RESUMEN
Pesquisas com células tronco têm demonstrado que essa alternativa terapêutica tem grande potencial em diversas patologias. Contudo, muito ainda precisa ser elucidado quanto aos mecanismos de ação, dose e melhores vias de aplicação, para que essa alternativa terapêutica seja efetivamente incorporada às outras. Neste contexto, a via de aplicação se torna crucial na efetividade do tratamento. O objetivo do presente estudo foi avaliar no modelo de necrose tubular aguda (NTA) induzido pelo glicerol o potencial de migração das células tronco mesenquimais derivadas de polpa dentária humana, utilizando as vias intraperitoneal e a via intravenosa. Os nossos resultados demonstraram que neste modelo, não há diferença na migração das células para o órgão alvo, o rim. Contudo, a via intravenosa proporcionou uma melhora da função renal mais significativa do que quando comparada a via intraperitoneal.
Stem cell research have demonstrated that this alternative therapy has great potential in various diseases. However, much remains to be elucidated about the mechanisms of action, dosage and best means of implementation, so that alternative therapy may be incorporated other. In this context, the route of application becomes crucial in the effectiveness of treatment. The aim of this study was to evaluate the model of acute tubular necrosis (NTA) induced by glycerol the potential for migration of mesenchymal stem cells derived from human dental pulp, using the intraperitoneal and intravenous route. Our results demonstrate that this model, there is no difference in cell migration to the target organ, the kidney. However, the intravenous route provided an improvement in renal function more significantly than when compared to the intraperitoneal route.
Asunto(s)
Animales , Ratas , Células Madre Adultas/inmunología , Lesión Renal Aguda , Glicerol/uso terapéuticoRESUMEN
Diversos estudos têm demonstrado que a polpa dentária humana é uma fonte de células-tronco. Neste trabalho nós caracterizamos células obtidas da polpa do dente de camundongos (CTMDC) e o seu efeito terapêutico em um modelo de diabetes em camundongos. O tecido pulpar foi separado do dente incisivo e cultivado in vitro. Foi investigada a expressão de marcadores de células-tronco nas culturas celulares obtidas e a integridade genética. A diferenciação adipogênica e osteogênica foi induzida após o cultivo das células em meios específicos. Camundongos foram tratados com 80 mg/kg de estreptozotocina (ETZ) e transplantados após 10 dias com CTMDC ou salina. Os níveis de glicose no sangue, proteinúria, glicosúria e creatinina foram avaliados atmvés de dosagens bioquímicas. A migração celular para o pâncreas foi analisada por imunofluorescência. A diferenciação espontânea em adipócitos foi confirmada pela marcação com óleo vermelho, sudan black e por microscopia eletrônica. As CTMDC são aderentes ao plástico, polimórficas e altamente proliferativas. Algumas células alongadas adquiriram a capacidade de contração após 28 dias de cultura. As CTMDC apresentaram um cariótipo normal até a quinta passagem. A expressão de marcadores hematopoiéticos não foi detectada, enquanto que foi observada a expressão dos marcadores mesenquimais CD90, Sca-1, STRO-1 e CD73. Na análise da expressão de marcadores embrionários observou-se a expressão de SSEA-1 por imunofluorecência e dos fatores de transcrição REX-1 e OCT-4, mas não de NANOG, por RT-PCR. A diferenciação osteogênica e adipogênica foi observada após duas semanas de cultivo em meios específicos. Dezesseis dias após o transplante de CTMDC, camundongos com hiperglicemia induzida por ETZ apresentavam os níveis de glicose no sangue menores quando comparados com o grupo controle injetado apenas com salina. Os níveis de glicosúria, proteinúria e creatinina foram significantemente reduzidos nos camundongos transplantados com CTMDC...
Asunto(s)
Animales , Ratones , Células Madre Adultas/inmunología , Diabetes Mellitus/metabolismo , Ratones , Pulpa Dental/lesiones , Tratamiento Basado en Trasplante de Células y Tejidos/métodos , FenotipoRESUMEN
BACKGROUND: The extensive damage that occurs in the cardiac tissue after myocardial infarct is the major concern in post infarct management. It is very well known that adult stem cells mobilized by administration of G-CSF result in homing of stem cells into the damaged myocardium. This is because of the fact that stem cells have the ability to proliferate and capacity to generate into multiple cell lineages. METHOD: A healthy donor was selected as per the guidelines given by the institutional ethical committee and Helsinki declaration. The donor was given G-CSF 5 microg/kg/day and stem cells were harvested from the peripheral blood using Fresenius ASTec204 cell separator. The PBSC were then evaluated by immunohistochemical staining using anti-human CD34 monoclonal antibodies. The cells were then cultured in DMEM with 10% FCS for 17 weeks and in vitro cardiogenesis was initiated by adding 4 microM/l 5'Azacytidine. RESULTS: In vitro cardiogenesis was initiated in pure CD34+ cells with 5' Azacytidine. The cells showed spontaneous beating after 24 hours of treatment and after 5 weeks, the cells connected with the adjoining cells by a myotube. In these cells, expression of myosin light chain (MLC2v) gene and GATA-4 transcription factor validated the development of cardiomyocytes. CONCLUSION: It is observed that the transplantation of autologous stem cells/fetal cardiomyocytes in the heart scar tissue developed due to infarct, limited the scar expansion, and prevented post infarct heart failures. Homing process due to the transplantation of autologous stem cells is time consuming; therefore, transplantation of cardiomyocytes developed from autologous stem cells could be the future method of correcting the infracted myocardium.