Comparison of the Effectiveness of Leaf Extracts of Anredera cordifolia, Psidium guajava and Pogostemon cablin on Inhibitory Power Over Escherichia coliBacteria / Comparación de la eficacia de los extractos de hojas de Anredera cordifolia, Psidium guajava y Pogostemon cablinen su poder inhibidor sobre la bacteria Escherichia coli

Background: the current research studies why it is effective using Anrederacordifolia, Psidium guajava, and Pogostemon cablin by the local community as a traditional medicine for diarrhea treatment caused by Escherichiacoli bacteria. Objectives: We compared the inhibitor effectiveness of three leaf extracts against Escherichia coli; we also identified the anti-bacterial substances contained in leaf extracts. Methods: We determined the bacterial test activity using the "agar diffusion" method and the thin layer chromatography (TLC) as qualitative analysis for determining the anti-bacterial substances contained in the extract. Results: The Pogostemon cablin leaf extract contained terpenoids, phenolic, and flavonoids compound as bacterial inhibitors, and the comparison showed that Pogostemon cablin leaf extract had the greatest bacterial inhibition power. Conclusion: The antibiotic substances found in the leaf extracts of Anredera cordifolia, Psidium guajava, and Pogostemon cablin can be used as traditional medicine. The breakthrough was evidenced by the ability to inhibit Escherichia coli bacteria. This research shows that traditional medicine has ancient knowledge used by this paper

Antecedentes: la presente investigación estudia la eficacia del uso de Anredera cordifolia, Psidium guajava y Pogostemoncablin por la comunidad local como medicina tradicional para el tratamiento de la diarrea causada por la bacteria Escherichia coli. Objetivos: Comparamos la eficacia inhibidora de los extractos de tres hojas contra Escherichia coli; también identificamos las sustancias antibacterianas contenidas en los extractos de hojas. Métodos: Determinamos la actividad de la prueba bacteriana mediante el método de "difusión en agar" y la cromatografía en capa fina (TLC) como análisis cualitativo para determinar las sustancias antibacterianas contenidas en el extracto. Resultados: el extracto de hoja de Pogostemoncablin contenía compuestos terpenoides, fenólicos y flavonoides como inhibidores bacterianos, y la comparación mostró que el extracto de hoja de Pogostemon cablin tenía el mayor poder de inhibición bacteriana. Conclusión: El contenido de sustancias antibióticas que se encuentran en el extracto de hoja de Anredera cordifolia, Psidium guajava y Pogostemoncablin puede utilizarse como medicina tradicional. Esto se evidencia por la capacidad de inhibir la bacteria Escherichiacoli. Esta investigación muestra que la medicina tradicional tiene un conocimiento antiguo utilizado por este artículo

Determinación del efecto antimicrobiano in vitro de un gel elaborado con extracto etanólico de hojas de Senecio rhizomatus Rusby (Asteraceae) / Determination of the in vitro antimicrobial effect of a gel made with ethanolic extract of leaves of Senecio rhizomatus Rusby (Asteraceae)

El uso de plantas para el alivio de afecciones de manera exitosa nos lleva a investigar su actividad y hacer formulaciones aprovechando los principios activos de estas. Es así; que en el presente trabajo se determinó el efecto antimicrobiano del gel elaborado con extracto etanólico de hojas de Senecio rhizomatus Rusby; planta seleccionada en base a la etnobotánica y etnofarmacia, se recolectó en la zona de Chavín de Huantar, distrito de Huari, Departamento de Ancash, su nombre común es "Llancahuasha"; con la cual se hizo un extracto etanólico de hojas para la determinación de metabolitos secundarios utilizando reacciones en tubo y Cromatografía en Capa Fina para la determinación de Alcaloides. Con el extracto etanólico se elaboró un gel antimicrobiano a concentraciones de 12,5 y 25 mg/mL; se evaluó su efecto antimicrobiano mediante el método de difusión en agar, utilizando para ello cepas de Staphylococcus aureus aisladas de muestra clínica hospitalaria y de la comunidad. Se encontró alcaloides, flavonoides y saponinas esteroidales y mediante la lectura e interpretación de zonas claras de inhibición del crecimiento bacteriano se comprobó el efecto antibacterial significativo del gel a concentración de 25 mg/mL frente a cepa de la comunidad de S. aureus, el halo de inhibición formado fue de 20 mm y con la cepa hospitalaria el halo de inhibición formado fue de 18 mm. Se concluye entonces que el gel elaborado con extracto etanólico de hojas de Senecio rhizomatus Rusby tiene efecto antibacteriano in vitro.

Validación del agar Mueller Hinton modificado para la determinación de las concentraciones mínimas inhibitorias a los antifúngicos por etest en candida spp / Validation of the modified Mueller Hinton agar for the determination of the minimum inhibitory concentrations to antifungals by E-test in Candida spp

En este trabajo de investigación se determinaron las Concentraciones Mínimas Inhibitorias (CMI) de los antifúngicos fluconazol, voriconazol, posaconazol, caspofungina, anidulafungina y anfotericina B, por los métodos de microdilución en caldo y difusión en agar con Etest, empleando RPMI 1640 agar y Mueller Hinton modificado (MHm), en 102 cepas de Candida spp., aisladas de sangre, provenientes de la Red de Candidemia del INHRR. El objetivo fue validar el empleo del MHm como medio de cultivo confiable en el método de Etest para la obtención de las CMI. Se utilizaron las cepas C. parapsilosis ATCC 22019 y C. krusei ATCC 6258 como control de calidad. Los resultados demostraron un 94% de frecuencia para C. no albicans y un 6% para C. albicans. Se obtuvo un 100% de sensibilidad para las equinocandinas y anfotericina B, en todas las especies. El MHm demostró una elevada reproducibilidad con respecto al RPMI agar y el método de referencia microdilución en caldo. En base a los resultados obtenidos en esta investigación, se logró la validación del medio MHm para la determinación de las CMI por Etest, así como la detección de resistencia, recomendándolo como metodología confiable, accesible y de fácil ejecución para uso rutinario en el laboratorio de microbiología.

In this research, the Minimum Inhibitory Concentrations (MICs) of the antifungal agent's fluconazole, voriconazole, posaconazole, caspofungin, anidulafungin and amphotericin B were determined by broth microdilution and agar diffusion Etest methods, using RPMI 1640 agar and modified Mueller Hinton (mHM), in 102 strains of Candida spp., isolated from blood, from the Candidemia Network of the INHRR. The objective was to validate the use of mHM as a reliable culture medium for the Etest method to obtain MICs. As a quality control, the strains C. parapsilosis ATCC 22019 and C. krusei ATCC 6258 were used. The results demonstrated a 94% of frequency for non C. albicans and 6% for C. albicans. A 100% of sensitivity was obtained for echinocandins and amphotericin B in all species. The mHM showed high reproducibility with respect to RPMI agar and the reference method of microdilution broth. Based on the results obtained in this investigation, the validation of mHM medium, for the determination of MICs by Etest, as well as the resistance detection was achieved, recommending it as a reliable, affordable and easy to implement method for the routine use in the microbiology laboratory.

Validación de la técnica para la cuantificación de tilosina en un producto sólido / Validation of technique for the quantification of tylosin in a solid product

Se validó la técnica para la cuantificación de tilosina en polvo, para lo cual previamente se estandarizó la técnica recomendada por la United States Pharmacopeia versión 30 del 2007, con el fin de ajustarse y dar cumplimiento a la normativa internacional. La muestra se compuso del 10 por ciento de tilosina fosfato y 90 por ciento de Carrier 40-60. El microorganismo sometido a prueba fue Micrococcus luteus ATCC 9341 y se empleó el método de difusión en agar. Los resultados de las pruebas se sometieron al programa de validación microbiológica "Validation Manager". El método de difusión en agar cumplió con los valores esperados, y así quedó validada la técnica.

The quantification technique of powdered tylosin was validated. To this end, the technique recommended by the United States Pharmacopeia, 30th version, 2007 was standardized to adapt it to and to comply with the international regulations. The sample was composed of 10 percent tylosin phosphate and 90 percent Carrier 40-60. The agar diffusion was used to test the micro-organism Micrococcus luteus ATCC 9341 and all results were microbiologically validated by the program "Validation Manager". The agar diffusion method met the prospective values, thus validating the technique.

Validación del método analítico para la cuantificación de bacitracina / Validation of the analytical method to quantify the bacitracine

Se desarrolló y validó un método analítico para la determinación cuantitativa de bacitracina zinc al 15 por ciento y bacitracina metilen disalicilato al 11 por ciento, por el método de cilindro en placa (difusión en agar), con el fin de ser usado en el control de calidad de las materias primas y productos farmacéuticos. Se evaluaron los parámetros de especificidad, selectividad, linealidad del sistema, y del método, exactitud, límite de cuantificación y precisión. Mediante el diseño experimental y la evaluación estadística de los resultados, se demostró que el método analítico es específico, selectivo, lineal, preciso (CV< 5 por ciento) y exacto (sesgo< 3 por ciento, Gexp< Gtab y t exp< t tab) en el intervalo de las concentraciones estudiadas. El límite de cuantificación y de detección fue de 0,02 y 0,005 UI/mL respectivamente. Las características de desempeño analítico cumplen con los requisitos para la aplicación analítica propuesta.

An analytical method was developed and validated for quantitative determination of 15 percent zinc bacitracine and 11 percent disalicylate methylene-bacitracine by the plate-cylinder method (agar diffusion) to be used in quality control of raw products and pharmaceutical products. Specificity, selectivity, system and method linearity, accuracy, quantification and precision parameters were assessed. By the experimental design and the statistic evaluation of results, it was demonstrated that the analytical method is specific, selective, linear, precise (CV< 5 percent) and exact (bias < 3 percent, Gexp< Gtab< t exp< t tab) during the study concentrations. The quantification and detection limit was of 0.02 and 0.005 Ul/mL, respectively. The analytical performance characteristics fulfill the requirement for the proposal analytical implementation.

Estudio multicéntrico de la vigilancia de la susceptibilidad in vitro a tigeciclina en Santiago de Chile / Multicenter study on the monitoring of in vitro susceptibility to tigeeyeline in Santiago, Chile

The objective of this multicenter study was to determine tigeeyeline susceptibility rates, measured by agar diffusion, in nine hospitals in Santiago and to compare these rates with other antimicrobials. Each center studied 20 strains per month. All intermedíate and fully resistant strains as well as 10 percent of susceptibile strains were also studied by the broth microdilution method. Overall, 2301 strains were studied displaying the foliowing susceptibility rates for tigeeyeline: 100 percent for Streptococcus sp, Enterococcus sp, and E. coli respectively, 99.8 percent for Staphylococcus sp, 93 percent for Klebsiella and 80 percent for Acinetobacter baumarmii. For Proteus, Providencia and Morganella the susceptibility rates were 4 percent. For cefotaxime-resistant Klebsiella and imipenem-resistant A. baumarmii susceptibility rates were 95 percent and 80 percent respectively. The agar diffusion and broth dilution method were 100 percent concordant for tigeeyeline susceptible strains but only 27 percent for resistant or intermedíate strains represented mostly by Acinetobacter baumannii. The majority of these strains (57/59) proved to be susceptible after retesting. The great majority (96,6 percent) of strains tested from nine Chilean hospitals proved to be susceptible to tigeeyeline with exception for Proteus, Providencia and Morganella (66 percent resistance). Using the agar diffusion method for measuring tigeeyeline susceptibility to A. baumannii may be misleading.

Para conocer la susceptibilidad a tigeciclina por difusión en agar en nueve hospitales de Santiago y comparar la susceptibilidad con otros antimicrobianos, se diseñó este estudio multicéntrico. Cada centro estudió 20 cepas mensualmente. Las intermedias, resistentes y 10 por cientoo de las susceptibles se re-testearon y estudiaron por microdilución en caldo. Se incluyeron 2.304 cepas. Fueron susceptibles a tigeciclina Strep-tococcus sp (100 por cientoo), Enterococcus sp (100 por ciento), E. coli (100 por cientoo), Staphylococcus sp (99,8 por ciento), Klebsiella pneumoniae (93 por ciento) y Acinetobacter baumannii (80 por ciento). En Proteus, Providencia y Morganella la susceptibilidad fue 4 por cientoo. Klebsiella resistente a cefotaxima y Acinetobacter resistente a imipenem, 95 por cientoo y 80 por cientoo fueron susceptibles a tigeciclina, respectivamente. La concordancia en cepas susceptibles y en las enviadas como resistentes o intermedias (A. baumannii) fue 100 por cientoo y 27 por cientoo respectivamente. El re-testeo confirmó que la mayoría eran susceptibles. Los patrones de susceptibilidad bacteriana muestran muy buena actividad in vitro a tigeciclina. La resistencia in vitro de A. baumannii por difusión en agar debe interpretarse con precaución.

Actividad antibacteriana no-peróxido de mieles zulianas / Non-peroxide antibacterial activity in zulia honeys

La actividad antibacteriana no-peróxida de la miel de abeja se evaluó en 160 muestras procedentes de cuatro centros apícolas del estado Zulia: Facultad de Agronomía de la Universidad del Zulia, La Rinconada, Mara y Caja Seca, durante la época seca y lluviosa. Se muestrearon 20 panales obteniéndose 20 litros de miel por zona/época, llevando a cabo diluciones de 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 10 y 5% (p/v) de concentración de miel utilizando como diluyente catalasa al 0,2% (p/v). Las muestras se analizaron utilizando cepas patógenas de Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes y Proteus mirabilis, mediante la técnica de difusión en agar. Los resultados obtenidos revelaron que las mieles zulianas, tuvieron actividad antibacteriana del tipo bacteriostático contra las seis bacterias seleccionadas. La bacteria más susceptible fue Pseudomonas aeruginosa, a nivel de todas las concentraciones ensayadas.

The honey bee non peroxide antibacterial activity was evaluated in 160 samples from four zones of the Zulia state: The Agronomy Faculty of the University of Zulia, La Rinconada, Mara and Caja Seca during the dry and rainy seasons. Twenty honey combs per zone and per season were sampled, obtaining 20 L of honey for test, making dilutions from 5, 10, 15, 20 25, 30, 35, 40, 45 to 50% (% w/v) of honey content using 0.2% (w/v) catalasa a diluent. The samples were analyzed using pathogenic strains of Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes and Proteus mirabilis, with the agar diffusion technique. The results obtained showed that the Zulia state honeys had antibacterial activity (bacteriostatics) against the six bacteria selected. The most susceptible bacterium was Pseudomonas aeruginosa, over the range of concentrations assayed.

Método de difusión con discos para la determinación de sensibilidad a fluconazol en aislamientos de Candida spp / Disk diffusion method for fluconazole susceptibility testing of Candida spp. isolates

Se estudiaron 1193 aislamientos clínicos para estandarizar y evaluar un método de difusión con discos de fluconazol de lectura visual, que permita detectar levaduras sensibles al antifúngico. Las especies analizadas fueron: Candida albicans (n=584), Candida parapsilosis (n=196), Candida tropicalis (n=200), Candida glabrata (n=113), Candida krusei (n=50), Candida spp. y otras levaduras oportunistas (n=50). Los discos fueron manufacturados en el INEI-ANLIS "Dr. Carlos G. Malbrán". Se midieron los halos de inhibición del crecimiento producidos por fluconazol y la concentración inhibitoria mínima (CIM) por el método de referencia M27-A2 modificado por EUCAST. Se establecieron los valores de corte del método de difusión en: ≥16 mm para levaduras sensibles a fluconazol (CIM ≤ 8 µg/ml), entre 9 y 15 mm para sensibles dependientes de la dosis (CIM = 16-32 mg/ml) y ≤ 8 mm para resistentes (CIM ≥ 64 µg/ml). El método de difusión tuvo 94,7% de concordancia con el de referencia, con 0,2% de errores very major y 0,3% de errores major. La reproducibilidad inter e intralaboratorio fue muy buena. Para detectar aislamientos sensibles a fluconazol, este método resulta confiable y de bajo costo; sin embargo, es conveniente que los aislamientos con halos ≤ 15 mm sean reevaluados por el método de referencia.

In order to standardize and evaluate a disk diffusion method with visual reading to detect in vitro fluconazole susceptibility of yeast, 1193 clinical isolates were tested. These included 584 Candida albicans, 196 Candida parapsilosis, 200 Candida tropicalis, 113 Candida glabrata, 50 Candida krusei and 50 Candida spp. and other opportunistic yeasts. The disks were manufactured in the INEI-ANLIS "Dr. Carlos G. Malbrán". The disk diffusion method results were compared to MIC results obtained by the reference CLSI M27-A2 broth microdilution method modified by EUCAST. The interpretative breakpoints for in vitro susceptibility testing of fluconazole were established at: zone diameter ≥ 16 mm for MIC ≤ 8 µg/ml (susceptible isolates), between 9 and 15 mm for MIC = 16-32 mg/ml (susceptible dose-dependent isolates), and ≤ 8 mm for MIC ≥ 64 µg/ml (resistant isolates). Overall agreement between the two methods was 94.7%, with 0.2% very major errors, and 0.3% major errors. Inter - and intralaboratory agreement was good. The disk diffusion method for drug susceptibility testing of Candida spp. isolates is inexpensive, reliable and reproducible. However, when the inhibition zone diameter is ≤ 15 mm, it is advisable to test the isolate by the reference microdilution method.