An easy, reproducible and cost-effective method for andrologists to improve the laboratory diagnosis of non-obstructive azoospermia: a novel microcentrifugation technique

ABSTRACT This study describes a new method of microcentrifugation as an improved, viable, cost-effective option to the classical Cytospin apparatus to confirm azoospermia. Azoospermic semen samples were evaluated for cryptozoospermia by a centrifugation method similar to that of World Health Organization guidelines (2010; entire specimen centrifuged at 3000g for 15 min, and aliquots of the pellet examined). Then, if no sperm were detected, the pellet from that procedure was resuspended in culture medium, centrifuged (2000g for 15 min), and the entire pellet spread on a 4 X 6mm area of a slide and stained using the Christmas tree method (Nuclear-Fast solution and picric acid). The entire stained area was examined for the presence or absence of sperm. A total of 148 azoospermic samples (after standard WHO diagnosis) were included in the study and 21 samples (14.2%) were identified as sperm-positive. In all microcentrifugation slides, intact spermatozoa could be easily visualized against a clear background, with no cellular debris. This novel microcentrifugation technique is clearly a simple and effective method, with lower cost, increasing both sensitivity and specificity in confirming the absence or presence of spermatozoa in the ejaculate. It may represent a step forward of prognostic value to be introduced by andrology laboratories in the routine evaluation of patients with azoospermia in the initial semen analysis.

Aplicação da avaliação ultraestrutural de espermatozoides na rotina da andrologia / Application of sperm ultra structural evaluation in andrology routine

A microscopia eletrônica de espermatozoides é uma ferramenta complementar da análise seminal que pode contribuir na interpretação clínica da astenozoospermia grave e da teratozoospermia e na investigação de infertilidade idiopática. Reportamos um caso de paciente com varicocele, submetido à varicocelectomia, com análise seminal ultraestrutural por microscopia eletrônica.

Electron microscopy of sperm is a complementary tool to semen analysis that can contribute to the clinical interpretation of severe astenozoospermia, teratozoospermia and idiopathic infertility investigation. We report a patient with varicocele, submitted to varicocelectomy,with seminal ultrastructural analysis by electron microscopy.

Splenogonadal fusion and testicular cancer: case report and review of the literature / Fusão esplenogonadal e câncer testicular: relato de caso e revisão da literatura

A 36 year-old man after tests for assessing male infertility was diagnosed with primary infertility, bilateral cryptorchidism, nonobstructive azoospermia and discontinuous splenogonadal fusion. Carcinoma in situ was found in his left testicle, which was intraabdominal and associated with splenogonadal fusion. To our knowledge, this is the fourth case of splenogonadal fusion associated with testicular cancer reported. One should always bear in mind the possibility of this association for the left cryptorchid testicle.

Um homem de 36 anos, depois de ser submetido a exames para avaliação de infertilidade masculina, foi diagnosticado com infertilidade masculina primária, criptorquidia bilateral, azoospermia não obstrutiva e fusão esplenogonadal descontínua. Carcinoma in situ estava presente no testículo esquerdo, que tinha localização intra-abdominal e estava associado à fusão esplenogonadal. Esse é o quarto caso de fusão esplenogonadal associada a câncer testicular, segundo nossa avaliação. Deve-se sempre ter em mente a possibilidade dessa associação em testículos criptorquídicos à esquerda.

Testicular adrenal rest tumor in infertile man with congenital adrenal hyperplasia: case report and literature review / Tumor testicular de remanescente adrenal em homem infértil com hiperplasia adrenal congênita: relato de caso e revisão de literatura

CONTEXT: Synthesis of cortisol and aldosterone is impaired in patients with congenital adrenal hyperplasia (CAH) because of 21-hydroxylase deficiency. Men with CAH have low fertility rates compared with the normal population, and this is related to testicular adrenal rest tumors. Findings of azoospermia in combination with a testicular tumor on ultrasound are likely to have a mechanical cause, especially when in the testicular mediastinum. The preferred treatment method consists of intensive corticoid therapy. However, when the tumor is unresponsive to steroid therapy, surgical treatment should be considered. CASE REPORT: We present the case of a male patient with CAH due to 21-hydroxylase deficiency who presented a testicular tumor and azoospermia. Treatment with low daily corticoid doses had previously been started by an endocrinologist, but after 12 months, no significant change in sperm count was found. Although the adrenocorticotrophic hormone and 17-hydroxyprogesterone levels returned to normal values, the follicle-stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone and testosterone levels remained unchanged. Ultrasound examination confirmed that the testicles were small and heterogenous bilaterally, and revealed a mosaic area at the projection of the testis network bilaterally. Magnetic resonance imaging confirmed the finding. Testicular biopsy revealed the presence of preserved spermatogenesis and spermiogenesis in 20 percent of the seminiferous tubules in the right testicle. The patient underwent testis-sparing tumor resection. After 12 months of follow-up, there was no tumor recurrence but the patient still presented azoospermia and joined an intracytoplasmic sperm injection program.

CONTEXTO: Pacientes com hiperplasia adrenal congênita (HAC) por deficiência da 21-hidroxilase podem ter a síntese de cortisol e de aldosterona prejudicada. Homens com HAC têm baixas taxas de fertilidade em comparação com a população normal, e isso está relacionado a tumores testiculares de remanescente adrenal. A associação de azoospermia e tumor testicular sugere uma causa mecânica, principalmente quando o tumor é encontrado no mediastino testicular. O método preferencial de tratamento consiste na corticoterapia intensa. No entanto, quando o tumor não é responsivo à terapia com esteroides, o tratamento cirúrgico deve ser considerado. RELATO DE CASO: Apresentamos o caso de um paciente do sexo masculino com HAC por deficiência da 21-hidroxilase, portador de tumor testicular e azoospermia. Em consulta prévia com endocrinologista, o paciente começou tratamento com baixas doses diárias de corticoide, porém, após 12 meses de tratamento, não houve mudança significativa no espermograma. Embora os níveis de hormônio adrenocortitrófico e 17-hidroxiprogesterona tenham se normalizado, os níveis séricos de hormônio folículo-estimulante, hormônio luteinizante e testosterona não se alteraram. Exame ultrassonográfico confirmou testículos bilateralmente diminuídos e heterogêneos, além de área em mosaico na projeção da rede testis bilateralmente. Ressonância nuclear magnética confirmou o achado. Biópsia testicular revelou espermatogênese e espermiogênese preservadas em 20 por cento dos túbulos seminíferos no testículo direito. O paciente foi submetido a cirurgia poupadora testicular, com ressecção tumoral. Após 12 meses de acompanhamento, não houve recorrência tumoral, mas o paciente ainda apresentava azoospermia, sendo integrado no programa de injeção intracitoplasmática de espermatozoides.

Aspectos da saúde reprodutiva em homens com miopatia inflamatória idiopática: um estudo multicêntrico / Reproductive health aspects in men with idiopathic inflammatory myopathy: a multicenter study

OBJETIVO: Avaliar a saúde reprodutiva de homens com miopatia inflamatória idiopática (MII) e compará-la com controles saudáveis. MÉTODOS: Vinte e cinco pacientes com MII (dermatomiosite ou polimiosite) foram avaliados com relação aos dados demográficos, exame urológico (incluindo parâmetros pubertários e função sexual/erétil), ultrassonografia testicular, perfil hormonal, análise seminal, características clínicas e tratamento. O grupo controle incluiu 25 homens saudáveis. RESULTADOS: A mediana da idade atual foi similar nos pacientes com MII e controles (24 versus 27 anos, P = 0,566). As frequências de atividade sexual, número de parceiras com gestações espontâneas após início da doença e uso de preservativo masculino foram significativamente menores nos pacientes com MII versus controles (60 por cento versus 96 por cento, P = 0,004; 16 por cento versus 60 por cento, P = 0,0031; 40 por cento versus 76 por cento, P = 0,021; respectivamente). Além disso, as frequências de atrofia testicular (28 por cento versus 4 por cento, P = 0,049), níveis elevados de FSH e/ou LH (25 por cento versus 0 por cento, P = 0,05) e alterações dos espermatozoides (40 por cento versus 0 por cento, P = 0,0006) foram estatisticamente maiores nos pacientes com MII quando comparados aos controles. As medianas das idades de início da doença e atual foram estatisticamente maiores nos pacientes com MII que apresentaram disfunção sexual/erétil versus sem disfunção (41 versus 12,5 anos, P = 0,014; 46 versus 21 anos, P = 0,027; respectivamente). Entretanto, comparando-se, pacientes com disfunção sexual/erétil e sem disfunção, nenhuma diferença foi evidenciada em relação à idade da espermarca, parâmetros de função gonadal, atividade da doença, enzimas musculares e tratamento...

OBJECTIVE: To evaluate reproductive health of males with idiopathic inflammatory myopathies (IIM), and comparing them with a control group. METHODS: Demographic data, urologic evaluation (including pubertal parameters and sexual/erectile function), testicular ultrasound, hormone profile, semen analysis, clinical features, and treatment of 25 IIM patients were evaluated. The control group was composed of 25 healthy males. RESULTS: Median age of IIM patients was similar to that of the control group (24 versus 27 years, P = 0.566). The frequency of sexual activity, number of partners with spontaneous pregnancies after the onset of the disease, and use of condom were significantly lower in IIM patients than in the control group (60 percent versus 96 percent, P = 0.004; 16 percent versus 60 percent, P = 0.0031; 40 percent versus 76 percent, P = 0.021, respectively). Moreover, the frequency of testicular atrophy (28 percent versus 4 percent, P = 0.049), elevated levels of FSH and/or LH (25 percent versus 0 percent, P = 0.05), and sperm abnormalities (40 percent versus 0 percent, P = 0.0006) were statistically higher in IIM patients than in the control group. Median age of onset of IIM and current age were significantly higher in IIM patients with sexual/erectile dysfunction than in patients without this dysfunction (41 versus 12.5 years, P = 0.014; 46 versus 21 years, P = 0.027, respectively). On the other hand, differences in the age of spermarche, parameters of gonadal function, disease activity, muscle enzymes, and treatment were not observed between IIM patients with or without sexual/erectile dysfunction...

Novel CFTR missense mutations in Brazilian patients with congenital absence of vas deferens: counseling issues

PURPOSE: Screening for mutations in the entire Cystic Fibrosis gene (CFTR) of Brazilian infertile men with congenital absence of vas deferens, in order to prevent transmission of CFTR mutations to offspring with the use of assisted reproductive technologies. METHOD: Specific polymerase chain reaction (PCR) primers were designed to each of the 27 exons and splicing sites of interest followed by single strand conformational polymorphism and Heteroduplex Analysis (SSCP-HA) in precast 12.5 percent polyacrylamide gels at 7°C and 20°C. Fragments with abnormal SSCP migration pattern were sequenced. RESULTS: Two novel missense mutations (S753R and G149W) were found in three patients (two brothers) together with the IVS8-5T allele in hetrozygosis. CONCLUSION: The available screenings for CF mutations do not include the atypical mutations associated to absence of vas deferens and thus, when these tests fail to find mutations, there is still a genetic risk of affected children with the help of assisted reproduction. We recommend the screening of the whole CFTR gene for these infertile couples, as part of the work-up before assisted reproduction.

OBJETIVO: Pesquisar mutações em toda a extensão do gene que causa a Fibrose Cística (CFTR) de homens brasileiros inférteis por agenesia congênita dos vasos deferentes, com a finalidade de prevenir a transmissão de mutações em CFTR à prole com o uso das tecnologias de reprodução assistida. MÉTODOS: Foram desenhados oligonucleotídeos específicos para realização de reação de polimerização em cadeia (PCR) para cada um dos 27 exons e sítios de processamento de interesse no gene CFTR. O PCR foi seguido pela técnica de SSCP-HA (polimorfismos de conformação no DNA de fita simples e na formação de heteroduplexes) em géis pré-fabricados de poliacrilamida a 12,5 por cento em duas temperaturas, 7°C e 20°C. Os fragmentos com padrão alterado na migração do SSCP foram submetidos a seqüenciamento automatizado. RESULTADOS: Foram identificadas duas mutações novas com alteração de aminoácidos (S753R and G149W) em 3 pacientes (dois irmãos) juntamente com o alelo IVS8-5T em heterozigose. CONCLUSÕES: O rastreamento básico de mutações típicas da Fibrose Cística não inclui as mutações atípicas associadas à ausência dos deferentes. Desta forma, quando esses testes resultam normais, ainda assim existe um risco genético de crianças afetadas serem geradas com auxílio das Assisted Reproduction Technologies. Por este motivo, recomenda-se que a pesquisa de mutações em todo o gene CFTR seja o exame a ser oferecido para todos os casais inférteis em que o homem seja portador de agenesia dos vasos deferentes, antes da realização de reprodução assistida.

Assessment of sexual function in patients undergoing vasectomy using the international index of erectile function

INTRODUCTION: The present study aims to prospectively compare the sexual function in males before and after vasectomy surgery using the international index of erectile function (IIEF). MATERIALS AND METHODS: From October to December 2002, sixty-four patients who were candidates for male sterilization in the vasectomy program of the Urology Section at the General Hospital of the University of São Paulo were included. The same investigator applied the IIEF before and 90 days after the surgery. The mean scores obtained on pre and postoperative visits for all domains of sexual function were analyzed and compared with the Wilcoxon test. RESULTS: The mean patient age was 35 years (range from 25 to 48 years) and the mean number of children per man was 3. The total mean score of the IIEF was 64.06 before surgery and 65.64 after the procedure, with this difference considered statistically significant (p < 0.001). Sixty-seven per cent of the patients improved their scores, versus 17 percent and 16 percent who showed worsening or no change at all in IIEF scores following surgery, respectively. Of the 5 sexual function domains, desire and sexual satisfaction presented statistically significant improvement. CONCLUSION: This study showed that vasectomy caused a positive impact on sexual function, especially on desire and sexual satisfaction, in the majority of men undergoing surgery. There was no case of surgery-related erectile dysfunction.

Semen analysis in fertile patients undergoing vasectomy: reference values and variations according to age, length of sexual abstinence, seasonality, smoking habits and caffeine intake

CONTEXTO E OBJETIVO: Estudos recentes têm demonstrado diferenças regionais e populacionais quanto a características do sêmen. O objetivo foi estabelecer valores de referência para análise seminal e verificar o efeito da idade, tempo de abstinência sexual, sazonalidade, hábito de fumar e consumo de cafeína sobre as características do sêmen de indivíduos férteis. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo prospectivo, na Divisão de Clínica Urológica do Hospital das Clínicas, Universidade de São Paulo. MÉTODOS: Entre setembro de 1999 e agosto de 2002, 500 homens férteis requisitando vasectomia com propósitos de esterilização voluntária foram solicitados a coletar uma amostra de sêmen antes da vasectomia. Avaliamos efeitos da idade, abstinência sexual, sazonalidade, consumo de cigarros e café nas características seminais. RESULTADOS: Quando comparados aos valores da Organização Mundial de Saúde, 87,2 por cento dos pacientes apresentavam morfologia espermática abaixo do normal. Foi observado declínio significativo do volume seminal, motilidade e morfologia em pacientes acima de 45 anos. Em pacientes com cinco dias ou mais de abstinência, houve redução da motilidade. Valores mais baixos para concentração, motilidade e morfologia espermática foram observados no verão e os mais elevados no inverno. Não houve diferenças nos parâmetros seminais estudados de acordo com o hábito de fumar. Com relação ao consumo de café, pacientes que ingeriam seis ou mais xícaras/dia apresentaram maior motilidade espermática. CONCLUSAO: Houve baixa porcentagem de morfologia espermática normal. Apenas a morfologia espermática apresentou alto percentual de anormalidade se levado em consideração o padrão descrito pela Organização Mundial de Saúde. Foram identificadas diferenças nos parâmetros seminais de acordo com a idade, tempo de abstinência sexual, sazonalidade e consumo de café. Não houve diferenças de acordo com o hábito de fumar.

Resultados dos procedimentos em tecnologia reprodutiva de alta complexidade no Centro de Reprodução Humana Governador Mario Covas, Instituto Central do Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo em 2003 / Results of high complexity reproductive techology in 2003 at the Center of Human Reproduction Governor Maria Covas, Central Institute of Hospital das Clinicas, Faculty of Medicine of the University of São Paulo

Objetivo: Apresentar os resultados dos procedimentos em tecnologia reprodutiva de alta complexidade realizados entre 1 de setembro e 20 de dezembro de 2003. Casuística: Foram selecionadas 26 pacientes e iniciados 26 ciclos. A média etária foi 32,3 (mais ou menos) 3,5 anos.Resultados: Houve 25 captações ovulares...

Risks and benefits of hormone replacement therapy in older men

O uso da testosterona em homens idosos, conhecido como Terapia de Reposição Hormonal no homem ou Terapia de Reposição com Androgênios, têm aumentado o interesse para as comunidades médica e leiga na última década. Muito embora o conhecimento a respeito dos potenciais benefícios e riscos da Terapia de Reposição Hormonal nos homens tem aumentado dramaticamente, ainda existe muito que precisa ser determinado. Embora existam vários benefícios potenciais da Terapia de Reposição com Androgênios e dados clínicos relacionados com o uso de tal terapia, não existem ainda nenhum estudo controlado, randomizado e multicêntrico avaliando o uso de tal terapia. O objetivo deste artigo é revisar os aspectos atuais sobre os possíveis riscos e benefícios da Terapia de Reposição com Androgênios discutindo os estudos clínicos publicados sobre o assunto.

Insuficiência de múltiplos órgäos / Multiple organ failure

A insuficiência de múltiplos órgäos e sistemas (IMOS) é síndrome clínica relativamente nova e deve ser considerada como indentificável precocemente do ponto de vista clínico. É um produto dos avanços tecnológicos dos últimos anos, possibilitando o tratamento de pacientes muito graves. A IMOS ocorre quando dois ou mais órgäos näo podem manter espontaneamente suas funçöes. Esta condiçäo geralmente aparece seguindo um trauma grave, queimadura, sepsis, pancreatite e peritonite. A sepse abdominal permanece como a principal causa da IMOS. No presente capítulo, pretendemos analisar as etapas fisiopatológicas identificadas na IMOS. Os mediadores orgânicos, como a interleucina-1, complemento, PAF, TNF, säo comuns a índrome da Angústia Respiratória do Adulto e a IMOS, e têm um papel central no desencadeamento e manutençäo da IMOS. Säo considerados neste trabalho, também, os fatores de risco para o desenvolvimento de IMOS, assim como a seqüência de orgäos em insuficiência. Insuficiência respiratória, renal e cardiovascular säo as combinaçöes mais freqüentemente encontradas com sepsis, má nutriçäo e alteraçöes metabólicas acompanhando o quadro todo. Estudos recentes mostram-nos que a condiçäo chamada de "hipemetabolismo" é realmente importante e só agora está sendo melhor definida e estendida. Sobre o ponto de vista de tratamento, o aspecto básico é que näo há tratamento específico e que a prevençäo é fundamental. Isto tudo resultou no desenvolvimento de princípios novos sobre suporte metabólico ao doente com IMOS, que säo diferentes so suporte nutricional clássico e têm como objetivo a prevençäo das mudanças orgânicas que ocorrem na vigência de desnutriçäo e dar suporte para manter a estrutura e funçäo dos orgäos. Quando a IMOS se instala, devemos corrigir os déficits já constatados, dar suporte aos sistemas que entraram em insuficiência e manter a funçäo dos órgäos ainda perfeitos. A combinaçäo deste fatores é a chave para a sobrevivência