Hemolytic uremic syndrome: co-infection with two different serotypes of shiga-like toxin producing Escherichia coli

Se presenta el caso de un niño de 14 meses que desarrolló Sindrome Urémico Hemolítico después de un período prodrómico con vómitos y diarrea mucosanguinolenta del cual se aislaron 2 cepas de E. coli productoras de toxina simil-Shiga (SLT) de diferente serotipo y genotipo. Una de las cepas correspondió al seotipo 0157: H7, biotipo D, productora de SLT II y susceptible a todos los antibióticos probados. Esta cepa hibridizó cona las sondas genéticas para SLT II; la fimbria de adherencia (factor EHEC) y para el factor de fijación y disolución del borde en cepillo ("E. coli attaching and effacing") eae). La otra cepa correspondió al serotipo O25:K2:H2 productora de SLT II en los ensayos de neutralización de efecto citotóxico sobre células VERO utilizando anticuerpos monoclonales, pero negativas para SLT I y SLT II y el factor eae. Sólo fue positiva por hibridización con la sonda para la fimbria de adherencia. Esta cepa presentó además un patron de multiresistencia a los antibióticos probados. Por otra parte, la cepa de E. coli, del serotipo O25: K2: H2 produjo niveles tanto de toxina libre como asociada a células, 20 veces superiores a la cepa del serotipo O157:H7. Esta es la primera publicación de un caso de SUH en el cual se detectó una cepa de E. coli del serotipo O25:H2 produjo niveles tanto de toxina libre como asociada a células, 20 veces superiores a la cepa del serotipo O157:H7. Esta es la primera publicación de un caso de SUH en el cual se detectó una cepa de E. coli del serotipo O25:H2 productora de SLT. Además el hecho de no hibridizar con la sonda genética para SLT II, a pesar de tener una actividad citotóxica neutralizable por el anticuerpo monoclonal (MAb BC5BB12) indicaria que la secuencia que codifica para SLT II no presenta homología con la sonda utilizada. la detección de SLT libre tanto en la materia fecal del niño como en la de su padre (quien padeció diarrea una semana antes), indicaría que el niño adquirió la infección en el entorno familiar

Relationship between enterotoxigenic Escherichia coli and diarrhea among children in Buenos Aires

La diarrea aguda infecciosa es el problema de salud más importante en los países en desarrollo. Diversos estudios en Latinoamérica han demonstrado que Escherichia coli enterotoxigénica (ETEC) y rotavirus son los patógenos más frecuentemente asociados con la diarrea infantil. Para causar la diarrea, ETC coloniza, se multiplica en el intestino delgado y produce la enterotoxina lábil (LT) y/o la estable (ST) al calor. La colonización está mediada por estructuras fimbriales de superficie llamadas factores de colonización (CFAs). Tres CFAs han sido descriptos y bien caracterizados: CFA/I, CFA/II y CFA/IV. Las cepas de ETEC aisladas de pacientes con diarrea pertenecen a un número reducido de serotipos y se ha sugerido que existe una relación entre el patrón de fermentación de azúcares y el serotipo. En este trabajo se estudió la incidencia de ETEC en 85 niñoscon diarrea aguda internados en el Hospital de Niños "Pedro de Elizalde" de Buenos Aires y en 38 niños sanos. La edad en ambos grupos, estuvo comprendida entre 0 y 4 años y ninguno de los niños recibió antibioticoterapia en los 7 días previos a la toma de muestra. Se aislaron cepas de ETEC en 9 de los 85(10,6%) niños con diarrea. De estos casos positivos, 6 estuvieron asociados con ETEC productores de ST, 1 con LT y 2 con ambas (LT/ST). Dentro del grupo control sólo en 1 caso (2,6%) se detectó ETEC-LT. En 5 de los 9 casos de diarrea asociados a ETEC (55,5%), se asislaron cepas que expresaron algunos de los CFAs investigados: 4 fueron CFA/I y 1 CFA/II. En 23 cepas de E. coli, aisladas de los 10 niños ETEC positivos, se estudiaron los factores de colonización, el biotipo, serotipo y antibiotipo en relación al perfil toxigénico que presentaban. De 12 cepas productoras sólo de ST, 5 (41,7%) expresaron CFA y 2 (16,7%) CFA/II (CS2 + CS3)...

An evaluation of the pooling culture method for the detection of Escherichia coli enterotoxins

Se estudió la eficiencia de la metodología de inoculación en "pool" de cepas que integran casos de diarrea aguda infantil, para la detección de escherichia coli enteroxigénico (ECET). Se procesaron 6989 cepas de E. coli correspondientes a 1485 casos de diarrea provenientes de 7 centros asistenciales del país. Las cepas de cada caso (3 a 5) se sembraron en "pool". Los cultivos se realizaron en medio de Evans con lincomicina (30 microng/ml) a 37-C durante 18 h con agitación y luego se trataron con sulfato de polimixina B (2200U/ml) por 30 min. Los cultivos se centrifugaron y los sobrenadantes se emplearon para la detección de la enterotoxina lábial al calor (LT) por GMI-ELISA con antisuero a toxina de cólera y la estable al calor (ST) por la prueba del ratón lactante. En aquellos casos que fueron positivos par LT, ST o LT-ST, por la metodología de "pool", se analizaron sus cepas individualmente, como así también en 1 de cada 15 caos negativod para detectar falsos negativos. Se hallaron 57 casos ECET-LT, 61 casos ECET-ST y 15 casos ECET-LT-ST. De los 89 casos negativos seleccionados al azar detectaron 2 casos (pl = 2.25%, intervalo de confianza del 95% entre 0,27% - 7,88) en los cuales una de las cepas no enterotoxigénicas inhibía a la ECET. En otros 5 casos (p2 = 5,62%, intervalo de confianza del 95% entre 1,85% - 12,63%), el falso resultado negativo se debió a la falla en la inoculación del "pool", pues el mismso resultó positivo al repetirse. A partir de los resultados obtenidos que el método de iniculación en "pool" es adecuado cuando se debe analizar un número elevado de casos de diarrea aguda y disponer de un diagnóstico en el menor tiempo posible, con la recomendación de realizar una siembra cuidadosa de las cepas que integran el caso tratando que el inóculo de cada una de ellas sea similar

Producción de enterotoxina termolábil por cepas de Escherichia coli aisladas en Argentina / Production of heat-labile enterotoxin by Escherichia coli strains isolated in Argentina

Se estudió la producción de enterotoxina termolábil (LT) por cepas de Escherichia coli. Se emplearon 4 cepas aisladas de casos de diarrea aguda infantil en nuestro país y una de referencia internacional que sintetizan distintos niveles de LT. Como método de valoración se empleó el GM1-ELISA. Se ensayaron dos medios de cultivo: Evans (Ev) y caldo tripticasa de soja (CTS) con diferentes concentraciones de lincomicina (0; 30; 45 y 90 microng/ml), con y sin glucosa. Se determinó la influencia del pH y de la concentración del inóculo. Los valores medios de producción (X = 233,1 ng/ml para Ev y X = 133,8 ng/ml para CTS) demuestran que Ev permite la síntesis de niveles de LT aunque esa diferencia no resultó significativa (P = 0,22). El agregado de lincomicina estimuló la síntesis y la liberación de la toxina en ambos medios de cultivo y el efecto aumentó al incrementarse la concentración del antibiótico (P < 0,01). El agregado de glucosa aumentó los niveles de LT en el caso de las cepas productoras de bajas concentraciones de toxina (R49045(2) y C28(b). También aumentó la velocidad de crecimiento, el rendimiento celular y los niveles de LT tanto en la cepa 40T como en la CC2e. Los niveles de LT liberados no variaron con las distintas concentraciones del inóculo inicial. Los niveles de LT disminuyeron a la mitad en CTS con pH no regulado respecto al CTS con pH no regulado. Esto no se debió a una acción sobre la liberación de la toxina, pues la LT detectada correspondió tanto a la extracelular como a la intracelular acumulada en el espacio periplásmico y liberada con el tratamiento con Sulfato de Polimixina B. Se demostró una inactivación de la toxina ya sintetizada y liberada por acción del pH