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Gamme d'année
1.
Rev. bras. anal. clin ; 29(3): 151-154, 1997. graf, tab
Article Dans Portugais | LILACS | ID: lil-526279

Résumé

Foi otimizado um método de extração de DNA de coágulo sangüíneo. Amostras de sangue total colhidas em EDTA e de coágulo foram obtidas de 10 indivíduos não aparentados. Os coágulos foram homogeneizados (sistema Potter-Elvelyn NSE-11R). O DNA foi extraído pelo método de precipitação salina modificado (Clin.Chem.42-S298,1996). A quantificação e a pureza do DNA foram realizadas por espectrofotometria em 260 e 280 nm, sendo a sua integridade verificada por eletroforese em gel de agarose. A qualidade do DNA foi avaliada por amplificação da região polimórfica Ava II do gene do receptor da LDL, por PCR. A quantidade de DNA de coágulo foi semelhante a de sangue total (61,5 ± 11,9 e 60,6 ± 12,6 mg/ml de sangue, respectivamente). A pureza do DNA de coágulo foi semelhante a de sangue total (A260/280=1,87 ± 0,19 e 1,96 ± 0,17, respectivamente). As amostras de DNA apresentaram-se intactas no gel de agarose e sem contaminação com RNA. O rendimento do DNA obtido por este método dói maior que o dos descritos em outros estudos e mostrou-se adequado para análise do polimorfismo genético do receptor da LDL. Portanto, o procedimento de extração de DNA, otimizado em nosso laboratório, é simples, rápido e aplicável para obtenção de DNA de alta qualidade de amostras de coágulo sangüíneo, sendo útil em estudos de genotipagem.


Sujets)
Humains , Mâle , Femelle , Coagulation sanguine , Tests de coagulation sanguine , ADN , Gènes/génétique , Techniques de diagnostic moléculaire
SÉLECTION CITATIONS
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