colombia, ni su relación con paludismo grave. Objetivos. Este trabajo determinó la asociación entre los polimorfismos Asn86Tir y Asp1246Tir del gen pfmdr1 con la respuesta terapéutica a cloroquina, amodiaquina y mefloquina, en tres municipios antioqueños, y la asociación de estos polimorfismos con paludismo grave en muestras de pacientes del municipio de Tumaco. Materiales y métodos. Los polimorfismos del gen pfmdr1 se determinaron mediante amplificación de ácidos nucleicos y análisis con enzimas de restricción. Resultados. El alelo silvestre Asn86 se encontró en 97 por ciento (137/141) de las muestras en el estudio de respuesta terapéutica a cloroquina, amodiaquina y mefloquina; no se observó ninguna asociación entre su presencia y la falla terapéutica como sí lo reportan otros autores. El alelo 1246Tir se encontró en una alta proporción en el estudio de respuesta terapéutica, tanto en las muestras del día cero como en los del día de la falla después del tratamiento con los antipalúdicos. Conclusiones. Los polimorfismos 86Tir y 1246Tir en el gen pfmdr1 no son útiles como factores de predicción de falla terapéutica o paludismo grave en los municipios estudiados. Este estudio describe por primera vez la presencia del alelo 86Tir en cuatro muestras clínicas de Suramérica.

Introduction. The pfmdr1 gene of Plasmodium falciparum has been described as a gene conferring resistance to several antimalarial drugs. In particular, polymorphisms on specific codons have been associated with resistance and treatment failure with cloroquine, amodiaquine and mefloquine. However, the role of these polymorphisms in treatment response to antimalarials remains unexplored in Colombia. Furthermore, the relationship of these polymorphisms to severe malaria is unknown. Objective. This work studied the association of the Asn86Tyr and Asp1246Tyr pfmdr1 polymorphisms with response to cloroquine, amodiaquine and mefloquine treatment in three municipalities of Antioquia, and severe malaria cases from the municipality Tumaco. Materials and methods.The polymorphisms were assessed by nucleic acid amplification followed by restriction length polymorphism analysis. Results. The wild-type codon Asn86 was detected in 97% of the clinical samples from the treatment response study. No association was detected between this polymorphism and treatment failure to the three antimalarials administered. The 1246Tyr polymorphism was detected with a higher frequency in the samples from Antioquia 92% (130/141) than in those from Tumaco 22% (20/89). However, again, no association was found between the presence of a specific polymorphism and the presence of severe malaria in the municipality of Tumaco. Conclusions. The 86Tyr and 1246Tyr polymorphisms of the pfmdr1 gene are not useful as predictors of treatment failure or severe malaria in the municipalities studied. In addition, we report for the first time, the presence of the mutant codon 86Tyr in field samples in South America.

El caso de infecciosas: histoplasmosis diseminada en pacientes con el síndrome de inmunodeficiencia adquirida: reporte de casos y revisión del tema / The infectious case: disseminated histoplasmosis in patients with acquired immunodeficiency syndrome: case report and review of the literature

Se presentan los datos clínicos y de laboratorio de 11 pacientes positivos para V.I.H., en los cuales se comprobó infección por Histoplasma capsulatum. Las manifestaciones clínicas más frecuentes fueron los de tipo Inespecífico como adenomegalias, fiebre, pérdida de peso y lesiones de lo piel; por ello, el laboratorio desempeña a un papel importante al establecer el diagnóstico de la entidad.

Todos los pacientes cursaron con una formo diseminada de lo micosis; es por esto que el médico debe estar alerta ante la presencia de un cuadro clínico Inespecífico en el paciente V.I.H. positivo.