Résumé
Due to the serovar diversity in Haemophilus (H.) parasuis, it is difficult to develop a universal serological method for detection of this pathogen. Here, we report a universal plate-agglutination test for detecting H. parasuis. Diagnostic antisera were prepared by mixing antisera of serovars 4, 5, 12, 13 and 14 in the optimized ratio. The results of the plate-agglutination test showed that the diagnostic antisera could agglutinate with all 15 reference strains of H. parasuis and 74/75 clinical isolates. Further, the specificity of the method was validated with 22 bacterial strains from 12 related species.
Sujets)
Animaux , Tests d'agglutination/méthodes , Réactions croisées , Haemophilus parasuis/isolement et purification , Sérums immuns/métabolisme , Reproductibilité des résultats , Sensibilité et spécificitéRésumé
The biological activities of the venom of three species of spiders of the genus Loxosceles were studied (L. gaucho, L. laeta and L. intermedia). The dermonecrotic and lethal activities are shared by all three Loxosceles venoms. Only low levels of proteolytic, myotoxic and phospholipase A2 activities were demonstrable even when a large amount of venom was used. No direct hemolytic activitiy was detected. L. intermedia venom was the most lethal (LD50 0.48 mg/kg), the L. laeta venom was the least lethal (LD50 1.45 mg/kg) whereas L. gaucho venom showed an intermediate value (LD50 0.74 mg/kg). The anti-Loxosceles serum used (anti-arachnidic serum) was able to neutralize the most important activities (i.e., dermonecrotic and lethal activities) of the three venoms. SDS-PAGE and immunoblotting using the anti-arachnidic serum showed that almost all venom antigens were recognized by this antiserum. The possible mechanisms of action of the Loxosceles venom are discussed.
Sujets)
Animaux , Souris , Lapins , Sérums immuns/métabolisme , Nécrose , Venins d'araignée/composition chimique , Araignées/pathogénicité , Dose létale 50 , Venins d'araignée/toxicitéRésumé
El presente trabajo tuvo el propósito de aislar, caracterizar y estudiar inmunológicamente, dos enzimas extracelulares proteolíticas de una cepa de Pseudomonas aeruginosa (Pa) tomada como prototipo, para luego compararlas con las producidas por cepas de la misma o diferentes especies bacterianas. La cepa prototipo mostró por cromatografía de intercambio iónico las dos enzimas proteolíticas identificadas como A y B, sobre la base de su mayor o menor electronegatividad. La enzima A fue activa sobre caseína y no sobre elastina y necesitó fuerza iónica adicional para eluir del intercambiador. la enzima B fue activa sobre caseína y elastina y no necesitó fuerza iónica adicional para su elución. Fue la responsable del 80% o más de la actividad total. Con las dos enzimas obtenidas por poliacrilamida, se inmunizaron conejos, obteniéndose antisueros (As A y As B), con los que se efectuaron reacciones inmunológicas. Los As A y As B inmunoprecipaitaron las enzimas respectivas, tanto de la solución enzimática concentrada como de las obtenidas por cromatografía. Estos dos componentes enzimáticos no mostraron identidad inmunológica. Los antisueros homólogos fueron capaces de inhibir la actividad enzimática in vitro. Seis cepas adicionales de Pa mostraron un comportamiento inmunoenzimático similar a la prototipo. Dos de Serratia marcescens, aisladas de pacientes, mostraron por zimograma una especie proteolítica coincidente con la A de Pa, activa sólo sobre caseína y que reaccionó solamente con el As A. Una cepa de Pseudomonas fluorescens conservada en laboratorio no mostró actividad en el zimograma y tampoco reactividad con los As A y As B