Toxicological evaluation of Lafoensia pacari A. St.-Hil. (Lythraceae) stem bark extract: Acute and subchronic studies in mice

This study evaluated the safety of Lafoensia pacari A. St.-Hil. (Lythraceae) stem bark hydroalcoholic extract (LPE) through acute and subchronic toxicological assessments in mice. In the acute toxicity evaluation, a single 2000 mg/kg oral dose of LPE was administered to mice and clinical observations were conducted for 14 days. For subchronic toxicity, LPE doses (6.25-1000 mg/kg) were administered orally for 28 days and biochemical, hematological, histopathological analyses and renal and liver expression of Ki-67 were carried out. The acute oral toxicity evaluation of LPE showed no toxicity in mice and it was was classified as category 5 (LD50>2000-5000 mg/kg). In a repeated dose 28-day toxicity study, LPE (100-1000 mg/kg) led to an increase in reticulocytes, which suggests a possible proliferative effect on blood cells. In addition, LPE (400-1000 mg/kg) of produced alterations in biochemical parameters, although no microscopic changes were found in the organs analyzed. A normal expression of the Ki-67 cell proliferation indicator was observed in the kidney and liver tissues, which suggests that LPE does not bring about changes in the proliferative activity of these organs. In conclusion, LPE should be used with caution, particularly in larger doses over longer periods and also in combination with other medication.

Acaricidal activity of ethanolic extracts of Stryphnodendron adstringens and Lafoensia pacari and oil resins from Copaifera sp. and Pterodon emarginatus against Sarcoptes scabiei var. suis / Atividade acaricida dos extratos etanólicos de Stryphnodendron adstringens Mart. e Lafoensia pacari A. St Hil., bem como das óleo-resinas de Copaifera sp. e Pterodon emarginatus Vogel, 1837 contra Sarcoptes scabiei var. suis

In vitro bioassay using Sarcoptes scabiei as a test microorganism is a viable method of study for diverse drugs with acaricidal properties. A great amount of assays proves the diverse and efficient biological activity of extracts and compounds from Brazilian savanna plants. This study had as main object, test and compare the acaricidal activity of four Brazilian Cerrado bioproducts: Stryphnodendron adstringens Mart., Copaifera sp., Lafoensia pacari A. St Hil. and Pterodon emarginatus Vogel, 1837. To perform this test S. scabiei mites were collected from crusts removed on ears of highly infected sows. The mites were selected and separated in Petri dishes with three different concentrations (25, 50 and 75%) of each bioproduct, to evaluate their potential acaricidal activity. The mortality of the mites was counted in each Petri dish every hour, during five hours. The statistical analyses demonstrated differences between the bioproducts tested. The oleoresin of Copaifera sp. and P. emarginatus presented the best results with 100% of mites mortality after treatment. The ethanolic extracts of S. adstringens and L. pacari demonstrated lower acaricidal activity when compared to the oleoresins, with little or no difference among the control groups tested. This bioassay demonstrated to be efficient, reliable, low cost and easy accomplishment. Oil resins from Copaifera sp. and P. emarginatus have in vitro acaricidal activity against adult females of S. scabiei var. suis.(AU)

O uso de Sarcoptes scabiei como microrganismo teste para bioensaio in vitro é um método de estudo viável para diversas drogas acaricidas. Muitos ensaios comprovam a diversidade e eficiência de atividade biocida de extratos e componentes presentes em plantas do cerrado brasileiro. Este trabalho objetivou testar e comparar a atividade acaricida de quatro bioprodutos do cerrado brasileiro: Stryphnodendron adstringens Mart., Lafoensia pacari A. St Hil., Copaifera sp. e Pterodon emarginatus Vogel, 1837. Para este estudo, ácaros S. scabiei foram colhidos em crostas removidas de orelhas de fêmeas suínas altamente infestadas. Os ácaros foram selecionados, separados e colocados em placas de Petri com três diferentes concentrações (25, 50 e 75%) de bioprodutos, para avaliar o potencial de atividade acaricida de cada um. Foi realizada a contagem da mortalidade dos ácaros em cada placa de Petri a cada hora, durante cinco horas. As análises estatísticas demonstraram diferenças entre os bioprodutos testados. As óleo-resinas de Copaifera sp. e P. emarginatus apresentaram os melhores resultados, com 100% de mortalidade dos ácaros após tratamento. Os extratos etanólicos de S. adstringens Mart. e L. pacari demonstraram menor atividade acaricida quando comparados as óleo-resinas, com pequena ou nenhuma diferença entre os resultados dos grupos controle. Este ensaio demonstrou ser uma ferramenta eficiente, confiável, de baixo custo e de fácil realização. As óleo-resinas Copaifera sp. e P. emarginatus possuem atividade acaricida in vitro sobre fêmeas adultas de S. scabiei var. suis.(AU)

Avaliação da atividade antioxidante do extrato aquoso de Lafoensia pacari A. ST-HIL. em emulsão não-iônica / Evaluation of antioxidant activity of aqueous extract of Lafoensia pacari A. ST.-HIL. in non-ionic emulsion

O envelhecimento cutâneo está relacionado com a ação de radicais livres que, por consequência da senescência, acabam estando em maior quantidade e logo as defesas naturais não conseguem eliminá-los. O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma emulsão não-iônica com adição do extrato aquoso das entrecascas de Lafoensia pacari A. St.-Hil. e avaliar sua estabilidade físico-química, assim como a atividade antioxidante. O extrato aquoso foi preparado sob refluxo na proporção 1:25. A dosagem de polifenóis totais se deu pelo método Folin-Ciocalteau, com ácido tânico como padrão. Foram incorporados à emulsão não-iônica BHT e ácido ascórbico, ambos empregados como substâncias de referência e o extrato aquoso na concentração de 1%. A análise da atividade antioxidante foi realizada pelo método do fosfomolibdênio, onde cada amostra foi diluída a concentração de 400 miug/mL. A incorporação de extrato aquoso de L. pacari não influenciou de maneira significativa na estabilidade do creme em relação ao tempo de análise. A quantificação de polifenóis mostrou que a extração aquosa à quente não foi um método eficiente, resultando em um EAT (equivalente de ácido tânico) de 1,0328 mg/mL. Proporcional à concentração de polifenóis, a atividade antioxidante foi baixa, não ultrapassando 5,0% de atividade em relação ao ácido ascórbico.

Cutaneous aging is related to the action of free radicals, which appear in greater quantity as a consequence of senescence, so that natural defenses cannot eliminate them. The aim of this study was to develop a non-ionic emulsion containing an aqueous extract of the inner bark of Lafoensia pacari A. St.-Hil. and assess its physicochemical stability, as well as its antioxidant activity. The aqueous extract was prepared under reflux with a 1:25 ratio of bark:distilled water (w/v). The total polyphenol content was determined by the Folin-Ciocalteau method, with tannic acid as standard. BHT, ascorbic acid and the aqueous extract were incorporated into the non-ionic emulsion, each of them at a concentration of 1%, the first two being. used as reference substances. Antioxidant activity was analyzed by the phosphomolybdenum method, each emulsion being first diluted in water to 400 ìg / mL. The addition of aqueous extract of L. pacari did not significantly affect the stability of the cream over the period of analysis. The content of polyphenols showed that hot aqueous extraction was not an efficient method, resulting in a tannic acid equivalent (TAE) of 1.0328 mg/mL in the crude extract. Proportional to the polyphenol concentration, the antioxidant activity was also low, not exceeding 5.0% of the activity of the ascorbic acid.

Central activities of hydroalcoholic extract from Lafoensia pacari A. St.-Hil. stem bark / Atividades centrais do extrato de Lafoensia pacari A. St.- Hil. da casca do caule

Lafoensia pacari A. St.-Hil. can be found from Amapá to Rio Grande do Sul states, and also in Paraguay and Bolivia. It is popularly known as pacari or mangava-brava and is used to promote weight loss, as an anti-thermal or tonic, to treat gastritis, ulcers, scarring, itching, discouragement, and cancer. In the open field tests, the hydroalcoholic extract from L. pacari stem bark (HEP) decreased the number of rearings, number of invaded squares, and increased immobility time compared to control animals. In the pentobarbital-induced sleep time test, HEP decreased latency time to sleep and increased sleeping time. In the rota-rod test, no changes in the studied parameters were observed. In the elevated plus maze, HEP increased the percentage time and percentage entries in the open arms, indicating that this extract exerts an anxiolytic-like activity.

Lafoensia pacari A. St.-Hil., uma espécie vegetal presente no Brasil, do Amapá ao Rio Grande do Sul, no Paraguai e na Bolívia, é popularmente conhecida como pacari ou mangava-brava e é utilizada como emagrecedor, cicatrizante, antitérmico, tônico e para tratar gastrite, úlcera, coceira, desânimo e câncer. No teste do campo aberto, o tratamento com o extrato hidro-alcoólico de pacari (HEP) reduziu o número de rearings e o número de quadrados invadidos além de aumentar o tempo de imobilidade dos animais em relação ao controle. No sono induzido por pentobarbital sódico o tratamento com HEP causou redução na latência e aumento na duração do sono. No rota-rod, o tratamento com HEP não alterou os parâmetros observados. No teste de labirinto em cruz elevado, com o tratamento com HEP foi observado aumento do percentual do tempo de permanência e de entradas nos braços abertos, caracterizando uma atividade tipo ansiolítica.

Effects of ethanolic extract of leaves of Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae (pacari), in pain and inflammation models / Efeitos do extrato etanólico das folhas de Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae (pacari), em modelos de dor e inflamação

Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae, popularly known as pacari, is a Cerrado's native specimen; the stem bark extract is used in folk for pain and inflammation, also showing sedating activity. This study aimed to evaluate the analgesic and anti inflammatory activities of ethanol extract from pacari leaves (EEPL). These activities were verified in mice. The previous treatment with EEPL 1.0 g/kg showed antinociceptive activity both in the acetic acid-induced writing test and in the formalin-induced model of pain, and in neurogenic and inflammatory phases as well. In the croton oil-induced ear edema, the pre-treatments with EEPL reduced the edema in a dose-dependent manner. Also in the carrageenan-induced peritonitis, the two major doses tested (2.0 and 1.5 g/kg p.o.) were able to reduce the leukocyte migration in a dose-dependent manner. The Central Nervous System tests showed that the extract does not elicit uncoordinated motricity, hypnosis or sedating effects. The results showed that EEPL maintains the analgesic and anti-inflammatory effects of the stem bark of pacari, being the collect of leaves more favorable to the preservation of this Cerrado's native specimen.

O pacari (Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae) é uma espécie vegetal nativa do cerrado, o extrato da casca de caule é utilizado popularmente para dores e inflamação, tendo mostrado atividade sedativa. Este trabalho objetivou avaliar os efeitos do extrato etanólico das folhas do pacari (EEFP) como analgésico e antiinflamatório. As atividades analgésica e antiinflamatória foram verificadas em camundongos. O tratamento prévio com EEFP 1,0 g/kg mostrou atividade antinociceptiva tanto no método das contorções abdominais induzidas por ácido acético como também no modelo de dor induzida por formalina, tanto na fase neurogênica quanto na fase inflamatória. Os pré-tratamentos com o EEFP reduziram o edema de orelha, induzido por óleo de cróton, de forma dose-dependente. Os testes de atividade no sistema nervoso central mostraram que o extrato não provoca incoordenação motora nem hipnose ou sedação. Os resultados mostram que o EEFP mantém as atividades analgésica e antiinflamatória do extrato das cascas do caule do pacari, sendo que a coleta das folhas favorece a preservação desta espécie nativa do cerrado.

Evaluation of the antifungal activity and mode of action of Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae, stem-bark extracts, fractions and ellagic acid / Avaliação da atividade antifúngica e modo de ação dos extratos da entrecasca, frações e ácido elágico de Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae

Stem-bark extracts, fractions and the isolated constituent, ellagic acid of Lafoensia pacari St. Hil. (Lythraceae) were in vitro assayed for antifungal activity against a panel of yeasts, hialohyphomycetes as well as dermatophytes with the microbroth dilution method. The EtOH extract and its fractions and ellagic acid exhibited activity against Candida spp and Saccharomyces cerevisiae with MIC values between 250-1000 µg/mL, but they showed no action against filamentous fungi and dermatophytes (MIC>1000 µg/mL). Active extracts were evaluated in Neurospora crassa hyphal growth inhibition and sorbitol assays and then the effect of ergosterol on the MIC of ellagic acid was studied. The active extracts and its fractions and ellagic acid showed a blotchy zone around the paper disk and induced malformations of the hypha. Besides, MIC of the ellagic acid against the Saccharomyces cerevisiae was raised from 62 to 250 µg/mL in the presence of sorbitol 0.8 M, suggesting that the ellagic acid would probably exert its action on fungal cell wall. These results indicate that ellagic acid might be the main active antifungal compound of Lafoensia pacari and further suggest that the mode of antifungal action of these extracts and ellagic acid could be associated with the inhibition of fungal cell wall.

Os extratos, frações e ácido elágico, isolados da entrecasca de Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae, foram testados in vitro para atividade antifúngica, frente a um painel de leveduras, hialo-hifomicetos e dermatófitos, utilizando o método de microdiluição. O extrato EtOH, frações e ácido elágico exibiram atividade contra Candida spp. e Saccharomyces cerevisiae com valores de CIM entre 250-1000 µg/mL, porιm não mostraram ação contra fungos filamentosos e dermatófitos (CIM>1000 µg/mL). Os extratos ativos foram avaliados nos ensaios de inibição do crescimento das hifas de Neurospora crassa, no teste do sorbitol, e pelo estudo do efeito do ergosterol na CIM do ácido elágico. Os extratos ativos, frações e ácido elágico mostraram zonas manchadas ao redor dos discos de papel e induziram malformações nas hifas. Além disso, a CIM do ácido elágico contra Saccharomyces cerevisiae passou de 62 para 250 µg/mL na presença do sorbitol 0,8 M, sugerindo que o ácido elágico provavelmente poderia exercer ação na parede celular fúngica. Esses resultados indicam que o ácido elágico pode ser o principal composto antifúngico de Lafoensia pacari, sugerindo que o modo de ação antifúngico desses extratos e ácido elágico poderia estar associado à inibição da parede celular fúngica.

Atividade antimicrobiana de extratos hidroalcoólicos de Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae, frente a bactérias multirresistentes de origem hospitalar / Antibacterial activity of the hydro-alcoholic extracts of Lafoensia pacari Saint Hil. against multiresistant bacterial strains from hospital source

Os microrganismos patogênicos multirresistentes apresentam-se como grandes responsáveis por milhões de mortes em todo o mundo, principalmente Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus, responsáveis por grande parte das infecções hospitalares. A preocupação com estas espécies faz com que novas pesquisas busquem alternativas para controlar estes microrganismos de uma forma mais eficiente e também mais econômica. Os extratos fitoterápicos são alternativas promissoras para este fim, visto que são uma imensa fonte de compostos de ação biológica. O objetivo do trabalho foi a elucidação da atividade antimicrobiana do extrato de Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae, frente a linhagens de bactérias multirresistentes (P. aeruginosa, S. aureus) isoladas de pacientes com múltiplas infecções internados na Unidade de Emergência de Maceió. Os testes de atividade antibacteriana foram avaliados pelo método de difusão em meio sólido (Kirby-Bauer) modificado. De acordo com os ensaios in vitro, foi constatado que 96,4 por cento das linhagens de bactérias utilizadas na pesquisa apresentaram-se sensíveis ao extrato da folha da planta, demonstrando atividade antibacteriana. Halos de inibição de crescimento de até 26 mm foram encontrados. Dessa forma, conclui-se que o extrato de Lafoensia pacari apresenta possibilidades de se encontrar substâncias úteis no combate a bactérias multirresistentes.

Multiresistant pathogenic microorganisms are responsible for million of death all the world, mainly Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus that are responsible for great part of hospital infections. The concern with this species does new researches to find out alternatives to control these microorganisms in the way more efficient and more economic. The phytoterapic extracts are promissory alternatives for that purpose because they are an immense source of biological action. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial activity of Lafoensia pacari A. St.-Hil., Lythraceae, extract on multiresistant bacterial strains (P. aeruginosa, S. aureus) that have been isolated from patients with multiple infections occupying an Emergency Unit from Maceió in Brazil. The antibacterial activity experiments were evaluated by agar diffusion tests. Agreeable us experiments in vitro, ascertain that 96,4 percent of bacterial strains utilized in this research have showed susceptible to the plant's leaf extract, it means an excellent antibacterial activity. Halos of bacterial inhibition until 26 mm were observed. Thus, it can be concluded that the Lafoensia pacari extract has showed as an excellent product to combat multiresistant bacterial.

The antibiotic activity of some Brazilian medicinal plants / Atividade antibiótica de algumas plantas medicinais brasileiras

The antibiotic activities of the ethanol extracts from 16 species of plants used in Brazilian folk medicine have been determined against Staphylococcus aureus, Micrococcus flavus, Bacillus cereus, B. subtilis, Salmonella enteretidis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Proteus mirabilis, Serratia marcescens, Mycobacterium phlei, M. smegmatis and M. fortuitum, and the yeasts Candida albicans and C. krusei. Among 32 extracts assayed, only those from Lafoensia pacari and Pterodon polygalaeflorus showed activity against the bacterial strains, and none were active against the yeasts. The ethanolic extract from the leaves of L. pacari showed minimum inhibitory concentration (MIC) values of 312.5 to 2500, 250, 625 and 1250 mg/mL, respectively, against eight different Gram-positive strains of Staphylococcus aureus, the Gram-negative Proteus mirabilis and the acid-fast bacilli Mycobacterium phlei, M. fortuitum and M. smegmatis. The ethanolic extract from the stem of L. pacari showed an MIC value of 625 mg/mL against S. aureus. Chemical analysis revealed that the crude extracts contained tannins, steroids, phenols, flavonoids, triterpenes and saponins: the activities were sufficiently high to present the possibility of future identification of the active components by bioassay-guided fractionation and purification.

As atividades antibióticas de extratos etanólicos de 16 espécies de plantas usadas em medicina popular no Brasil foram determinadas contra Staphylococcus aureus, Micrococcus flavus, Bacillus cereus, B. subtilis, Salmonella enteretidis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Proteus mirabilis, Serratia marcescens, Mycobacterium phlei, M. smegmatis e M. fortuitum, contra as leveduras Candida albicans e C. krusei. Entre os trinta e dois extratos testados, somente aqueles derivados de Lafoensia pacari e Pterodon polygalaeflorus mostraram atividade contra as cepas bacterianas e nenhum deles apresentou atividade contra as leveduras. O extrato etanólico das folhas de L. pacari mostrou valores de concentração inibitória mínima (CIM) na faixa entre 312,5 a 2500 mg/mL, 250 mg/mL, 625 mg/mL, e 1250 mg/mL, respectivamente, contra oito diferentes variedades de Staphylococcus aureus Gram-positivas, Proteus mirabilis Gram-negativas e os bacilos acido-resistentes Mycobacterium phlei, M. fortuitum e M. smegmatis. O extrato etanólico do caule de L. pacari apresentou valores de CIM de 625 mg/mL contra S. aureus. Análise química revelou que os extratos brutos continham taninos, esteróides, fenóis, flavonóides, triterpenos e saponinas: as atividades foram altas o suficiente para possibilitar o isolamento guiado pelo bioensaio e a identificação futura dos compostos ativos.