α, ß-Amyrin prevents steatosis and insulin resistance in a high-fat diet-induced mouse model of NAFLD via the AMPK-mTORC1-SREBP1 signaling mechanism

Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD), characterized by hepatosteatosis and steatohepatitis, is intrinsically related to obesity. Our previous study reported on the anti-obese activity of α,β-amyrin (AMY), a pentacyclic triterpene isolated from Protium heptaphyllum. This study investigated its ability to prevent fatty liver and the underlying mechanism using the mouse model of NAFLD. NAFLD was induced in male Swiss mice fed a high fat diet (HFD) for 15 weeks. The controls were fed a normal chow diet (ND). The mice were simultaneously treated with AMY at 10 and 20 mg/kg or fenofibrate at 50 mg/kg. Lipid levels along with metabolic and inflammatory parameters were assessed in liver and serum. The liver sections were histologically examined using H&E staining. RT-qPCR and western blotting assays were performed to analyze signaling mechanisms. Mice fed HFD developed severe hepatic steatosis with elevated triglycerides and lipid droplets compared with ND controls. This was associated with a decrease in AMP-activated protein kinase (AMPK) activity, an increase of mechanistic target of rapamycin complex 1 (mTORC1) signaling, and enhanced sterol regulatory element binding protein 1 (SREBP1) expression, which have roles in lipogenesis, inhibition of lipolysis, and inflammatory response. AMY treatment reversed these signaling activities and decreased the severity of hepatic steatosis and inflammatory response, evidenced by serum and liver parameters as well as histological findings. AMY-induced reduction in hepatic steatosis seemed to involve AMPK-mTORC1-SREBP1 signaling pathways, which supported its beneficial role in the prevention and treatment of NAFLD.

A proline derivative-enriched methanol fraction from Sideroxylon obtusifolium leaves (MFSOL) stimulates human keratinocyte cells and exerts a healing effect in a burn wound model

It was previously demonstrated that the methanol fraction of Sideroxylon obtusifolium (MFSOL) promoted anti-inflammatory and healing activity in excisional wounds. Thus, the present work investigated the healing effects of MFSOL on human keratinocyte cells (HaCaT) and experimental burn model injuries. HaCaT cells were used to study MFSOL's effect on cell migration and proliferation rates. Female Swiss mice were subjected to a second-degree superficial burn protocol and divided into four treatment groups: Vehicle, 1.0% silver sulfadiazine, and 0.5 or 1.0% MFSOL Cream (CrMFSOL). Samples were collected to quantify the inflammatory mediators, and histological analyses were performed after 3, 7, and 14 days. The results showed that MFSOL (50 μg/mL) stimulated HaCaT cells by increasing proliferation and migration rates. Moreover, 0.5% CrMFSOL attenuated myeloperoxidase (MPO) activity and also stimulated the release of interleukin (IL)-1β and IL-10 after 3 days of treatment. CrMFSOL (0.5%) also enhanced wound contraction, promoted improvement of tissue remodeling, and increased collagen production after 7 days and VEGF release after 14 days. Therefore, MFSOL stimulated human keratinocyte (HaCaT) cells and improved wound healing via modulation of inflammatory mediators of burn injuries.

Effects of magnesium sulfate and dioctyl sodium sulfosuccinate on fecal hydration, output and systemic hydration in healthy horses / [Efeitos do sulfato de magnésio e do dioctil-sulfossuccinato de sódio na hidratação e eliminação fecal e sobre a hidratação sistêmica de cavalos saudáveis]

Magnesium sulphate (MS) and dioctyl sodium sulphosuccinate (DSS) are laxative drugs frequently used for the treatment of impactions. The aim of this study was to compare the effects of MS and DSS in fecal hydration, output and systemic hydration in healthy horses. Five healthy horses received 3 treatments with a 21-day interval. Treatment 1 was performed with administration of 4 liters of warm water; treatment 2: administration of 4 liters of warm water associated with 1g/kg of MS; and treatment 3: administration of 4 liters of warm water associated with 20mg/kg DSS. General and specific physical examination of the digestive system were performed, alongside with packed cell volume and total plasma protein measurement, abdominal ultrasonography and quantification of the amount and hydration of feces, before and 6, 12, 24, 36 and 48 hours after the treatments. No adverse effects were observed. The administration of laxatives promoted greater fecal output and hydration without resulting in systemic dehydration, yet no differences were observed between treatments. The absence of adverse effects of DSS demonstrates the safety of its use as a laxative drug at a dose of 20mg/kg. Studies comparing the effects of the laxative drugs in horses with large colon impaction are needed.(AU)

O sulfato de magnésio (SM) e o dioctil-sulfossuccinato de sódio (DSS) são drogas laxativas frequentemente utilizadas no tratamento da compactação. O objetivo deste estudo foi comparar os efeitos do SM e do DSS na hidratação e eliminação fecal, e na hidratação sistêmica de cavalos saudáveis. Cinco cavalos receberam três tratamentos, com intervalo de 21 dias. O tratamento 1 consistiu na administração de quatro litros de água morna; o tratamento 2: administração de quatro litros de água morna associada a 1g/kg de SM; e o tratamento 3: administração de quatro litros de água morna associada a 20mg/kg de DSS. Foram realizados exames físicos gerais e específicos do trato digestivo, hematócrito e proteína plasmática total, ultrassonografia abdominal e mensuração da quantidade e hidratação das fezes antes e após seis, 12, 24, 36 e 48 horas dos tratamentos. Não foram observados efeitos adversos. A administração de ambos os laxantes promoveu maior produção fecal e hidratação, sem resultar em desidratação sistêmica, entretanto não houve diferença entre os tratamentos. A ausência de efeitos adversos do DSS demonstra a segurança de seu uso como medicamento laxante na dose de 20mg/kg. São necessários estudos que comparem o efeito dos laxantes em equinos portadores de compactação de cólon.(AU)

Cicatrização da musculatura reto-abdominal em coelhos submetidos à laparorrafia com fios de sutura à base de quitosana, categute cromado e poliglactina 910 / [Healing of the rectus abdominis muscle in rabbits submitted to laparorrhaphy with suture-based chitosan, chromic catgut and polyglactin 910]

Objetivou-se, com este estudo, avaliar o processo de cicatrização da musculatura reto-abdominal em coelhos submetidos à laparorrafia, utilizando-se o fio de sutura à base de quitosana, comparando-o aos fios de categute cromado e poliglactina 910. Foram utilizados 24 coelhos adultos, divididos aleatoriamente em quatro grupos: quitosana e categute 15 dias (QC-15dias), quitosana e categute 30 dias (QC-30 dias), quitosana e poliglactina 910 15 dias (QP-15 dias) e quitosana e poliglactina 910 30 dias (QP-30 dias). Cada grupo foi composto por seis coelhos, nos quais foram realizadas duas incisões, uma do lado direito e outra do lado esquerdo e, posteriormente, a laparorrafia, com o fio de quitosana de um lado e o categute cromado ou poliglactina 910 do outro. Realizou-se análise clínico-cirúrgica, histológica e avaliação de achados de necropsia, além de testes de citotoxicidade e de mecânica no fio de quitosana. Ele apresentou baixa resistência mecânica e citotóxica. O fio de quitosana não proporcionou uma cicatrização satisfatória em coelhos, pois desencadeou uma resposta inflamatória acentuada.(AU)

The objective of this study was to evaluate the healing process of the recto-abdominal muscles in rabbits submitted to laparorrhaphy using chitosan-based suture yarn, comparing it to chrome catgut and polyglactin 910 yarns. Twenty-four adult rabbits were divided in to four random groups: chitosan and polyglactin 910 15 days (QP-15 days) and chitosan and polyglactin 910 30 days (QC-30 days), chitosan and polyglactin 910 15 days (QP-15 days) QP-30 days). Each group consisted of six rabbits, in which two incisions were made, one on the right side and one on the left side, and later the laparorraphy with the chitosan yarn on one side and chromed catgut or polyglactin 910 on the other. Clinical-surgical, histological and necropsy findings were evaluated, as well as cytotoxicity and mechanical tests on the chitosan wire. It presented low mechanical and cytotoxic resistance. Chitosan thread did not provide satisfactory healing in rabbits, as it triggered a marked inflammatory response.(AU)

Carboxymethylcellulose and psyllium effects in sand output of horses with asymptomatic sand accumulation / [Efeitos da carboximetilcelulose e do psyllium sobre a eliminação de areia de cavalos com sablose assintomática]

The aim of this study was to evaluate the effects of Psyllium (PSY) and Carboxymethylcellulose (CMC) administration on fecal elimination of sand in horses with asymptomatic sand accumulations. Eight horses were selected from sandy areas and randomly divided into 2 groups of four animals. The subjects were treated either with CMC or PSY. The presence of intestinal sand was confirmed through radiography and glove sedimentation test. The study was performed in two phases, with a 7-day interval. In phase I, all the animals received 8 liters of warm water; in phase II, the CMC group received 8 liters of water + 1g/kg of CMC, whereas the PSY group received 8 liters of water + 1g/kg of PSY. All administrations were performed through nasogastric intubation and fractionated in 2 equal volume administrations with an interval of two hours. General and specific physical examination of the digestive system were performed in conjunction with abdominal ultrasonography before the administrations and after 6, 12, 24, 36 and 48 hours, aiming to evaluate intestinal motility and presence of sand. All the feces eliminated by the animals within the 72 hours following the administrations were quantified, diluted and sedimented in order to calculate the sand output (g/kg of feces). All the animals were also subjected to radiographic examination to quantify sand accumulation prior to phase I and after 72 hours of phases I and II. No adverse effects were observed after the treatments. It was possible to notice higher sand elimination in both groups during the phase I, whereas no difference was observed in sand elimination rates between the groups in phase II. The radiographic scores presented differences between the initial timepoint and 72h in phases I and II for both groups. Based on the sand elimination rates and radiographic score, this study demonstrated that sand output was greater after administration of water alone, compared to CMC and Psyllium, leading to the inference that removal of the sandy environment and prevention of sand re-ingestion are effective measures for the elimination of sand from the colon of horses with asymptomatic sand accumulations.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da administração do psyllium (PSY) e da carboximetilcelulose (CMC) sobre a eliminação fecal de areia em equinos com sablose assintomática. Oito equinos com confirmação radiográfica de sablose assintomática foram divididos em dois grupos (grupo CMC e grupo PSY). O estudo foi realizado em duas fases, com intervalo de sete dias. Na fase 1, todos os animais receberam 8L de água; na fase 2, o grupo CMC recebeu 8L de água + 1g/kg de CMC e o grupo PSY recebeu 8L de água + 1g/kg de PSY. Antes da administração de cada solução e após seis, 12, 24, 36 e 48 horas, foram realizados exame físico e ultrassonografia abdominal. Todas as fezes eliminadas em 72 horas foram avaliadas para quantificar a eliminação de areia (g/kg de fezes). Antes da fase 1 e após 72 horas das fases 1 e 2, o exame radiográfico foi realizado para quantificar o escore de acúmulo de areia. Houve maior eliminação de areia após a administração de água em comparação com a administração de CMC, e não se observou diferença entre a CMC e o PSY. Uma redução significativa nos escores radiográficos de acúmulo de areia foi observada após a administração de água, bem como a manutenção dos escores após a administração da CMC e do PSY. Com base na produção de areia e no escore radiográfico, este estudo sugere que a remoção do ambiente arenoso, impedindo a reingestão de areia, é uma medida eficaz para a eliminação da areia do cólon de cavalos com acúmulos de areia assintomáticos.(AU)

Efeito da suplementação com óleo de avocado (Persea americana Mill) na temperatura superficial corpórea de equinos antes e após exercício em esteira / [Effect of supplementation with avocado oil (Persea americana Mill) on body surface temperature of horses before and after exercise on treadmill]

Oito equinos foram distribuídos em delineamento randomizado cruzado, sendo um grupo sem suplementação (GC) e outro grupo suplementado com óleo de avocado (GOAv) por um período de sete semanas. Ao fim da sexta semana, os animais foram submetidos a teste padrão de exercício progressivo (TPEP) e, após sete dias, a teste de baixa intensidade e longa duração (BILD). Após o primeiro ciclo, houve período de descanso "washout" de 30 dias para troca de grupos para o segundo ciclo, que seguiu o protocolo do primeiro. A termorregulação foi avaliada com base na temperatura retal e na temperatura superficial corpórea, obtidas por termografia, de 15 regiões de interesse. A temperatura retal e as imagens termográficas foram obtidas antes, um minuto e 15 minutos após o exercício. Não houve diferença entre os grupos GC e GOAv em nenhum momento. Os resultados obtidos neste estudo revelaram que a suplementação de 5% da matéria seca (MS) com óleo de avocado por seis e sete semanas não influenciou na termorregulação com base na temperatura superficial corpórea dos equinos submetidos ao teste padrão de exercício progressivo (TPEP) e ao exercício de baixa intensidade e longa duração (BILD), respectivamente.(AU)

Eight equines were distributed in a randomized crossover design, one control group (CG) without supplementation and another group supplemented (SG) with avocado oil for a period of six weeks. At the end of the sixth week, the animals were submitted to standard exercise test (SET) and after seven days to the low intensity test (LIT). After the first cycle, there was a 30-day washout rest period to exchange groups for the second cycle, which followed the protocol of the first one. Thermoregulation was evaluated based on rectal temperature and body surface temperature of 15 regions of interest obtained by thermography. Rectal temperature and thermographic images were obtained before, one minute and 15 minutes after exercise. There was no difference between the CG and SG at any time. The results obtained in this study revealed that the supplementation of 5% of dry matter with avocado oil for six and seven weeks did not influence the thermoregulation based on the body surface temperature of the horses submitted to SET and LIT, respectively.(AU)

Frequência das doenças de pele não tumorais em cães no município de João Pessoa, Paraíba, Brasil (2014-2016) / [Frequency of non tumor skin diseases in dogs in the city of João Pessoa, Paraíba, Brazil (2014-2016)]

Diante da carência de estudos sobre a frequência de dermatopatias que acometem cães por região geográfica no Brasil, o presente estudo objetivou conhecer a frequência das principais doenças cutâneas que afetam cães na região metropolitana de João Pessoa, Paraíba, Brasil. Os dados foram coletados de cães que passaram por atendimento dermatológico no período de setembro de 2014 a dezembro de 2016. Além dos exames clínicos e dermatológicos os cães foram submetidos a exames complementares (citológico, raspado de pele, parasitológico, tricograma, bacteriológico, micológico, histopatológico e molecular). No período do estudo, foram atendidos 1.083 cães, em que 18,65% (202/1.083) apresentavam algum tipo de dermatopatia não tumoral. Dos 202 cães acometidos, 51,49% (104/202) eram machos e 48,51% (98/202), fêmeas. Desses 202 cães, 13 tinham dois diagnósticos, totalizando 215 dermatopatias. Dos cães afetados, 62,87% (127/202) eram de raça definida e 37,13% (75/202), sem raça definida (SRD). As lesões observadas com mais frequência caracterizaram-se por áreas alopécicas, hipotricoicas, maculosas, erosivas e ulcerativas, placoides, eritematosas, assim como comedões, colaretes, seborreia. As dermatopatias parasitárias foram as mais frequentes (35,35%; 76/215), seguidas pelas dermatopatias bacterianas (24,19%; 52/215), dermatopatias alérgicas (20,00%; 43/215), dermatopatias fúngicas (17,21%; 37/215), dermatopatias por outras causas (2,32%; 5/215) e pelas dermatopatias autoimunes (0,93%; 2/215). Os exames físicos e dermatológicos, incluindo anamnese detalhada, histórico clínico apurado, associado a exames complementares, são ferramentas importantes para o diagnóstico das dermatopatias em cães. Presume-se que a frequência de dermatopatias em cães na região de estudo possa ser maior do que a observada.(AU)

Faced with the lack of studies on the frequency of dermatopathies that affect dogs by geographical region in Brazil, the present study aimed to evaluate the frequency of dermatopathies that affect the canine species in the metropolitan region of João Pessoa, Paraíba, Brazil. Data was collected from dogs that underwent dermatological care from September 2014 to December 2016. In addition to the clinical and dermatological examinations, dogs underwent complementary exams, such as cytological, skin scraping, parasitological skin examination, trichogram, bacteriological, mycological, histopathological and/or polymerase chain reaction. During the study period, 1,083 dogs were examined, in which 18.65% (202 /1,083) had some form of non-tumoral dermatopathy. Of the 202 dogs affected, 51.49% (104/202) were males and 48.51% (98/202) females. Of these 202 dogs, thirteen had two diagnoses, totaling 215 dermatopathies. 62.87% (127/202) of the affected dogs were purebred and 37.13% (75/202) were without a defined breed (WDB). The most frequently observed lesions were alopecia, hypotric, macular, erosive and ulcerative, placoid, erythematous areas, as well as comedones, collaretes and seborrhoea. The parasitic dermatopathies were the most frequent (35.35%; 76/215), followed by bacterial dermatopathies (24,19%; 52/215), allergic dermatopathies (20,00%; 43/215), dermatomycosis (17,21%; 37/215), dermatopathies for other causes (2,32%; 5/215) and autoimmune dermatopathies (0.93%; 2/215). Clinical and dermatological examination, including a detailed anamnesis, accurate clinical history and associated complementary exams are important tools for the diagnosis of dermatopathies in dogs. Available literature present some studies with canine dermatopathies frequencies superior to that obtained in the present study; however, the number of animals examined was smaller. In this survey, it was possible to establish the primary and secondary diagnoses in 100.0% of the non-tumoral dermatopathies in dogs, results higher than in previous studies. Probably, the frequency of canine dermatopathies in this region is higher than that observed, thus requiring additional studies with greater sampling.(AU)

Anisakidae Skrjabin & Karokhin, 1945 and Raphidascarididae Hartwich, 1954 nematodes in lutjanidae (pisces: perciformes) from the Brazilian Northeast Coast / Nematodas Anisakidae Skrjabin & Karokhin, 1945 e Raphidascarididae Hartwich, 1954 em Lutjanidae (Pisces: Perciformes) do litoral nordeste brasileiro

Abstract The present study aimed at describing and evaluating the fauna of Anisakidae and Raphidacarididae nematodes of lutjanid fish (snappers) from the Brazilian northeastern coast unloaded at the city of Aracaju, capital of the State of Sergipe. A total of 186 lutjanids of 5 different species were analyzed including 69 Lutjanus analis, 51 L. vivanus , 29 Ocyurus chrysurus, 23 L. synagris, and 14 L. jocu. Nematode specimens found in the viscera of these fish were clarified with lactophenol. Illustrations of each of these specimens were prepared to help identify these samples and compose their taxonomic description and classification. At necropsy, 3,183 nematodes belonging to two families were collected from fish viscera which included the following: Anisakidae: Anisakis, Terranova , Contracaecum, and Goezia; Raphidascarididae: Raphidascaris (Ichthyascaris) and Hysterothylacium . A total of six genera of nematodes were found at postmortem examination of which adult worms of only three genera (Goezia, Raphidascaris and Hysterothylacium) were detected in the fish examined. Larvae of Terranova sp. were found only in the musculature of O. chrysurus . Most of the nematode larvae were present in the mesentery and organs of the fish necropsied. Therefore, the zoonotic potential of these nematodes cannot be ruled out. There was a significant negative correlation between the intensity of parasitism by anisakids and the total body length of O. chrysurus; the intensity of parasitism was greater in smaller and shortef fish. There was a significant positive correlation between the abundance of these parasites and the length of L. synagris; the presence of these parasites increased according to the fish's body length. To the authors' knowledge, these are the first records of Raphidascaris (Ichthyascaris ) sp. and Hysterothylacium sp. in L. vivanus , of Terranova sp. in O. chrysurus and L. jocu, and of Goezia sp. in L. analis. These novel findings add the Brazilian northeast coast and the State of Sergipe in the geographic distribution of these parasites in the country.

Resumo O objetivo deste trabalho é descrever e avaliar a fauna de Anisakidae e Raphidacarididae de peixes lutjanídeos do litoral nordeste do Brasil desembarcados na cidade de Aracaju, capital do estado de Sergipe. Foram analisados 186 lutjanídeos das espécies Lutjanus analis 69, L. vivanus 51, Ocyurus chrysurus 29, L. synagris 23 e L. jocu 14. Exemplares dos nematodas encontrados nas vísceras foram clarificados em lactofenol e ilustrados para auxiliar na identificação e compor a descrição taxonõmica. Foram coletados 3.183 nematodas das vísceras dos peixes, pertencentes a duas famílias: Anisakidae: Anisakis, Terranova, Contracaecum e Goezia; e Raphidascarididae: Raphidascaris (Ichthyascaris) e Hysterothylacium. Totalizando seis gêneros encontrados, apenas nos três últimos gêneros foram encontrados vermes em estágio adulto. Apenas em O. chrysurus foram encontradas larvas de Terranova sp. na musculatura. A maioria das larvas estava restrita ao mesentério e órgãos dos peixes, e em grande intensidade não podendo se descartar o potencial zoonótico. Observou-se uma correlação significativa negativa entre a intensidade anisakídeos e o comprimento total de O. chrysurus, onde a intensidade dos parasitas é maior em peixes de menor comprimento e uma correlação significativa positiva entre a abundância desses mesmos parasitos com o comprimento de L. synagris, onde a presença dos parasitas aumenta conforme o comprimento do peixe. Esse é o primeiro registro de Raphidascaris ( Ichthyascaris) sp. e Hysterothylacium sp. em L. vivanus ; de Terranova sp. em O. chrysurus e L. jocu e Goezia sp. em L. analis, adicionando o litoral nordeste do Brasil e o estado de Sergipe na distribuição geográfica desses parasitos.

Perfil hematológico e bioquímico sérico de capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) de vida livre nos biomas Mata Atlântica e Caatinga / Hematological and serum biochemical profile of free-living capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) in Atlantic Forest and Caatinga biomes

Devido à ausência de estudos sobre capivaras na região Nordeste do Brasil, o objetivo deste estudo foi avaliar a sanidade desses roedores de vida livre em três áreas dos biomas Mata Atlântica (2) e Caatinga (1) do estado de Pernambuco, por meio da determinação de parâmetros da hematologia e bioquímica sérica. De novembro de 2016 a dezembro de 2017, foram capturados 21 animais, dos quais foram coletadas amostras de sangue para avaliação hematológica (eritrograma, leucograma e plaquetometria) e bioquímica sérica (atividade enzimática, perfil proteico, energético e mineral). A maioria dos parâmetros esteve dentro dos valores de normalidade para a espécie, embora alguns apresentassem diferenças estatisticamente significativas de acordo com a área de estudo (hemoglobina, hematócrito, VCM, CHCM, eosinófilos, fosfatase alcalina, proteína total, albumina, ácido úrico, creatinina, lactato, sódio e magnésio) e o sexo dos animais (ácido úrico). Os parâmetros obtidos são apresentados como referência e atestam a sanidade e o bom estado nutricional de populações de capivaras nos biomas Mata Atlântica e Caatinga da região Nordeste do Brasil. As informações aportadas neste estudo pioneiro na região Nordeste contribuem para aumentar o conhecimento sobre a ecofisiologia e a conservação in situ de capivaras.(AU)

Due to the lack of studies about capybaras in the northeast region of Brazil, the objective of this study was to evaluate the health status of free-ranging capybaras in three areas of Atlantic Forest (2) and Caatinga (1) biomes in Pernambuco state, through the determination of hematological and serum biochemical parameters. From November 2016 to December 2017, 21 animals were captured and blood samples were collected for the hematological (erythrogram, leukogram and platelet counts) and serum biochemistry (enzymatic activity, protein, energy and mineral profile) evaluation. Hematological and serum biochemical parameters were within the normal range for the species, but some presented statistically significant variations according to the study area (hemoglobin, hematocrit, MCV, MCHC, eosinophils count, alkaline phosphatase, total proteins, albumin, uric acid, creatinine, lactate, sodium and magnesium) and sex of the animals (uric acid). The parameters obtained are presented as reference and attest to the health and good nutritional status of populations of capybaras in the Atlantic Forest and Caatinga biomes of northeastern Brazil. The information provided in this pioneering study in the northeast region contributes to increased knowledge about the ecophysiology and in situ conservation of capybaras.(AU)

Cervical vertebral osteomyelitis secondary to Streptococcus equi infection in an adult horse - case report / Osteomielite vertebral cervical secundária à infecção por Streptococcus equi em um cavalo adulto - relato de caso

A 15-year-old, mixed breed, male horse was attended with a history of multiple abscesses in the cervical region with a three-year evolution. Upon admission, three fistulous tracts with drainage of purulent secretions in the cervical region, low body score, restriction of cervical movements, and painful sensitivity to palpation were observed. The horse was diagnosed with osteomyelitis secondary to Streptococcus equi infection. The initial treatment was antibiotic therapy and local curative. Owing to the lack of response, surgical debridement was performed. An initial favorable response was observed; however, after 4 months, drainage recurred, and the animal was euthanized. A post-mortem computed tomography scan was performed to obtain details of the injury. Cervical osteomyelitis is rare, and its occurrence through hematogenous spread in adult horses and the tomographic findings had not been reported previously. The long period of evolution, difficulty in performing an aggressive debridement, and the presence of multi-drug resistant bacteria contributed to the negative outcome.(AU)

Um equino macho, sem raça definida, de 15 anos de idade, foi atendido com histórico de múltiplos abscessos cervicais com evolução de três anos. Na admissão, foram observados: três trajetos fistulosos com drenagem de material purulento na região cervical; baixo escore corporal; restrição de movimentos cervicais; e sensibilidade dolorosa à palpação da região. Foi diagnosticada osteomielite vertebral cervical secundária à infecção por Streptococcus equi. O tratamento inicial consistiu na administração de antibióticos e curativo local. Na ausência de resposta à terapia, realizou-se o debridamento cirúrgico. Inicialmente, obteve-se uma resposta favorável, entretanto, após quatro meses, houve recidiva da lesão e o animal foi submetido à eutanásia. Realizou-se tomografia computadorizada no post mortem para detalhamento da lesão. A osteomielite vertebral cervical é rara, e sua ocorrência por meio de disseminação hematógena em animais adultos não foi previamente reportada. O longo período de evolução, aliado à dificuldade de realização de um debridamento agressivo, e a característica multirresistente do agente etiológico contribuíram para o desfecho negativo do caso.(AU)

Aspectos clínicos e terapêuticos de infecção por Mycobacterium bovis em gato doméstico - relato de caso / Clinical and therapeutic aspects of infection by Mycobacterium bovis in domestic cat - case report

Este artigo tem como objetivo relatar um caso de infecção por Mycobacterium bovis em um gato doméstico, com seis meses de idade, enfatizando seus aspectos clínicos e terapêuticos. O felino apresentava como histórico a ingestão de leite de vaca não fervido e posteriormente desenvolveu sinais de anorexia, tosse não produtiva e linfadenomegalia. Para elucidação do diagnóstico, foram realizados exames complementares de imagem, hematológicos, citológicos e reação em cadeia da polimerase (PCR). Diante da confirmação de infecção por Mycobacterium, o tratamento foi instituído por meio da associação de três antimicrobianos (enrofloxacino 5mg/kg, claritromicina 10mg/kg e rifampicina 15mg/kg), por via oral, a cada 12 horas, aos quais o animal respondeu positivamente, apresentando significativa diminuição dos sinais clínicos; entretanto, após 60 dias de tratamento, foi a óbito devido a um atropelamento. Conclui-se que a realização do tratamento em gatos com tuberculose pode ocasionar melhora dos sinais clínicos e que, embora de ocorrência rara no Brasil, essa enfermidade deve ser incluída como diagnóstico diferencial das enfermidades infecciosas nessa espécie.(AU)

This article aims to report a case of Mycobacterium bovis infection in a six-month-old domestic cat, emphasizing its clinical and therapeutic aspects. The feline presented as history the intake of unboiled cow's milk and later developed signs of anorexia, non-productive cough and lymphadenomegaly. Additional imaging, hematological, cytological and polymerase chain reaction (PCR) tests were performed to elucidate the diagnosis. In the presence of Mycobacterium infection, treatment was instituted by the combination of three antimicrobials (Enrofloxacin 5mg/kg, Clarithromycin 10mg/kg, and Rifampicin 15mg/kg) orally every 12 hours, to which the animal responded positively, presenting significant decrease of the clinical signs, however after 60 days of treatment the cat died accidentally, hit by a car on the street. It is concluded that the treatment in cats affected by tuberculosis can cause improvement of clinical signs and that although rare in Brazil, this disease should be included as a differential diagnosis of infectious diseases in this species.(AU)

Effects of tenectomy of the medial head of the deep digital flexor on the hindlimbs of healthy horses / Efeitos da tenectomia da cabeça medial do tendão flexor digital profundo nos membros posterior de cavalos saudáveis

The tenectomy of the medial head of the deep digital flexor (TMHDDF) is a minimally studied surgery used in cases of dorsal subluxation of the proximal interphalangeal joint of the hindlimb in horses. The TMHDDF was evaluated in six healthy horses by the degree of lameness, perimeter of the surgical site, the angle of the distal articular joints, and the linear and angular measures of the hoof. Thus, TMHDDF of the right hindlimb was performed and the contralateral limb was used as a control. Both, right and left limbs were evaluated before surgery, as well as at 15, 30, and 60 days after surgery aiming to evaluate the effects of the surgical procedure in healthy limbs. Data were compared by analysis of variance regarding days and limbs. Values below the significant level (P< 0.05) were analyzed using the Tukey's test. TMHDDF caused a mild increase of the toe length and the height of lateral heel (0.2cm in both), as well as a decrease of the angle of the proximal interphalangeal joint (2°) when comparing the left hindlimb to the right hindlimb, 30 and 60 days after surgery. Overall, TMHDDF did not cause significant changes in the evaluated variables up to the 60 days of surgery.(AU)

A tenectomia da cabeça medial do flexor digital profundo (TCMFDP) é uma técnica cirúrgica pouco estudada, indicada para equinos com subluxação dorsal da articulação interfalângica proximal do membro pélvico. A TCMFDP foi avaliada em seis equinos hígidos no grau de claudicação; na perimetria da área operada; nos ângulos articulares distais; e nas medidas lineares e angulares de parâmetros dos cascos. Nesse sentido, foi realizada a TCMFDP do membro pélvico direito, permanecendo o esquerdo como controle. Ambos os membros foram avaliados nos momentos pré-operatório (0) e 15, 30 e 60 dias após a cirurgia, sendo objetivo avaliar os efeitos do procedimento cirúrgico em membros hígidos. Para comparação dos dados entre momentos e membros, foi realizada análise de variância. Os valores inferiores ao de significância (P<0,050) foram submetidos ao teste de Tukey. A TCMFDP provocou discreto aumento (0,2cm, em ambos) do comprimento de pinça e da altura do talão lateral e redução no ângulo da articulação interfalângica proximal (2°) na comparação com o membro pélvico esquerdo aos 30 e 60 dias após a cirurgia no contralateral. Em geral, a TCMFDP não causou alterações influentes nos aspectos avaliados até 60 dias do experimento.(AU)

Recurrent laryngeal neuropathy secondary to nerve compression by melanomas - case report / Neuropatia laríngea recorrente secundária à compressão por melanomas - relato de caso

Recurrent laryngeal neuropathy (RLN) etiology can be acquired, iatrogenic or idiopathic. There are no previous reports of RLN caused by recurrent laryngeal nerve compression by melanomas. This report describes a horse presenting severe dyspnea and progressive weight loss. Physical exam demonstrated tachycardia, tachypnea, inspiratory dyspnea at rest, neck extension and mydriasis. Temporary tracheotomy was performed and videoendoscopic examination diagnosed grade IV laryngeal paralysis. The animal came suddenly to death by suppurative bacterial pneumonia. At necropsy, it was possible to observe multiple melanotic epithelioid melanoma nodules compressing the recurrent laryngeal nerve, alongside with lung and parotid metastasis. This finding emphasizes the importance of establishing a differential diagnosis for tumor mass compression in the etiology of RLN, especially melanomas in gray horses, with or without cutaneous manifestations of masses.(AU)

A neuropatia laríngea recorrente (NLR) pode apresentar etiologia adquirida, iatrogênica ou idiopática. Não há relatos prévios da ocorrência da NLR causada pela compressão do nervo laríngeo recorrente por melanomas. Este relato descreve um equino apresentando dispneia grave e perda de peso progressiva. O exame físico demonstrou taquicardia, taquipneia, dispneia inspiratória em repouso, extensão do pescoço e midríase. Foi realizada traqueotomia temporária e exame videoendoscópico, mediante o qual se diagnosticou paralisia laríngea grau IV. O animal veio a óbito por pneumonia bacteriana supurativa. Na necropsia, foi possível observar múltiplos nódulos de melanoma epitelioide amelanótico comprimindo o nervo laríngeo recorrente, juntamente com metástases pulmonares e parotídeas. Este achado enfatiza a importância de estabelecer um diagnóstico diferencial nos casos de NLR, pensando-se na compressão nervosa por massas tumorais, especialmente melanomas em cavalos tordilhos, com ou sem manifestações cutâneas de massas.(AU)

Caracterização anatomopatológica e imuno-histoquímica dos tumores das glândulas cutâneas em cães / Anatomopathological and immunohistochemical characterization of skin gland tumors in dogs

O presente estudo objetivou caracterizar os aspectos anatomopatológicos e imuno-histoquímicos dos tumores das glândulas cutâneas em cães. A caracterização morfológica seguiu a classificação atualizada da Organização Mundial de Saúde. Para a caracterização imuno-histoquímica, utilizaram-se anticorpos monoclonais primários anti-citoqueratina 14 (CK14), vimentina, p63, calponina, EGFR e Ki-67. Dos animais examinados, 66,67% (18/27) eram machos e 33,33% (9/27) fêmeas, 21 tinham raça definida e seis eram sem raça definida (SRD), com idade variando entre sete e 15 anos. Dos tumores caracterizados, 40,74% eram hepatoides (11/27), 29,63% sebáceos (8/27), 25,92% apócrinos (7/27) e 3,70% meibômio (1/27). Os tumores malignos representaram 55,56%, e os benignos 44,44%. Com esses resultados, foi possível demonstrar que os tumores das glândulas cutâneas em cães são frequentes, sem predileção por raça, sexo e com idade superior ou igual a sete anos. Os anticorpos CK 14, p63, vimentina e EGFR foram imunoexpressos nas células basais, células de diferenciação sebácea dos tumores hepatoides e de meibômio e células mioepiteliais. Entretanto, a vimentina e o EGFR não demonstraram imunomarcação para os tumores sebáceos. A calponina foi um bom marcador para as células mioepiteliais. O índice de Ki-67 foi mais acentuado nos tumores malignos em relação aos benignos. No entanto, estudos futuros utilizando maior número de casos se fazem necessários.(AU)

The present study aimed to characterize the anatomopathological and immunohistochemical aspects of cutaneous glandular tumors in dogs. Tumours were diagnosed according to the WHO criteria for canine skin neoplasms. For the immunohistochemical characterization, the primary monoclonal antibodies anti-cytokeratin 14 (CK14), vimentin, p63, calponin, EGFR and Ki-67 were used. Males were 66.67% (18/27) and females 33.33% (9/27), 21 had a defined race and 6 were mixed breed, with ages varying from 7 to 15 years. The tumors characterized were 40.74% hepatoid (11/27), 29.63% sebaceous (8/27), 25.92% apocrine (7/27) and 3.70% Meibômio (1/27). Malignant tumors accounted for 55.56% and benign tumors 44.44%. With these results it was possible to demonstrate that tumors of cutaneous glands in dogs are frequent, with no predilection for race, sex and with an age ≥ seven years. The CK 14 antibodies, p63, vimentin, and EGFR were imunoexpressed in the basal cells of the sebaceous cell differentiation and Meibomian hepatoides tumors and myoepithelial to cells. However, vimentin and EGFR did not demonstrate immunostaining for sebaceous tumors. Calponin was a good marker for myoepithelial cells. The Ki-67 index was more pronounced in malignant tumors compared to benign tumors. However, more studies are needed mainly using a higher number of tumors.(AU)

Estudo da técnica de venografia dos dígitos de vacas / Study of Venography technique in digits of cows

O objetivo deste estudo foi descrever a técnica de venografia retrógrada podal em vacas, comparando os acessos da veia digital dorsal comum III com a digital comum II ou IV, nos membros torácicos e pélvicos, mediante a administração de dois diferentes volumes de contraste. Foram utilizados 53 membros torácicos e pélvicos de 14 vacas, com o torniquete de borracha posicionado a 5cm proximal aosparadígitos. Administraram-se 10mL do diatrizoato de meglumina em 24 membros (grupo 1), sendo 13 na veia digital dorsal comum III pelo acesso 1 (A1) e 11 na digital II ou IV no acesso 2 (A2). No grupo 2, administraram-se 20mL em 29 membros, sendo 15 pelo A1 e 19 pelo A2. Após a administração do contraste, as radiografias foram repetidas a cada 20 segundos até 120 segundos. O grau de preenchimento vascular foi maior no grupo 2, não diferindo entre membros e acessos venosos. Conclui-se que a administração de 20mL de contraste apresentou melhor preenchimento vascular e radiopacidade, não havendo diferença entre 20 e 120 segundos após a administração do contraste na qualidade radiográfica, independentemente do acesso venoso.(AU)

The aim of this study was to describe the technique of retrograde venography foot in cows, comparing the approaches of the dorsal common digital vein III with the digital commons II or IV, thoracic and pelvic by administering two different volumes of contrast members. Fifty three fore and hindlimbs of 14 cows were used, a rubber tourniquet was placed at 5cm above accessory digit. Diatrizoatemeglumine was administered at 10mL to 24 members (group 1), 13 dorsal common digital vein III for access 1 (A1), and 11 digital II or IV access 2 (A2). In group 2 20mL was administered to 29 members, 15 by 19 in A1 and A2. After contrast administration, the radiographs were repeated every 20 seconds until 120 seconds. The degree of vascular filling was greater in group 2, independent of venous access, member or moment. There was no significant difference in the degree of radiopacity of radiographic images when compared to the venous access, time and a member of both groups. We conclude that administration of 20mL of contrast showed better vascular filling and radiopacity, with no difference between 20 and 120 seconds after contrast administration in independent radiographic quality venous access.(AU)

Estudo comparativo entre métodos manual e digital no cálculo do ângulo do platô tibial em cães / Comparative study of manual and digital method in the calculation of the tibial plateau angle in dogs

São poucos os dados publicados sobre a aplicabilidade ou a confiabilidade dos métodos digitais para mensuração do ângulo do platô tibial (APT) em comparação à mensuração manual. O objetivo deste estudo foi comparar o APT obtido pelo cálculo manual padrão, em filmes radiográficos, com os valores obtidos por cálculos em imagens digitais, por meio do software do computador. Foram analisadas radiografias digitais do membro pélvico, direito e esquerdo, em perfil verdadeiro, de 20 cães saudáveis, com idade superior a um ano. Três observadores com graus de experiência semelhantes em cálculo do APT realizaram as mensurações em cada radiografia. Primeiramente, foram calculados os ângulos dos platôs tibiais manualmente nas películas radiográficas e, posteriormente, os cálculos foram realizados na imagem digital, por meio do software para medicina veterinária do sistema de raios X digital. Os resultados do presente estudo demonstraram diferenças significativas entre os métodos, com valor das médias do cálculo digital 20,48±3.71 e do cálculo manual 23.90±4.02. Valor de P foi < 0,01 na comparação entre médias dos dois grupos. Na avaliação interobservadores, houve diferença significativa no cálculo manual no perfil direito, o que sugere maior variação no cálculo manual quando comparado ao digital. O cálculo realizado pelo software apresentou menor variação nos valores interobservadores. Acredita-se que a menor variação obtida nos resultados aqui apresentados se dê em razão das facilidades proporcionadas pelo software. Conclui-se que houve diferença entre os valores obtidos por meio dos métodos convencional e digital no cálculo do ângulo do platô tibial, sendo os valores digitais menores entre os observadores, e que o método digital no cálculo do ângulo do platô tibial levou à menor variação quando comparado ao método manual.(AU)

There are few published data on the applicability and reliability of digital methods for measuring the TPA compared with manual measurement. The objective of this study was to compare the TPA obtained by calculating standard manual on conventional radiographs, with the values obtained by calculations in digital images through a computer program. Bilateral digital radiographs of hind limb were analyzed in true profile for 20 healthy dogs older than two years. Three observers with similar levels of experience in calculating the TPA conducted measurements on each radiograph. First we calculated the angle of the tibial plateaus manually in x-ray film and then the calculations were made through the program offered by the computer program in the digital image. The results of this study showed significant differences between the methods, with average value of 20.48±3.71 digital calculating average and 23.90±2.4 in the manual calculation. P value was < 0.01 when comparing averages. No significant difference in manual calculation in right profile were found between interobserver assessments, suggesting greater variation in manual calculation compared to digital. The calculation performed by the software showed less variation in values. The slight variation obtained in our results is believed to be due to the facilities provided by the software. There was a difference between the values obtained by means of conventional and digital methods for calculating the angle of the tibial plateau, and the smaller digital values between the observers and the digital method in the calculation of the tibial plateau angle led to less variation when compared to the manual method.(AU)

Pedometria e acompanhamento bioquímico no pós-operatório de bovinos Nelore com onfalopatias / Pedometer and biochemistry monitoring on postoperative from Nelore cattle with umbilical diseases

A analgesia pós-operatória em bovinos, por vezes, é negligenciada, frequentemente por falta de métodos quantitativos para seu diagnóstico e dimensionamento. Os objetivos deste trabalho foram: avaliar a pedometria e o acompanhamento bioquímico no pós-operatório de bovinos Nelore com onfalopatias e comparar a eficiência anti-inflamatória e analgésica entre diferentes doses de flunixin meglumine e meloxicam nesses animais. Foram utilizados 24 bovinos; deste total, 18 animais foram submetidos a laparotomia para tratamento das onfalopatias e, posteriormente, divididos em três grupos de animais: G1, que recebeu 1,1mg/kg flunixin; G2, 2,2mg/kg flunixin; G3, 0,5mg/kg meloxicam. A via de eleição para os tratamentos foi a IM, uma vez ao dia, totalizando seis aplicações. Outros seis bovinos saudáveis compuseram o grupo controle (GC). As coletas do sangue total para mensuração do cortisol plasmático foram realizadas antes e depois da cirurgia, assim como a leitura do pedômetro e o exame clínico. As concentrações plasmáticas de cortisol diferiram apenas no M0, entre o GC e os grupos tratados. O flunixin meglumine em diferentes doses e o meloxicam foram equivalentes no tratamento da dor pós-operatória e no efeito anti-inflamatório em bovinos submetidos à laparotomia para tratamento das onfalopatias.(AU)

Postoperative analgesia in cattle is sometimes overlooked, frequently due to the lack of quantitative methods for diagnosis and measurement. The objectives of this study were: to analyze the pedometric and biochemistry alterations of postoperative period in Nelore bovines with umbilical diseases; compare the anti-inflammatory and analgesic efficiency between different doses of flunixin meglumine and meloxicam in the postoperative of umbilical diseases in these animals. Twenty four bovines were used. From this total, 18 animals were submitted to laparotomy for treatment of umbilical diseases and subsequently divided into three groups of animals: G1, which received 1.1mg/kg flunixin, G2 2.2mg/kg flunixin, G3 0.5mg/kg meloxicam. Six other healthy cattle were allocated to the control group (CG). Total blood samples for plasma cortisol clinical examination was performed on standardizer times. Plasma cortisol concentrations differed only in the M0 between GC and treated groups. Flunixin meglumine in different doses and meloxicam were equivalent in the treatment of postoperative pain and anti-inflammatory effect in cattle submitted to laparotomy for the treatment of umbilical diseases.(AU)

Encarceramento do intestino delgado em forame epiploico em equinos com hábito de aerofagia: relato de caso / Entrapment of the small intestine in the epiploic foramen in crib-biting horses: case report

São relatados quatro casos de encarceramento de forame epiploico (EFE), entre os casos: três machos e uma fêmea; dois da raça Quarto de Milha, um SRD e um Brasileiro de Hipismo; idade média de 11 anos; altura média de cernelha de 160,5cm; massa corporal média de 465kg. Todos os animais possuíam o hábito de aerofagia. A presença de refluxo enterogástrico e intestino delgado distendido à palpação transretal foi variável na dependência do segmento intestinal aprisionado. À laparotomia exploratória constataram-se: dois casos de aprisionamento jejunoileal; um de jejuno; e o outro de íleo. Todos os animais apresentaram EFE da esquerda para a direita, representando o sentido horário. Apenas o animal que apresentava o íleo aprisionado sobreviveu; os demais foram submetidos à eutanásia no período transoperatório devido à extensa isquemia intestinal e às lesões vasculares decorrentes da manobra de redução. A aerofagia é o fator de risco que apresenta maior correlação positiva com o EFE, fato corroborado pelos casos apresentados. Apesar de ser descrito um bom prognóstico para o EFE na literatura, foi obtido um desfecho ruim entre os casos atendidos, e salienta-se que a extensão da lesão e o sangramento da veia porta no transoperatório contribuíram para esse resultado.(AU)

Four cases of epiploic foramen entrapment (EFE) are reported. Among the cases, three males and one female, two Quarter Horses, one mixed breed and one Brazilian Equestrian, aged between 3 to 20 years, mean 11 years. The average height was 160.5cm and 465kg. All horses had a previous record of crib-biting habit. The presence of enterogastric reflux and small intestine distended loops in transrectal palpation was variable in dependence of the trapped segment. In surgical exploration were identified two cases of jejunum and ileum entrapped, one of the ileum and one of jejunum. All animals showed EFE from left to right. The horse that had trapped the ileum has survived. The others were euthanized due to the extent of injury or rupture of large vessels during surgical reduction. Although there are many notes of possible risk factors for EFE occurrence, cribbing is the risk factor that has the highest positive correlation with EFE. This appointment was confirmed by the cases presented. Despite being described a good prognosis for the EFE, a bad outcome was achieved among the cases, and stresses that the extent of the injury and bleeding from the portal vein contributed to this outcome.(AU)

Physicochemical characterization and antioxidant activity of decolorized Moringa oleifera Lam leaf flour

BACKGROUND: Maringa oleifera leaves are rich in antioxidant substances; however, when lyophilized leaves were used in flour form in meat products, they presented no antioxidant effect and even accelerated the oxidation process of the product. Thus, the objective of this study was to evaluate the effect of chlorophyll extraction on the physicochemical composition and antioxidant activity of Moringa leaves. METHODS: Moringa leaves were dried and ground in order to obtain uniform flour. A treatment using chlorophyll extraction (decolorized) was tested versus a control treatment(non-decolorized) for proximate composition, instrumental color, and antioxidant activity using ANOVA followed by Tukey'stest. RESULTS: Higher crude fiber, ash, and protein contents were observed for decolorized flour (19.41 and 38.13%, 11.87 and14.02%, and 28.81 and 31.33%, respectively) when compared to those for the control. Chlorophyll extraction significantly affected (p< 0.05) the instrumental color of the leaves flour. The half maximal effective concentration (EC50) of both decolorized and control flour was 3.74 and 4.30 mg/L, respectively. The equivalent of antioxidant per gramof non-decolorized leaves was higher than that observed for the decolorized leaves (0.36 and 0.32 g/g DPPH, respectively). The antioxidant activity (AA%) of the extract from non-decolorized leaves was higher in the concentrations of 5 and 2.5 mg/0.1 mL, while the decolorized leaves was higher in the extract concentration 5 and 2 mg/0.1 ml. CONCLUSION: The decolorization process affected the chemical composition and color of Moringa oleifera leaves flours however did not improve its antioxidant activity

Avaliação biomecânica e dimensional do fio de sutura à base de quitosana / Biomechanics and dimensional evaluation of the suture based on chitosan

A resistência à tração e o diâmetro são características de grande importância na avaliação da qualidade de fios de sutura, estando relacionados à capacidade destes de suportar o estresse promovido pelas forças atuantes em determinados tecidos. Desta forma, objetivou-se com este estudo avaliar as propriedades mecânica e dimensional de fios de sutura à base de quitosana, comparando-as com as preconizadas pela norma NBR 13904/2003. Tais propriedades foram avaliadas usando-se uma máquina de ensaio universal e um micrômetro digital. Os parâmetros mecânico e dimensional analisados foram a resistência quanto à tração, a deformação, bem como o diâmetro, respectivamente. O valor médio do diâmetro dos fios de quitosana apresentou variação e observou-se resistência à tração ligeiramente abaixo da norma preconizada, com rápida deformação. O fio de quitosana, na forma em que foi produzido, apresentou variabilidade dimensional e baixa resistência à tração, havendo a necessidade de melhorias no método de fabricação dele.(AU)

Tensile strength and diameter are very important characteristics in assessing the quality of suture, being related to their ability to withstand the stress caused by forces acting in certain tissues. Thus, the aim of this study was to evaluate the mechanical and dimensional properties of chitosan-based suture, comparing them with those recommended by the NBR 13904/2003. These properties were evaluated by using a universal testing machine and a digital micrometer. The mechanical and dimensional parameters analyzed were resistance to traction, deformation and diameter, respectively. The average diameter of the chitosan showed variation and yarn tensile strength was observed slightly below the recommended standard, with rapid deformation. The chitosan yarn in the form in which it was produced, presented dimensional variability and low tensile strength, there is a need for improvements in the method of manufacturing the same.(AU)