RESUMEN
Chickpea is the world's third most important pulse crop and India produces 75% of the world's supply. Chickpea seeds are attacked by Callosobruchus maculatus and C. chinensis which cause extensive damage. The alpha-amylase inhibitor gene isolated from Phaseolus vulgaris seeds was introduced into chickpea cultivar K850 through Agrobacterium-mediated transformation. A total of 288 kanamycin resistant plants were regenerated. Only 0.3% of these were true transformants. Polymerase chain reaction (PCR) analysis and Southern hybridization confirmed the presence of 4.9 kb alpha-amylase inhibitor gene in the transformed plants. Western blot confirmed the presence of alpha-amylase inhibitor protein. The results of bioassay study revealed a significant reduction in the survival rate of bruchid weevil C. maculatus reared on transgenic chickpea seeds. All the transgenic plants exhibited a segregation ratio of 3:1.
Asunto(s)
Cicer/anatomía & histología , Inmunidad Innata/genética , Fitohemaglutininas/genética , Lectinas de Plantas/genética , Plantas Modificadas Genéticamente , Regiones Promotoras Genéticas , Ingeniería de Proteínas , Rhizobium/genética , Semillas/genética , Transformación Genética , Gorgojos/crecimiento & desarrollo , alfa-Amilasas/antagonistas & inhibidoresRESUMEN
Estudou-se o teste de transformaçäo de linfócitos (LTT) sob estímulo de fito-hemaglutinina (PHA), lepromina e M. leprae em doentes de lepra e em seus irmäos, com o objetivo de verificar se existiria ou näo traço familiar herdado ligado ao LTT. Investigou-se, também, a distribuiçäo familiar da reaçäo de Mitsuda e a correlaçäo entre esta reaçäo e LTT em doentes e em seus irmäos. Paralelamente ao LTT foi feita a determinaçäo de proteínas séricas, pela eletroforese, para observar se há correlaçäo entre resultados da blastogênese e nível de globulinas. O teste foi feito em 34 doentes (17 de forma lepromatosa (L) e 17 da tuberculóide (T) e 34 irmäos de doentes, previamente pareados, isto é, cada doente L e T foi pareado com irmäo näo afetado, tendo em conta sexo e idade. Linfócitos foram cultivados em meio Eagle com 20% de plasma autólogo em concentraçäo de 0,4 x 10**6 células por ml, durante 5 dias a 37-C e os resultados da blastogênese avaliados pela incorporaçäo de 3H timidina. Linfócitos de doentes L apresentaram menor atividade blastogênica sob estímulo de pHA, lepromina e M. leprae do que linfócitos e seus irmäos e essa depressäo de resposta talves esteja associada a presença da moléstia. Näo se evidenciou caráter familiar herdado que determinasse semelhante no LTT. Os níveis das globulinas alfa1, ß e gama foram semelhantes em doentes L e irmäos e näo se relacionaram a presença da doença ou herança familiar. Entretanto, alfa2 globulina tende a concentraçöes diferentes nos pares de irmäos, o que poderia estar associado a traço familiar que selecionaria doentes e näo doentes. Näo houve correlaçäo entre níveis de globulinas e resultados do LTT. A reaçäo da Mitsuda foi negativa em todos os doentes L enquanto a maioria de seus irmäos (14/17) reagiu positivamente...