Scuticociliatosis caused by Uronema sp. in ten different ornamental aquarium reef fish in Brazil / Scuticociliatose causado por Uronema sp. em dez diferentes peixes ornamentais de recife no Brasil

Abstract Scuticociliatosis, caused by an opportunistic ciliate protozoan, is responsible for significant economic losses in marine ornamental fish. This study reports the occurrence of Uronema spp., parasitizing ten species of marine reef fish at an ornamental fish wholesaler: Blue green damselfish (Chromis viridis), Vanderbilt's Chromis (Chromis vanderbilti), Pennant coralfish (Heniochus acuminatus), Threespot angelfish (Apolemichthys trimaculatus), Goldspotted angelfish (Apolemichthys xanthopunctatus), Sea goldie (Pseudanthias squamipinnis), Orchid dottyback (Pseudochromis fridmani), Threadfin butterflyfish (Chaetodon auriga), Vagabond butterflyfish (Chaetodon vagabundus), and Bluecheek butterflyfish (Chaetodon semilarvatus). Diseased fish showed disorders such as hemorrhages and ulcerative lesions on the body surface. Histopathological analysis of the muscle, liver, gut, kidney, spleen, gills, and stomach revealed hemorrhages and degeneration of muscle fiber, vacuolar degeneration of hepatocyte, inflammatory process and granuloma in the liver, atrophy of intestinal villi, inflammatory process and granuloma in the kidney, melanomacrophage centers, as well as inflammatory process in the spleen, epithelial cells hyperplasia and granuloma formation in the gills, and vacuolar degeneration and eosinophils in the stomach. Due to the severity of the disease, it is necessary to implement biosecurity measures with rapid and accurate diagnosis to minimize the risk of economic losses caused by Uronema spp.

Resumo Scuticociliatose, causada pelo protozoário ciliado oportunista, é responsável por significativas perdas econômicas em peixes marinhos ornamentais. O estudo relata a ocorrência de Uronema spp., parasitando dez espécies de peixes de recife em um distribuidor de peixes ornamentais: "Blue green damselfish" (Chromis viridis), "Vanderbilt's Chromis" (Chromis vanderbilti), "Pennant coralfish" (Heniochus acuminatus), "Threespot angelfish" (Apolemichthys trimaculatus), "Goldspotted angelfish" (Apolemichthys xanthopunctatus), "Sea goldie" (Pseudanthias squamipinnis), "Orchid dottyback" (Pseudochromis fridmani), "Threadfin butterflyfish" (Chaetodon auriga), "Vagabond butterflyfish" (Chaetodon vagabundus), e "Bluecheek butterflyfish" (Chaetodon semilarvatus). Peixes doentes apresentaram distúrbios como hemorragias e lesões ulcerativas na superfície do corpo. A análise histopatológica do músculo, fígado, intestino, rim, baço, brânquias e estômago revelou hemorragias e degeneração das fibras musculares, degeneração vacuolar de hepatócitos, processo inflamatório e granuloma no fígado, atrofia das vilosidades intestinais, processo inflamatório e granuloma no rim, centros de melanomacrófagos e processo inflamatório no baço, hiperplasia das células epiteliais, bem como formação de granuloma nas brânquias e degeneração vacuolar e eosinófilos no estômago. Devido à gravidade da doença, é necessário implementar medidas de biossegurança com diagnóstico rápido e preciso para minimizar o risco de perdas econômicas causadas por Uronema spp.

Infectious diseases in aquarium ornamental pet fish: prevention and control measures / Doenças infeciosas em peixes ornamentais de aquário: medidas de prevenção e controle

Aquarium ornamental pet fish constitute a major segment in the pet industry, with the United States, Europe, and Japan dominating the market. There are approximately 1,500 marine fish species and over 4,500 freshwater fish species commercialized as aquarium ornamental pet fish. Fish are the fourth most common pet present in Brazilian homes. In Brazil, aquarium ornamental pet fish can be marketed and distributed from different parts of the Brazilian territory and the world. Commercialization and circulation of living animals without the use of adequate prophylactic management procedures enables dissemination of a number of agents responsible for infectious diseases. Aquarium pet fish can also carry pathogenic agents, of bacterial, viral, fungal, or parasitic etiology, that may have a zoonotic feature endangering the persons handling the animals. This review presents the main pathogenic infectious agents of bacterial, viral, and fungal etiology that affect aquarium pet fish, as well as the prevention and control measures to ensure sanitary excellence in this segment.(AU)

Peixes ornamentais de aquário representam um grande segmento no mercado de animais de estimação, no qual Estados Unidos, Europa e Japão dominam. São aproximadamente 1.500 espécies de peixes marinhos e em torno de 4.500 de espécies de água doce comercializados com fins ornamentais. O peixe é a quarta espécie mais comum nos domicílios brasileiros. Peixes ornamentais de aquário são comercializados e distribuídos em diferentes partes do território nacional e do mundo. O comércio e circulação de animais vivos sem o uso de procedimentos de manejo profilático adequados possibilita a disseminação de inúmeros agentes patogênicos. Peixes ornamentais de aquário carreiam consigo agentes patogênicos de etiologia bacteriana, viral, fúngica e parasitária, sendo alguns de caráter zoonótico colocando em risco pessoas que os manipulam. O objetivo desta revisão é apresentar os principais agentes infeciosos patogênicos - de natureza bacteriana, viral e fúngica - que acometem peixes ornamentais de aquário, bem como os métodos de prevenção e controle que permitam excelência no segmento.(AU)

Identification of pathogenic and nonpathogenic Leptospira species of Brazilian isolates by Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization and Time Flight mass spectrometry

ABSTRACT Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization and Time of Flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) is a powerful tool for the identification of bacteria through the detection and analysis of their proteins or fragments derived from ribosomes. Slight sequence variations in conserved ribosomal proteins distinguish microorganisms at the subspecies and strain levels. Characterization of Leptospira spp. by 16S RNA sequencing is costly and time-consuming, and recent studies have shown that closely related species (e.g., Leptospira interrogans and Leptospira kirschneri) may not be discriminated using this technology. Herein, we report an in-house Leptospira reference spectra database using Leptospira reference strains that were validated with a collection of well-identified Brazilian isolates kept in the Bacterial Zoonosis Laboratory at the Veterinary Preventive Medicine and Animal Health Department at Sao Paulo University. In addition, L. interrogans and L. kirschneri were differentiated using an in-depth mass spectrometry analysis with ClinProTools™ software. In conclusion, our in-house reference spectra database has the necessary accuracy to differentiate pathogenic and non-pathogenic species and to distinguish L. interrogans and L. kirschneri.

A survey on gram-negative bacteria in saffron finches (Sicalis flaveola) from illegal wildlife tradein Brazil / Pesquisa de bactérias gram-negativas em canários-da-terra (Sicalis flaveola) resgatados do tráfico ilegal de aves no Brasil

Passerines such as canaries or finches are the most unlawfully captured species that are sent to wildlife centers in São Paulo, Brazil. Captured birds may have infection by opportunistic bacteria in stressful situations. This fact becomes relevant when seized passerine are reintroduced. The aim of this study was to evaluate the health state of finches from illegal wildlife trade using microbiological approaches. Microbiological samples were collected by cloacal and tracheal swabs of 100 birds, captured during 2012 and 2013. The results indicate high frequency of gram-negative bacteria in feces and oropharynx, especially from the Enterobacteriaceae family (97.5%). The most frequent genera were Escherichia coli (46.5%) and Klebsiella pneumoniae (10.4%). Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Serratia spp. Klebsiella oxytoca and Citrobacter freundii were isolated with lower frequency from asymptomatic birds. The presence of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) and Shiga toxinproducing strain (STEC) confirm the zoonotic risks and public health concern.(AU)

No Estado de São Paulo, Brasil, os pássaros como os canários-da-terra têm sido uma das espécies mais frequentemente resgatadas do tráfico ilegal e enviadas aos centros de vida selvagem. Em situações de estresse estas aves podem ser acometidas por infecções causadas por bactérias oportunistas. Este fato é de grande importância quando é planejada da reintrodução das aves na natureza. O presente trabalho foi delineado para avaliar o estado de saúde de canários-da-terra resgatados do tráfico ilegal. Foram colhidas soabes da traqueia e da cloaca de 100 aves resgatadas durante os anos de 2012 e 2013. Os resultados obtidos revelaram alta frequência de bactérias gram-negativas nas fezes e no orofaringe dos animais, com maior frequência para os membros da família Enterobacteriaceae (97,5%). Os gêneros mais frequentes foram Escherichia coli (46,55) e Klebsiella pneumoniae (10,4%). Outros microorganismos incluindo Enterobacter cloacae, Serratia liquefaciens, Serratia spp, Klebsiella oxytoca e Citrobacter freundii também foram isolados em menor frequencia de aves assintomáticas. A presença de estirpes de Escherichia coli enteropagênicas (EPEC) e as produtoras da toxina de Shiga confirmam o risco de zoonose e a importância para saúde pública deste tipo de ave.(AU)

Regulação de organismos geneticamente modificados de uso agrícola no Brasil e sua relação com os modelos normativos europeu e estadunidense / Regulation of genetically modified organisms for agricultural use in Brazil and its relationship with the United States and European regulatory models

A biotecnologia avançou consideravelmente nos séculos XX e XXI, de tal forma que, atualmente, 29 países são responsáveis pela produção de 160 milhões de hectares de organismos geneticamente modificados (OGMs). Esse desenvolvimento científico, tecnológico e produtivo requer medidas de monitoramento e controle para impedir grandes e futuros danos da introdução desses produtos no meio ambiente e no mercado. O presente trabalho teve como objetivo apresentar o cenário brasileiro dos alimentos geneticamente modificados e a evolução do corpo legislativo nacional relativo a eles, analisando-o com base nas políticas internacionais de produção e comércio de transgênicos. Para tanto, foi realizado um levantamento no que tange à legislação e literatura, reportadas até o momento, sobre a evolução do cenário dos OGMs de origem vegetal no Brasil e no mundo de 2007 a 2011, relacionando os dados obtidos com os modelos normativos europeu e estadunidense. As ações de vigilância sanitária no campo dos organismos geneticamente modificados são fundamentalmente de controle, monitoramento e fiscalização das etapas de desenvolvimento, plantio e comércio dos produtos transgênicos. A legislação brasileira segue os padrões internacionais de boas condutas relacionadas aos organismos geneticamente modificados, com normativas protetoras e com agências fiscalizadoras das atividades com esses produtos. No entanto, encontra-se em meio à dualidade das divergentes condutas europeia e americana, nas quais prevalece, atualmente, um posicionamento liberal.

Biotechnology has advanced much in the XX and XXI century, so that currently 29countries are responsible for the production of 160 million hectares of genetically modified organisms (GMO). This scientific, technological and productive development requires monitoring and control measures to prevent major and future damage from the introduction of these products on the environment and the market. The aim of this paper was to present the Brazilian scenario of genetically modified organisms and the development of the national legislative body relative to them, analyzing it based on the international politics of production and trade of transgenics. It was studied the legislation and literature, reported to date, about the development of genetically modified organisms’framework in Brazil and in the world, from 2007 to 2011, comparing these data with the United States and European normative models. The health surveillance activities in the field of genetically modified organisms are fundamentally: control, monitoring and supervision of the stages of development, cultivation and trade of transgenic products. Brazilian legislation follows international standards of good conduct relating to genetically modified organisms, with protective normative and regulatory agencies of the activities with these products. However, Brazilian rules is among the duality of the divergent European and American conducts in which prevails, today, a liberal position

Pesquisa de genes de virulência em cepas de Listeria monocytogenes e Listeria innocua originárias de carne suína e ambiente de abatedouros e açougues / Research of virulence genes in strains of Listeria monocytogenes and Listeria innocua originated from pork and slaughterhouse and meat market environment

Introdução - A bactéria Listeria monocytogenes é um agente zoonótico transmitido, principalmente, por alimentos. Dentre as fontes de contaminação, destacam-se os produtos de origem láctea, carnes e embutidos, além dos ambientes da indústria de processamento alimentício. Na última década, foram detectadas cepas de L. monocytogenes e L. innocua, em ambiente de frigoríficos e alimento. Estas apresentavam variação na intensidade da virulência para células eucarióticas decorrente de mutações nos genes de virulência. Esta alteração em ambas as espécies, e o relato de um caso fatal de listeriose humana ocasionada por L. innocua atípica demandam atenção, pois apresentam maior risco à saúde da população exposta a estes ambientes e alimentos tornando-se, portanto, uma importante questão de saúde pública. Objetivo - Pesquisar genes de virulência em cepas de L. monocytogenes e L. innocua, isoladas em pontos da linha de abate suíno e do comércio de carne no Estado de São Paulo. Material e Métodos Foram estudadas 40 cepas, dentre estas, isolados de L. monocytogenes e L. innocua com atividade hemolítica atípica. Foram realizados testes de atividade hemolítica e produção de fosfolipase A para caracterização dos isolados. A detecção dos genes de virulência foi realizada através da reação em cadeia pela polimerase (PCR). Para confirmação das sequências amplificadas e a análise das mesmas, os fragmentos obtidos foram sequenciados. A identificação molecular das espécies foi realizada por análise filogenética dos genes prs e 16S rRNA. Resultados Dos 40 isolados, cinco de L. monocytogenes e sete de L. innocua apresentaram atividade hemolítica atípica, sendo que nestes últimos também foi observado halo atípico no meio ALOA. As cepas de L. monocytogenes foram positivas para a detecção de todos os genes de virulência estudados. Dois dos isolados atípicos de L. innocua também foram positivos para todos os genes e os outros cinco foram positivos para hly, plcA e inlC. Foram detectadas mutações nas proteínas InlC, InlB, InlA, PI-PLC, PC-PLC e PrfA, nas cepas atípicas, que resultaram em alterações nas suas estruturas secundárias que podem explicar o fenótipo desses isolados. A confirmação de espécie apenas foi alcançada com a análise filogenética do 16S rRNA. Conclusões A partir desses resultados, foi proposta a utilização dos genes prfA, plcB e inlB, como forma de triagem, para diferenciar as espécies L. monocytogenes e L. innocua, de modo a complementar os testes fenotípicos.

Molecular epidemiology of Listeria monocytogenes isolated from different sources in Brazil / Epidemiologia molecular de Listeria monocytogenes isoladas de diferentes fontes no Brasil

Listeria monocytogenes is an important foodborne pathogen that primarily affects pregnant women, neonates, the elderly and immune-compromised individuals, and it may cause abortion, septicemia, and meningitis. From the 13 capsular groups described, serotypes 4b, 1/2b and 1/2a are most closely related to human infection. For this reason, serotyping has limited value as an epidemiological tool; thus, improved discriminatory typing methods are required to enhance knowledge of L. monocytogenes contamination and infection. The aim of this study was to characterize the genetic diversity of L. monocytogenes isolates in the pork processing industry in Sao Paulo, Brazil and human infection isolates by ERICPCR and single enzyme AFLP. Serotypes 1/2c and 4b were frequent among isolates from pork and slaughterhouse/market environments, whereas serotypes 4b and 1/2a were observed among human isolates. ERIC-PCR and AFLP revealed 34 and 31 distinct profiles, respectively, which had tendencies of separation according to serogroup and isolate origin. The genetic profiles from slaughterhouse and market environments suggest the possibility of different sources of Listeria contamination in the environment, although in certain cases, continuous contamination caused by the persistence of clonal strains is also a possibility.

Listeria monocytogenes é um importante patógeno de origem alimentar que afeta principalmente grávidas, neonatos, idosos e indivíduos imunocomprometidos, e pode causar abortamento, septicemia e meningite. Dos 13 grupos capsulares descritos, os sorotipos 4b, 1/2b e 1/2a são os mais relacionados à infecção humana. Por esta razão, a sorotipagem possui valor limitado como ferramenta epidemiológica e, dessa forma, métodos mais discriminatórios são necessários para melhorar o conhecimento sobre a contaminação e a infecção por L. monocytogenes. O objetivo deste estudo foi caracterizar a diversidade genética de isolados de L. monocytogenes da indústria de processamento de carne suína noEstado de São Paulo, Brasil, e compará-los a isolados de casos de infecção humana através do ERIC-PCR e AFLP com uma única enzima. Os sorotipos 1/2c e 4b foram frequentes em carne suína e ambientes de abatedouros e mercados, enquanto os sorotipos 4b e 1/2a foram observados nos isolados de humanos. ERIC-PCR e AFLP resultaram em 34 e 31 perfis distintos, respectivamente, com uma tendência a separar de acordo com o sorogrupo e a origem do isolado. Os perfis genéticos de ambiente dos abatedouros e mercados sugerem a possibilidade de diferentes origens de contaminação por Listeria nos ambientes estudados, porém, em alguns casos, é possível que ocorra a persistência de cepas clonais causando contaminação contínua.

ERIC-PCR genotypic characterization of Haemophilus parasuis isolated from Brazilian swine

Haemophilus parasuis infection, known as Glãsser's disease, is characterized by fibrinous polyserositis, arthritis and meningitis in piglets. Although traditional diagnosis is based on herd history, clinical signs, bacterial isolation and serotyping, the molecular-based methods are alternatives for species-specific tests and epidemiologic study. The aim of this study was to characterize H. parasuis strains isolated from different states of Brazil by serotyping, PCR and ERIC-PCR. Serotyping revealed serovar 4 as the most prevalent (24 percent), followed by serovars 14 (14 percent), 5 (12 percent), 13 (8 percent) and 2 (2 percent), whereas 40 percent of the strains were considered as non-typeable. From 50 strains tested 43 (86 percent) were positive to Group 1 vtaA gene that have been related to virulent strains of H.parasuis. ERIC-PCR was able to type isolates tested among 23 different patterns, including non-typeable strains. ERIC-PCR patterns were very heterogeneous and presented high similarity between strains of the same animal or farm origin. The results indicated ERIC-PCR as a valuable tool for typing H. parasuis isolates collected in Brazil.

Caracterização das mães, partos e recém-nascidos em Campinas, São Paulo, 2001 e 2005 / Characterization of mothers, mode of deliveries and newborns in Campinas, São Paulo, 2001 and 2005

OBJETIVO: Comparar dados pré-natais, dos partos e dos recém-nascidos de Campinas em 2001 e 2005. MÉTODOS: Estudo transversal que analisou 13.656 documentos do Sistema de Informações sobre Nascidos Vivos (Sinasc) de 2005, comparando-as aos resultados de 2001. Analisou-se o local de moradia e parto, idade materna, estado civil, escolaridade, ocupação, paridade, consultas de pré-natal, tipo de parto, duração da gestação e peso ao nascer. Para avaliar a associação entre as variáveis, utilizou-se o teste de qui-quadrado, sendo significante p<0,05. RESULTADOS: Os nascidos nos Distritos de Saúde (DS) com piores índices de condições de vida (ICV) diminuíram em relação a 2001. A taxa de adolescentes passou de 17,7 por cento para 14,7 por cento. Em 2001, 39,4 por cento das mães trabalhavam e, em 2005, 42,9 por cento. Quanto à presença de companheiro, 35,9 e 54,3 por cento não o referiam em 2001 e 2005, respectivamente. A escolaridade passou de 37,8 por cento de mães com até sete anos de estudo para 25,7 por cento, com aumento das que estudaram entre oito e 11 anos e 12 anos ou mais. O comparecimento a mais de seis consultas no pré-natal passou de 74,4 para 86,6 por cento. Houve aumento de cesáreas (54,9 para 60,3 por cento) e de prematuridade (7,1 para 8,9 por cento). Não houve alteração no perfil de peso ao nascimento. CONCLUSÕES: Verificou-se queda da paridade nos DS com piores ICV e no percentual de mães adolescentes. Elevou-se o número de trabalhadoras, mulheres sem companheiro, escolaridade e frequência ao pré-natal.

OBJECTIVE: To compare data related to prenatal care, deliveries and newborns from Campinas, Brazil, in 2001 and 2005. METHODS: This cross-sectional study analyzed 13,656 Live Birth Certificates from 2005, comparing them to of 2001. The analyzed variables were: place of birth and dwelling, maternal age, marital status, schooling, number of births, number of prenatal consultations, mode of delivery, length of pregnancy and birthweight. Association between variables was evaluated by the chi-square test, being significant p<0.05. RESULTS: In 2005, there was a decrease in the number of newborns from Health Districts with worse living conditions in comparison to 2001. The rate of teenage pregnancies varied from 17.7 percent in 2001 to 14.7 percent in 2005. Working mothers were 42.9 percent of the sample in 2005 and 39.4 percent in 2001. In 2005, single mothers were 54.3 percent compared to 35.9 percent in 2001. Mothers with seven or less years of schooling were 37.8 percent in 2001, compared to 25.7 percent in 2005. In 2005, 86.6 percent of mothers had more than six prenatal visits compared to 74.4 percent in 2001. There was an increase in the rates of cesarean section (from 54.9 percent in 2001 to 60.3 percent in 2005) and prematurity (from 7.1 percent in 2001 to 8.9 percent in 2005). No significant changes in birthweight were observed. CONCLUSIONS: This study shows a decrease in the rate of births in the Health Districts with worse conditions of living and in teenage pregnancies. Rates of working mothers, single mothers, years of schooling, number of prenatal consultations increased.