Estudo do perfilamento gênico tumoral e de marcadores de doença residual mínima (CK19 e c-ErbB-2) através de RT-PCR quantitativo na fração mononuclear do sangue periférico em pacientes com câncer de mama durante o tratamento / Study of tumor gene profiling and minimal residual disease markers (CK19 and c-ErbB-2) by quantitative RT-PCR in peripheral blood mononuclear fraction in patients with breast cancer during chemotherapy

INTRODUÇÃO: De acordo com a estimativa de 2012 do INCA, eram esperados 52.680 novos casos de câncer de mama no Brasil, com um risco estimado de 52 casos a cada 100 mil mulheres. Estes dados mostram a necessidade da identificação de biomarcadores efetivos para rastreamento precoce e seguimento destas mulheres durante seu tratamento. Neste trabalho, para a avaliação de potenciais biomarcadores desta doença, foi idealizado um modelo laboratorial específico que avalie tanto a capacidade de um dado biomarcador rastrear um tumor inicial de mama, bem como testar o seu potencial valor para o seguimento de mulheres já diagnosticadas durante seu tratamento. Este modelo baseia-se na avaliação de células tumorais circulantes e perfilamento gênico tumoral. MÉTODOS: Amostras biológicas (sangue periférico e tumor) de 167 pacientes diagnosticadas com carcinoma mamário estadios I, II e III com indicação de quimioterapia adjuvante para: a) avaliação da presença de células tumorais circulantes através da expressão de CK19 e HER2 na Fração Mononuclear do Sangue Periférico (FMNSP) por RT-PCR quantitativo e b) perfilamento gênico tumoral através da análise da expressão de 21 genes relacionados a importantes processos de carcinogênese mamária em amostras de tecido parafinado por ensaio multiplex de RT-PCR quantitativo utilizando o sistema Plexor®. RESULTADOS: Foi observada uma correlação significativa entre CK19 e HER2 na primeira coleta e queda da concentração de HER2 no SP durante o tratamento; porém, não foi percebida queda significativa do CK19 ao longo do estudo. A expressão de HER2 na segunda coleta de pacientes positivas para HER2 na primeira coleta tendeu a se correlacionar significativamente com um pior Intervalo Livre de Doença (ILD). Através da padronização da pontuação em quartis das análises realizadas em multiplex pelo sistema Plexor, foi percebido que o quartil superior apresentava ILD significativa pior do que a de pacientes nos demais quartis...

BACKGROUND: According to the estimate of 2012 INCA, were expected 52,680 cases of breast cancer in Brazil, with an estimated risk of 52 cases per 100 000 women. These data show the need for effective identification of biomarkers for early screening and follow-up of these women during their treatment. In this work, for the evaluation of potential biomarkers of this disease, a model laboratory was designed to evaluate both the specific capacity of a given biomarker trace an initial breast tumor, as well as test its potential value for the follow-up of women already diagnosed during their treatment. This model was based on the evaluation of circulating tumor cells and tumor gene profiling. METHODS: Biological samples (peripheral blood and tumor) of 167 patients diagnosed with breast cancer stages I, II and III with an indication for adjuvant chemotherapy: a) to evaluate the presence of circulating tumor cells through the expression of HER2 and CK19 in Peripheral Blood Mononuclear fraction (PBMN) by quantitative RT-PCR and b) tumor profiling gene by analyzing the expression of 21 genes related to important processes of mammary carcinogenesis in paraffinized tissue samples by multiplex assay for quantitative RT-PCR using the Plexor ® System. RESULTS: Was observed a significant correlation between HER2 and CK19 in the first collection and decrease in concentration of HER2 in PB during the treatment, but were not perceived significant decrease of CK19 along the study. The expression of HER2 in the second collection of patients positive for HER2 in the first test tended to correlate with a significantly worse disease-free interval (DFI). Through standardization of the scores in quartiles of the analyzes performed at multiplex Plexor system was seen that the upper quartile ILD had significantly worse than patients in the other quartiles...

Utilização de plataforma gênica no prognóstico do câncer de mama / Use of a gene plataform in breast cancer prognosis

O câncer de mama é o principal tipo de câncer que acomete as mulheres no mundo. Muitos são os fatores que estão associados ao aparecimento e desenvolvimento desse tipo de tumor. Há grande variabilidade interindividual tanto na idade da mulher no momento do diagnóstico de câncer de mama quanto na expressão fenotípica existente nesse mesmo momento, o que torna o diagnóstico desafiante para qualquer pesquisador. Na última década, houve melhor entendimento sobre os mecanismos moleculares envolvidos na progressão do câncer de mama e sobre o papel central das alterações moleculares na detecção precoce do tumor. O desafio agora é aprender a usar as características moleculares individuais do tumor de cada paciente e melhorar as formas atuais de detecção e de tratamento, visando à prevenção do aparecimento e ao diagnóstico precoce do tumor. Atualmente, dois são os métodos já amplamente utilizados nos Estados Unidos para caracterizar molecularmente os tumores mamários: MammaPrint e OncotypeDX. Este trabalho teve por objetivo discutir esses dois métodos prognósticos do câncer de mama, visando estabelecer diferenças entre eles e suas principais aplicações.

Breast cancer is the leading cancer affecting women worldwide. There are many factors associated with the emergence and development of this tumor type. There is large interindividual variability in both woman's age at breast cancer diagnosis and the phenotypic expression existing at that moment, which makes the diagnosis challenging for any researcher. In the last decade, there was a better understanding of the molecular mechanisms involved in the progression of breast cancer and the central role of molecular changes in early detection of tumor. The challenge now is to learn how to use the individual tumor molecular characteristics of each patient and improve the current forms of detection and treatment, aiming at preventing the onset and the early diagnosis of the tumor. Currently, two methods are already widely used in United States of America to molecularly characterize breast tumors: MammaPrint and OncotypeDX. This paper aimed to discuss these two methods for breast cancer prognosis, in order to establish differences between them and their main application.