Mecanismos celulares e moleculares modulados por PGE2 e TGFβ durante a progressão do câncer colorretal

Um dos primeiros eventos associados à progressão do câncer colorretal (CCR) é a perda dos contatos célula-célula, seguido da aquisição de um fenótipo indiferenciado e aumento na motilidade celular. Estes eventos estão associados com um processo conhecido como transição epitélio-mesenquimal (TEM), na qual as células adquirem capacidade para invadir tecidos vizinhos. A biogênese deste tipo de câncer envolve uma série de fatores predisponentes dentre os quais está o processo infamatório, onde a prostaglandina E2 (PGE2) e o fator transformador β de crescimento (TGFβ) cumprem importante função. Vários estudos têm mostrado que a PGE2 induz proliferação, migração e invasão celular. Já o TGFβ, apesar de ter uma função dual como promotor ou supressor da tumorigênese, é conhecido também por promover TEM em diferentes tipos de câncer. No entanto, a associação entre as vias de sinalização celular ativada por estes agentes na indução da perda da adesão célula-célula e da TEM em CCR não é conhecida. No presente estudo, usando linhagens celulares de CCR, analisamos a associação entre a PGE2 e o TGFβ sobre as alterações no fenótipo celular e eventos relacionados com a TEM. Na primeira etapa do estudo, usando células Caco-2, mostramos que o tratamento com PGE2 promoveu alterações na localização e função de proteínas do complexo juncional apical (CJA) concomitantemente com a perda da funcionalidade da barreira paracelular. Mostramos também que a via de sinalização responsável nesse evento foi a PKC através de um mecanismo envolvendo os receptores prostanóides EP1 e EP2 e a proteína claudina-1 na modulação do CJA. Na segunda etapa do estudo, analisamos eventos relacionados com a TEM usando linhagens celulares de CCR que diferem no fenótipo e no grau de invasão mediante tratamentos com PGE2 e TGFβ...

The lost of cell-cell adhesion followed by increased motility and acquisition of an undifferentiated phenotype are initial events associated with colorectal cancer (CCR) progression. These events are associated with a process known as epithelial-mesenchymal transition (TEM) in which cells acquire the ability to invade neighboring tissues. The biogenesis of this type of cancer predisposes a series of conditions for which the inflammatory process, known as an important inductor of prostaglandin E2 (PGE2) and tumor growth factor β (TGFβ), plays an important function. Various studies have shown that PGE2 is able to induce proliferation, migration and invasion. TGFβ plays a dual function either as promoter or tumor suppressor and is also a TEM inductor in different types of cancer. However, a crosslink between the cell signaling pathways activated by these agents in relation to lost of cell-cell adhesion and TEM development in CCR is unknown. In the present study, using CCR cell lines, we analyze the association between PGE2 and TGFβ...

Modulação do processo de adesão célula-célula por prostaglandina E2 em células de adenocarcinoma de cólon humano / Modulation of the adhesion process cell-cell for prostaglandim E2 in cells of human colon adenocarcinoma

A enzima ciclooxigenase-2 juntamente com a prostaglandina E2 (PGE2), tem sido descrito como potentes indutores da proliferação, migração e invasividade celular em câncer colo-retal. Neste trabalho nós investigamos os efeitos do tratamento da PGE2 no complexo juncional (CJ) de células epiteliais derivadas de adenocarcinoma de cólon humano, Caco-2. As células foram tratadas com PGE2 (1 μM) e os efeitos no complexo juncional foram monitorados em diferentes tempos de tratamento. Alterações nas proteínas de junção tight e aderente foram observadas pela medida da resistência elétrica transepitelial (TER), por imunofluorescência e immunoblotting e microscopia eletrônica de transmissão (TEM). Nossos resultados mostraram que células tratadas por 15 minutos com PGE2 (1 μM) apresentaram uma diminuição de aproximadamente 40por cento na TER. Quando a monocamada de células foi analisada por MET, foi possível observar grandes espaços na região das junções aderentes nas células tratadas durante 15, 30 e 60 minutos quando comparada a células não tratadas, que apresentaram um CJ bem definido. As juncões tight apareceram aparentemente preservadas durante os tempos de tratamento utilizados com PGE2. No entanto, usando a técnica do vermelho de rutênio, mostramos que as junções tight não estavam funcionais como verificado pela passagem dessas partículas através do espaço intercelular. Alterações no perfil de distribuição das proteínas do complexo juncional foram observadas para E-caderina, β-catenina, ocludina, ZO-1 e claudinas –1 e –4, principalmente nos primeiros minutos de tratamento. O presente estudo mostra que a PGE2 causa alterações no complexo juncional, provocando alterações da permeabilidade paracelular a íons e moléculas, rompimento do contato célula-célula e redistribuição das principais proteínas das junções tight e aderentes em células Caco-2.