Análisis de factores pronósticos en leucemia linfática crónica. Valor predictivo del inmunofenotipo, el CD23 soluble y la morfología / Predictive factors in chronic lymphocytic leukemia. Value of immunophenotype, SCD23 and morphology

En LLC se reconocen factores pronósticos útiles como la duplicación linfocitaria, el estadio clínico y el patrón de infiltración medular. Otros, como el porcentaje de células CD38+, están en estudio y requieren confirmación. El objetivo del presente trabajo fue evaluar si existe asociación entre morfología, inmunofenotipo linfocitario, CD23 soluble (SL) y sobrevida libre de eventos (SLE). Se evaluaron prospectivamente 36 pacientes sin tratamiento. Se determinaron: morfología típica, mixta y LLC-PL; inmunofenotipo linfocitario (score de Matutes); niveles plasmáticos de CD23 SL; estadio clínico, duplicación linfocitaria; ß2 microglobulina y alteraciones citogenéticas. Se consideró evento: progresión de enfermedad (necesidad de tratamiento, evolución a estadios avanzados, desarrollo de organomegalia voluminosa) y muerte por enfermedad. Mediana de seguimiento 24 meses. Resultados: estadio 0: 11/36, SLE 80 por ciento; I: 10/36 SLE 90 por ciento; II: 13/36: III y IV: 2/36. SLE >= II 37 por ciento. p= 0.023. Duplicación linfocitaria: <12m 7/31, >12m 24/31. SLE 28 por ciento vs 80 por ciento p<0.001. Citogenético: normal 13/28; anormal 15/28. SLE 92 por ciento vs 54 por ciento p=0.053. +12 positiva 7/30, negativa 23/30. SLE 65 por ciento vs 66 por ciento. ß2 microglobulina normal 9/35, elevada 26/35; SLE 100 por ciento vs 53 por ciento p=0.006. D23 SL < 350 Ul/ml 15/32, > 350 Ul/ml 17/32. SLE 92 por ciento vs 53 por ciento p=0.005. Inmunofenotipo: Score 5: 15/36, Score 4: 19/36, SLE 64 por ciento. Score 3: 2/36. p=0.516. Morfología típica 17/35, mixta 17/35. SLE 81 por ciento vs. 57 por ciento p=0.099. LLC-PL 1/35. El CD 23 SL resultó adecuado para predecir SLE, particularmente útil en estadios iniciales sin otros marcadores de actividad. La morfología y el fenotipo linfocitario, dos variables accesibles, no fueron útiles para el propósito del estudio.

Aplicaciones diagnósticas del estudio por PCR de los reordenamientos de los receptores T y de las inmunoglobulinas en oncohematología / Diagnostic applications of PCR studies of T cell receptor and immunoglobulin gene rearrangements in oncohematology

El trabajo consiste en la puesta a punto de diversas técnicas de biología molecular para el diagnóstico de leucemias y linfomas dentro del Instituto. Por medio de la técnica de PCR, utilizada para detectar reordenamientos de los genes de la cadena pesada de las inmunoglobulinas y en el receptor de los linfocitos T (cadena µ), se determina clonalidad en las LLA y algunos linfomas en los cuales los métodos convencionales ofrecen dificultad diagnóstica. Se han analizado 64 muestras de ADN provenientes de pacientes de la Sección Inmunología Oncológica del Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex" (I.I.HEMA.), 19 biopsias de linfomas incluidas en parafina y 14 cultivos celulares de pacientes del mismo Instituto. Se ha detectado clonalidad B por PCR mediante la identificación de un fragmento de alrededor de 100 bp en una serie de pacientes oncohematológicos. En 81 ensayos se ha detectado reordenamiento VDJ en 52 casos, distribuidos de la siguiente manera: 15/19 biopsias de linfomas incluidas en parafina, 13/14 cultivos de células mononucleares periféricas de pacientes hemofílicos HIV+ y 24/48 pacientes con leucemias y linfomas (material fresco). Se han detectado reordenamientos en las cadenas µ del receptor T por PCR Multiplex con la idea de complementar el diagnóstico en la identificación de la clonalidad T. Se detectaron reordenamientos en el locus TCGR en 23 de las 30 muestras de ADN provenientes de células mononucleares totales de pacientes con linfomas y leucemias. Este es el primer paso para la realización de un diagnóstico preciso y a partir de aquí poder detectar la enfermedad mínima residual en los pacientes post-tratamiento.

Síndrome mielodisplásico: evaluación de la proteína p53 como factor pronóstico / Myelodysplastic syndrome: evaluation of p53 prognostic factor

Los síndromes mielodisplásicos representan un estado preleucémico en el cual existe una falla de los progenitores hematopoyéticos para diferenciarse normalmente. Se ha observado que estos cuadros clínicos obedecen a un desorden clonal y que el incremento de células blásticas en la médula ósea se correlaciona con un pobre pronóstico. Si bien no se conocen completamente los mecanismos moleculares que subyacen a esta progresión, se han detectado diversas anomalías cromosómicas y mutaciones genéticas. La proteína p53 es el producto de un gen supresor de tumor relacionado con los mecanismos de control de la división celular y en el desarrollo de neoplasias. Para determinar si p53 tiene participación en el proceso mielodisplásico, evaluamos en este estudio las alteraciones de la proteína p53 y de su gen, empleando inmunohistoquímica y polimorfismo conformacional de cadena simple (SSCP) en un grupo de 21 pacientes con mielodisplasia, relacionando los hallazgos con la transformación leucémica, en un seguimiento a 5 años. Se encontraron alteraciones de la proteína en 4/21 casos (19 por ciento) y mutaciones del gen que la codifica también en 4/21 pacientes (19 por ciento). Seis pacientes (sobre 17 evaluables) desarrollaron leucemia aguda. El 50 por ciento de ellos presentó alteraciones de la proteína p53...