Paratuberculosis in a dairy Gyr herd in the State of Paraíba, Brazil / Paratuberculose em um rebanho Gir leiteiro no Estado da Paraíba Brasil

This paper describes the clinical, pathological, and microbiologic aspects of paratuberculosis (Johne's disease) in a dairy Gyr herd in the State of Para�ba, northeastern Brazil. An eight years old cow with chronic unresponsive diarrhea was clinically examined and euthanized for pathological evaluation. Fecal samples from all 160 animals over 12 months of age from the herd were collected for isolation of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis. Clinically, the index case cow was severely dehydrated, cachectic, with profuse mucous diarrhea. The main post-mortem findings were emaciation and thickened intestinal wall. Microscopically, the intestinal lamina propria and submucosa were infiltrated by macrophages, epithelioid cells, and Langhans giant cells with numerous alcohol-acid resistant bacilli in the cytoplasm. Two fecal samples displayed growth in slants of Herrold's egg-yolk agar supplemented with mycobactin J, 150 days after incubation. No growth was noticed in slants without mycobactin J. Microscopic examination of the isolated microorganisms stained by Ziehl-Neelsen revealed considerable amounts of alcohol-acid resistant bacilli, morphologically compatible with Mycobacterium spp. Based on the clinical signs, gross and histological lesions, growth time, bacterial morphology in Ziehl-Neelsen staining, and dependence of mycobactin J, the first diagnosis of paratuberculosis in Zebu cattle was made.

Objetivou-se descrever os aspectos clínicos, anátomo-histopatológicos e microbiológicos da paratuberculose em um rebanho Gir leiteiro no Estado da Paraíba. Uma vaca de oito anos que apresentava diarréia persistente, refratária a tratamento foi necropsiada para estudo anátamo-histopatológico. Também foram coletadas amostras de fezes de todos os 160 animais do plantel, com idade superior a 12 meses, para tentativa de isolamento de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis. Ao exame clínico, o animal caso índice apresentou caquexia, diarréia profusa e desidratação grave. À necropsia, o animal apresentou-se emaciado e, ao exame detalhado do trato digestivo, foi observado espessamento da parede e superfície mucosa do íleo e intestino grosso. À microscopia, verificou-se intensa infiltração de macrófagos espumosos associado a raras células epiteliódes e gigantes do tipo Langerhans na lâmina própria e submucosa. À coloração de Ziehl-Neelsen foram observadas miríade de bacilos álcool-ácido resistentes no citoplasma destas células. Houve crescimento de colônias bacterianas em duas das 160 amostras de fezes após 150 dias de incubação em tubos com meio Herrold's egg-yolk suplementados com micobactina J e ausência de crescimento nos tubos com mesmo meio, mas sem suplementação. Os microrganismos isolados foram corados pelo Ziehl-Neelsen observando-se presença de grande quantidade de bacilos álcool-ácido resistente, com morfologia compatível ao gênero Mycobacterium. Baseado na história clínica, achados anátomo-histopatológicos e histoquímicos (Ziehl-Neelsen), e microbiológicos, firmou-se o primeiro diagnóstico de paratuberculose em Zebu na Paraíba.

Viabilidade de Tritrichomonas foetus após congelamento com diferentes crioprotetores / Viability of Tritrichomonas foetus after freezing with diferents cryoprotectors

Este trabalho teve como objetivo avaliar a viabilidade de um isolado de Tritrichomonas foetus criopreservada com glicerol e dimetilsulfóxido (DMSO) a -196ºC. Isolados do protozoário foram descongeladas dois dias após o congelamento e 6, 12, 18 e 26 meses, para avaliação de sua viabilidade. Em todos os tempos analisados, o congelamento foi viável em 60 por cento e 90 por cento das amostras congeladas com glicerol a 10 por cento e DMSO a 12 por cento, respectivamente.

The aim of this work was to evaluate the viabilitity of Tritrichomonas foetus cryopreservated with glycerol and dimethilsulphosyde (DMSO) at -196ºC. Samples of the protozoa were thaw two days and 6, 12, 18, and 26 months after freezing to be evaluated. In the time analyzed, the freezing was viable in 60 percent and 90 percent of freeze samples with glycerol at 10 percent and DMSO at 12 percent, respectively.

Fibrinonecrotic enteritis of piglets in a commercial farm: a postmortem study of the prevalence and the role of lesion associated agents Isospora suis and Clostridium perfringens

The objectives were to determine the prevalence of fibrinonecrotic enteritis (FNE) on a farrow-to-finish farm of 1,000 sows, to categorize the pathological changes, and to to investigate the lesion associated agents Isospora suis and Clostridium perfringens. Causes of preweaning mortality (PWM) were classified into 8 categories including FNE. Obtained data were evaluated for statistical significance by adjusted Chi-square analysis. Samples of FNE were taken for complementary studies including a PCR technique for genotyping toxin genes of Clostridium perfringens from gut samples fixed in 10 percent neutral formalin. From 3,153 piglets examined, less than 1 percent was classified as FNE. FNE prevalence increased progressively from the first to the third week, the last differing statistically from the others. Eighty percent of gut samples with FNE lesions were positive to Isospora suis, when examined by PCR from 9 severe FNE lesions detected 7 positive samples only for a toxin gene, characteristic of C. perfringens type-A.

Os objetivos deste trabalho foram determinar a prevalência de enterite fibrinonecrótica (EFN) em uma granja tecnificada com 1000 matrizes, classificar as mudanças patológicas e investigar a lesão decorrente da associação dos agentes Clostri-dium perfringens e Isospora suis. As lesões macroscópicas devidas à mortalidade pré-desmame (MPD) foram classificadas em oito categorias incluindo EFN. Os dados obtidos foram avaliados pelo teste Qui-quadrado. Amostras de EFN foram colhidas para estudos complementares incluindo uma técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) para identificação dos genes codificadores de toxinas de C. perfringens a partir de amostras do intestino fixadas em formalina a 10 por cento. Dos 3.153 leitões examinados, menos que 1 por cento foram classificados como EFN. As análises estatísticas revelaram que a EFN aumentou progressivamente a partir da primeira para a terceira semana, sendo que a última semana diferiu estatisticamente das demais. Oitenta porcento das amostras do intestino com EFN foram positivas para I. suis. Por meio da PCR a partir dos 9 casos de EFN severa, 7 foram positivos somente para o gene da toxina alfa, característico de C. perfringens tipo A.

Serotyping and evaluation of the virulence in mice of Streptococcus suis strains isolated from diseased pigs

Um total of 110 amostras de Streptococcus suis isoladas de suínos doentes, no Brasil foram sorotipificadas e analisadas para a virulência. Sorotipificação das amostras resultou na seguinte classificação: 42 amostras do sorotipo 2 (38,2%), 10 amostras do sorotipo 14 (9,1%), sete amostras do sorotipo 9 (6,4%), três amostras de cada sorotipo, 7 e 11 (2,7%), duas amostras de cada sorotipo, 1 e 8 (1,8%) e uma amostra de cada um dos sorotipos, ½, 3, 5, 6 e 10 (0,9%). Reações cruzadas entre os sorotipos 1, 14 e 7 foram observadas em 21 amostras (19,1%). Somente 41,9% das amostras foram patogênicas para camundongos.

Immunohistochemical detection of Clostridia species in paraffin-embedded tissues of experimentally inoculated guinea pigs

O carbúnculo sintomático é causado pelo Clostridium chauvoei, enquanto o edema maligno é causado pelo C. chauvoei, C. septicum, C. sordellii, C. perfringens tipo A, e/ou C. novyi tipo A. Corpos policlonais anti-C. chauvoei, anti-C. septicum, anti-C. sordellii and anti-C.novyi tipo A foram produzidos em coelhos e purificados em uma coluna de DEAE-celulose. Alíquotas das imunoglobulinas foram conjugadas com isotiocianato de fluoresceína e o restante foi usado na técnica de streptavidina biotina peroxidase (SBP). SBP foi padronizada para detectar C. chauvoei, C. septicum, C. sordellii e C. novyi tipo A em tecidos de cobaias fixados em formol e incluídos em parafina. A mesma foi comparada com a técnica de imunofluorescência direta (IFD). Secções e impressões do músculo da área de inoculação, coração, fígado, baço e rim, foram obtidas para ambas as técnicas. Nenhuma reação cruzada foi observada quando tecidos inoculados com outras espécies de Clostridia foram tratadas com esses quatro anticorpos primários. C. chauvoei e C. septicum foram detectados em todos os espécimes provenientes dos animais inoculados com esses microrganismos, enquanto somente secções de músculo obtidas de todos os animais inoculados com C. sordellii e C. novyi tipo A foram positivas. Os mesmos resultados observados pela técnica de SBP, foram obtidos em impressões de tecidos desses microrganismos corados pela IFD. Os resultados indicam que a técnica de SBP permite a detecção de C. chauvoei, C. septicum, C. sordellii e C. novyi tipo A em tecidos de cobaias fixados em formol e incluídos em parafina.

Drug susceptibility of Brazilian strains of Mycobacterium bovis using traditional and molecular techniques

Transmission of Mycobacterium bovis from cattle to humans has been reported and can cause tuberculosis (Tb) and a problem in certain risk populations. Therefore, knowledge of resistance of M. bovis towards antibiotics used for therapy of human Tb could help avoiding cure delay and treatment cost increase when dealing with drug resistant organisms. We therefore evaluated the susceptibility of M. bovis isolates towards streptomycin, isoniazide, rifampicin, ethambutol, and ethionamide, the first line antibiotics for human Tb. Therefore, 185 clinical samples from cattle with clinical signs of tuberculosis were processed and submitted to culturing and bacterial isolates to identification and drug susceptibility testing using the proportion method. Among 89 mycobacterial strains, 65 were identified as M. bovis and none were resistant to any of the antibiotics used. Confirmation of present results by future studies, enrolling a large number of isolates and designed to properly represent Brazilian regions, may favor the idea of using isoniazide preventive therapy as part of a Tb control strategy in special situations. Also, nucleic acids from bacterial isolates were submitted to rifoligotyping, a recently described reverse hybridization assay for detection of mutations causing resistance towards rifampicin. Concordance between the conventional and the molecular test was 100 percent, demonstrating the use of such methodology for rapid evaluation of drug susceptibility in M. bovis.

Enterotoxemia em caprinos no Rio Grande do Sul / Caprine enterotoxaemia in Rio Grande do Sul, Brazil

São descritos surtos de enterotoxemia em caprinos em cinco propriedades no Estado do Rio Grande do Sul. Os animais afetados eram, normalmente, encontrados mortos ou apresentavam evolução aguda de 2 a 3 horas com acentuada depressão, cólicas abdominais e diarréia profusa com fibrina. Em duas propriedades relataram-se casos com a evolução de até 12 horas. Em treze animais necropsiados observaram-se aumento de líquidos nas cavidades abdominal, torácica e pericárdica, congestão e hiperemia da serosa e mucosa do intestino, conteúdo do cólon líquido com fibrina além de hemorragias de serosa e fibrina. Em um animal constatou-se microangiopatia cerebral caracterizada por acúmulo de material homogêneo e eosinofílico no espaço perivascular. No conteúdo intestinal, colônias com bastonetes morfológica e bioquimicamente sugestivos de Clostridium perfringens foram caracterizadas no estudo bacteriológico. A soroneutralização em camundongos com conteúdo intestinal dos animais afetados, revelou a presença da toxina épsilon. Estes achados evidenciam a enterotoxemia como doença de importância para criação de caprinos no Rio Grande do Sul