RESUMEN
O adenocarcinoma de ducto pancreático (PDAC) é a quarta causa de morte em decorrência de neoplasias nos países ocidentais. Atualmente, a cirurgia ressectiva é a única possibilidade de cura para a doença, porém, a recidiva tumoral acontece em menos de um ano após a intervenção cirúrgica, mesmo com a quimioterapia adjuvante. A terapia fotodinâmica (PDT) é uma alternativa promissora no tratamento do câncer. No entanto, pouco se sabe sobre o uso da PDT em tumores pancreáticos. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência da PDT com o azul de metileno (MB) como fotossensibilizador (MB-PDT) em induzir a morte de linhagens de PDAC humanas (AsPC-1, Panc-1, MIAPaCa-2 e BxPC-3) e estudar a contribuição de vias de necrose regulada nos efeitos citotóxicos da terapia sobre estes modelos. Os resultados obtidos mostraram que a MB-PDT foi capaz de induzir a morte massiva das células de PDAC. Além disso, eles indicaram que há dois perfis de susceptibilidade entre as quatro linhagens estudadas quando submetidas a MBPDT com 4,5 J/cm2 de energia e 6min de irradiação. De acordo com os dados apresentados, a diferença nas sensibilidades das linhagens à terapia não está associada à diferenças na capacidade de incorporação do MB ou na localização sub-celular do fotossensibilizador nas diferentes células, uma vez que a localização é, predominantemente, lisossomal em todas elas. Adicionalmente, mostrou-se que as linhagens menos susceptíveis ao tratamento, MIAPaCa-2 e Panc-1, apresentam níveis significativamente menores de RIPK3 e MLKL, dois dos componentes do necrossomo, essenciais para a execução da necroptose. Além disso, foi visto que a MB-PDT induz um aumento de fosforilação de MLKL em AsPC-1, demonstrando a ativação da necroptose após a terapia nestas células, mas não em MIAPaCa-2 (menos responsiva à terapia com 4,5 J/cm2 deenergia e 6min de tempo de irradiação). Ainda, a inibição da via de sinalização necroptótica diminuiu significativamente as porcentagens de morte das células mais susceptíveis (BxPC-3 e AsPC-1), não alterando a resposta de Panc-1 e MIAPaCa-2, corroborando a ativação e importância da necroptose para a citotoxicidade da MB-PDT. Finalmente, neste trabalho foi mostrado que o aumento do tempo de irradiação, mantendo-se a quantidade total de energia aplicada no tratamento, melhora a eficiência da MB-PDT em induzir a morte das células que apresentam limitações para executar a necroptose, sugerindo que mais de uma via de morte esteja sendo ativada após a terapia e que o tempo de irradiação atuaria modulando esta ativação. Complementarmente, foi mostrado que os tempos maiores de irradiação aumentam o estresse oxidativo intracelular que é acompanhado por uma diminuição significativa do conteúdo intracelular de glutationa reduzida (GSH), indicando, preliminarmente, que a ferroptose pode estar sendo acionada após os protocolos mais longos de irradiação. Coletivamente, os resultados apresentados neste trabalho confirmam a eficiência da MB-PDT no tratamento de diferentes linhagens de PDAC, indicando que a necroptose está sendo ativada e contribuindo para a citotoxicidade da terapia sobre as células que não apresentam resistência à esta via de morte. Ainda, eles demonstram que o aumento do tempo de irradiação pode transpor a barreira de resistência de algumas linhagens à terapia, provavelmente por induzir a ativação de outras vias de necrose regulada, mostrando a importância da otimização do protocolo de tratamento no aumento da eficiência da MB-PDT sobre os tumores de pâncreas. Finalmente, os resultados confirmam a MB-PDT como alternativa eficaz no tratamento do PDAC, apresentando um amplo espectro de atuação sobre subtipos tumorais resistentes à vias clássicas de morte celular, uma característica importante no contexto de uma terapia anti-cancer
Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is the fourth leading cause of death due to neoplasms in western countries. Currently, resective surgery is the only therapetical approach to cure this disease, but tumor´s recurrence occurs less than one year after the surgery, even with adjuvant chemotherapy. Photodynamic therapy (PDT) is a promising alternative for the cancer treatment. However, the efficacy of PDT to treat pancreatic tumors as well as the mechanisms involved in the induction of tumorigenic cell death remain unclear. For this purpose, in this study, we set out to evaluate the efficacy of PDT using methylene blue (MB) as a photosensitizer (MB-PDT), in inducing death of human PDAC derived cell lines (AsPC-1, Panc-1, MIAPaCa-2 and BxPC-3) and to deeper investigate the contribution of necroptosis to the cytotoxic effects of the therapy. We observed that MB-PDT was able to induce massive death of PDAC cells. Moreover, our results indicated that upon MB-PDT (4.5 J/cm2 energy and 6min of irradiation time), there were two susceptibility profiles among the four cell lines studied. Data also showed that this differential profile of cell response was neither associated with the differences in the MB incorporation capacity nor with the subcellular location of the photosensitizer, since the localization was predominantly lysosomal in all of tested cell lines. In addition, less susceptible cells, MIAPaCa-2 and Panc-1, showed significantly lower levels of RIPK3 and MLKL, two of the necrosome components, essential for triggering necroptosis. Furthermore, while MB-PDT (4.5 J/cm2 and 6min of irradiation) has been able to increase MLKL´s phosphorylation levels, an essential step in necroptosis induction, in AsPC-1cells, less responsive MIAPaCa-2 cells presented no variations on the phosphorylation state of this pseudokinase. Moreover, pharmacological inhibition of the necroptotic signaling pathway significantly decreased cell death percentages of the most susceptible cells (BxPC-3 andAsPC-1), without altering the response of Panc-1 and MIAPaCa-2, corroborating that activation of necroptosis was strongly involved in the cytotoxicity of MB-PDT. Finally, this work showed that increasing the irradiation time improved the efficacy of MB-PDT in killing cells which display limitations to perform necroptosis, suggesting that the irradiation time would be modulating the degree of oxidative stress generated and this stimuli would in turn, be responsible for triggering other regulated cell death pathways in a RIKP3 and MLKL independent way. Indeed, this increase in oxidative stress was accompanied by a significant decrease in GSH, a global indicatior of less antioxidant cell capacity, preliminarily pointing at the induction of ferroptosis by longer irradiation protocols. In summary, we demonstrated that MB-PDT is able to induce cell death in different PDAC cell lines and that different regulated cell death mechanisms are being activated upon MB-PDT induction. Furthermore, it was demonstrated that increased irradiation time may overcome the resistance barrier of some cell lines, probably inducing the activation of other regulated cell death pathways, showing the importance of optimizing the irradiation protocol in order to maximize the efficacy of the therapy. Finally, our observations point MB-PDT as an alternative and effective therapy for pancreatic cancer treatment, displaying a broad-spectrum action on tumors displaying different resistance mechanisms to classic cell death pathways, a desired property for improving an anticancer therapy
Asunto(s)
Neoplasias Pancreáticas/diagnóstico , Fotoquimioterapia/efectos adversos , Azul de Metileno/análisis , Páncreas/anomalías , Fármacos Fotosensibilizantes , Biología Celular/clasificación , Necrosis/clasificaciónRESUMEN
Introducción: La Oxigenoterapia Hiperbárica (OHB) se ha convertido en el tratamiento de elección de numerosas patologías. Sin embargo, su rol en el tratamiento de las Infecciones Necrotizantes de partes blandas (INPB) es aún controvertido.Objetivo: Evaluar el beneficio de la Oxigenoterapia Hiperbárica (OHB) en el tratamiento de las Infecciones Necrotizantes de partes blandas (INPB).Método: Retrospectivo, revisión de historias clínicas y seguimiento de los casos. Durante el período de Enero 1996 a Diciembre2002, una población de 42 pacientes con INPB, se categorizó las lesiones de acuerdo a profundidad según la clasificación de Ámsterdam y se los dividió en 2 grupos: el grupo I (n = 18) que completó el protocolo de 10 sesione de OHB de 60 minutos cada una a 2.5 atmósferas absolutas (ATA), iniciando el 1º día del postoperatorio y el grupo II (n = 24) que no lo completó. En todos los casos se realizó desbridamiento quirúrgico precoz y antibioticoterapia.Resultado: En el grupo I hubo 12 (66.6%) recuperaciones completas, 5 (27.7%) secuelas leves y 1 (5.7%) grave, en el grupo II hubo 5 (20.8%) recuperaciones completas, 8 (33.4%) secuelas leves y 5 (20.8%) graves. La flora patógena fue en el 85.7% de los casos polimicrobiana. La mortalidad global fue del 25%, todos del grupo II.Conclusión: Se observó una relación inversamente proporcional entre el número de sesiones de OHB y la morbimortalidad. La OHB fue beneficiosa en esta serie como tratamiento complementario a la cirugía y los antibióticos.
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Informes de Casos , Necrosis/clasificación , Necrosis/diagnóstico , Necrosis/mortalidad , Necrosis/terapiaRESUMEN
Con la finalidad de examinar nuestros resultados en el tratamiento quirúrgico de la necrosis pancreática se analizan retrospectivamente 31 pacientes a los que se les practicó necrosectomía en un lapso de 20 años (1971-1990). En la serie predominó el sexo masculino (22 enfermos). Se detallan las características clínicas que, junto a las pruebas de laboratorio y diagnóstico por imágenes, permitieron sospechar la necrosis con infección y decidir la oportunidad quirúrgica. La mortalidad global postoperatoria fue de 11 pacientes (35,48 por ciento). En la primera década sobre 12 operados observamos una letalidad de 8 casos (66,66 por ciento), mientras que en el segundo decenio ésta se redujo a 3 observaciones (15,78 por ciento). La completa exéresis de los tejidos desvitalizados y el aporte de una correcta reanimación pre y postoperatoria en unidades de cuidado intensivo, sumados a una nutrición parenteral o enteral que permitió evitar una realimentación oral temprana, a un mejor manejo infectológico y a la incorporación de nuevos procedimientos de diagnóstico por imágenes constituyeron la base para mejorar los resultados en los últimos 19 casos de nuestra casuística
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Adulto , Persona de Mediana Edad , Necrosis/cirugía , Pancreatitis/complicaciones , Enfermedad Aguda , Necrosis , Necrosis/clasificación , Pancreatitis/mortalidad , Pancreatitis/cirugía , Resultado del TratamientoRESUMEN
Los autores presentan dos casos con loxocelismo cutaneo y mordedura de araña del género Loxoceles sp. en la casa de uno de los pacientes. Estos son uno de los primeros caos de loxocelismo y Loxoceles en Piura