Simultaneous assessment of plasmatic, acrosomal, and mitochondrial membranes in ram sperm by fluorescent probes / Avaliação simultânea das membranas plasmática, acrossomal e mitocondrial de espermatozoides de carneiros por sondas fluorescentes

In this experiment, it was defined a protocol of fluorescent probes combination: propidium iodide (PI), fluorescein isothiocyanate-conjugated Pisum sativum agglutinin (FITC-PSA), and JC-1. For this purpose, four ejaculates from three different rams (n=12), all showing motility >80 percent and abnormal morphology <10 percent, were diluted in TALP medium and split into two aliquots. One of the aliquots was flash frozen and thawed in three continuous cycles, to induce damage in cellular membranes and to disturb mitochondrial function. Three treatments were prepared with the following fixed ratios of fresh semen:flash frozen semen: 0:100 (T0), 50:50 (T50), and 100:0 (T100). Samples were stained in the proposal protocol and evaluated by epifluorescence microscopy. For plasmatic membrane integrity, detected by PI probe, it was obtained the equation: v=1.09+0.86X (R²=0.98). The intact acrosome, verified by the FITC-PSA probe, produced the equation: v=2.76+0.92X (R²=0.98). The high mitochondrial membrane potential, marked in red-orange by JC-1, was estimated by the equation: v=1.90+0.90X (R²=0.98). The resulting linear equations demonstrate that this technique is efficient and practical for the simultaneous evaluations of the plasmatic, acrosomal, and mitochondrial membranes in ram spermatozoa.

Neste experimento, foi definida uma combinação de sondas fluorescentes: iodeto de propídio (PI), aglutinina de Pisum sativum conjugada ao isotiocionato de fluoresceína (FITC-PSA) e JC-1. Para esta proposta, quatro ejaculados de três carneiros (n=12), que apresentavam motilidade >80 por cento e alterações morfológicas <10 por cento, foram diluídos em meio TALP e divididos em duas alíquotas. Uma alíquota foi submetida a três ciclos de flash frozen e descongelação, para induzir danos nas membranas celulares e distúrbios na função mitocondrial. Três tratamentos foram preparados com as seguintes proporções preestabelecidas de sêmen fresco: sêmen submetido a flash frozen: 0:100 (T0), 50:50 (T50) e 100:0 (T100). As amostras foram coradas no protocolo proposto e avaliadas por microscopia de epifluorescência. Para integridade de membrana plasmática, detectada pela sonda PI, foi obtida a equação: v=1,09+0,86X (R²=0,98). O acrossomo intacto, verificado pela sonda FITC-PSA, produziu a equação: v=2,76+0,92X (R²=0,98). O alto potencial de membrana mitocondrial, marcada em vermelho-alaranjado pelo JC-1, foi estimado pela equação: v=1,90+0,90X (R²=0,98). As equações lineares resultantes demonstraram que a técnica é eficiente e prática para avaliação simultânea das membranas plasmática, acrossomal e mitocondrial em espermatozoides de carneiros.

Estudo comparativo entre os sistemas de umidificação aquoso aquecido e trocador de calor e de umidade na via aérea artificial de pacientes em ventilação mecânica invasiva / Comparative study between heated water humidifiers and hygroscopic heat and moisture exchangers in artificial airways for patients undergoing invasive mechanical ventilation

CONTEXTO: Nos pacientes recebendo suporte ventilatório invasivo através de tubos endotraqueais é essencial o uso de umidificadores. OBJETIVO: avaliar os níveis de temperatura (TºC) e de umidade relativa (UR) do gás administrado ao paciente em ventilação mecânica através da umidificação aquosa aquecida (UAA) e do filtro trocador de calor e de umidade (FTCU). MÉTODO: Este foi um estudo prospectivo, randomizado, onde foram estudados 20 pacientes divididos em dois grupos: um grupo usou a UAA (n=10) e o outro grupo (n=10) usou FTCU Hygrobac "S", marca Mallinckrodt®. As variáveis analisadas foram: níveis de temperatura (T) e umidade relativa (UR) do gás, volume minuto (VM), volume corrente (VC) e volume de condensação. RESULTADOS: Verificou-se que o sistema de umidificação aquosa aquecida atingiu temperaturas mais baixas que o filtro trocador (29,01 ± 1,33 ºC, versus 30,14 ± 1,24 ºC; p<0,001). A umidade relativa foi maior na UAA do que no FTCU (97,45 ± 5,22 por cento, versus 89,87 ± 11.04 por cento, p < 0,021). O volume de condensação do circuito do grupo usando UAA foi maior que o do grupo usando o FTCU (p < 0,05). CONCLUSÃO: Os resultados demonstram que ambos os sistemas, UAA e o FTCU forneceram umidades absolutas abaixo do valor recomendado, sendo que o sistema de UAA ofereceu uma umidade relativa maior, enquanto que o aquecimento do gás com o FTCU obteve um melhor desempenho.

BACKGROUND: In patients receiving invasive mechanical ventilation through endotracheal tubes, the use of humidifiers is essential. OBJECTIVE: To evaluate temperature and relative humidity levels in the gas administered to patients undergoing mechanical ventilation by means of heated water humidifiers (HWH) and hygroscopic heat and moisture exchangers (HHME). METHOD: This was a prospective randomized study on 20 patients divided into two groups: one group using HWH (n=10) and the other using the Hygrobac "S" model of HHME, made by Mallinckrodt® (n=10). The variables analyzed were: temperature and relative humidity levels of the gas, minute volume (MV), tidal volume (V T) and condensation volume. RESULTS: It was found that HWH attained lower temperatures than did HHME (29.01 ± 1.33 ºC versus 30.14 ± 1.24 ºC; p<0.001). The relative humidity was higher in HWH than in HHME (97.45 ± 5.22 percent versus 89.87 ± 11.04 percent; p<0.021). The condensation volume in the ventilator circuit for the group using HWH was greater than for the HHME group (p<0.05). CONCLUSION: The results demonstrate that both systems (HWH and HHME) supplied absolute humidity that was below recommended values, while the HWH offered higher relative humidity. On the other hand, HHME produced better performance regarding gas heating.

Alteraçöes neurológicas nas cardiopatias congênitas: um estudo neuropatológico / Neurologic changes in congenital heart diseases: a neuropathologic study

Estudo neuropatológico foi realizado em 190 autópsias consecutivas de pacientes com cardiopatias congênitas: 116 casos foram operados (grupo cirúrgico, GCg e os 74 restantes formam o grupo clínico (GCI). Alteraçöes neuropatológicas foram observadas em 71 casos (41 no GCg e 30 no GCI). Entretanto, a maior parte dos 129 casos com exame normal morreu nas primeiras 72 horas após a cirurgia ou os eventos clínicos responsáveis pela morte. Quase todas as alteraçöes foram hipóxico-isquêmicas. Infartos, únicos ou múltiplos, foram encontrados em 41 casos (23 no GCg e 18 no GCI). Mecanismo embólico foi detectado em 12 casos. Alteraçöes hipóxicas difusas estavam presentes em 17 casos (10 no GCg e 7 no GCI). Hemorragias foram encontradas em 11 (6 no GCg e 5 no GCI). Em 17 casos (5 no GCI e 12 no GCg), o quadro foi o de uma leucomalacia periventricular. Todos os casos eram concernentes a crianças abaixo de 6 meses de idade. Em 7 casos, alteraçöes inflamatórias foram detectadas (micro-abscessos difusos em 6 d abscesso de lobo frontal em 1). Quase todos os casos em ambos os grupos apresentaram complicaçöes clínicas, isoladas ou associadas, potencialmente danosas para o cérebro, como parada cardíaca, baixo débito cardíaco, hipoxemia e insuficiencia respiratória. Foi impossível determinar, em cada caso, a magnitude do fator ou fatores responsáveis pelo padräo neuropatológico corrspondente. Näo houve diferenças do padräo neuropatológico entre as cardiopatias com hiper ou hipofluxo pulmonar

Enhanced rate of cortical spreading depression due to malnutrition: prevention by dietary protein supplementation

The enhanced prpagation rate of cortical spreading depression, observed previously in rats rendered malnourished by the region basic diet that is typical of the daily fare of many of the inhabitants of the northeastern region of Brazil, was not prevented by raising the quantity of dietary protein to the normal level without changing its quality. Dietary supplementation with casein, a protein of good quality, however, abolished the effect on sprteading depression. These data indicte that the quality, and not the quantity, of the dietary protein is the criticañ factor in reversing the effects of regional basic diet malnutrition on spreading depression