Avaliação da prevalência e localização de canais mandibulares bífidos: um estudo em TCFC / Evaluation of the prevalence and location of bifid mandibular canals: a CBCT study

Objetivo: Investigar a prevalência e localização de canais mandibulares bífidos (CMB) por meio de tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC). Materiais e métodos: Três radiologistas odontológicos treinados e calibrados avaliaram individualmente 1254 exames tomográficos por meio do software I-Cat Vision (Imaging Sciences International®) e classificaram em quatro tipos distintos (Retromolar, Dental, Anteriorizado e Bucolingual). Os dados de frequência, coletados a partir de um formulário Access (Microsoft® Office), foram analisados por meio dos testes de Fischer e Friedman. O nível de significância estatística foi estabelecido em 5%. Resultados: CMBs foram encontrados em 276 casos (22%), sem predileção por gênero (P=0,186). Houve diferença estatisticamente significante entre os tipos (P=0,001). Discussão: O reconhecimento de um CMB é de grande relevância quando associado a procedimentos anestésicos e cirúrgicos na região posterior da mandíbula. Apesar de muitos estudos demostrarem que o CMB não é comumente visto, uma falha em sua identificação pode resultar em danos ao nervo alveolar inferior (NAI) ou em dificuldade na obtenção do bloqueio anestésico. Conclusão: O tipo mais frequente de CMB em ambos os gêneros, foi o retromolar (P=0,001), representando 18,5%, e visualizado com taxas de 47,1% nas mulheres e 52,9% nos homens. A frequência de CMBs analisada por meio da TCFC foi significativa na população avaliada e apresentou-se com diferentes configurações. Desta forma, sua investigação não deve ser negligenciada frente a procedimentos cirúrgicos que envolvam a região posterior da mandíbula.

Aim: To investigate the prevalence and location of bifid mandibular canals (CMB) using cone beam computed to-mography (CBCT). Materials and methods: Three trained and calibrated dental radiologists individually evaluated 1254 CT scans using the I-Cat Vision software (Imaging Sciences International®) and classified them into four distinct types (Retromolar, Dental, Forward and Buco-lingual). Frequency data, collected from an Access form (Microsoft® Office), were analyzed using the Fischer and Friedman test. The level of statistical significance was set at 5%. Results: CMBs were found in 276 cases (22%), with no gender predilection (P = 0.186). There was a statistically significant difference between the types (P = 0.001). Dis-cussion: The recognition of a CMB is of great relevance when associated with anesthetic and surgical procedures in the posterior region of the mandible. Although many studies have shown that CMB is not commonly seen, a failure to identify it can result in damage to the lower alveolar nerve (NAI) or difficulty in obtaining anesthetic block. Conclusion: The most frequent type of CMB in both genders was retromolar (P = 0.001), representing 18.5%, and visualized with rates of 47.1% in women and 52.9% in men. The frequency of CMBs analyzed using the CBCT was significant in the population evaluated and presented in different configurations. Thus, its investigation should not be neglected in the face of surgical procedures that involve the posterior region of the mandible

RA92A recombinant protein as immunogen to protect cattle against tick challenge in Brazil and Uganda

In this study, the recombinant gut protein rRa92A produced in Pichia pastoris yeast cells was used to immunize cattle in two experiments, one in Brazil and the other in Uganda. In both experiments, the animals were intramuscularly (IM) injected with 200 µg of recombinant protein in Brazil on days 0, 30 and 51 and in Uganda on days 0, 30. Blood samples for sera separation were collected from different days in both experiments. These samples were analyzed by ELISAs. In Brazil, ticks collected from the animals during the experimental period were analyzed for biological parameters. At Uganda, blood was collected to assess blood parameters, clinical signs were recorded and adult tick (Rhipicephalus appendiculatus) counts were performed. All animals of the vaccinated groups were shown to produce antibodies, and it was not possible to detect an effect on Rhipicephalus microplus. All the clinical parameters were considered within the normal ranges for both the experimental and control groups in Uganda. Antibody absorbance was elevated after each immunization and remained high until the end of the experiments, remaining low in the control animals. The results of stall test carried out in Brazil using R. microplus tick showed efficacy of 21.95%. The rRa92A immunization trial experiments in Uganda showing a decrease of 55.2% in the number of engorged adult ticks, which was statistically significant (p<0.05). Assessment of the immunogenicity of Ra92A produced in the P. pastoris expression system in bovines is reported for the first time, and the protein acted as a concealed antigen.

Immunogenicity of a Recombinant Gonadotropin-releasing Hormone Associated to the B Subunit of Escherichia coli Heat-labile Enterotoxin Expressed in Pichia pastoris and Escherichia coli Platforms

Abstract Gonadotropin-releasing hormone (GnRH) is one of the main targets for the development of immunocontraceptives vaccines. The aim of this study was to clone and express the recombinant GnRH fused to the B subunit of Escherichia coli heat-labile enterotoxin (LTB) molecule in Pichia pastoris and Escherichia coli platforms and evaluate their immunogenicity in mice. P. pastoris (pGnRH/LTB) and E. coli (eGnRH/LTB) platforms were able to express GnRH/LTB expected band with ~ 21 kDa. Both constructions were immunogenic in mice. Similar IgG kinetics was observed for both construction when it was used as ELISA antigen respectively, showing significant (p<0.05) IgG levels 5-fold higher than a commercial vaccine and 14-fold higher than the controls. The histological effects of pGnRH/LTB as well as eGnRH/LTB proteins demonstrated a significant effect on the gonads, characterized by atrophy of seminiferous tubules, absence of spermatogenesis and reduction of Leydig cells. Both constructions were able to induce antibodies that block the hormone effect, suggesting the potential of GnRH/LTB, independently of the P. pastoris or E. coli platform used, as a vaccine candidate for immunocontraception.

Cloning and expression of Neospora caninum rhoptry 2 and its potential as an immunobiological for neosporosis control / Clonagem e expressão de rhoptry 2 Neospora caninum e seu potencial como um imunobiológico para o controle de neosporose

The protozoan Neospora caninum is known worldwide as one of the main causes of abortion in cattle. During infection, rhoptry proteins present in the apical complex of the parasite play important roles in adhesion and parasitophorous vacuole formation. The use of N. caninum ROP2 in experimental vaccines has shown promising protective results. In our study we performed cloning and expression in Escherichia coli of an antigenic portion of N. caninum ROP2. The recombinant protein (rROP2) was obtained in insoluble form, and the purified protein showed a size of approximately 18kDa. Even being a small truncate NcROP2 region, it was possible to conserve the antigenic epitopes which were recognized by bovine serum naturally infected with N. caninum. Vaccination with rROP2 on aluminum hydroxide adjuvant induced high levels of rROP2-specific IgG antibodies capable of recognizing native protein in tachyzoite lysates. In conclusion, our approaches were effective in obtaining the rROP2 protein, which induced specific mouse immune response and was also recognized by sera from N. caninum naturally infected cattle. These results suggest that it is a promising antigen for the development of neosporosis subunit vaccines as well as a suitable antigen for use in immunodiagnosis.(AU)

O protozoário Neospora caninum é conhecido mundialmente como uma das principais causas de aborto em bovinos. Durante a infecção, as proteínas rhoptry presentes no complexo apical do parasita desempenham papel importante na adesão e formação de vacúolos parasitóforos. O uso de ROP2 de N. caninum em vacinas experimentais tem mostrado resultados de proteção promissores. Em nosso estudo, realizamos a clonagem e expressão em Escherichia coli de uma porção antigênica de N. caninum ROP2. A proteína recombinante (rROP2) foi obtida na forma insolúvel, e a proteína purificada apresentou tamanho aproximado de 18kDa. Mesmo sendo uma pequena região truncada de NcROP2, foi possível conservar os epítopos antigênicos que foram reconhecidos pelo soro de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. A vacinação com rROP2 adsorvida no adjuvante de hidróxido de alumínio induziu altos níveis de anticorpos IgG anti-rROP2, capazes de reconhecer a proteína nativa em lisados de taquizoítos. Em conclusão, nossas abordagens foram eficazes na obtenção da proteína rROP2, que induziu resposta imune específica em camundongos e também foi reconhecida por soros de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. Estes resultados sugerem que rROP2 é um antígeno promissor para o desenvolvimento de vacinas de subunidades de neosporose, bem como um antígeno adequado para uso em imunodiagnóstico.(AU)

Cloning and expression of Neospora caninum rhoptry 2 and its potential as an immunobiological for neosporosis control

ABSTRACT: The protozoan Neospora caninum is known worldwide as one of the main causes of abortion in cattle. During infection, rhoptry proteins present in the apical complex of the parasite play important roles in adhesion and parasitophorous vacuole formation. The use of N. caninum ROP2 in experimental vaccines has shown promising protective results. In our study we performed cloning and expression in Escherichia coli of an antigenic portion of N. caninum ROP2. The recombinant protein (rROP2) was obtained in insoluble form, and the purified protein showed a size of approximately 18kDa. Even being a small truncate NcROP2 region, it was possible to conserve the antigenic epitopes which were recognized by bovine serum naturally infected with N. caninum. Vaccination with rROP2 on aluminum hydroxide adjuvant induced high levels of rROP2-specific IgG antibodies capable of recognizing native protein in tachyzoite lysates. In conclusion, our approaches were effective in obtaining the rROP2 protein, which induced specific mouse immune response and was also recognized by sera from N. caninum naturally infected cattle. These results suggest that it is a promising antigen for the development of neosporosis subunit vaccines as well as a suitable antigen for use in immunodiagnosis.

RESUMO: O protozoário Neospora caninum é conhecido mundialmente como uma das principais causas de aborto em bovinos. Durante a infecção, as proteínas rhoptry presentes no complexo apical do parasita desempenham papel importante na adesão e formação de vacúolos parasitóforos. O uso de ROP2 de N. caninum em vacinas experimentais tem mostrado resultados de proteção promissores. Em nosso estudo, realizamos a clonagem e expressão em Escherichia coli de uma porção antigênica de N. caninum ROP2. A proteína recombinante (rROP2) foi obtida na forma insolúvel, e a proteína purificada apresentou tamanho aproximado de 18kDa. Mesmo sendo uma pequena região truncada de NcROP2, foi possível conservar os epítopos antigênicos que foram reconhecidos pelo soro de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. A vacinação com rROP2 adsorvida no adjuvante de hidróxido de alumínio induziu altos níveis de anticorpos IgG anti-rROP2, capazes de reconhecer a proteína nativa em lisados de taquizoítos. Em conclusão, nossas abordagens foram eficazes na obtenção da proteína rROP2, que induziu resposta imune específica em camundongos e também foi reconhecida por soros de bovinos naturalmente infectados com N. caninum. Estes resultados sugerem que rROP2 é um antígeno promissor para o desenvolvimento de vacinas de subunidades de neosporose, bem como um antígeno adequado para uso em imunodiagnóstico.

Results of orthoses used on ambulatory patients with bilateral cerebral palsy / Resultados do uso de órteses em pacientes deambuladores com paralisia cerebral

ABSTRACT Objective: To investigate the impact of ankle-foot orthoses (AFO) on subjects diagnosed with bilateral cerebral palsy (CP) using the gait index and temporal data parameters. Methods: Twenty-four subjects, 14 male and 10 female, with a mean age of 11 (5-17 years old), underwent a comprehensive gait analysis under both barefoot (BF) and braced walking conditions. All children had been wearing the orthoses for at least 2 months before the gait analysis. Results: The overall values for the left and right Gait Profile Scores (GPS) did not show statistically significant variations when comparing the same individuals with and without orthoses. Gait velocity increased by 19.5% (p < 0.001), while the cadence decreased by 4% with use of orthosis, although it was not statistically significant (p > 0.05). The stride and the step lengths on both the right and left sides, however, resulted in statistically significant increases, when wearing AFO. Conclusion: AFO, prescribed for assistance by professionals without using gait data, did not significantly affect the gait index (GPS), but improved temporal data. The determination of quantitative clinical parameters for the prescription of orthotics in patients with bilateral CP, as well as orthotics that meet the specific requirements are points to be addressed in the future to obtain more significant effects. Level of evidence III, Case control study.

RESUMO Objetivo: Investigar o impacto das órteses suropodálicas (AFOs) utilizando índices da análise computadorizada da marcha (ACM) e dados de tempo e espaço, em indivíduos com diagnóstico de paralisia cerebral (PC) bilateral. Métodos: 24 indivíduos, 14 do sexo masculino e 10 do sexo feminino, com média de idade de 11 anos (5-17 anos), foram submetidos a uma análise da marcha, tanto na condição de andar descalço (AD) quanto com uso das órteses. Todas as crianças usavam as órteses há no mínimo 2 meses antes da ACM. Resultados: Os valores do perfil global da marcha (GPS) dos lados direito e esquerdo não apresentaram variações estatisticamente significativas quando os mesmos indivíduos foram comparados, com e sem órteses. Com o uso de órtese a velocidade da marcha aumentou 19,5% (p < 0,001), enquanto a cadência diminuiu 4%, embora não tenha sido estatisticamente significativa (p > 0,05). No entanto, com o uso da órtese, a passada e o comprimento do passo dos lados direito e esquerdo tiveram aumentos estatisticamente significativos. Conclusão: As AFOs, quando prescritas por profissionais sem o uso de dados da ACM, não alteraram significativamente o índice da marcha (GPS), mas melhoraram os dados de tempo e espaço. A determinação de parâmetros clínicos quantitativos para a prescrição de órteses em pacientes com PC bilateral, bem como órteses que atendam a requisitos específicos, são pontos a serem abordados no futuro, a fim de obter efeitos mais significativos. Nível de evidência III, Estudo de caso e controle.

Mucocutaneous leishmaniasis in a cocaine user: diagnostic and therapeutic knowledge

Abstract Mucocutaneous leishmaniasis (MCL) is a chronic infection that can affect the skin and mucous membranes. We report a case of oral, nasopharyngeal, and penile lesions in a 35-year-old cocaine user. The patient presented with ulcerated lesions in 2014. Histopathologic analysis revealed amastigotes, and serological test results were positive for leishmaniasis. Systemic therapy with meglumine antimoniate was administered; however, the patient failed to present for follow-up. In 2018, he returned with nasal collapse, and another histopathologic test confirmed MCL. This case illustrates the importance of careful differential diagnosis of skin and mucous ulcers to identify the particular pathology.

Efeito da técnica de coleta e do estágio do ciclo estral na recuperação de oócitos de boa qualidade em felinos e caninos domésticos / The effect of recovery technique and stage of estrous cycle on the recoveryof good quality oocytes in domestic felines and canines

A obtenção de oócitos de boa qualidade é essencial para o sucesso de diversas biotécnicas reprodutivas. Objetivou-se determinar o efeito de duas técnicas na recuperação de oócitos de boa qualidade em gatas e cadelas em diferentes estágios reprodutivos. Foram utilizados 43 pares de ovários de gata e 35 de cadela após realização da ovariosalpingohisterectomia eletiva. A fase do ciclo estral foi classificada em inativa, folicular ou luteal. Os ovários da fase folicular foram divididos em três grupos: PUN) punção dos folículos com agulha; PUN+FAT) fatiamento do mesmo ovário já puncionado; e FAT) fatiamento do segundo ovário. Os ovários das fêmeas em fase luteal e inativa foram submetidos ao FAT. Foram obtidos no total 974 oócitos (~23/animal) nas fêmeas felinas e 940 (~27/animal) nas caninas. O fatiamento recuperou número superior (P0,05) entre as técnicas de coleta na qualidade de estruturas recuperadas. A quantidade de oócitos recuperados em cada fase foi similar (P>0,05). Contudo, a fase inativa foi superior à luteal (P<0,05) e semelhante à folicular na quantidade de oócitos de boa qualidade em gatas e não houve diferença em cadelas. Conclui-se que o fatiamento recupera maior quantidade de oócitos, não influenciando em sua qualidade. As fases inativa e folicular recuperam maior quantidade de oócitos de boa qualidade em gatas e não afetam a recuperação em cadelas. Portanto, para otimizar o uso das biotecnologias, deve-se levar em consideração o estágio do ciclo estral em fêmeas felinas e a técnica de coleta utilizada na recuperação de oócitos.

The recovery of good quality oocytes is essential for the success of various reproductive biotechniques. The aim of this study was to determine the effect of two techniques on the recovery of good quality oocytes in queens and bitches at different reproductive stages. A total of 43 pairs of ovaries of queens and 35 of bitches after elective ovariosalpingohisterectomy were performed. The estrous cycle phase was classified as inactive, follicular or luteal. The ovaries of the follicular phase were allocated into three groups: PUN) puncture of the follicles with a needle; PUN + SLI) slicing of the same ovary already punctured; and SLI) slicing of the second ovary. The ovaries of luteal and inactive females were submitted to SLI. A total of 974 oocytes (~23/animal) were obtained in feline females and 940 (~27/animal) in canines females. The SLI technique recovered superior number (P0.05) between the collection techniques in the quality of recovered structures. The number of oocytes recovered in each phase was similar (P>0.05). However, the inactive phase was higher than luteal (P<0.05) and similar to the follicular phase in the quantity of good-quality oocytes in queens and there was no difference in bitches. In conclusion, it is preferable to perform the slicing technique to recover more oocytes in both species. Moreover, in queens it is possible to obtain good quality oocytes in the inactive phase and in bitches the estrous cycle phase does not influence the quality.

Efeito da técnica de coleta e do estágio do ciclo estral na recuperação de oócitos de boa qualidade em felinos e caninos domésticos / The effect of recovery technique and stage of estrous cycle on the recovery of good quality oocytes in domestic felines and canines

A obtenção de oócitos de boa qualidade é essencial para o sucesso de diversas biotécnicas reprodutivas. Objetivou-se determinar o efeito de duas técnicas na recuperação de oócitos de boa qualidade em gatas e cadelas em diferentes estágios reprodutivos. Foram utilizados 43 pares de ovários de gata e 35 de cadela após realização da ovariosalpingohisterectomia eletiva. A fase do ciclo estral foi classificada em inativa, folicular ou luteal. Os ovários da fase folicular foram divididos em três grupos: PUN) punção dos folículos com agulha; PUN+FAT) fatiamento do mesmo ovário já puncionado; e FAT) fatiamento do segundo ovário. Os ovários das fêmeas em fase luteal e inativa foram submetidos ao FAT. Foram obtidos no total 974 oócitos (~23/animal) nas fêmeas felinas e 940 (~27/animal) nas caninas. O fatiamento recuperou número superior (P<0,05) de oócitos. Não houve diferença (P>0,05) entre as técnicas de coleta na qualidade de estruturas recuperadas. A quantidade de oócitos recuperados em cada fase foi similar (P>0,05). Contudo, a fase inativa foi superior à luteal (P<0,05) e semelhante à folicular na quantidade de oócitos de boa qualidade em gatas e não houve diferença em cadelas. Conclui-se que o fatiamento recupera maior quantidade de oócitos, não influenciando em sua qualidade. As fases inativa e folicular recuperam maior quantidade de oócitos de boa qualidade em gatas e não afetam a recuperação em cadelas. Portanto, para otimizar o uso das biotecnologias, deve-se levar em consideração o estágio do ciclo estral em fêmeas felinas e a técnica de coleta utilizada na recuperação de oócitos.

The recovery of good quality oocytes is essential for the success of various reproductive biotechniques. The aim of this study was to determine the effect of two techniques on the recovery of good quality oocytes in queens and bitches at different reproductive stages. A total of 43 pairs of ovaries of queens and 35 of bitches after elective ovariosalpingohisterectomy were performed. The estrous cycle phase was classified as inactive, follicular or luteal. The ovaries of the follicular phase were allocated into three groups: PUN) puncture of the follicles with a needle; PUN + SLI) slicing of the same ovary already punctured; and SLI) slicing of the second ovary. The ovaries of luteal and inactive females were submitted to SLI. A total of 974 oocytes (~23/animal) were obtained in feline females and 940 (~27/animal) in canines females. The SLI technique recovered superior number (P<0.05) of oocytes. There was no difference (P>0.05) between the collection techniques in the quality of recovered structures. The number of oocytes recovered in each phase was similar (P>0.05). However, the inactive phase was higher than luteal (P<0.05) and similar to the follicular phase in the quantity of good-quality oocytes in queens and there was no difference in bitches. In conclusion, it is preferable to perform the slicing technique to recover more oocytes in both species. Moreover, in queens it is possible to obtain good quality oocytes in the inactive phase and in bitches the estrous cycle phase does not influence the quality.

Alternativa de tratamento reabilitador para pacientes em uso de bisfosfonato intravenoso: relato de caso clínico / An alternative rehabilitation treatment for patients using intravenous bisphosphonate: clinical case report

O objetivo deste relato de caso clínico foi descrever a importância de planejar de maneira minuciosa uma alternativa de reabilitação conservadora de um paciente em uso de bisfosfonato intravenoso, bem como detalhar os procedimentos realizados. Paciente do gênero masculino, 78 anos, buscou atendimento odontológico relatando insatisfação com sua condição dentária atual, e o desejo de realizar novas próteses dentárias. Ao exame clínico, observou-se instabilidade da prótese parcial removível superior devido à fratura coronária do elemento 26. Ao exame radiográfico, observaram-se extensas lesões cariosas nos dentes 16 e 26. Após plano de tratamento realizado em equipe multidisciplinar, foi sugerida uma reabilitação sem nenhum procedimento cirúrgico, a fim de minimizar as complicações pós-operatórias e proporcionar saúde oral de maneira mais breve e minimamente invasiva. O tratamento incluiu a confecção de uma prótese parcial fixa dos elementos 13 ao 23 com encaixes de precisão associada à uma prótese parcial removível superior. Já para a arcada inferior, foi realizada uma prótese parcial fixa dos elementos 33 ao 41 e uma prótese parcial removível. Por meio deste caso clinico, foi possível concluir que uma abordagem conservadora possibilitou uma reabilitação que supriu as necessidades estéticas e funcionais do paciente que faz uso de medicamento antirreabsortivo(AU)

The aim of this study was to describe the importance of a carefully planning to conservative rehabilitation alternative for a patient using intravenous bisphosphonate, as well as to detail the procedures performed. A male patient, 78 years old, sought dental care reporting dissatisfaction with his current dental condition and the desire to perform new dental prostheses. At the clinical examination, instability of the superior removable partial denture was observed due to the coronary fracture of element 26. Radiographic examination revealed extensive carious lesions on teeth 16 and 26. After a multidisciplinary treatment planning, was suggested a rehabilitation without any surgical procedure, in order to minimize postoperative complications and provide oral health in a minor and minimally invasive manner. Treatment included a fixed partial denture of elements 13 to 23 with precision fittings attachments associated with a removable partial denture. To the jaw, a fixed partial prosthesis of elements 33 to 41 and a partial removable prosthesis were performed. Through this clinical case, it was possible to conclude that a conservative management provides an aesthetical and functional patient rehabilitation who take antiresorptive medication(AU)

Differences in protein expression associated with ivermectin resistance in Caenorhabditis elegans / Diferenças na expressão de proteínas associadas à resistência à ivermectina em Caenorhabditis elegans

Abstract The indiscriminate administration of synthetic anthelmintics such as ivermectin contributes to the selection of subpopulations capable of resisting the drugs' effects. To understand the mechanisms of ivermectin resistance in Caenorhabditis elegans, this study attempted to identify molecular targets. C. elegans lineages that were sensitive and resistant to ivermectin were used. Collected nematodes were added to an extraction buffer and macerated in liquid nitrogen for protein extraction. The extracted proteins were separated according to molecular weight by SDS-PAGE to verify their integrity. Subsequently, proteins from both lineages were separated using two-dimensional electrophoresis. The gels were analyzed and the relevant spots were excised and identified by mass spectrometry (NanoESI-Q-TOF and MASCOT®) and subsequently assessed by GO enrichment and STRING® analyses. The increased expression of proteins associated with high metabolic activity, such as ATP-2 and ENOL-1, which are responsible for ATP synthesis, was observed. Furthermore, proteins with involvement in mediating muscular function (MLC-1, ACT-1, and PDI-2), signaling (FAR-1 and FAR-2), and embryo development (VHA-2) were identified. Protein interaction analysis indicated that the majority of the identified proteins in the resistant lineages participated in the same reaction triggered by ivermectin.

Resumo A administração indiscriminada de anti-helmínticos sintéticos, como a ivermectina, contribui para a seleção de subpopulações capazes de resistir ao efeito das drogas. Para entender os mecanismos de resistência à ivermectina em Caenorhabditis elegans, este estudo visou identificar alvos moleculares. Portanto, linhagens de C. elegans sensíveis e resistentes à ivermectina foram utilizadas. Os nematóides coletados foram adicionados ao tampão de extração e macerados em nitrogênio líquido para obtenção das proteínas. As proteínas extraídas foram separadas por peso molecular em SDS-PAGE para verificar sua integridade. Posteriormente, as proteínas de ambas as linhagens foram separadas por eletroforese bidimensional. Os géis foram analisados, os spots relevantes foram excisados e identificados por espectrometria de massa (NanoESI-Q-TOF e MASCOT®), em seguida, analisados ​​em seus termos de GO e STRING®. A expressão aumentada de proteínas associadas à alta atividade metabólica, como as proteínas ATP-2 e ENOL-1, responsáveis ​​pela síntese de ATP, foi observada. Além disso, foram identificadas as proteínas responsáveis ​​pelo controle da função muscular (MLC-1, ACT-1 e PDI-2), sinalização (FAR-1 e FAR-2) e desenvolvimento embrionário (VHA-2). A análise das interações proteicas indicou que a maioria das proteínas identificadas na cepa resistente participa da mesma reação desencadeada pela ivermectina.

Staphylococcal slime layers and biofilm from different origins / Slime layer e biofilme de Staphylococcus de diferentes origens

ABSTRACT: The genus Staphylococcus comprises some of the most important pathogenic bacteria for both humans and animals. It is responsible for bovine mastitis and canine otitis, besides being present in the microbiota of animals and as a contaminant in food. Its pathogenesis is related to the formation of capsule and biofilm, which contribute to its infectivity. The objective of this study was to observe the production of slime layer and formation of biofilm, which are related to the resistance to antimicrobial agents and presence of icaA and icaD genes, in 41 isolates of Staphylococcus spp. from different origins, provided by the Universidade Federal de Pelotas (UFPEL), Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD). Strains of Staphylococcus spp. were cultivated in Congo red agar for capsule detection. Biofilm formation was detected using the 96-well microplate testing. Antimicrobial susceptibility testing was performed using the plate diffusion method. Part of the analyzed samples produced slime layer (36.6%) and formed biofilm (17.1%). However, six of those that formed biofilms were susceptible to the eight antibiotics tested in the antibiogram. In tests to determine the minimum bactericidal and inhibitory concentrations, gentamicin resistance of biofilm-forming strains was greater than that of non-forming strains. Ampicillin was the least effective antimicrobial drug (51%), followed by tetracycline (71%), neomycin (73%), and erythromycin (73%). Some isolates presented the icaA (6) and icaD (11) genes. Therefore, we suggested that the origin of an isolate can determine its expression of virulence factor and resistance to certain antibiotics.

RESUMO: O gênero Staphylococcus abrange algumas das bactérias patogênicas mais importantes tanto para humanos como para animais. Ele é responsável pela mastite bovina e otite canina, além de estar presente na microbiota de animais e como contaminante em alimentos. Sua patogênese está relacionada à formação de cápsula e biofilme, que contribuem para sua infectividade. O objetivo deste estudo foi observar a produção de slime layer e a formação de biofilme, que estão relacionados à resistência a antibicrobianos e à presença dos genes icaA e icaD, em 41 isolados de Staphylococcus spp. de diferentes origens fornecidos pelo Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD) da Universidade Federal de Pelotas (UFPEL). Os isolados de Staphylococcus spp. foram cultivados em ágar vermelho do Congo para detecção de cápsulas. A formação de biofilme foi detectada usando o teste de microplaca com 96 poços. O teste de susceptibilidade antimicrobiana foi realizado usando o método de difusão em placa. Parte das amostras analisadas produziram slime layer (36,6%) e formaram biofilme (17,1%). Entretanto, seis daquelas que formaram biofilmes foram sensíveis aos oito antibióticos testados no antibiograma. Em testes para determinar as concentrações bactericidas e inibitórias mínimas, a resistência à gentamicina de cepas formadoras de biofilme foi maior que aquela das cepas não formadoras. O antimicrobiano menos eficaz foi a ampicilina (51%), seguida por tetraciclina (71%), neomicina (73%) e eritromicina (73%). Alguns isolados apresentaram os genes icaA (6) e icaD (11). Portanto, sugerimos que a origem de um isolado pode determinar sua expressão de fator de virulência e resistência a certos antibióticos.

Epidemiological and clinical profile of infective endocarditis at a Brazilian tertiary care center: an eight-year prospective study

Abstract INTRODUCTION: Infective endocarditis (IE) is a systemic infectious disease requiring a multidisciplinary team for treatment. This study presents the epidemiological and clinical data of 73 cases of IE in Rio de Janeiro, Brazil. METHODS This observational prospective cohort study of endocarditis patients during an eight-year study period described 73 episodes of IE in 70 patients (three had IE twice). Community-associated (CAIE) and healthcare-acquired infective endocarditis (HAIE) were diagnosed according to the modified Duke criteria. The collected data included demographic, epidemiologic, and clinical characteristics, including results of blood cultures, echocardiographic findings, surgical interventions, and outcome. RESULTS: Analysis of data from the eight-year study period and 73 cases (70 patients) of IE showed a mean age of 46 years (SD=2.5 years; 1-84 years) and that 65.7% were male patients. The prevalence of CAIE and HAIE was 32.9% and 67.1%, respectively. Staphylococcus aureus (30.1%), Enterococcus spp. (19.1%), and Streptococcus spp. (15.0%) were the prevalent microorganisms. The relevant signals and symptoms were fever (97.2%; mean 38.6 + 0.05°C) and heart murmur (87.6%). Vegetations were observed in the mitral (41.1%) and aortic (27.4%) valves. The mortality rate of the cases was 47.9%. CONCLUSIONS: In multivariate analysis, chronic renal failure (relative risk [RR]= 1.60; 95% confidence interval [CI] 1.01-2.55), septic shock (RR= 2.19; 95% CI 1.499-3.22), and age over 60 years (RR= 2.28; 95% CI 1.44-3.59) were indirectly associated with in-hospital mortality. The best prognosis was related to the performance of cardiovascular surgery (hazard ratio [HR]= 0.51; 95% CI 0.26-0.99).

Analysis of Bm86 conserved epitopes: is a global vaccine against Cattle Tick Rhipicephalus microplus possible? / Análise de epítopos conservados da Bm86: é possível uma vacina global contra Carrapato-do-Boi Rhipicephalus microplus?

Abstract The cattle tick Rhipicephalus microplus causes significant economic losses in agribusiness. Control of this tick is achieved mainly through the application of chemical acaricides, often resulting in contamination of animal food products and of the environment. Another major concern associated with acaricide use is the increasing reports of resistance of this tick vector against the active ingredients of many commercial products. An alternative control method is vaccination. However, the commercially available vaccine based on a protein homologous to Bm86 exhibits variations in efficacy relative to the different geographical locations. This study aimed to identify antigenic determinants of the sequences of proteins homologous to Bm86. Phylogenetic analyses were performed to determine the extent of divergence between different populations of R. microplus to identify the sequence that could be used as a universal vaccine against the multiple geographically distinct populations of R. microplus and related tick species. Considering the extensive sequence and functional polymorphism observed among strains of R. microplus from different geographical regions, we can conclude that it may be possible to achieve effective vaccination against these cattle ticks using a single universal Bm86-based antigen.

Resumo O carrapato Rhipicephalus microplus é responsável por perdas significativas no agronegócio. O controle deste carrapato é feito principalmente por meio da aplicação de acaricidas químicos, geralmente resultando na contaminação de produtos de origem animal e do meio ambiente. Outra preocupação importante associada ao uso de acaricidas é o crescente aumento de relatos sobre a resistência deste carrapato a princípios ativos de vários produtos comerciais. Uma alternativa de controle é por meio de vacinação. Porém, a vacina comercializada contendo proteína homóloga à Bm86, apresenta variações de eficácia em relação às diferentes localizações geográficas. Este estudo buscou identificar determinantes antigênicos das sequencias de proteínas homólogas a Bm86. As análises filogenéticas foram feitas para determinar a extensão da divergência entre diferentes populações de R. microplus com o objetivo de identificar a sequência que poderia ser usada como vacina universal contra as múltiplas populações geograficamente distintas de R. microplus e espécies de carrapatos relacionados. Considerando-se a extensa sequência e o polimorfismo observados entre linhagens de R. microplus de diferentes regiões geográficas, podemos concluir que pode ser possível obter uma vacinação efetiva contra esses carrapatos bovinos utilizando um único antígeno universal baseado em Bm86.

Antigenic and immunogenic properties of the canine distemper virus nucleocapsid protein expressed in Escherichia coli employing codon optimized synthetic gene / Propriedades antigênicas e imunogênicas da proteína do nucleocapsídeo do virus da cinomose canina expressa em Escherichia coli empregando gene sintético com codons otimizados

Despite common occurrence and importance of canine distemper disease the majority of tests currently available for diagnosis are hampered by either low sensitivity or specificity. In this study it was evaluated antigenic and immunogenic characteristics of a conserved region of nucleocapsid protein of canine distemper virus (rCDV NP) expressed in Escherichia coli employing a codon optimized synthetic gene. The expression of rCDVNP in Star strain (mean 300μg/mL, purified) was confirmed by SDS-PAGE and Western blot analysis by using His-Tag monoclonal antibodies. Western blot and ELISA, employing positive and negative control dog sera, demonstrated the rCDVNP antigenicity. The rCDVNP was inoculated in hens and immunoglobulin Y (IgY) was purified from the egg yolk. The mean yield of IgY was 28.55mg/mL. IgY reacted with the recombinant protein as demonstrated by Western blot and ELISA assays. In summary, our findings demonstrated that rCDVNP is antigenic since CDV positive dog sera recognized the protein in vitro. Additionally, the rCDVNP proved to be immunogenic in hens being possible to isolate a high concentration of specific IgY antibodies from the egg yolk. Taken together, these results indicate that the rCDVNP along with the specific IgY could be useful tools for development of the canine distemper immunodiagnostic assays.(AU)

Apesar da ocorrência comum e importância da cinomose canina, a maioria dos testes atualmente disponíveis para diagnóstico são prejudicados pela baixa sensibilidade ou especificidade. Neste estudo foram avaliadas características antigênicas e imunogênicas de uma região conservada da proteína do nucleocapsídeo do virus da cinomose canina (rCDV NP) expressa em Escherichia coli empregando um gene sintético e codons otimizados. A expressão na cepa Star (média de 300μg/mL, purificada) foi confirmada por SDS-PAGE e Western blot utilizando anticorpos monoclonais anti-His-Tag. A antigenicidade da rCDVNP foi demonstrada por western blot e ELISA empregando soros de cães positivos e negativos. A rCDVNP foi inoculada em galinhas e imunoglobulina Y (gY) foi obtida e purificada a partir da gema. A produção média de IgY foi 28.55mg/mL. Anticorpos IgY reagiram com a proteína recombinante, quando analisados por Western blot e ELISA. Em resumo, nossos achados demonstram que a rCDVNP produzida é antigênica, uma vez que os anticorpos de soro de cães positivos para CDV reconheceram a proteína in vitro. Além disso, a rCDVNP foi imunogênica em galinhas, sendo possível isolar anticorpos IgY específicos a partir da gema do ovo em altas concentrações. Tomados em conjunto, estes resultados indicam que a rCDVNP juntamente com a IgY específica podem ser ferramentas úteis para elaborar ensaios de imunodiagnóstico de cinomose canina.(AU)

Wildlife species, Ixodid fauna and new host records for ticks in an Amazon forest area, Rondônia, Brazil / Espécies de vida selvagem, fauna ixodídica e novos registros de hospedeiros de carrapatos em uma área de Floresta Amazônica, Rondônia, Brasil

Abstract The objective of this work was to evaluate the diversity of ticks associated with free-living animals and to investigate new host records for ticks. Ticks were collected from animals rescued during the flood of the Jamari River in the municipality of Ariquemes, state of Rondônia, North Region of Brazil. A total of 39 animals were captured, out of which 10 were amphibians, 19 were reptiles and 10 were mammals. A total of 127 ticks of the Amblyomma genus were collected from these animals, distributed among seven species: Amblyomma dissimile, Amblyomma geayi, Amblyomma humerale , Amblyomma longirostre, Amblyomma nodosum , Amblyomma rotundatum and Amblyomma varium. In addition, one specimen of Rhipicephalus (Boophilus) microplus was collected. Among these specimens, 85 were adults and 42 were nymphs, with A. rotundatum being the most prevalent species. An Amblyomma spp. larvae was also collected from a lizard (Uranoscodon superciliosus), and one Amblyomma calcaratum and one Amblyomma dubitatum were recovered from the environment, thus totaling 130 ticks. Among the Ixodidae collected from different hosts, we provide the first report for the species A. rotundatum parasitizing Rhinella major, U. superciliosus, Leptophis ahaetulla, Chironius multiventris, and Mastigodryas boddaerti, as well as of A. humerale parasitizing U. superciliosus, A. geayi parasitizing Choloepus didactylus, and Rhipicephalus (B.) microplus parasitizing Alouatta puruensis.

Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade de carrapatos associados à animais de vida livre e investigar novos registros de hospedeiros. Coletas foram feitas em animais resgatados durante a cheia do Rio Jamari, localizado no município de Ariquemes, estado de Rondônia, Região Norte do Brasil. Um total de 39 animais foi capturado, dos quais dez eram anfíbios, 19 eram répteis e dez eram mamíferos. 127 carrapatos do gênero Amblyomma foram coletados destes animais, distribuídos em sete espécies: Amblyomma dissimile , Amblyomma geayi, Amblyomma humerale, Amblyomma longirostre, Amblyomma nodosum, Amblyomma rotundatum e Amblyomma varium. Adicionalmente, um exemplar de Rhipicephalus (Boophilus) microplus foi coletado. Dentre estes espécimes, 85 eram adultos e 42 eram ninfas, com A. rotundatum sendo a espécie mais prevalente. Uma larva de Amblyomma spp. também foi coletada de um lagarto (Uranoscodon superciliosus), um Amblyomma calcaratum e um Amblyomma dubitatum foram recuperados do ambiente, assim totalizando 130 carrapatos. Dentre os ixodídeos coletados de diferentes hospedeiros, este trabalho fornece o primeiro registro da espécie A. rotundatum parasitando Rhinella major, U. superciliosus, Leptophis ahaetulla, Chironius multiventris e Mastigodryas boddaerti, assim como da espécie A. humerale parasitando U. superciliosus , a espécie A. geayi parasitando Choloepus didactylus e R. microplus parasitando Alouatta puruensis .

Detection of distant metastases in patients with locally advanced breast cancer: role of 18F-fluorodeoxyglucose positron emission tomography/computed tomography and conventional imaging with computed tomography scans / Detecção de metástases a distância em pacientes com câncer de mama localmente avançado: papel da tomografia por emissão de pósitrons/tomografia computadorizada com 18F-fluordesoxiglicose e exames de imagem convencional com tomografia computadorizada

Abstract Objective: To evaluate positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) and conventional imaging tests for the detection of distant metastases in patients with locally advanced breast cancer. Materials and methods: We included 81 patients with breast cancer who had undergone 18F-fluorodeoxyglucose (FDG) PET/CT before treatment. Conventional imaging included the following: bone scintigraphy; chest X-ray (in 14.5%) or CT (in 85.5%); and abdominal ultrasound (in 10.8%), CT (in 87.8%), or magnetic resonance imaging (in 1.4%). Histopathology and clinical/imaging follow-up served as reference. Results: Distant metastases were observed in nine patients (11.1%). On patient-based analysis, conventional imaging identified distant metastases in all 9 patients. In one patient, the initial 18F-FDG PET/CT failed to demonstrate bone metastases that was evident on bone scintigraphy. In two patients, the CT scan failed to show extra-axillary lymph node metastases that were identified on 18F-FDG PET/CT. There was no significant difference between 18F-FDG PET/CT and conventional imaging in terms of their sensitivity for the detection of distant metastases in patients with locally advanced breast cancer. Conclusion: This study showed that 18F-FDG PET/CT and conventional imaging with CT scans had similar sensitivity for the diagnosis of distant metastases in patients with locally advanced breast cancer. 18F-FDG PET/CT can add information about extra-axillary lymph node involvements.

Resumo Objetivo: Avaliar a tomografia por emissão de pósitrons/tomografia computadorizada (PET/TC) e os exames de imagem convencionais na detecção de metástases em pacientes com câncer de mama localmente avançado. Materiais e métodos: Oitenta e uma pacientes com câncer de mama foram submetidas a PET/TC com 18F-fluordesoxiglicose (18F-FDG) antes do tratamento. Os exames de imagem convencionais incluíram cintilografia óssea, radiografia (14,5%) ou TC (85,5%) do tórax, e ultrassonografia (10,8%), TC (87,8%) ou ressonância magnética (1,4%) do abdome. A histopatologia e o seguimento clínico-imaginológico foram usados como padrão ouro. Resultados: Metástases a distância foram observadas em 9 pacientes (11,1%), sendo identificadas em todas as pacientes pelos exames de imagem convencionais. A PET/TC inicial não demonstrou metástase óssea em uma paciente, que foi identificada na cintilografia óssea. A TC não mostrou metástases em linfonodos extra-axilares, que foram demonstradas na PET/TC, em duas pacientes. Não houve diferença estatisticamente significante entre a PET/TC e os exames de imagem convencionais na detecção de metástases a distância nas pacientes com câncer de mama localmente avançado. Conclusão: Este estudo mostrou que a PET/TC e os exames de imagem convencionais têm sensibilidade similar no diagnóstico de metástases a distância nas pacientes com câncer de mama localmente avançado. A PET/TC pode adicionar informações sobre o envolvimento de linfonodos extra-axilares.

Desajuste vertical entre implante de hexágono interno e pilares Ucla totalmente calcináveis e com base de CoCr após a fundição pelo processo convencional / Vertical misfit between internal hexagon implants and Ucla burnout and CoCr prefabricated base abutments after conventional casting procedures

Objetivo: avaliar, por meio de um microdurômetro, o grau de desajuste na adaptação de pilares Ucla em implantes. Material e métodos: foram utilizados dez implantes de hexágono interno de plataforma regular, e seus respectivos componentes protéticos do tipo Ucla com antirrotacional, como seguem: dez pilares Ucla totalmente calcináveis e dez pilares Ucla com base de CoCr. Todos os pilares Ucla foram fundidos pelo mesmo laboratório de prótese e pelo mesmo processo laboratorial. Cada implante recebeu apenas dois pilares, que foram anexados por meio de um parafuso de titânio quadrado utilizando-se torque de 30 Ncm com torquímetro manual. Cada conjunto implante/pilar recebeu quatro marcações aleatórias em torno da circunferência, na qual foram feitas as medições do espaço existente entre as peças utilizando uma lupa estereoscópica de 100 vezes de aumento. Resultados: os resultados obtidos mostraram diferenças significativas entre os grupos submetidos ao teste Mann-Whitney (p < 0,05). Conclusão: o pilar Ucla com base de CoCr apresentou menor desajuste marginal vertical, quando comparado ao pilar Ucla totalmente calcinável, após o processo de fundição nos implantes de hexágono interno.

Objective: to evaluate, using a microhardness device, the misfit between Ucla abutments and internal hex implants. Material and methods: 10 internal hex implants received 10 Ucla burnout and 10 Ucla abutments with CoCr collar. All the abutments were cast in the same laboratory and under the same protocol. A square-head titanium screw was tightened to a 30 Ncm using a manual wrench. Each abutment/implant set receive four random markings around its perimeter. A stereoscopic lens was used to investigate the misfi t at 100 magnification. Results: there was a statistically significant difference between tested abutments (Mann-Whitney p < 0.05). Conclusion: the Ucla abutment with the CoCr collar presented less vertica misfit values after casting for internal hex dental implants.

New insights from molecular characterization of the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus in Brazil / Novos pontos de vista sobre a caracterização molecular em carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus, no Brasil

Abstract The Rhipicephalus (Boophilus) microplus complex currently consists of five taxa, namely R. australis, R. annulatus, R. (B.) microplus clade A sensu, R. microplus clade B sensu, and R. (B.) microplus clade C sensu. Mitochondrial DNA-based methods help taxonomists when they are facing the morpho-taxonomic problem of distinguishing members of the R. (B.) microplus complex. The purpose of this study was to perform molecular characterization of ticks in all five regions of Brazil and infer their phylogenetic relationships. Molecular analysis characterized 10 haplotypes of the COX-1 gene. Molecular network analysis revealed that haplotype H-2 was the most dispersed of the studied populations (n = 11). Haplotype H-3 (n = 2) had the greatest genetic differentiation when compared to other Brazilian populations. A Bayesian phylogenetic tree of the COX-1 gene obtained strong support. In addition, it was observed that the population of R. (B.) microplus haplotype H-3 exhibited diverging branches among the other Brazilian populations in the study. The study concludes that the different regions of Brazil have R. (B.) microplus tick populations with distinct haplotypes.

Resumo Carrapatos do complexo R. (B.) microplus se distribuem em cinco taxa: R. australis, R. annulatus, R. (B.) microplus clado A sensu R. microplus clado B sensue e R. (B.) microplus clado C sensu. Métodos baseados no DNA mitocondrial podem auxiliar taxonomistas quando há dificuldades em estabelecer diferenças morfológicas para distinguir membros do complexo R. (B.) microplus. O objetivo deste estudo foi a caracterização molecular e a inferência de relações filogenéticas em carrapatos de todas as cinco regiões geográficas do Brasil. Para o gene COX-1, a análise molecular caracterizou 10 haplótipos. Na análise molecular em rede foi observado que o haplótipo H-2 é o mais disperso entre as populações (n=11). O haplótipo H-3 (n=2) foi o que obteve maior diferenciação genética ao ser comparado com outras populações brasileiras. A árvore filogenética Bayesiana de gene COX-1 gerou suporte robusto e foi observado que a população de R. (B.) microplus haplótipo H-3 apresentou ramificação com divergência entre as outras populações brasileiras apresentadas neste estudo. Conclui-se que as populações brasileiras possuem diversidade haplotípica com divergência entre as diversas populações de R. (B.) microplus no Brasil.

Avaliação do sistema WaveOne Gold e ProTaper retratamento para remoção de guta-percha clínico / Evaluation of WaveOne Gold system and ProTaper retreatment for gutta-percha removal

Objetivo: avaliar ex vivo a quantidade de guta-percha remanescente no retratamento de canal de dentes pré-molares inferiores com único canal utilizando o sistema WaveOne Gold em comparação com o sistema de retratamento ProTaper R. Materiais e métodos: foram selecionados 52 pré-molares inferiores humanos extraídos, distribuídos aleatoriamente em 2 grupos (n=26), em função das técnicas de retratamento: sistema WaveOne Gold (grupo 1) e sistema de retratamento ProTaper R (grupo 2). Após os canais radiculares serem instrumentados e obturados com guta--percha, foram submetidos à de sobturação e ao procedimento de retratamento. Os dentes foram seccionados confeccionando uma canaleta nas faces proximais dos dentes obtendo-se duas hemi--secções radiculares, expondo, portanto, a luz do canal preparado. Todas as amostras foram codificada se fotografadas por máquina Cânon A640 acoplada ao microscópio Zeiss, com aumento de 5 vezes. As fotos foram transportadas para o programa de software Image Tool 3.0. Foi feita medição das áreas de remanescentes de material obturador no interior do canal e a medição da área total do interior do canal através das imagens da secção no computador. As medidas foram comparadas em relação a cada sistema utilizando o programa BioEstat 4.0 (teste de Mann-Whitney). Resultados:A menor porcentagem de material obturador remanescente ocorreu no sistema ProTaper Rcom diferenças significantes em relação ao sistema WaveOne Gold (p<0.01). Conclusão: o sistemaProTaper R foi mais eficaz na remoção de guta-percha em comparação com o sistema WaveOne Gold, entretanto nenhum dos sistemas removeram totalmente o material obturador do canal.

Objective: This ex vivo research study aims to evaluate ex vivo the amount of remaining gutta -perchaduring canal retreatment of lower premolars single-rooted using WaveOne Gold system compared with Protaper R system. Materials and methods: 52 mandibular premolars were selected and randoml y divided into 2 groups (n = 26), according to the retreatment techniques, which are: WaveOne Gold system(group 1) and ProTaper R system (group 2). After the root canals were instrumented and filled withgutta-percha, they underwent removal procedure. After retreatment procedure, the teeth were sectioned in the proximal surfaces resulting in two hemi-sections exposing the interior of the root canal. Allsamples were coded and photographed by A640 Canon machine attached to the microscope Zeiss withzoom in 5 times, and the photos were transported to the Image Tool 3.0. software. The evaluation wasdone by measurement of areas of remaining filling material and the total area of the interior of root canal through the images on the computer. The measurements were compared for each system using Bio-Estat 4.0 program and Mann-Whitney test. Results: The smallest percentage of remaining gutta-perchaoccurred in ProTaper Retreatment system with significant differences from the WaveOne Gold system(p <0.01).Conclusion: ProTaper R system was more effective in removing gutta-percha compared withWaveOne Gold system. However none of the both systems completely removed the filling material.