Modulación de la abundancia de acuaporinas 2 en el riñón de la rata: efecto del óxido nítrico durante el estado hipovolémico / Aquaporin-2 Abundance Modulation in the Kidney of the Rat: The Effect of Nitric Oxide During the Hypovolemic State

Hemos demostrado que el shock hemorrágico induce un incremento en la actividad de la enzima óxido nítrico sintetasa, isoforma específica y dependiente del tiempo. Dicha activación estaría involucrada en la modulación de la función cardiovascular. Parecería que la inhibición del sistema del óxido nítrico previene el aumento de la frecuencia cardíaca que se observa en las fases tardías del estado hipovolémico inducido por una pérdida aguda de sangre. En este estudio planteamos la hipótesis de que la inhibición del sistema del óxido nítrico altera la expresión y/o la localización de las acuaporinas 2 en los túbulos colectores renales de ratas sometidas a una hemorragia. Se utilizaron ratas Sprague-Dawley macho, divididas en cuatro grupos (n =15 por grupo): a) normotensas (grupo N), b) hipovolémicas (hemorragia 20% volemia) (grupo H), c) normotensas y tratadas con N G-nitro-L-arginina metil éster (grupo L-NAME N) y d) hipovolémicas y tratadas con el inhibidor (grupo LNAME H). La distribución y la expresión de las acuaporinas 2 se determinaron mediante análisis inmunohistoquímico y Western blot a los 120 minutos del sangrado. La hemorragia indujo un incremento en la expresión de las acuaporinas 2 a los 120 minutos del sangrado. La inmunolocalización mostró que las acuaporinas 2 se ubicaron en el citoplasma de las células principales de los túbulos colectores renales de las ratas sometidas a hemorragia. La inhibición del óxido nítrico aumentó los niveles de acuaporinas 2, principalmente en la membrana apical. Se demuestra así que el sistema del óxido nítrico estaría asociado con una disminución progresiva de la expresión de las acuaporinas 2 que contribuye a la alteración de la capacidad de concentración de la orina en respuesta al shock hemorrágico.

We have previously demonstrated that hemorrhagic shock induces a time-dependent increase in the activity of nitric oxide synthase specific isoform. Such activation might be involved in modulation of cardiovascular function. It seems that the inhibition of the nitric oxide system prevents hemorrhage- induced heart rate changes seen in late stages of hypovolemic shock. The objective of this study was to assess if the inhibition of the nitric oxide system alters aquaporin-2 expression and/or location in the collecting-duct systems in kidneys of bleeding rats. Male Sprague-Dawley rats were used, divided in four groups (n = 15 for each group): a) normotensive rats (group N), b) hypovolemic rats (animals subjected to a 20% loss of the total volemia) (group H), c) normotensive rats pretreated with the nitric oxide synthase inhibitor N G-nitro-L-arginine- methyl ester (group L-NAME N), and d) hypovolemic rats pretreated with the inhibitor (group L-NAME H). The distribution and the expression of aquaporin-2 were assessed 120 minutes after bleeding by immunohystochemical and Western blot analysis. An increase in aquaporin-2 expression was seen 120 after blood loss. Immunolocation showed aquaporin-2 inside the cytoplasm of collecting-duct main cells in kidneys of bleeding rats. Nitric oxide inhibition increased aquaporin-2 levels, especially in the apical membrane. Thus, the nitric oxide system might be associated with a progressive decrease in the expression of aquaporin-2 which may alter urine concentration as a response to hemorrhagic shock.

Estructura histologica de los planos subyacentes al aparato extensor de los dedos de la mano / Histological structure of the planes underlying the fingers extensor apparatus

En este trabajo se muestra la composicion microscopica de dos planos anatomicos que discurren en profundidad al aparato extensor digital de la mano humana, revelandose la aponeurosis extensora digital subtendinosa compuesta por tejido conectivo denso y por un tejido conectivo laxo con componentes de tejido adiposo unilocular las fascias preperiosticas falangicas dorsales. Se procedio a la observacion de preparados histologicos provenientes de 48 preparados frescos de sujetos cadavericos adultos y fetales teñidos con hematoxilina-eosina, tricromico de Masson e impregnacion argentica para fibras de reticulina. Las diferentes coloraciones utilizadas permitieron diferenciar y mostrar las estirpes celulares y las variedades tisulares que se revelaron al microscopio; asi fue posible constatar la presencia de fibras colagenas en los tejidos correspondientes al capuchon extensor; la caracteristica abundancia de fibras reticulares rodeando vasos y nervios; el aspecto y el contenido tipicos de los adipositos; y la presencia de elementos nerviosos, como corpusculos receptores. La presencia de estos tejidos entre el aparato extensor y el periostio permite inferir que sus funciones contribuyen al normal deslizamiento del primero sobre el ultimo. Ademas, la integridad anatomica de estos planos evita las adherencias entre el tendon extensor y el periostio, tanto en condiciones normales como luego de heridas o intervenciones quirurgicas

Distribution of NADPH-diaphorase in rat mesencephalon: a light and electron microscopical study

NADPH-diaphorase is a useful technique to reveal NO producing neurons at light microscopic level (LM). A modification of the technique using the tetrazolium salt BSPT as substrate, is useful to study the ultrastructure of NO neurons. The aim of this work was to perform a detailed analysis of NADPH-diaphorase reactive neurons in rat mesencephalon both at light and electron microscopic levels. NADPH-diaphorase reactive neurons were observed in superior colliculus, in central gray matter, in dorsal and medial raphe and in the pedunculopontine tegmental nucleus using two histochemical techniques at LM. Electron microscopy showed deposits on membranes of the endoplasmic reticulum, Golgi apparatus and nuclear envelope of dorsal raphe neurons. Presynaptic and postsynaptic terminals showed deposits on membranous elements but postsynaptic terminals also showed deposits on the inner surface of their membranes. Further physiological studies are needed to clarify the meaning of the ultrastructural findings such as the putative interaction of NOS with postsynaptic proteins, receptors or membranous channels.

Terminales nerviosas sensitivas en los planos extensores de los dedos de la mano / Sensitive nerve terminations in the extensor layers of the fingers

En este trabajo se describe el hallazgo de terminales nerviosas sensitivas en los planos histologicos que subyacen al aparato extensor digital de la mano. Cuarenta y ocho preparados frescos de sujetos cadavericos fueron teñidos con hemotoxilina-eosina, con tricromico de Mason y con impregnacion argentica para reticulina. Las coloraciones permitieron diferenciar y mostrar las estirpes celulares y las variedades tisulares de diferentes planos que se corresponden con los descritos en otro trabajo publicado, relacionados con la aponeurosis extensora digital subtendinosa y las fascias preperiosticas falangicas dorsales, asi fue posible constatar la presencia de fibras colagenas en los tejidos correspondientes al capuchon extensor, la caracteristica abundancia de fibras reticulares a lo largo de todos los planos observados, el aspecto y el contenido tipicos de los adipocitos, y la presencia de elementos nerviosos, tales como corpusculos receptores de Pacini en la fascia preperiostica falangica dorsal

Striatal cytomegalic neurons containing nitric oxide are associated with experimental perinatal asphyxia: implication of cold treatment

Neuropathological mechanisms triggered by excitatory aminoacids are Known to involve nitric oxide (NO). Neurons containing NO are histochemically reactive to nicotinamide adenine dinucleotide phosphate diaphorase (NADPH-d), which labels NO synthase in CNS, Sprague-Dawley male rats subjected to perinatal asphyxia (PA) at 37 degreese Celsius, and PA plus 15 degreese Celsius hypothermia were evaluted when 6 months old by NADPH-d histochemical reaction. Computarized image analysis was used for quantification of stained sections. NADPH-d neurons in striatum from subsevere and severe PA showed a significant increment in soma size and dendritic process length versus control and hypothermic treated rats. Post-ischemic damage reurons are therefore involved in NO changes induced by PA that may be prevented by hypothermia treatment.