Bacillus cereus as the main casual agent of foodborne outbreaks in Southern Brazil: data from 11 years / Bacillus cereus como principal agente etiológico em surtos de intoxicação alimentar no Sul do Brasil: dados de 11 anos / Bacillus cereus como el principal agente causante de brotes de enfermedades alimentarias en el Sur de Brasil: datos de 11 años

Foodborne diseases are a global concern. In Brazil, the most prevalent pathogen found in foodborne outbreaks is Salmonella sp. (14.4%), followed by Staphylococcus aureus (7.7%), Escherichia coli (6.5%), and Bacillus cereus (3.1%). With the aim to perform a regional detailed analysis of foodborne intoxication, we analyzed 253 outbreaks' profile reports to Food Surveillance team of the General Secretariat of Health Surveillance of Porto Alegre, Rio Grande do Sul State, between 2003 and 2013. In contrast to what was most notified in Brazil, in Porto Alegre the main outbreak agent identified was Bacillus cereus (32.2%) and, based on the patient symptoms, most cases were linked to enterotoxin production. The majority of the outbreaks were linked to the ingestion of food containing cereals or sauces poorly kept at environment temperature during the stock or preparation. We believe that, due to the compulsory use of pasteurized eggs in our city, Salmonella sp. outbreaks are less important here.

As doenças de veiculação alimentar representam um problema de ordem global. No Brasil, o patógeno mais prevalente em surtos de intoxicação alimentar é a Salmonella sp. (14,4%), seguido pelo Staphylococcus aureus (7,7%), Escherichia coli (6,5%) e Bacillus cereus (3,1%). Com o objetivo de realizar uma análise regional detalhada da intoxicação alimentar, examinamos os relatórios de 253 surtos, notificados à equipe de Vigilância de Alimentos da Coordenadoria Geral de Vigilância em Saúde de Porto Alegre, Rio Grande do Sul, entre 2003 e 2013. Ao contrário do que é notificado no Brasil, em Porto Alegre, identificamos como principal agente etiológico, o Bacillus cereus (32,2%) e de acordo com os sintomas dos pacientes, a maioria dos casos esteve associada à produção de enterotoxina. A maioria dos surtos foram associados à ingestão de alimentos que continham cereais ou molhos mantidos à temperatura ambiente durante o armazenamento ou preparação. O uso compulsório de ovos pasteurizados em Porto Alegre pode explicar a relativa escassez de surtos de Salmonella sp. no município.

Las enfermedades transmitidas a través de la comida son una preocupación de carácter global. En Brasil, el patógeno encontrado de forma más prevalente en los brotes de epidemias alimentarias es la Salmonella sp. (14,4%), seguida por el Staphylococcus aureus (7,7%), Escherichia coli (6,5%), y el Bacillus cereus (3,1%). Con el fin de realizar un análisis regional detallado de los brotes de infecciones alimentarias, analizamos el perfil de 253 brotes, registrados por el servicio de Vigilancia Alimentaria de la Secretaría General de Vigilancia en Salud de Porto Alegre, Rio Grande do Sul, entre 2003 y 2013. En contraste con lo que fue más notificado en Brasil, en Porto Alegre el principal agente causante de brotes fue identificado como el Bacillus cereus (32.2%) y, basado en los síntomas del paciente, la mayoría de los casos estaban relacionados con la producción de la enterotoxina. Muchos de los brotes estaban relacionados con la ingesta de comida que contenía cereales o salsas mal conservadas a temperatura ambiente durante el almacenaje o la preparación. Creemos que, debido a la utilización obligatoria de huevos pasteurizados en nuestra ciudad, los brotes de Salmonella sp. son menos relevantes aquí.

Avaliação da presença de microrganismos indicadores higiênico-sanitários em alimentos servidos em escolas públicas de Porto Alegre, Brasil / Evaluation of the presence of hygienic and sanitary indicator microorganisms in food served in public schools in Porto Alegre, Brazil

Este estudo tem por objetivo avaliar a presença de microrganismos indicadores higiênico-sanitários em amostras de alimentos servidos em escolas públicas de Porto Alegre. Foram analisados todos os alimentos servidos na refeição do turno da visita, quanto à presença de Escherichia coli, Staphylococcus coagulase positiva, Salmonella sp. e Shigella sp. No total de 196 alimentos analisados de 120 escolas, 4 apresentavam contagem de Escherichia coli acima do permitido e dois tinham a presença de Staphylococcus coagulase positiva. Os gêneros Shigella e Salmonella não foram encontrados. Foi observado que a maioria das escolas estudadas servia alimentos dentro de padrões higiênico-sanitários adequados. Foi evidenciado que somente escolas municipais contavam com a orientação de responsável técnico pela alimentação escolar. Das escolas estaduais 60% nunca haviam recebido visita de nutricionista nas quais foram encontrados procedimentos em desacordo com as exigências da legislação. Na maioria das escolas, os alimentos servidos estavam dentro de padrões adequados, porém os problemas detectados demonstram a necessidade da implantação das Boas Práticas no ambiente escolar.

The objective of this study was to evaluate the presence of hygienic and sanitary indicator microorganisms in samples of food served in public schools in Porto Alegre. All the food served in the meal of the session visited was analyzed for Escherichia coli, coagulase-positive Staphylococcus, Salmonella sp. and Shigella sp. Of the total of 196 food products analyzed in 120 schools, 4 contained and Escherichia coli score above the permitted level, and 2 contained coagulase-positive Staphylococcus. Neither Shigella nor Salmonella genus were detected. In the majority of schools studied, it was found that food was of an adequate hygienic-sanitary standard. However, only municipal schools had the supervision of a technician responsible for school food. In the state schools, 60% had never been visited by a nutritionist and in these schools several procedures failed to comply with legal requirements. In most of the schools studied, the food served to students was within adequate standards, though the problems detected revealed the need for the implementation of Best Practices in the school environment.

Efeito de probiótico na infecção e excreção fecal de Salmonella em suínos / Effect of probiotic on the Salmonella infection and fecal excretion in pigs

A transmissão de Salmonella na cadeia produtiva de suínos é um problema de difícil controle. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito da administração oral de probiótico sobre a ocorrência de infecção e excreção fecal de Salmonella em suínos em fase de crescimento. Os tratamentos consistiram de ração basal sem aditivos (controle) ou adicionada de probiótico (10(7)ufc g-1 de células viáveis dos gêneros Bifidobacterium, Enterococcus, Lactobacillus e Saccharomyces). Foram alocados seis leitões de 50 dias em cada tratamento, com duas repetições por tratamento. Todos os animais foram inoculados com Salmonella Typhimurium (10(6)ufc mL-1) após 14 dias do alojamento. Semanalmente, foram coletadas amostras de sangue e fezes e no dia 35 pós-inoculação os animais foram sacrificados e necropsiados. Os animais de ambos os tratamentos foram infectados por Salmonella e soroconverteram. Não houve diferença (P>0,05) entre os grupos nas médias de Salmonella, Enterococcus, Lactobacillus e coliformes totais nas fezes, porém a administração de probiótico resultou em menor frequência de isolamento de Salmonella a partir de fígado (P=0,04), linfonodos mesentéricos (P=0,04), pulmão (P=0,03) e baço (P=0,01). Conclui-se que os microrganismos probióticos testados não foram capazes de impedir a infecção ou a excreção fecal de Salmonella em suínos de crescimento, mas diminuíram o número de portadores em linfonodos mesentéricos.

Control of Salmonella transmission has been a challenge for the pork production companies. The aim of this study was to evaluate the effect of oral administration of probiotics on the occurrence of infection and fecal excretion of Salmonella in growers. The treatments consisted of basal diet without additives (control) or added of probiotic (10(7)cfu g-1 of viable cells of the genera Bifidobacterium, Enterococcus, Lactobacillus and Saccharomyces). Six 50 days-old pigs were allocated into each treatment, with two replicates per treatment. All animals were inoculated with Salmonella Typhimurium (10(6)cfu mL-1) after 14 days of housing. Afterwards, blood and feces samples were taken weekly and on day 35 post-inoculation the animals were euthanized and necropsied. The animals in both treatment groups were infected by Salmonella and seroconverted. There was no difference (P>0.05) between groups in mean counts of Salmonella, Enterococcus, Lactobacillus and coliforms in the feces samples, but the probiotic administration resulted in a lower frequency of isolation of Salmonella from liver (P=0.04), mesenteric lymph nodes (P=0.04), lung (P=0.03) and spleen (P=0.01). It was concluded that the probiotic microorganisms tested in this study were not able to protect against the infection or to decrease the fecal excretion of Salmonella in growing pigs, but were able to decrease the number of carriers in the mesenteric lymph nodes.

Avaliação de parâmetros microbiológicos de potabilidade em amostras de água provenientes de escolas públicas / Microbiological analyses for assessing the potability of water samples from public schools

A água para o consumo humano exige altos padrões de qualidade a fim de controlar a transmissão de doenças. Nas escolas, a água é utilizada no preparo de refeições e na higienização de utensílios em contato com os alimentos. No presente estudo foi averiguada a qualidade de água utilizada em escolas públicas do Estado do Rio Grande do Sul, analisando-se os parâmetros microbiológicos de potabilidade. Foi conduzido estudo transversal em 124 escolas localizadas nas sete regiões do Estado. As amostras coletadas foram analisadas quanto à presença de coliformes totais, Escherichia coli, Shigella sp. e mesófilos totais. Foi aplicado questionário sobre o abastecimento de água, e foram avaliados os laudos emitidos pelas empresas responsáveis pelo abastecimento. Coliformes totais e E. coli foram encontrados nas amostras de água, respectivamente, de22,6% e 10,5% escolas. Shigella sp. não foi identificada em nenhuma das amostras. A presença de mesófilos totais foi detectada nas amostras de água de 25 escolas. Do total de escolas avaliadas, 20,5% tinham potabilidade atestada por laudos e 18,8% informaram possuir reservatório em condições adequadas. É prioritário que se estabeleçam rotinas para o monitoramento da potabilidade da água e manutenção dos reservatórios, para que se possa fornecer água de qualidade à comunidade escolar.

Doenças transmitidas por alimentos, principais agentes etiológicos e aspectos gerais: uma revisão / Foodborne diseases, main etiologic agents and general aspects: a review

Doenças Transmitidas por Alimentos (DTA) compõem um grave problema de saúde pública em nível mundial. A análise crítica e a divulgação dos principais aspectos relacionados das DTA pode ser um importante fator para a prevenção dessas doenças. O presente estudo realizou uma breve revisão sobre as DTA, objetivando contribuir para um melhor entendimento de alguns dos seus principais agentes etiológicos, identificando os alimentos comumente envolvidos nos surtos, os fatores causais mais significativos, assim como as características e impactos sociais relacionados a essas doenças.

Foodborne Diseases (FBD) comprises a serious public health problem worldwide. Critical analysis of the main aspects of FBD may be an important factor for preventing these diseases. This study is a brief review of the FBD in order to provide a better understanding of the main etiologic agents, identifying the foods commonly associated with outbreaks, the most significant causal factors, as well as the characteristics and social impacts related to these diseases.

Performance of transport and selective media for swine Bordetella bronchiseptica recovery and it comparison to polymerase chain reaction detection / Desempenho de meios de transporte e seletivo na recuperação de Bordetella bronchiseptica de suínos e sua comparação à detecção pela reação em cadeia pela polimerase

Three comparative assays were performed seeking to improve the sensitivity of the diagnosis of Bordetella bronchiseptica infection analyzing swine nasal swabs. An initial assay compared the recovery of B. bronchiseptica from swabs simultaneously inoculated with B. bronchiseptica and some interfering bacteria, immersed into three transport formulations (Amies with charcoal, trypticase soy broth and phosphate buffer according to Soerensen supplemented with 5 percent of bovine fetal serum) and submitted to different temperatures (10ºC and 27ºC) and periods of incubation (24, 72 and 120 hours). A subsequent assay compared three selective media (MacConkey agar, modified selective medium G20G and a ceftiofur medium) for their recovery capabilities from clinical specimens. One last assay compared the polymerase chain reaction to the three selective media. In the first assay, the recovery of B. bronchiseptica from transport systems was better at 27ºC and the three formulations had good performances at this temperature, but the collection of qualitative and quantitative analysis indicated the advantage of Amies medium for nasal swabs transportation. The second assay indicated that MacConkey agar and modified G20G had similar results and were superior to the ceftiofur medium. In the final assay, polymerase chain reaction presented superior capability of B. bronchiseptica detection to culture procedures.

Três ensaios comparativos foram feitos com o objetivo de aperfeiçoar a sensibilidade do diagnóstico da infecção pela Bordetella bronchiseptica a partir de suabes nasais de leitões. O experimento inicial comparou a recuperação de B. bronchiseptica a partir de suabes, simultaneamente inoculados com B. bronchiseptica e algumas bactérias interferentes, imersos em três formulações para transporte (meio Amies com carvão, caldo tripticaseína de soja e tampão de fosfatos segundo Soerensen suplementado com 5 por cento de soro fetal bovino) e submetidos a diferentes temperaturas (10ºC e 27ºC) e períodos de incubação (24, 72 e 120 horas). O experimento subseqüente comparou três meios seletivos (ágar MacConkey, meio seletivo G20G modificado e o meio de ceftiofur) em relação às suas capacidades de recuperação a partir de amostras clínicas. O último experimento comparou a reação em cadeia pela polimerase aos três meios seletivos. No primeiro experimento, a recuperação de B. bronchiseptica nos sistemas de transporte foi melhor a 27ºC e as três formulações tiveram boas performances nesta temperatura, mas o conjunto das análises qualitativa e quantitativa apontou para o uso preferencial do meio Amies para o transporte de suabes nasais. O segundo experimento indicou que o ágar MacConkey e o G20G modificado mostraram resultados similares e foram superiores ao meio de ceftiofur. No experimento final, a técnica de reação em cadeia pela polimerase apresentou uma capacidade de detecção da B. bronchiseptica superior a do cultivo.

Necrotic enterocolitis in pigs naturally infected by porcine circovirus type 2 / Enterocolite necrótica em suínos naturalmente infectados por circovírus suíno tipo 2

Samples of intestine with necrotic enteritis from 63 pigs naturally infected with porcine circovirus type 2 (PCV2) were studied. Colon was the main target of PCV2 associated necrotic enteritis in 60 cases. Immunohistological investigations were carried out to detect the presence of PCV2 in necrotic lesions and to identify the type of cells infected by the virus. Crypt epithelial cells had positive labelling for PCV2 in 17 cases. Depletion of goblet cells occurred in 10 cases. In 24 necrotic enteritis cases, co-infection of PCV2 and Salmonella was identified. An increased rate of apoptosis in the crypt epithelial cells of the large intestine from PCV2 of naturally infected pigs was observed. Immunohistochemical findings confirmed the presence of PCV2 within cells from necrotic intestinal tissue, suggesting that PCV2 may play a role in the development of those lesions. Diagnosis of necrotic enteritis associated with PCV2 should be based on the detection of PCV2 antigen or DNA in the necrotizing lesions. However, bacteriological examination should be performed to rule out the presence of bacterial agents, since co-infections are likely to occur in PCV2 affected pigs.

Foram selecionadas amostras intestinais com enterite necrótica de 63 suínos naturalmente infectados pelo circovírus suíno tipo 2 (PCV2). Enterite necrótica associada com PCV2 ocorreu principalmente no cólon, em 60 casos. Análise imuno-histoquímica foi realizada para identificar a presença de PCV2 em lesões necróticas e o tipo de células infectadas pelo vírus. Células epiteliais das criptas apresentaram marcação positiva para PCV2 em 17 casos. Depleção de células caliciformes ocorreu em 10 casos. Em 24 casos de enterite necrótica, observou-se co-infecção por PCV2 e Salmonella. Foi observado um aumento no índice de apoptose nas células das criptas do intestino grosso de suínos naturalmente infectados com PCV2. Os achados imuno-histoquímicos e histopatológicos sugerem que a infecção por PCV2 das células do tecido intestinal pode ocasionar enterite necrótica. O diagnóstico de enterite necrótica associada com PCV2 deve ser baseado na detecção do antígeno ou do DNA viral nas lesões necróticas. Contudo, análise bacteriológica deve ser realizada para descartar a presença de agente bacteriano, já que co-infecções são comuns.

Phenotypic and genotypic characterization of Salmonella Enteritidis isolates

In order to study the epidemiology of Salmonella Enteritidis outbreaks and determine the source of contamination so that a recurrence can be avoided, detailed characterization is necessary. Thus, the purpose of this study was to verify whether rep-PCR was able to discriminate among Salmonella Enteritidis isolates. Phage typing, detection of virulence genes and antimicrobial resistance testing were also associated to rep-PCR results. One hundred and two S. Enteritidis isolates from broiler carcasses, food, human, pigs, poultry-related samples, and nine isolates from other countries were genotypically typed by REP-PCR, ERIC-PCR and BOX-PCR, collectively called rep-PCR. Phage typing, detection of virulence genes and antimicrobial resistance testing were also performed. Only three fingerprinting profiles were obtained with each rep-PCR method, with the majority of isolates belonging to the same profile. No relationship was observed between genotypic profile and year, place of isolation or source of infection. However, the less frequent rep-PCR profiles showed single antimicrobial resistance patterns. Although few strains isolated from swine were analyzed, different antimicrobial resistance patterns were observed. Furthermore, phage type 4 was not found in swine isolates. rep-PCR showed a lower discriminatory power as compared with antimicrobial resistance and phage typing, but the combination of genotypic and phenotypic methods was more discriminatory than any method alone, resulting in 48 different types.

Uma caracterização detalhada de Salmonella Enteritidis é necessária para que possa ser desenvolvido o estudo da epidemiologia dos surtos causados por este organismo, bem como a determinação da fonte de contaminação, evitando que ocorram novos surtos. Assim, o objetivo deste estudo foi verificar se a rep-PCR era capaz de diferenciar isolados de S. Enteritidis. A fagotipagem, a detecção de genes de virulência e a determinação de resistência antimicrobiana foram associadas aos resultados da rep-PCR. Cento e duas S. Enteritidis isoladas de carcaças de frango, alimentos prontos para consumo, humanos suínos, amostras relacionadas a aves, e nove isolados de outros países foram genotipicamente tipados por REP-PCR, ERIC-PCR e BOX-PCR, juntamente chamados de rep-PCR. A fagotipagem, a detecção de genes de virulência e a determinação de resistência antimicrobiana também foram realizadas. Somente três padrões de fingerprinting foram obtidos com cada método de rep-PCR, sendo que a maioria dos isolados pertenceu ao mesmo perfil. Nenhuma relação foi observada entre o perfil genotípico e o ano, o local de isolamento e a fonte de infecção. Entretanto, os perfis menos freqüentes de rep-PCR apresentaram padrões de resistência antimicrobiana únicos. Embora poucas amostras de suínos tenham sido analisadas, diferentes padrões de resistência antimicrobiana foram observados. Além disso, o fagotipo 4 não foi encontrado em isolados de suínos. A rep-PCR apresentou um menor poder discriminatório quando comparada com a resistência antimicrobiana e com a fagotipagem, mas a combinação dos métodos genotípicos e fenotípicos foi mais discriminatória do que qualquer método isolado, resultando em 48 tipos diferentes.

Sobrevivência e perfil de resistência a antimicrobianos de Salmonella sp. isoladas em um sistema de tratamento de dejetos de suínos / Survival and resistance patterns of Salmonella sp. isolated in a pig slurry treatment plant

No presente estudo, foi avaliada a sobrevivência de Salmonella sp., presente em dejetos suínos, durante tratamento em um sistema de separaçäo física e lagoas de estabilizaçäo ligadas em série. Nas amostras de Salmonella sp. isoladas foi determinado o perfil de resistência pelo método de difusäo em ágar, usando 14 antimicrobianos. Das 20 coletas realizadas, foi possível isolar Salmonella sp. em 13 coletas no ponto correspondente ao início do sistema de tratamento e em apenas uma no ponto final do mesmo. Amostras de Salmonella sp. isoladas (161/163) pertenciam ao sorotipo Typhimurium e demonstraram resistência contra sulfonamida (100 por cento), tetraciclina (99,4 por cento), estreptomicina (90,1 por cento), sulfa/trimetoprima (84,5 por cento), ácido nalidíxico (77,6 por cento), ampicilina (76,4 por cento), cloranfenicol (29,2 por cento), cefaclor (25,5 por cento), tobramicina (13,7 por cento), gentamicina (6,2 por cento), amoxacilina/ácido clavulânico (5 por cento), neomicina (5 por cento) e amicacina (3,7 por cento). A maioria (94,5 por cento) das amostras isoladas foram resistentes a 4 ou mais antimicrobianos e apresentaram grande variabilidade nos perfis de resistência. O nível de resistência e a variabilidade dos perfis mantiveram-se em nível semelhante ao longo do sistema.

Qualidade sanitária de embutidos coletados no mercado público central de Porto Alegre-RS / Microbial safety of sausage collected in the central market of Porto Alegre-RS, Brazil

Noventa e três amostras de embutidos coletados no Mercado Público Central de Porto Alegre foram analisadas quanto à presença de Salmonella sp. e à contagem de coliformes fecais. Todos as amostras apresentaram ausência de Salmonella sp., enquanto, em relaçäo aos coliformes fecais, constatou-se que quatorze amostras de embutidos frescais encontravam-se acima do padräo estabelecido pela portaria n° 451, em vigor no momento da coleta. Entretanto, se fossem considerados os parâmetros estabelecidos na Resoluçäo n° 12, em vigor atualmente, apenas cinco amostras seriam consideradas fora de padräo. A maioria das amostras com contagens de coliformes fecais acima de 5x10²/g estava armazenadas acima da temperatura adequada no momento da coleta

Sorotipos de Salmonella isolados em uma propriedade de suínos de terminação no Sul do Brasil / Salmonella serotypes isolated from a finishing swine farm in the South of Brazil

Em uma granja de suínos, foram isolados quinze sorotipos diferentes de Salmonella. Dois dos sorotipos isolados, Mbandaka e Tennessee, foram também encontrados na raçäo fornecida aos animais. Este estudo demonstrou a diversidade de sorotipos que podem estar presentes em uma granja e a necessidade de um melhor entendimento da epidemiologia da infecçäo por Salmonella

Empiema pleural experimental em ratos: avaliaçäo dos efeitos do uso intrapleural de dextran-40 na fase fibrinopurulenta / Experimental pleural empyema in rats: effect of the intrapleural administration of dextran 40 during the fibrinopurulent stage

O empiema pleural é patologia frenqüente, apresentando morbidade considerável. O sucesso terapêutico nos empiemas baseia-se na detençäo do processo em sua fases iniciais com antibióticos sistêmicos à drenagem e destruiçäo dos coágulos fibrínicos intrapleurais. As propriedades do dextran na prevençäo de aderência em cirurgias abdominal levou os autores à criaçäo de um modelo de empiema pleural em ratos, em que testaram a hipótese de o dextran-40 ser capaz de reduzir a proliferaçäo fibrílica intrapleural quando administrado juntamente com o inóculo bacteriano para produçäo do empiema. Foram utilizados 24 ratos Wistar com 250-400g.Após anestesia, intubaçäo orotraqueal e verificaçäo mecânica, os animais foram submetidos a toracotomia direta, randomizados em três grupos: I(n=8): administraçäo intrapleural de 1ml/kg de soluçäo de dextran-40 + 1ml/kg de inóculo contendo 10 elevado a 10 de células/ml de Staphylococcus aureus em caldo cérebro-coraçäo (obtidos a partir do cultivo de secreçäo oral dos animais); grupo II (n=8): 1ml/kg de soluçäo salina a 0,9 por cento + 1ml/kg de inóculo contendo 10 elevado a 10 de células/ml de Staphylococcus aureus em caldo cérebro-coraçäo; grupo III (n=8): grupo controle: instilaçäo de caldo cérebro-coraçäo no mesmo volume (1ml/kg) + soluçäo salina a 0,9 por cento. Após síntese da toracotomia, os animais foram recupedos e observados por quatro dias, sendo sacrificados. Somente os animais dos grupos I e II apresentaram derrame (volume de 9,7 ml e 8,1ml, respectivamente, NS), empiema pleural na fase exsudativa e perda ponderal significativa em relaçäo aos do grupo controle (p=0,004). as análises bioquímicas do sangue e hemogramas näo apresentaram diferenças significativas entre os grupos. A bioquímica do líquido pleural nos grupos I e II (DHL, pH, glicose e proteínas) näo demonstrou diferenças. Todas as culturas dos líquidos pleurais foram positivas nos grupos I e II. Os autores concluem que nesse modelo confiável e inédito de empiema pleural em ratos, a instalaçäo do dextran-40 intrapleural no momento da inoculaçäo näo foi capaz de induzir reduçäo significativa na reaçäo pleural até 96 horas de observaçäo