Degree of hydrolysis and peptide profile of whey proteins using pancreatin / Grau de hidrólise e perfil peptídico das proteínas do soro de leite utilizando a pancreatina

In the present study, we used pancreatin for hydrolyzing whey proteins and evaluated the degree of hydrolysis (DH) and peptide size distribution. The following methods were used for DH determination: formol titration, soluble protein content, ortho-phthalaldehyde (OPA), and freezing point. Peptide size distribution was conducted by size-exclusion high-performance liquid chromatography (HPLC). The DH varied from 3.26% to 36.41%, and the highest yield was obtained by the soluble protein content method (mean of 35.85%). Formol titration was considered the most suitable method for assessing the DH, because it showed a marked increase with reaction time (from 1h-17.20% to 2h-24.86%). Significant positive correlation of strong intensity was observed between the following methods: formol titration and OPA (r=0.9616; p=0.0090), formol titration and freezing point (r=0.8784; p=0.0493), and OPA and freezing point (r=0.9515; p=0.0127). The highest contents of di- and tri-peptides and free amino acids were 9.07% and 8.22%, respectively. A significant positive correlation of strong intensity was also observed between the degree of hydrolysis and the fraction of medium-sized peptides by the formol titration (r =?0.9274; p=0.0232) and OPA (r=?0.8977; p=0.0386) methods.

En este trabajo, se utilizó una pancreatina para hidrolizar las proteínas del suero de leche, evaluándose el grado de hidrólisis (GH) y la distribución de tamaño de los péptidos. Los métodos de valoración con formol, determinación de proteínas solubles, ortoftalaldehído (OPA) y disminución del punto de congelación se emplearon para evaluar el GH. La distribución del tamaño de los péptidos se realizó por cromatografía líquida de exclusión molecular. El GH varió de 3,26% a 36,41% y los mejores resultados se obtuvieron con el método de determinación de proteínas solubles (media de 35,85%). La valoración con formol se consideró el método más adecuado para evaluar el GH, en función de los significativos incrementos con el tiempo de reacción (de 17,20% a 24,86%). Se observó una correlación positiva y de fuerte intensidad entre los siguientes métodos: valoración con formol y OPA (r=0,9616, p=0,0090); valoración con formol y disminución del punto de congelación (r=0,8784, p=0,0493); OPA con la disminución del punto de congelación (r=0,9515, p=0,0127). Los contenidos más altos de di-tripéptidos y de aminoácidos libres fueron de 9,07% y 8,22%, respectivamente. Una correlación positiva y de fuerte intensidad se verificó entre la fracción de péptidos medios y el GH evaluado con los métodos de la valoración con formol (r=?0,9274, p=0,0232) y OPA (r=?0,8977, p=0,0386).

Neste trabalho, uma pancreatina foi utilizada para hidrolisar as proteínas do soro de leite, avaliando-se o grau de hidrólise (GH) e a distribuição de tamanho dos peptídeos. Os métodos de titulação com formol, determinação de pro-teínas solúveis, ortoftalaldeído (OPA) e depressão do ponto de congelamento foram empregados para avaliar o GH. A distribuição do tamanho de peptídeos foi realizada por cromatografia líquida de exclusão molecular. O GH variou de 3,26% a 36,41% e os melhores resultados foram obtidos com o método de determinação de pro¬teínas solúveis (média de 35,85%). A titulação com formol foi considerada como o método mais adequado para avaliar o GH, em função dos significativos aumentos com o tempo de reação (de 17,20% a 24,86%). Observou-se uma correlação positiva e de forte intensidade entre os métodos de titulação com formol e OPA (r=0,9616, p=0,0090); titulação com formol e depressão do ponto de congelamento (r=0,8784, p=0,0493); OPA e depressão do ponto de congelamento (r=0,9515, p=0,0127). Os maiores teores de di-tripeptídeos e de aminoácidos livres foram de 9,07% e 8,22%, respectivamente. Correlação positiva e de forte intensidade foi verificada entre a fração de peptídeos médios e o GH avaliado pelos métodos da titulação com formol (r=?0,9274, p=0,0232) e OPA (r=?0,8977, p=0,0386).

Novel agents for enzymatic and fungal hydrolysis of stevioside / Novos agentes para a hidrólise enzimática e fúngica do esteviosídeo

A comparative study on the potential of some biological agents to perform the hydrolysis of stevioside was carried out, aiming at establishing an alternative methodology to achieve the aglycon steviol or its rearranged derivative isosteviol, in high yields to be used in the preparation of novel bioactive compounds. Hydrolysis reactions were performed by using filamentous fungi (Aspergillus niger, Rhizopus stolonifer and Rhizopus arrhizus), a yeast (Saccharomyces cerevisiae) and enzymes (pancreatin and lipases PL250 and VFL 8000). Pancreatin showed the best hydrolytic activity, furnishing isosteviol at 93.9% of yield, at pH 4.0, using toluene as a co-solvent. Steviol was produced using both pancreatin at pH 7.0 (20.2% yield) and A. niger atpH 7 (20.8% yield).

Um estudo comparativo do potencial de alguns agentes biológicos capazes de hidrolisar o esteviosídeo foi realizado,objetivando-se estabelecer uma metodologia alternativa para a obtenção da aglicona esteviol ou seu produto de rearranjo, isoesteviol, em rendimentos elevados que permitam o uso destas agliconas para o preparo de novos compostos bioativos. As reações de hidrólise foram realizadas usando fungosfilamentosos (Aspergillus niger, Rhizopus stolonifer e Rhizopus arrhizus), uma levedura (Saccharomyces cerevisiae) e enzimas(pancreatina, lipase PL250 e lipase VFL 8000). A pancreatina mostrou a melhor atividade hidrolítica dentre os sistemastestados, fornecendo isoesteviol com rendimento de 93,9% em pH 4,0, usando tolueno como co-solvente. Esteviol foi produzido tanto usando pancreatina em pH 7,0 (20,2% derendimento) quanto usando A. niger em pH 7,0 (20,8% de rendimento).

Indicators of inflammation and cellular damage in chronic asymptomatic or oligosymptomatic alcoholics: correlation with alteration of bilirubin and hepatic and pancreatic enzymes

Indicadores bioquimicos e hematimetricos de inflamacao e lesao celular foram correlacionados com bilirrubina e enzimas hepaticas e pancreatica em 30 alcoolistas cronicos do sexo masculino internados em hospital psiquiatrico para desintoxicacao e tratamento do alcoolismo. A aspartato aminotransferase, alanino aminotransferase, gamaglumiltransferase, fosfatase alcalina e bilirrubina total estavam alteradas em 90(por cento), 63(por cento), 87(por cento), 23(por cento) e 23(por cento) dos casos, respectivamente. Entre os indicadores de inflamacao (desidrogenase latica, alterada em 16 dos casos; alfa-1 globulina, 24(por cento), alfa-2 globulina, 88(por cento); contagem de leucocitos, 28(por cento) nenhum estava correlacionado com as alteracoes da bilirrubina e enzimas hepaticas...

Lesäo hepatica na pancreatite aguda experimental: influencia da reduçäo da reserva enzimatica do pancreas / Evaluation of hepatic lesion of experimental acute pancreatitis: influence of pancreatic enzyme reduction

A pancreatite aguda (PA) produz alteracoes morfologicas e funcionais no figado. A administraçäo de doses baixas de ceruleina diminui o conteudo enzimatico do pancreas. O objetivo do presente estudo foi estudar o efeito da reduçäo do conteudo enzimatico do pancreas na funçäo mitocondrial hepatica. Ratos machos Wistar foram submetidos a PA atraves de injeçäo retrograda intraductal de taurocolato de sodio a 5 por cento com e sem infusäo de ceruleina (0,133 ug/Kg/h) durante tres horas : Grupo I (GI): sem reducao enzimatica do pancreas, com induçäo de PA, GRUPO II (GII): com reduçäo enzimática do pancreas, com induçäo de PA, GRUPO III (GIII): com reduçäo enzimatica do pancreas, sem induçäo de PA, GRUPO IV (GIV): sem reduçäo enzimatica do pancreas, sem induçäo de PA (Controle). Após duas horas da inducao da PA os animais foram sacrificados e os figados retirados para avaliaçäo da funçäo mitocondrial hepatica, determinada polarograficamente com eletrodo de Clark, medindo-se o consumo de oxigenio na ausência de ADP (S4-Basal) e na presença de ADP (S-3 Ativado), utilizando-se succinato de potassio como substrato. Os conteudos de tripsina, amilase e proteinas totais no liquido ascitico foram determinados. Após duas horas da induçäo da PA observamos aumento significativo no estado 4 da respiraçäo (41 por cento) e diminuiçäo do RCR e da relaçäo ADP/O nos animais do GI (PA sem ceruleina) quando comparados com os animais do GII (PA com ceruleina) (p<0,05). O conteudo de amilase (A) e tripsina (T) no liquido ascitico mostraram-se diminuidos nos animais do GII (A=80 +- 10 U/ml, T= 9,75 +- 1,25 U/ml), quando comparados com os animais do GI que nao receberam ceruleina ( A= 231 +- 24 U/ml, T = 40,32 +- 5,19 U/ml) (p<0,001). Infusäo somente de ceruleina (GIII) näo alterou a funçäo mitocondrial hepatica. Estes achados sugerem que a reduçäo do conteudo enzimatico do pancreas através de infusäo de ceruleina atenua a disfunçäo mitocondrial hepatica na PA experimental evidenciada por desacoplamento da oxigenaçäo fosforilativa