Effect of tetrahydroquinoline derivatives on the intracellular Ca2+ homeostasis in breast cancer cells (MCF-7) and its relationship with apoptosis / Efecto de derivados de tetrahidroquinolinas sobre la homeostasis del Ca2+ intracelular en células de cáncer de mama (MCF-7) y su relación con la apoptosis

Abstract Tetrahydroquinoline derivatives are interesting structures exhibiting a wide range of biological activities, including antitumor effects. In this investigation, the effect of the synthesized tetrahydroquinolines JS-56 and JS-92 on apoptosis, intracellular Ca2+ concentration ([Ca2+]i), and the sarco(endo)plasmic reticulum Ca2+-ATPase (SERCA) activity was determined on MCF-7 breast cancer cells. Colorimetric assays were used to assess MCF-7 cells viability and SERCA activity. Fura-2 and rhodamine 123 were used to measure the intracellular Ca2+ concentration and the mitochondrial electrochemical potential, respec tively. TUNEL assay was used to analyze DNA fragmentation, while caspase activity and NF-κB-dependent gene expression were assessed by luminescence. In silico models were used for molecular docking analysis. These compounds increase intracellular Ca2+ concentration; the main contribution is the Ca2+ entry from the extracellular milieu. Both JS-56 and JS-92 inhibit the activity of SERCA and dissipate the mitochondrial electrochemical potential through processes dependent and independent of the Ca2+ uptake by this organelle. Furthermore, JS-56 and JS-92 generate cytotoxicity in MCF-7 cells. The effect of JS-92 is higher than JS-56. Both compounds activate caspases 7 and 9, cause DNA fragmentation, and potentiate the effect of phorbol 12-myristate-13-acetate on NF-κB-dependent gene expression. Molecular docking analysis suggests that both compounds have a high interaction for SERCA, similar to thapsigargin. Both tetrahydroquinoline derivatives induced cell death through a combination of apoptotic events, increase [Ca2+]i, and inhibit SERCA activity by direct interaction.

Resumen Los derivados de tetrahidroquinolina son estructuras interesantes que exhiben una amplia gama de actividades biológicas, incluyendo efectos antitumorales. Se determinó el efecto de las tetrahidroquinolinas sintetizadas JS-56 y JS-92 sobre la apoptosis, concentración intracelular de Ca2+ ([Ca2+]i) y la actividad Ca2+-ATPasa del retículo sarco(endo)plásmico (SERCA) en células de cáncer de mama MCF-7. Se usaron ensayos colorimétricos para evaluar la viabilidad de las células MCF-7 y la actividad SERCA. Se emplearon Fura-2 y rodamina 123 para medir la concentración de Ca2+ intracelular y el potencial electroquímico mitocondrial, respectivamente. El ensayo TUNEL se utilizó para analizar la fragmentación del ADN, mientras que la actividad de caspasas y la expresión génica dependiente de NF-κB se evaluaron mediante luminiscencia. Modelos in silico permitieron el análisis del acoplamiento molecular. Estos compuestos aumentan la concentración de Ca2+ intracelular; la principal contribución es la entrada de Ca2+ desde el medio extracelular. Tanto JS-56 como JS-92 inhiben la actividad de SERCA y disipan el potencial electroquímico mitocondrial a través de procesos dependientes e independientes de la captación de Ca2+ por este orgánulo. Además, JS-56 y JS-92 generan citotoxicidad en células MCF-7. El efecto de JS-92 es mayor que JS-56. Ambos compuestos activan las caspasas 7 y 9, provocan la fragmentación del ADN y potencian el efecto del 12-miristato-13-acetato de forbol en la expresión génica dependiente de NF-κB. El análisis de acoplamiento molecular sugiere que ambos compuestos tienen una alta interacción con SERCA, similar a la tapsigargina. Ambos derivados de tetrahidroquinolina indujeron la muerte celular a través de una combinación de eventos apoptóticos, aumento de [Ca2+]i e inhibición de la actividad SERCA por interacción directa.

Toxicidad y afectación en la locomoción de Triatoma dimidiata (Latreille 1811) (Hemiptera: Reduviidae: Triatominae) tratados con análogos de girgensohnina / Toxicity and affectation in locomotion of Triatoma dimidiata (Latreille 1811) (Hemiptera: Reduviidae: Triatominae) treated with analogues of girgensohnine

Resumen Introducción: Análogos del alcaloide girgensohnina, diseñados y sintetizados para inhibir a la enzima acetilcolinesterasa, han presentado efecto insecticida sobre insectos vectores de enfermedades. Objetivo: Determinar la actividad insecticida de 12 análogos sintéticos de gingersohnina sobre ninfas del primer estadio de Triatoma dimidiata. Materiales y Métodos: Se tomó como referencia el protocolo de la OMS 2005. Ninfas del primer estadio de T. dimidiata fueron expuestas a los análogos por aplicación tópica y exposición a superficies para determinar las dosis letales (DL50 y DL95) y verificar alteración en la locomoción mediante el software Videomex V. Resultados: El análogo 6 presentó la mayor actividad insecticida a las 72h con una mortalidad del 20,8% ± 3,57 para el tratamiento de topicación 25% ± 0,00 para las superficies no porosas. Las dosis letales de la molécula 6 fueron: DL50 1036,8 ± 0,38 ng/insecto y DL95 3991,4 ± 0,50 ng/insecto respectivamente. Con respecto a la locomoción, el análogo indujo un comportamiento similar al insecticida comercial deltametrina.

Abstract Introduction: Analogs of the girgensohnine alkaloid, designed and synthesized to inhibit acetylcholinesterase enzyme, have presented an insecticidal effect on vectors insects of diseases. Objective: To determine the insecticidal activity of 12 synthetic analogs of gingersohnine in first stage nymphs of Triatoma dimidiata. Materials and methods: WHO protocol 2005, using exploratory doses, was used to determine the best molecule according to its mortality. First stage nymphs of T. dimidiata were exposed to different doses of the analogs by topical application and surface exposure. Lethal doses (LD50 and DL95) and alterations in locomotion using Videomex V software were determined. Results: Analog 6 presented the highest insecticidal activity at 72 h with a mortality of 20.8% ± 3.57 for topical treatment and 25%±0,0 for non-porous surfaces evaluation. Analog 6 lethal doses were LD50 1036.8 ± 0.38 ng/insecto and DL95 3991.4 ± 0.508 ng/insecto, respectively. With regard to locomotion, analogue 6 induced a similar behavior to that observed for commercial insecticide deltametrin.

Synthesis of new α-amino nitriles with insecticidal action on Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

Abstract Aedes aegypti is the principal vector of arboviral pathogens that may cause diseases as dengue fever, chikungunya and zika. The harmful environmental effects of commercial pesticides coalesced with the development of insecticide-resistant populations encourage the discovery and generation of new alternative products as a tool to reduce the incidence of vector-borne diseases. In this work, through the classic three component Strecker reaction of commercial benzaldehydes, cyclic secondary amines and KCN, a new series of nine α-amino nitriles, girgensohnine analogs, has been synthetized and screened for larvicide and adulticide properties against A. aegypti, one of the dominant vectors of dengue, chikungunya and zika in tropical and subtropical areas all over the world. Molecules 3 and 4 were identified as potential larvicidal agents with LC50 values of 50.55 and 69.59 ppm, respectively. Molecule 3 showed 100% of mortality after 2 h of treatment when a concentration of 30 ppm in adulticidal assays was evaluated. Additionally, in order to elucidate the mode of action of these molecules, their acetylcholinesterase (AChE) inhibitory properties were evaluated using the Ellman assay. It was found that the molecules possess a weak AChE inhibitory activity with IC50 values between 148.80 and 259.40 µM, indicating that AChE could not be a principal target for insecticide activity.

Insecticidal action of synthetic girgensohnine analogues and essential oils on Rhodnius prolixus (Hemiptera: Reduviidae) / Acción insecticida de análogos sintéticos de girgensohnina y de aceites esenciales sobre Rhodnius prolixus (Hemiptera: Reduviidae)

ABSTRACT Introduction: The alkaloid girgensohnine has been used as a natural model in the synthesis of new alkaloid-like alpha-aminonitriles with insecticidal effect against disease vectors. Objective: To evaluate the biocide activity of girgensohnine analogues and essential oils of Cymbopogon flexuosus, Citrus sinensis and Eucalyptus citriodora in stage I and stage V Rhodnius prolixus nymphs. Materials and methods: We used a topical application model in tergites and sternites, as well as exposure to treated surfaces with different exploratory doses of each of the molecules and essential oils to determine the lethal doses (LD50 and LD95). Results: Analogue 3 showed the highest insecticidal activity with 83.3±16.7% of mortality when applied on tergites, 38.9±4.8% on sternites and 16.7±0% on treated surfaces in stage I nymphs at 72 hours (h) and 500 mg.L-1. In stage V nymphs, the compounds induced mortality only in sternums (11.1±9.6% for analogue 6 and 5.5±4.7% for analogues 3 and 7 at 72 h and 1500 mg.L-1). The lethal doses for molecule 3 on tergites in stage I nymphs were LD50 225.60 mg.L-1 and LD95 955.90 mg.L-1. The insecticidal effect of essential oils was observed only in stage I nymphs, with 11.1±4.8% for C. flexuosus when applied in sternites, while using exposure to surfaces treated it was 5.6±4.8% for C. sinensis applied on tergites and 8.3±0% on sternites at 72 h and 1000 mg.L-1. Conclusion: Synthetic girgensohnine analogues, and C. flexuosus and C. sinensis essential oils showed insecticidal activity in R. prolixus. Analogue 3 showed the greatest insecticidal activity among all molecules and oils evaluated under our laboratory conditions.

RESUMEN Introducción. El alcaloide natural girgensohnina se ha usado como modelo en la síntesis de nuevos análogos de alcaloidales alfa-aminonitrílicos con efecto insecticida en vectores de enfermedades. Objetivo. Evaluar la actividad biocida de análogos de girgensohnina y de aceites esenciales de las plantas Cymbopogon flexuosus, Citrus sinensis y Eucalyptus citriodora en ninfas de estadios I y V de Rhodnius prolixus. Materiales y métodos. Se empleó la aplicación tópica en terguitos, esternitos y superficies tratadas con diferentes dosis exploratorias de cada una de las moléculas y aceites esenciales para determinar las dosis letales (LD50 y LD95). Resultados. El análogo 3 tuvo la mayor actividad insecticida, con una mortalidad de 83,3±16,7% en los terguitos, de 38,9±4,8 % en los esternitos y de 16,7±0 % a las 72 horas en ninfas de estadioI expuestas a superficies tratadas y 500 mg.L-1. En las ninfas de estadio V solo se presentó mortalidad en los esternitos (11,1±9,6 % con el análogo 6 y 5,5±4,7 % con los análogos 3 y 7 a las 72 h y 1.500 mg.L-1). Las dosis letales para la molécula 3 en los terguitos de ninfas de estadio I fueron las siguientes: DL50, 225,60 mg.L-1 y DL95, 955,90 mg.L-1. En cuanto a los aceites esenciales, el efecto insecticida solo se presentó con C. flexuosus (11,1±4,8%) en los esternitos de ninfas de estadio I expuestas a superficies tratadas; con C. sinensis (5,6±4,8%) en los terguitos y en los esternitos (8,3±0%) a las 72 horas y 1.000 mg.L-1. Conclusión. Los análogos sintéticos del alcaloide girgensohnina y los aceites esenciales de C. flexuosus y C. sinensis exhibieron actividad insecticida en R. prolixus. El análogo 3 exhibió la mayor actividad insecticida de todas las moléculas evaluadas bajo las condiciones de laboratorio.

Citotoxicidad/capacidad antiradicalaria in-vitro y caracterización estructural por GC-MS/1H-13C-RMN de los aceites esenciales de hojas de árboles joven/adulto de annona purpurea Moc. & Sessé ex Dunal de Repelón (Atlántico, Colombia) / [in-vitro Cytotoxicity/Anti-Radical Capability and structural characterization by GC-MS/1H13C-NMR of theleaves essential oils of young/old trees of Annona purpurea Moc. & Sessé ex Dunal from Repelón (Atlántico,Colombia]

Annona purpurea es una planta empleada en etnomedicina, en la región norte de Colombia, que no tiene reportes científicos relacionados con la composición de su AE y sus actividades biológicas. En este trabajo, los AE de hojas de árboles joven/adulto se caracterizaron por GC-MS y RMN y se evaluaron sus propiedades antiradicalarias/citotóxicas. Los AE de hojas de árboles joven/adulto estuvieron representados por beta-eudesmol (68.9 por ciento) y alfa-eudesmol (16.8 por ciento), y germacreno D (55.6 por ciento) y biciclogermacreno (20.3 por ciento), respectivamente. El análisis por RMN mostró las señales distintivas de los constituyentes mayoritarios identificados. Los valores de TAA (mmol Trolox®/kg SE) obtenidos por los AE de árboles joven/adulto fueron 165 +/- 8 y 602 +/- 38. Los AE de árboles joven/adulto evaluados sobre linfocitos humanos fueron “moderadamente tóxicos” con valores de CL50 (ug/mL) de 145.5 +/- 0.7 y 346 +/- 8. Finalmente, la citotoxicidad en eritrocitos humanos reveló que el AE de árbol adulto no fue hemolítico (CL50 > 1000 μg/mL, 4.3 +/- 0.6 por ciento); mientras que, el AE de árbol joven fue hemolítico (CL50 490 +/- 48 ug/mL).

Annona purpurea is a plant used in ethnomedicine in the northern region of Colombia, which has no scientific reports on the composition of their essential oil (EO) and biological activities. In this work, the leaves EO of young/old trees were characterized by GC- MS and NMR, and their antiradical/cytotoxic properties were evaluated. beta-Eudesmol (68.9 percent) and alpha-eudesmol (16.8 percent), and germacrene D (55.6 percent) and bicyclogermacrene (20.3 percent), were the representative compounds of the leaves EO of young/old trees, respectively. The NMR analysis showed the distinctive signals of the main constituents identified. The TAA values (mmol Trolox®/kg ES) obtained from the EO of young/old trees were 165 +/- 8 and 602 +/- 38. The EO of young/old trees evaluated on human lymphocytes were “moderately toxic” with LC50 (μg/mL) of 145.5 +/- 0.7 and 346 +/- 8. Finally, the cytotoxicity in human erythrocytes revealed that the old tree EO was not haemolytic (LC50 > 1000 ug/mL, 4.3 +/- 0.6 percent); while the young tree EO was hemolytic (LC50 490 +/- 48 ug/mL).

Synthesis and in vitro Evaluation of Antifungal Properties of Some 4-Aryl-3-Methyl-1,2,3,4-Tetrahydroquinolines Derivatives / Síntesis y evaluación in vitro de las propiedades antifungicas de algunos derivados de 4-aril-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroquinolinas / Síntese e avaliação in vitro das propriedades antifungicas de alguns derivados de 4-Aryl-3-Methyl-1,2,3,4-Tetrahydroquinolines

Two series of 4-aryl-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroquinoline derivatives were efficiently synthesized according to a two-step synthesis and evaluated as potential antifungal agents. The key step was the formation of the corresponding N-benzyltetrahydroquinolines 5 via a three-component cationic imino Diels-Alder cycloaddition. The second step was a catalytic debenzylation to obtain the N-unprotected tetrahydroquinolines 6. The products were isolated and purified by column chromatography. Substances were characterized using nuclear magnetic resonance (NMR) mass spectrometry (MS) and infrared spectroscopy (IR). All compounds were tested in vitro against standardized, clinically important fungi, including yeasts, hialohyphomycetes, and dermatophytes. These studies showed that between the tetrahydroquinoline series tested, compounds 6f and 6g showed antifungal activity, specifically against dermatophytes. The compound 6-methoxy-4-(4-hydroxi-3-methoxyphenyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroquinoline 6g exhibited the best in vitro activity (MIC 32-65 μg/mL). The results indicated that the elimination of benzyl group from the N-benzyltetrahydroquinolines derivatives, as well as the introduction of a hydroxyl group in the 4-aryl substituent caused a significant improvement in the antifungal activity. These results were supplemented by the in silico prediction; most of the tetrahydroquinolines evaluated showed high bioavailability, high drugs score and low potential risk.

Dos series de 4-aril-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroquinolinas fueron sintetizadas de acuerdo con una metodología sintética de dos pasos y evaluadas como potenciales agentes antifúngicos. El paso clave involucró la formación de las correspondientes N-bencil tetrahidroquinolinas 5 vía una cicloadición imino Diels-Alder catiónica. El segundo paso consistió en obtener las tetrahidroquinolinas N-desprotegidas 6 vía una desbencilación catalítica. Los productos fueron aislados y purificados usando cromatografía en columna (CC). Las sustancias fueron identificadas usando resonancia magnética nuclear (RMN), espectrometría de masas (EM) y espectroscopia infrarroja (IR). Los compuestos fueron evaluados in vitro frente a cepas estandarizadas de hongos clínicamente relevantes, incluyendo levaduras, hialohifomicetes y dermatofitos. Estos estudios mostraron que, de las tetrahidroquinolinas ensayadas, los compuestos 6f y 6g mostraron actividad antifúngica, específicamente frente a dermatofitos. El compuesto 6-metoxi-4-(4-hidroxi-3-metoxifenil)-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroquinolina 6g exhibió la mejor actividad (MIC 32-65 μg/mL). Los resultados indican que remover el grupo bencilo e introducir un grupo hidroxilo en el sustituyente arilo de las N-bencil tetrahidroquinolinas produce un mejoramiento de la actividad antifúngica. Predicciones in silico complementaron los resultados: la mayoría de las tetrahidroquinolinas ensayadas mostraron alta biodisponibilidad, altos "drug scores" y bajo riesgo potencial.

Duas séries de 4-aril-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroquinolina foram sintetizadas de acordo com um método de síntese em duas etapas e avaliadas como potenciais agentes antifúngicos. O passo chave envolveu a formação dos correspondentes N-bencil tetrahidroquinolinas 5 via uma cicloadição de imino Diels-Alder catiónica. O segundo passo foi obter as N-tetrahidroquinolinas 6 através de uma desbenzilação catalítica. Os produtos foram purificados utilizando cromatografia em coluna. As substancias foram identificadas por ressonancia magnética nuclear (RMN), espectrometria de massa (EM) e espectroscopia de infravermelho (IR). Todos o compostos foram testados in vitro contra as estirpes padrao e os fungos clinicamente importantes, incluindo as leveduras, hialohifomicetes e dermatófitos. Estes estudos mostraram que entre a série de tetrahidroquinolinas (THQ) os compostos 6f e 6g mostraram atividade antifúngica, particularmente contra dermatófitos. O composto 6-metoxi-4-(4-hidroxi-3-metoxifenil)-3-metil-1,2,3,4-tetrahidroquinila 6g mostrou melhor atividade (MIC 32-65 μg/mL). Os resultados indicam que a remoção do grupo benzilo e a introdujo de um grupo hidroxilo no substituinte arilo do N-benzil-tetrahidroquinolina, resultou num aumento significativo da atividade antifúngica. Os resultados foram suplementados por previsöes in silico, que mostraram alta biodisponibilidade e pouco risco potencial da maioria dos tetrahidroquinolinas avaliados.

Estudio químico-biológico de los aceites esenciales de Croton malambo H. Karst y su componente mayoritario, metileugenol / Chemical-biological study of the essential oils from Croton malambo H. Karst.and their major component, methyleugenol

Croton malambo is a plant used in traditional medicine, in Colombia. The aim of this research was to characterize the essential oils (EO) from leaves and branches by GC-MS, NMR and determine the antiradical capacities and the in vitro and in vivo cytotoxic properties of the EO, methyleugenol (ME) and eugenol (EU). The EO of leaves and branches of C. malambo presented to ME as the main constituent (68.5 percent and 85.1 percent, respectively) and their structure was confirmed by NMR. On the other hands, the antiradical capacities (ABTS+. method) of the EO and ME were very low, obtaining only inhibition values at a fixed concentration: to 2045 ug/mL – 50 +/- 2 percent (leaves EO) and 28 +/- 1 percent (branches EO); and, 2218 ug/mL - 2.0 +/- 0.2 percent (ME). While EU had the highest value of TAA (14003 +/- 719 mmol Trolox®/kg SE). According to lymphocytes citotoxicity test, all tested substances were classified as “moderately toxic”, with values of LC50 between 310 +/- 17 – 897 +/- 11 ug/mL, being the EO the most toxic. The assessment of the toxicity in Zebra fish embryos indicated that LC50 of the branches EO, ME and EU were between 16 +/- 9 – 43 +/- 9 ug/mL, being the EU the most toxic.

Croton malambo es una planta empleada en medicina tradicional, en Colombia. El objetivo de esta investigación fue caracterizar los aceites esenciales (AE) de hojas y ramas por GC-MS, RMN y determinar las capacidades antiradicalarias y las propiedades citotóxicas in vitro e in vivo de los AE, metileugenol (ME) y eugenol (EU). Los AE de hojas y ramas de Croton malambo presentaron a ME como el constituyente principal (68.5 por ciento y 85.1 por ciento, respectivamente) y su estructura fue confirmada por RMN. Por otro lado, las capacidades antiradicalarias (método ABTS+.) de los AE y ME fueron muy bajas, obteniéndose sólo valores de inhibición a una concentración fija: a 2045 ug/mL – 50 +/- 2 por ciento (AE de hojas) y 28 +/- 1 por ciento (AE de ramas); y, 2218 ug/mL - 2.0 +/- 0.2 por ciento (ME). Mientras que, EU tuvo el mayor valor de TAA (14003 +/- 719 mmol Trolox®/kg SE). Según el ensayo de citotoxicidad en linfocitos, todas las sustancias evaluadas se catalogaron como “moderadamente tóxicas”, con valores de CL50 entre 310 +/- 17 – 897 +/- 11 ug/mL, siendo los AE los más tóxicos. La estimación de la toxicidad en embriones del pez Cebra indicó que las CL50 del AE ramas, ME y EU estuvieron entre 16 +/- 9 – 43 +/- 9 ug/mL, siendo el EU el más tóxico.

Synthesis and Crystal Structure of Two Nitro-Regioisomers of cis-4(4-Methoxyphenyl)-3-Methyl-2-Phenyl-1, 2, 3, 4-Tetrahydroquinoline / Síntesis y estudio de la estructura cristalina de dos nitro regioisómerosde la cis-4-(4-metoxifenil)-3-metil-2-fenil-1, 2, 3, 4-tetrahydroquinolina

Dos nitro-regioisómeros de la moléculacis-4-(4-metoxifenil)-3-metil-2-fenil-1,2,3,4-tetrahydroquinolina fueronpreparados vía una síntesis one-pot de tres componentes basada en lareacción de cicloadición imino Diels-Alder catalizada por BF3.OEt2. Sucompleta caracterización estructural se llevó a cabo usando la técnicade difracción de rayos-X de monocristal y métodos espectroscópicos.La pureza de los productos y la composición de las mezclas de reacciónfueron monitoreadas por cromatografía en capa fina (CCD). Losproductos fueron aislados y purificados usando cromatografía encolumna. Las sustancias fueron identificadas usando resonancia magnéticanuclear (RMN) y espectrometría de masas (EM). Los datos para lacaracterización por difracción de rayos-X fueron colectados usando undifractómetro Bruker AFC7S Mercury con radiación de Mo-Kα (λ =0.71073Å) a temperatura ambiente. Las estructuras de los regio-isómerosfueron confirmadas por 1H RMN y 13C RMN y la estructura cristalinafue estudiada usando la difracción de rayos-X de monocristal. El análisisespectroscópico (RMN, EM y difracción de rayos-X) mostró una completacaracterización y permitió establecer la correcta estereoquímica para elanillo tetrahidroquinolínico. El empaquetamiento molecular en el cristalpara el regioisómero 5-nitro 4 es producto de la combinación de enlaces dehidrógeno intermoleculares e interacciones de van der Waals, mientras queen el 7-nitro regioisómero 3 el empaquetamiento se debe principalmente ainteracciones intermoleculares débiles de tipo van der Waals y N—H••• π...

Here we synthesized two nitro regioisomersof cis-4-(4-methoxyphenyl)-3-methyl-2-phenyl-1,2,3,4-tetrahydroquinoline via the “one pot” three-componentimino Diels-Alder reaction catalyzed by BF3.OEt2and completed its structural characterization using thesingle crystal X-ray diffraction technique and otherspectroscopic methods. To monitor the purity of theproducts and the composition of the reaction mixtureswe used thin layer chromatography, and isolated andpurified the products by column chromatography. Thenusing nuclear magnetic resonance (NMR) and massspectrometry (MS) identified the substances. We collectedX-ray diffraction data for crystal characterization byusing a Bruker AFC7S Mercury diffractometer with Mo-Kα radiation (λ = 0.71073Å) at room temperature. Thestructures of these regioisomers were confirmed by 1HNMR and 13C NMR studies and studied their crystalstructure using single crystal X-ray diffraction technique.The spectroscopy analyses (NMR, GC-MS and X-raydiffraction) provided a complete characterizationand enabled the correct stereochemistry for thetetrahydroquinoline ring. We determined the molecularpacking for the 5-nitro regioisomer 4 is the product ofthe combination of intermolecular hydrogen bonds andvan der Waals interactions, while for 7-nitro regioisomer3 is mainly due to weak intermolecular van der Waalsinteractions and N—H··· π...

Dois nitro regioisómeros da molécula cis-4-(4-metoxifenil)-3-metil-2-fenil-1,2,3,4-tetrahydroquinolina foram preparados através de umasíntese de um só recipiente de três componentes com base na reacçãode imino Diels-Alder cicloadição catalisada BF3.OEt2 e sua completacaracterização estrutural foi realizada usando a técnica de difracçãocristalografia de raios X, e outros métodos espectroscópicos. A purezado produto e a composição das misturas reaccionais foram monitorizadaspor cromatografia em camada fina (CCD). Os produtos foram isoladose purificados utilizando cromatografia em coluna. As substâncias foramidentificadaos por ressonância magnética nuclear (RMN) e espectrometriade massa (EM). Os dados para caracterização por difração de raios Xforam coletados usando um Bruker AFC7S Mercury difratômetro comMo-Ka radiação (λ = 0,71073Å) à temperatura ambiente. As estruturasdosa regioisómeros foram confirmadaos por 1H RMN e 13C RMN aestrutura de cristal foi investigada usando difracção de raios X de cristalúnico. As análises espectroscópicas (RMN, EM e difracção de raios-X)demonstraram uma completa caracterização e permitiramu estabelecer aestereoquímica correcta de anel tetrahidroquinolínico. O empacotamentomolecular no cristal para 5-nitro regioisómero 4 é derivado de umacombinação de ligações de hidrogénio intermoleculares e interacções devan der Waals, e ao 7-nitro regioisómero 3 embalagens é principalmentedevido a interacções intermoleculares fracas do tipo van der Waals e N-H• • • π...

Aberraciones cromosomales en bulbos de cebolla Allium cepa inducidas pormoléculas híbridas 4-aminoquinolínicas / Chromosomal aberrations in Allium cepa onion bulbs induced by 4-aminoquinoline hybrid molecules

Se estudiaron las propiedades toxicológicas de los trescompuestos híbridos quinolin-tiazolidinona (FR-72 y FR-121), y acridinepoxiisoindolindiona(FR-154) aplicándolos en el test de las raíces debulbos de cebolla Allium cepa. Las moléculas FR-72, FR-121 y FR-154 fueron sintetizadas de novo según protocolos experimentalesdescritos. Los bulbos de Allium cepa (2n = 16) limpios y sanos,previamente sumergidos en el agua destilada, se secaron con papeltoalla y se colocaron directamente en los tubos de ensayo llenos conla sustancia a evaluar. Los experimentos se realizaron a temperaturaambiente 20 ± 2°C y se mantuvieron en oscuridad. El periodo deexposición de los bulbos fue de 120 horas y las raíces que se utilizaronpara el montaje de genotoxicidad eran en promedio de 2 a 2.5 cmde longitud. La evaluación del comportamiento de las tres moléculasquinolínicas sobre la inhibición del crecimiento promedio de las raícesde bulbos de cebolla Allium cepa se realizó con los tres parámetrosde bioactividad (CE50, IM, ACs) en diferentes concentraciones. Lassustancias evaluadas pueden considerarse aneugénicas, ya que actúana nivel de estructuras celulares y moleculares e impiden la fijación delas fibras del huso acromático, por ende ocasionan el desplazamientode cromosomas en anafase o pérdidas de cromosomas, llegandoincluso a ser inductoras de la apoptosis al sobrepasar la capacidadhomeostática de la célula. El análisis preliminar indicó que la moléculaFR-121 a concentración 10-6 M y la molécula FR-154 a concentración10-3 M resultaron ser potentes agentes fitotóxicos provocando diversasaberraciones claustogénicas y aneugénicas...

The toxicological properties of three hybridcompounds, quinoline-thiazolidinone (FR-72 and FR-121)and acridin-epoxyisoindolindione (FR-154) were studiedby applying named compounds to the test of the rootsof Allium cepa onion bulbs. Molecules FR-72, FR-121 andFR-154 were synthesized de novo according to describedsynthetic protocols. Clean and healthy bulbs of Alliumcepa (2n = 16), previously immersed in distilled water,were dried with paper towels and placed directly into testtubes filled with the test substance. The experiments werecarried out at room temperature 20 ± 2°C and were keptin darkness. The period of exposure of bulbs was 120hours; the roots used for the genotoxicity evaluation wereon average of 2 to 2.5 cm in length. The evaluation of theeffect of the three quinolinic molecules on the growthof onion roots of Allium cepa bulbs was achieved usingdifferent concentrations of the three growth parameters(EC50, IM, ACs) The evaluated substances performedaneugenic actions, operating at cellular and molecularstructure level and preventing the fixing of mitoticspindle fibers, causing the movement of chromosomesin the anaphase or loss of chromosomes, even inducingapoptosis by exceeding the homeostatic capacity of thecell. The preliminary analysis indicated that molecule FR-121 at 10-6 M concentration and molecule FR-154 at 10-3M concentration, proved to be potent phytotoxic agentscausing various claustogenic and aneugenic aberrations...

Foram estudadas as propriedades toxicológicas dos trêscompostos híbridos, quinolina-tiazolidinona (FR-72 e FR-121)e hidroacridin-epoxiisoindolindiona (FR-154) aplicando-os noteste das raízes de bulbos de cebola Allium cepa. As moléculas FR-72, FR-121 e FR-154 foram sintetizadas de novo de acordo com osprotocolos experimentais já descritos. Os bulbos de Allium cepa (2n= 16) limpos e sádios, previamente imersos em água destilada, foramsecos com papel toalha e colocados diretamente em tubos de ensaio,cheios com a substância de teste. Os experimentos foram realizadosà temperatura ambiente 20 ± 2°C e mantiveram-se na escuridão. Operíodo de exposição dos bulbos foi de 120 horas e as raízes usadaspara a montagem de genotoxicidade tinham, em média, de 2 a 2,5 cmde comprimento. A avaliação do comportamento das três moléculasquinolínicas sobre a inibição do crescimento médio das raízes debulbos de cebola Allium cepa foi realizada com os três parâmetrosde bioatividade (EC50, IM, ACs) em diferentes concentrações. Assubstâncias avaliadas podem se considerar aneugénicas, já queatuam ao nível de estruturas celulares e moleculares, e impedem oestabelecimento de fibras do fuso acromático, provocando assim odeslocamento dos cromossomos na anáfase ou perda de cromossomos,chegando, inclusive, a serem indutoras da apoptose ao ultrapassar acapacidade homeostática da célula. A análise preliminar indicou que amolécula FR-121 em concentração de 10-6 M e a molécula de FR-154em concentração de 10-3 M resultaram ser potentes agentes fitotóxicosprovocando várias aberrações claustogénicas e aneugénicas...

Simple preparation of new N-(6-methyl-2-nitrophenyl-1, 2, 3, 4-tetrahydroquinolin-4-yl) pyrrolidin-2-ones and their spectroscopic analysis / Preparação simples de novas N-(6-metil-2-nitrofenil-1, 2, 3, 4-tetrahydroquinoline-4-il) pirrolidin-2-onas e sua análise espectroscópica / Preparación simple de nuevas N-(6-metil-2-nitrofenil-1, 2, 3, 4-tetrahidroquinolin-4-il) pirrolidin-2-onas y su análisis espectroscópico

Preparación simple de nuevas N-(6-metil-2-nitrofenil-1,2,3,4-tetrahidroquinolin-4-il) pirrolidin-2-onas y su análisis espectroscópico. Objetivos. Preparar nuevas moléculas N-(1,2,3,4-tetrahidroquinolin-4-il) 2-oxopirrolidínicas y caracterizarlas por métodos espectroscópicos. Materiales y métodos. Todos los reactivos usados son de Aldrich, grado comercial. La pureza de los productos y la composición de las mezclas de reacción fueron monitoreadas por cromatografía en capa fina sobre cromatoplacas de Silufol UV254 (0.25 mm). El aislamiento y purificación se realizó usando cromatografía en columna (SiO2), usando acetato de etilo. Resultados. La preparación de las nuevas N-(tetrahidroquinolin-4-il) pirrolidin-2-onas 4-nitrofenil (ó 2-nitrofenil) sustituidas en C-2 del anillo tetrahidroquinolínico, se realizóvía síntesis one-pot basada en la reacción de cicloadición imino Diels-Alder catalizada por BiCl3 entre toluidina, N-vinilpirrolidin-2-ona y 4-nitrobenzaldehído (3-nitrobenzaldehído). La estructura de los derivados pirrolidónicos fue confirmada por 1H RMN y 13C RMN, además de experimentos 2D RMN y difracción de rayos X de monocristal. Conclusiones. Una ruta eficiente, económica y rápida (reacción imino Diels-Alder multi-componente) fue empleada para la construcción de nuevas moléculas N-(tetrahidroquinolin-4-il) 2-oxopirrolidínicas, esqueleto muy atractivo y usado con estereoquímica bien definida...

Objectives. To prepare new N-(1,2,3,4-tetrahydroquinolin-4-yl) pyrrolidin-2-one molecules and to characterize them by spectroscopic methods. Materials and methods. All reagents were purchased from Aldrich, commercial grade. The purity of the products and the composition of the reaction mixtures were monitored by thin layer chromatography over Silufol UV254 chromatoplates (0.25 mm). Product isolation and purification were performed by column chromatography (SiO2) using ethyl acetate. Results. Preparation of new N-(2-nitrophenyl-1,2,3,4-tetrahydroquinolin-4-yl) pyrrolidin-2-ones has been achieved via the one-pot synthesis, based on a BiCl3-catalyzedimino Diels-Alder cycloaddition reaction of toluidine, N-vinylpyrrolidin-2-one and 4-nitro- or 3-nitrobenzaldehydes. The structure of the pyrrolidine derivatives was confirmed by 1H nmr and 13C nmr studies, in addition to inverse-detected 2D NMR experiments and monocrystal X-ray diffraction. Conclusions. An efficient, economic, and fast synthetic route (multi-component imino Diels-Alder reaction) was employed in the construction of several new tetrahydroquinoline derivatives, useful and attractive rigid skeleton with well-defined stereochemistry...

Preparação simples de novas N-(6-metil-2-nitrofenil-1,2,3,4-tetrahydroquinoline-4-il) pirrolidin-2-onas e sua análise espectroscópica. Objetivos. Preparar novas moléculas N-(1,2,3,4-tetrahydroquinoline-4-il) 2-oxopirrolidínicas e sua caracterização por espectroscopia. Materiais e métodos. Todos os reagentes utilizados são de Aldrich, de grau comercial. A pureza dos produtos e a composição das misturas de reação foram monitoradas por cromatografia em camada fina sobre cromatoplacas de Silufol UV254 (0,25 mm). O isolamento e purificação foi realizado utilizando cromatografia em coluna (SiO2), utilizando acetato de etila. Resultados. Preparação de novas N-(tetrahydroquinoline-4-il) pirrolidin-2-onas 4-nitrofenil (ou 2-nitrofenil) substituídas em C-2 do anel tetrahydroquinoline foi realizada através da síntese “one pot” baseada na reação de cicloadição imino Diels-Alder catalisada por BiCl3 entre toluidina, N-vinilpirrolidin-2-ona e 4 nitrobenzaldehyde (3 nitrobenzaldehyde). A estrutura dos derivados pirrolidónicos foi confirmada por 1H RMN y 13C RMN, experimentos 2D RMN, assim como difração de raios X e monocristais. Conclusões. Uma rota eficiente, econômica e rápida (reação imino Diels-Alder multi-componente) foi utilizada para a construção de novas moléculas N-(tetrahydroquinoline-4-il) 2-oxopirrolidínicas esqueleto muito atraente e usado com estereoquímica bem definida...

Antimycobacterial susceptibility testing methods for natural products research

The emergence of multidrug-resistant strains of Mycobacterium tuberculosis underscores the need of continuous developments on new and efficient methods to determine the susceptibility of isolates of M. tuberculosis in the search for novel antimicrobial agents. Natural products constitute an important source of new drugs, but design and implementation of antimycobacterial susceptibility testing methods are necessary for evaluate the different extracts and compounds. A number of biological assay methodologies are in current use, ranging from the classical disk diffusion and broth dilution assay format, to radiorespirometric (BACTEC), dye-based, and fluorescent/luminescence reporter assays. This review presents an analysis on the in vitro susceptibility testing methods developed for determinate antitubercular activity in natural products and related compounds (semi-synthetic natural products and natural products-derived compounds) and the criteria to select the adequate method for determination of biological activity of new natural products.

Actividad contra Trypanosoma cruzi, Leishmania chagasi y células de mamífero de nuevas N-bencil (2-furilmetil) cinamamidas / Activity against Trypanosoma cruzi, Leishmania chagasi and mammalian cells of new N-benzyl (2-furylmethyl) cinnamamides

Introducción: La quimioterapia contra la leishmaniasis y la enfermedad de Chagas es inefectiva, condición que agrava el problema de salud pública que estas enfermedades tropicales representan. Objetivo: Determinar la actividad de nuevas N-bencil (2-furilmetil) cinamamidas en las formas libres e intracelulares de Leismania chagasi y Trypanosoma cruzi y en células Vero y THP-1. Materiales y métodos: Los parásitos y las células fueron tratados con diferentes concentraciones de los compuestos y su actividad fue determinada microscópicamente y por ensayos de MTT en el caso de los parásitos y células de mamífero, respectivamente. Los resultados de actividad fueron expresados como la concentración que inhibe o destruye 50% o 90% de los parásitos o células. Resultados: Las N-arilalquilamidas 1, 2 y 5 fueron activos en epimastigotes de T. cruzi con actividades entre CI50 3,71-38,81 µM y CI90 entre 50,87-59,87 µM. El compuesto 2 presentó actividad en amastigotes intracelulares de L. chagasi con CI50 77,76 µM. Las amidas preparadas no presentaron toxicidad en células THP-1 y solo el compuesto 4 fue parcialmente tóxico en células Vero (CC50 65,9 ± 5,71 µM). Conclusiones: La baja toxicidad presentada por los compuestos 1, 2 y 5 y la actividad antiparasitaria mostrada soportan el diseño de nuevas moléculas relacionadas para ser evaluadas en sistemas in vitro e in vivo contra estas enfermedades parasitarias.

Introduction: The chemotherapy against leishmaniasis and Chagas disease is ineffective, a condition that is aggravating the public health problem caused by these tropical diseases. Objective: To determine the activity of new N-benzyl(2-furylmethyl) cinnamamides in the free and intracellular forms of Leishmania chagasi and Trypanosoma cruzi and Vero and THP-1 cells. Materials and Methods: The parasites and cells were treated with different concentrations of the compounds and the activity was determined microscopically and MTT assays in the case of parasites and mammalian cells. Antiparasitic activity of tested compounds was expressed as the concentration that inhibits or destroys 50% or 90% of parasites and cells. Results: The N-arylalkylamides 1, 2 and 5 were active against T. cruzi epimastigotes with a range of activities between IC50 3.71-38.81 ìM and IC90 between 50.87-59.87 ìM. The compound 2 was active on intracellular amastigotes of L. chagasi with IC50 77.76 ìM. The tested amides were not toxic to THP-1 cells; just only compound 4 resulted partially toxic on Vero cells (CC50 65.9 ± 5.71 ìM). Conclusions: The low toxicity and the antiparasitic activity showed by the cinnamanide compounds 1, 2 and 5 support the design of new related molecules in order to be evaluated on in vitro and in vivo systems for these parasitic diseases.

Composición y capacidad antioxidante in-vitro de aceites esenciales ricos en Timol, Carvacrol, trans-Anetol o Estragol / Composition and in-vitro antioxidant capacity of essential oils rich in Thymol, Carvacrol, trans-Anethole or Estragole

Se determinó por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS) la composición química de aceites esenciales (AE), aislados por hidrodestilación asistida por la radiación de microondas (MWHD), de las especies vegetales aromáticas Artemisia dracunculus, Foeniculum vulgare, Illicium verum, Lippia micromera, Lippia origanoides, Ocimum sp., Plectranthus amboinicus, Tagetes filifolia, Tagetes lucida y Thymus vulgaris. Los valores de capacidades antioxidantes in vitro de estos aceites esenciales, se obtuvieron usando los ensayos de decoloración del catión-radical ABTS+• (metodologías convencional y con dilución en microplacas) y la oxidación del ácido linoleico, inducida por O2 y Fe+2. El potencial inhibitorio de ABTS+• fue más alto para los aceites esenciales que contienen fenoles (carvacrol y timol), que para los aceites esenciales ricos en éteres (trans-anetol y estragol). La actividad antioxidante mediante el ensayo ABTS+• modificado en orden decreciente fue: AE Plectranthus amboinicus ≥ AE Lippia origanoides >> AE Thymus vulgaris > AE Lippia micromera >>> AE Tagetes lucida (flores) > AE Ocimum sp. > AE Tagetes lucida (hojas) > AE Illicium verum > AE Tagetes filifolia (Cenivam) > AE Foeniculum vulgare.

Gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) was used to determine the chemical composition of essential oils (EO) isolated by microwave-radiation-assisted hydrodistillation (MWHD) of Artemisia dracunculus, Foeniculum vulgare, Illicium verum, Lippia micromera, Lippia origanoides, Ocimum sp., Plectranthus amboinicus, Tagetes filifolia, Tagetes lucida and Thymus vulgaris. In vitro antioxidant capacity values using ABTS+• discoloration assays (traditional and microplate methods) and the linoleic acid oxidation (with O2 and Fe+2) of these essential oils were obtained. Essential oils with phenols (carvacrol and thymol) high content showed higher total antioxidant capacity values than the essential oils rich in ether compounds (estragole and trans-anethole). The antioxidant capacity using by modified ABTS+• assay in decreasing order was as follows: EO Plectranthus amboinicus ≥ EO Lippia origanoides >> EO Thymus vulgaris > EO Lippia micromera >>> EO Tagetes lucida (flowers) > EO Ocimum sp. > EO Tagetes lucida (leaf) > EO Illicium verum > EO Tagetes filifolia (Cenivam) > EO Foeniculum vulgare.

Simple preparation of new N-aryl-N-(3-indolmethyl) acetamides and their spectroscopic analysis / Preparación sencilla de nuevas N-aril-N-(3-indolmetil) acetamidas y su análisis espectroscópico / Preparação simples de novas N-aril-N-(3-indolmetil) acetamidas e sua análise espectroscópica

Objectives. To prepare new indolic molecules and characterize them by spectroscopic methods. Materials and methods: All reagents were purchased from Aldrich, commercial grade. The purity of the products and the composition of the reaction mixtures were monitored by thin layer chromatography over Silufol UV254 0.25 mm-thick chromatoplates. Product isolation and purification were performed by column chromatography (SiO2), using ethyl acetate-petroleum ether mixtures as eluents. Results. The synthesis of new N-aryl-N-(3-indolmethyl) acetamides based on first step iminization reaction of indol-3-carbaldehyde is accomplished. The structures of the C-3 substituted indoles were confirmed by ¹H-NMR and 13C-NMR studies supported by inverse-detected 2D NMR experiments and also through monocrystal X-ray diffraction. Conclusions. An efficient, economic, and fast synthetic route was designed to the construction of the N-aryl-N-(3-indolmethyl) acetamides, structural analogues of some alkaloids.

Objetivos: Preparar nuevas moléculas indólicas y caracterizarlas por los métodos espectroscópicos. Materiales y métodos. Todos los reactivos fueron adquiridos de Aldrich, de grado comercial. La pureza de los productos y composición de las mezclas de reacción fueron monitoreadas por la cromatografía en capa delgada, Silufol UV254 0.25 mm-grosor de cromatoplacas. El aislamiento y purificación de los productos fueron realizados por la cromatografía en columna (SiO2), usando mezclas de acetato de etilo y éter de petróleo como eluentes. Resultados. Se ha realizado la síntesis de nuevas N-aril-N-(3-indolmetil) acetamidas, basada en la reacción de iminización del indol-3-carbaldehído. Las estructuras de los indoles C-3 sustituidos fueron confirmadas por estudios de ¹H, 13C -RMN, experimentos de 2D RMN y también por difracción monocristal de Rayos X. Conclusiones. Se ha diseñado una nueva ruta de síntesis eficiente, económica y rápida para la construcción de las N-aril-N-(3-indolmetil) acetamidas, análogos estructurales de diversos alcaloides.

Objetivos. Preparar novas moléculas indólicas e caracterizar-las através de métodos espectroscópicos. Materiais e métodos. Todos os reagentes foram obtidos de Aldrich, de tipo comercial. A pureza dos produtos e a composição das misturas de reação foram monitoradas por cromatografia em camada fina, Silufol UV254 0,25 mm de espessura das cromatoplacas. O isolamento e a purificação dos produtos foram feitos através de cromatografia em coluna (SiO2), utilizando misturas de acetato de etila e éter de petróleo como eluente. Resultados. Realizou-se a síntese de novas N-aril-N-(3-indolmetil)acetamidas, baseada na reação de iminización do indol-3-carbaldeído. As estruturas dos indóis C-3 substituídos foram confirmadas por estudos de ¹H, 13C -RMN, experimentos de 2D RMN e também por difração monocristal dos Rayos X. Conclusões. Desenhou-se una nova rota de síntese eficiente, econômica e rápida para a construção das N-aril-N-(3-indolmetil) acetamidas, análogos estruturais de vários alcalóides.

Búsqueda de nuevos agentes antiprotozoarios selectivos / In search of new selective antiprotozoal agents

Se da la información general sobre los fármacos antiprotozoarios que están usándose en clínica, se discuten nuevas dianas de los parásitos protozoarios útiles en la búsqueda de nuevos agentes antiprotozoarios, enfocando la atención al rol biológico de las proteasas de los parásitos protozoarios. Esta información importante será útil para los estudiantes e investigadores que se interesen a los problemas de química medicinal (un área naciente en Colombia) cuál aporta mucho al desarrollo de ciencias médicas. [Kouznetsov V, Meléndez C. Búsqueda de nueveos agentes antiprotozoarios selectivos. MedUNAB 2009; 12:33-45].

The information is given on the antiprotozoal drugs used in clinic, new useful targets of the parasites protozoa in the search of new antiprotozoal agents are discussed, focusing the attention to the biological role of proteasas of the parasites protozoa. This important information will be useful for students and researchers, which are interested in the problems of medicinal chemistry (an appearing area in Colombia) that gives much to the development of medicine sciences. [Kouznetsov V, Meléndez C. In search of new selective antiprotozoal agents. MedUNAB 2009; 12:33-45].

Antimaláricos: construcción de híbridos moleculares de la cloroquina: [revisión] / Antimalarials: construction of molecular hybrids based on chloroquine: [review]

La resistencia desarrollada por el Plasmodium falciparum ante los fármacos tradicionales del tipo 4-amino-7-cloroquinolínicos ha llevado al diseño y síntesis de inhibidores duales, como los híbridos de la cloroquina. Además del farmacóforo típico en esta clase de antimaláricos, tales híbridos incorporan un espaciador metilénico como parte de un fragmento diamínico, cuyo propósito es la funcionalización del grupo amino terminal en sistemas heterocíclicos diversos con actividades biológicas reportadas. Esto con el fin de evitar la rápida e liminación de la molécula por parte del parásito, lo que se conoce como resistencia. Se discuten el diseño y síntesis de estos híbridos moleculares.

The resistance developed by Plasmodium falciparum againsttraditional 4-amino-7-chloroquinolinic drugs has lead to the design and synthesis of dual inhibitors such as chloroquine hybrids. Besides the usual pharmacophore in this type of antimalarials, such hybrids incorporate a methylenic spacer as part of a diaminic fragment whose purpose is the functionalization of the terminal amino group in various heterocyclic systems having reported biological activities. The prime goal is to avoid the molecule rapid elimination by the parasite, which is known as resistance. The design and synthesis of these molecular hybrids are discussed.

A resistência desenvolvida pelo Plasmodium falciparum frente aos fármacos tradicionais do tipo 4-amino-7-cloroquinolínicos tem levado ao desenho e síntese de inibidores duais, como os híbridos da cloroquina. Além do farmacóforo típico nesta classe de antimaláricos, tais híbridos incorporam um espaçador metilénico como parte de um fragmento diamínico, que tem por propósito a funcionalização do grupo amino terminal em sistemas heterocíclicos diversos com atividadesbiológicas reportadas. Isto com a finalidade de evitar a rápida eliminação da molécula por parte do parasito, o que se conhece como resistência. É discutido o desenho e sínteses destes híbridos moleculares.