Evaluation of the Genotoxicity of Endodontic Materials for Deciduous Teeth Using the Comet Assay

ABSTRACT Objective: To evaluate genotoxicity of zinc oxide, P. A. calcium hydroxide, mineral trioxide aggregate and an iodoform paste using comet assay on human lymphocytes. Material and Methods: Two positive controls were used: methyl-methanesulfonate for the P.A. calcium hydroxide and mineral trioxide aggregate; and doxorubicin for the iodoform paste and zinc oxide. There were also two negative controls: distilled water for the P.A. calcium hydroxide and mineral trioxide aggregate; and DMSO for the iodoform paste and zinc oxide. Comets were identified using fluorescence microscopy and 100 of them were counted on each of the three slides analyzed per drug test. A damage index was established, taking into consideration the score pattern that had previously been determined from the size and intensity of the comet tail. Analysis of variance, followed by Tukey's test, was used to compare the means of the DNA damage indices. Results: The DNA damage index observed for mineral trioxide aggregate (7.08 to 8.58) and P.A. calcium hydroxide (6.50 to 8.33), which were similar to negative control index. On the other hand, damage index for zinc oxide (104.7 to 218.50) and iodoform paste (115.7 to 210.7) were similar to positive control index. Conclusion: Iodoform paste and zinc oxide showed genotoxicity at all concentrations used.

Gastric toxicity of Alendronate and Methotrexate in Walker 256 carcinosarcoma jaw model / Toxicidade gástrica de Alendronato e Metotrexato em modelo de carcinossarcoma de Walker 256 em mandíbula

Introduction: Experimental animal models represent a key tool used to elucidate the mechanisms of action and toxicity of anticancer drugs. Objective: The purpose was to establish a correlation of neoplastic growth with the combinatorial therapeutic application of sodium alendronate (ALD) and methotrexate (MTX), and to evaluate the gastrointestinal toxicity of these drugs, in the rat Walker 256 carcinosarcoma inoculation model. Methods: Female rats were selected and randomly distributed into 5 groups (n=10): negative control (NC), positive control (PC), MTX-treated group, ALD-treated group, and MTX-ALD-treated group (MTX/ALD). Tumor cells were inoculated as a suspension of 1x106cells/mL into the alveolar cavities produced by exodontia procedures. The following parameters were evaluated: body weight, tumor volume and percentage of tumor inhibition, and gastrointestinal toxicity. Results: The body weight variation was statistically significant between NC animals and PC animals, and between NC animals and ALD-treated group (p<0.01). Tumor volume variation was statistically significant between PC animals, MTX-treated group and MTX/ALD-co-treated group (p<0.05). Analysis of gastric toxicity of MTX-treated group reveled slight reduction of chief (Ch) and parietal (Pr) cellular populations; ALD-treated group exhibited gastric mucosa without histological alterations of Ch cells but intense reduction of Pr cellular population; and MTX/ALD-co-treated group presented reduction of Ch and Pr cellular populations. Conclusions: ALD does not elicit significant antitumor effects on Walker 256 carcinosarcoma cells and decreases antitumor effects of MTX due to toxicity on the gastric epithelium, which is intensified with MTX association.

Introdução: Modelos experimentais em animais representam um instrumento fundamental para elucidar os mecanismos de ação e toxicidade de drogas anticâncer. Objetivo: estabelecer uma correlação do crescimento neoplásico com a aplicação terapêutica combinatória de alendronato de sódio (ALD) e metotrexato (MTX), e avaliar a toxicidade gastrointestinal dessas drogas, no modelo de inoculação de carcinossarcoma de Walker 256 em ratos. Métodos: Ratas fêmeas foram selecionadas e distribuídas aleatoriamente em 5 grupos (n = 10): controle negativo (NC), controle positivo (PC), grupo tratado com MTX, grupo tratado com ALD e grupo tratado com MTX-ALD (MTX/ALD). As células tumorais foram inoculadas como uma suspensão de 1x106 células/mL nas cavidades alveolares produzidas por procedimentos de exodontia. Os seguintes parâmetros foram avaliados: peso corporal, volume tumoral e porcentagem de inibição tumoral e toxicidade gastrointestinal. Resultados: A variação do peso corporal foi estatisticamente significante entre animais NC e animais PC, e entre animais NC e grupo tratado com ALD (p <0,01). A variação do volume tumoral foi estatisticamente significativa entre animais PC, grupo tratado com MTX e grupo tratado com MTX / ALD (p <0,05). A análise da toxicidade gástrica do grupo tratado com MTX revelou uma ligeira redução das populações celulares principais (Ch) e parietais (Pr); o grupo tratado com ALD exibiu mucosa gástrica sem alterações histológicas de células Ch mas intensa redução da população celular Pr; e o grupo tratado com MTX / ALD apresentou redução das populações celulares Ch e Pr. Conclusões: O ALD não provoca efeitos antitumorais significativos nas células do carcinossarcoma Walker 256 e diminui os efeitos antitumorais do MTX devido à toxicidade no epitélio gástrico, que é intensificada com a associação MTX.

Chemical constituents of Lecythis pisonis and cytotoxic activity

The phytochemical investigation of the ethanol extract from leaves of Lecythis pisonis Cambess., Lecythidaceae, resulted in the isolation of seven triterpenes: α- and β-amyrin, uvaol and erythrodiol, ursolic and oleanolic acids and 3β-friedelinol, as well as a mixture of sitosterol and stigmasterol steroids and a diterpene (E)-phytol. The structures of these compounds were identified by¹H and 13C NMR spectral analysis and compared with literature data. The mixture of triterpenes ursolic and oleanolic acids isolated from the active ethereal fraction showed moderate cytotoxic activity. This paper describes for the first time the phytochemical and cytotoxic study of Lecythis pisonis' leaves.

In vitro cytotoxic activity of Brazilian Middle West plant extracts

Cytotoxic activity of eight plant extracts, native from the Mid-West of Brazil comprising Cerrado, Pantanal and semideciduous forest, was evaluated for MDA-MB-435, SF-295, and HCT-8 cancer cell strains. A single 100 µg.mL-1 dose of each extract was employed with 72 h of incubation for all tests. Doxorubicin (1 µg.mL-1) was used as the positive control and the MTT method was used to detect the activity. Cytotoxicity of distinct polarities was observed in thirty extracts (46 percent), from different parts of the following species: Tabebuia heptaphylla (Vell.) Toledo, Bignoniaceae, Tapirira guianensis Aubl., Anacardiaceae, Myracrodruon urundeuva Allemão, Anacardiaceae, Schinus terebinthifolius Raddi, Anacardiaceae, Gomphrena elegans Mart., Amaranthaceae, Attalea phalerata Mart. ex Spreng., Arecaceae, Eugenia uniflora L., Myrtaceae, and Annona dioica A. St.-Hil., Annonaceae. Extracts of at least two tested cell strains were considered to be highly active since their inhibition rate was over 75 percent.

Radiographic and histological evaluation of bisphosphonate alendronate and metotrexate effects on rat mandibles inoculated with Walker 256 carcinosarcoma

PURPOSE: To investigate the effects of bisphosphosnate alendronate (ALD) and metotrexate (MTX) on an experimental model of Walker 256 carcinosarcoma developed in the oral cavity of rats. METHODS Walker 256 carcinosarcoma cell suspension (0,1 mL) containing 10(6) cell/mL was implanted in the alveoli of the first and second molars. The animals were divided and treated with saline, MTX, ALD, and MTX plus ALD. Later, the animals were sacrificed, the tumors were measured and the mandibles were removed for radiographic and histological analysis. RESULTS: In the control group, the radiographic images demonstrated radioluscency with poorly defined borders, and the microscopic examination revealed tumor infiltration into the peripheral and central regions of the bone. Areas of necrosis were commonly seen. In the treated groups with ALD, associated or not with MTX, the radiographic analysis revealed circumscribed tumor-induced osteolysis and various degrees of radiotransparence; while, histologically, preserved bone trabeculae with osteoid formation was observed among malignant cells. CONCLUSION: The bisphosphonate alendronate exherted an osteoprotective effect and induced bone neoformation on the Walker 256 carcinosarcoma inoculated in rat mandibles. The combination of metotrexate with bisphosphonate alendronate is more successful than treatment with the agents alone in controlling the growth of neoplastic cells and in stimulating reactive new bone. Therefore, this may be an alternative treatment to malignant lesions of maxillaries with osteolysis.

OBJETIVO: Avaliar o efeito do bisfosfonato alendronato (ALD) e do metotrexato (MTX) em modelo do carcinossarcoma 256 de Walker na mandíbula de ratos. MÉTODOS: Uma suspensão de células tumorais do carcinossarcoma 256 de Walker (0,1mL), na concentração de 10(6) células/mL, foi implantada nos alvéolos de ratos previamente abertos por exodontia. Os animais foram divididos em grupos e tratados com salina, MTX, ALD e associação do MTX com ALD. Após o sacrifício, os tumores foram medidos e as mandíbulas removidas para exames radiográfico e histológico. RESULTADOS: No exame radiográfico do grupo controle foi verificada área lítica, sem evidência de reparo na região dos alvéolos, e no microscópico, infiltração óssea periférica e central, de pequenas células tumorais com diversas áreas de necrose. Nos grupos tratados com ALD, associado ou não ao MTX, a análise radiográfica mostrou redução da osteólise tumor-induzida com graus variados de radiotransparência na estrutura óssea; enquanto que, na análise histopatológica, trechos de tecido ósseo preservado, com formação de osteóide em meio a células tumorais foram observados. CONCLUSÃO: O bisfosfonato alendronato exerceu um efeito osteoprotetor e induziu neoformação óssea em mandíbulas de ratos implantadas com células de carcinossarcoma de Walker 256. A combinação do metotrexato com o bisfosfonato alendronato foi mais eficaz que o tratamento com os agentes isoladamente no controle do crescimento das células neoplásicas e na estimulação da formação óssea. Sendo assim, essa associação constitui-se uma alternativa de tratamento das neoplasias malignas dos maxilares com invasão e comprometimento ósseo.

Modelo experimental de tumor na cavidade oral de ratos com carcinossarcoma de Walker 256 / Experimental model of Walker 256 carcinosarcoma developed in the oral cavity of rats

OBJETIVO: Estabelecer um modelo experimental de desenvolvimento tumoral na cavidade oral de ratos, permitindo, assim, o estudo da osteólise induzida pelo tumor nos ossos do complexo maxilomandibular como também nas estruturas dentais, através da caracterização histomorfológica da reabsorção óssea e dentária. MÉTODOS: Uma suspensão de células tumorais (0,1mL) do Carcinossarcoma de Walker 256, na concentração de 10(6) células/mL foi implantado na cavidade alveolar de ratos previamente aberta por exodontia. Os animais foram observados durante 12 (doze) dias consecutivos para determinação da curva de peso corpóreo, sendo posteriormente sacrificados e as mandíbulas removidas para exames radiográfico e histológico. RESULTADOS: No exame radiográfico foi verificada área lítica, sem evidência de reparo, na região dos alvéolos. No exame microscópico foi identificada infiltração óssea, periférica e central, de pequenas células hipercromáticas e pleomórficas, com leve infiltrado inflamatório mononuclear associado e áreas de necrose. O índice de pega foi de 100 por cento. CONCLUSAO: O modelo animal de invasão óssea, do tumor de Walker na cavidade oral, possibilita a avaliação in vivo de drogas antitumorais e esquemas terapêuticos no tratamento do câncer bucal.

Determinação do mecanismo de ação citotóxica de alguns compostos extraídos de plantas do Nordeste brasileiro / Determining the cytotoxic mechanism of action of some compounds extracted from Brazilian Northeast plants

Onze compostos originados de plantas do Nordeste Brasileiro foram avaliados quanto aos seus efeitos antiproliferativos em células tumorais humanas CEM (leucemia) e SW-1573 (pulmão), e em células normais humanas CCD-922 (fibroblasto), pelo método do MTT. Cinco desses compostos foram selecionados com valor de IC50 menor que 10 μg/mL nas linhagens de células tumorais. Dentre os compostos, a Jatrofona mostrou citotoxicidade inespecífica, com valores de IC50 menores que 1 μg/mL para três linhagens. Enquanto que um diterpeno e um flavanóide, ambos da Egletes viscosa (família da Compositeae), tiveram moderada atividade. O acetato da lactona do ácido hautrivaico (clerodano A) teve uma citotoxicidade com valores de 6, 6 e 10 μg/mL e o 4'5-dihidroxi-3,3', 7,8-tetrametoxi-flavona (ternatina) com IC50 de 2, 2 e 10 μg/mL nas células CEM, SW-1573 e CCD-922, respectivamente. As oncocalyxonas A (rel-8α-hidroxi-5-hidroximetil-2-metoxi-8αβ-metil-7,8,8a,9-tetrahidro) e C (rel-10α,11β-epoxi-11α-etoxi-8α-hidroxi-2-metoxi-8αβ-metil-5,6,7,8,8a,9,10,10αβ-octahidro), ambas 1,4-antracenodionas originadas da Auxemma oncocalyx (família da Boraginaceae), com IC50 de 0,8-2, 7-8 e 12-13 μg/mL mostraram maior citotoxicidade e especificidade nas células CEM, SW-1573, CCD-922 respectivamente...