Discriminatory accuracy of serological tests for detecting Trypanosoma cruzi using the ROC curve and the standard methodology / Precisión discriminatoria de pruebas serológicas para Trypanosoma cruzi aplicando metodología estándar y de curva COR

Abstract Introduction: Serological tests are used to confirm Trypanosoma cruzi infection and their discriminatory accuracy depends on the established decision threshold. Both, the standard methodology and the receiver operating characteristic (ROC) curve methodology allow obtaining such threshold. Objective: To compare the discriminatory accuracy of the standard methodology and the ROC curve methodology regarding serological tests for confirming T. cruzi infection. Materials and methods: A set of anti-T. cruzi antibodies values from subjects previously classified as healthy or as having Chagas disease were used, and computer simulations were performed under homoscedasticity and heteroscedasticity conditions. Sensitivity, specificity, 100% sensitivity, 100% specificity, and perfect-decision were calculated. Results: The discriminatory accuracy obtained with the standard methodology favored specificity (98.22% to 99.56%) over sensitivity (67.25% to 87.14%), while in the ROC curve methodology a balance between sensitivity (94.56% and 96.44%) and specificity (90.35% and 92.11%) was observed. Also, in the ROC curve methodology a greater perfect-decision ratio was observed, which, under homoscedasticity conditions, was >90%. Decisions thresholds were affected by het-eroscedasticity conditions. Conclusion: The ROC curve methodology showed better discriminatory accuracy, therefore its use for calculating decision thresholds in serological tests for detecting Chagas disease is recommended.

Resumen Introducción. Las pruebas serológicas se utilizan para detectar infección por Trypanosoma cruzi y su precisión discriminatoria depende del umbral de decisión establecido. La metodología estándar y la de curva característica operativa del receptor (COR) permiten obtener tal umbral. Objetivo. Comparar la precisión discriminatoria de la metodología estándar y la metodología de curva COR en lo que respecta a pruebas serológicas para detectar infección por T. cruzi. Materiales y métodos. Se utilizó un conjunto de valores de anticuerpos contra T. cruzi de individuos clasificados como chagásicos o sanos y se realizaron simulaciones computarizadas en condiciones homocedásticas y heterocedásticas. Se calculó sensibilidad, especificidad, sensibilidad = 100%, especificidad = 100% y decisión-perfecta. Resultados. La precisión discriminatoria de la metodología estándar favoreció la especificidad (98.22% a 99.56%) sobre la sensibilidad (67.25% a 87.14%), mientras que la de la curva COR mostró un equilibrio entre sensibilidad (94.56% y 96.44%) y especificidad (90.35% y 92.11%). Esta última metodología también evidenció una mayor proporción de decisión-perfecta, la cual llegó a ser >90% en condiciones de homocedasticidad. Los umbrales de decisión fueron afectados por las condiciones de heterocedasticidad. Conclusión. La metodología de la curva COR mostró una mejor precisión discriminatoria, por lo que se recomienda su uso para el cálculo de umbrales de decisión en pruebas serológicas para la enfermedad de Chagas.

Anátomo-radiografia dos ossos longos do membro torácico do Tamandua tetradactyla / Anatomo-radiography of long-bones in thoracic limb ofTamandua tetradactyla

Objetivou-se descrever os acidentes anatômicos dos ossos longos do membro torácico de Tamandua tetradactyla por meio de análises macroscópicas e radiográficas. Foram utilizados 34 espécimes, que foram a óbito por atropelamento. A avaliação do úmero demonstrou as mesmas estruturas presentes nos animais domésticos, além de outras sem prévia descrição. Já no antebraço, rádio e ulna se apresentaram completamente separados, e apesar de, como o úmero, serem identificados alguns dos mesmos acidentes anatômicos descritos em outras espécies, também notamos particularidades. Todas as estruturas descritas na análise macroscópica foram identificadas à radiografia, quando realizada em pelo menos duas projeções ortogonais. As estruturas anátomo-radiográficas dos ossos longos do T. tetradactyla demonstraram grande variação anatômica em comparação a outros mamíferos, o que torna a referida espécie muito singular. Assim o conhecimento de suas particularidades é fundamental para abordagens clínico-cirúrgicas mais seguras.

The objective was to describe the anatomical accidents of the long bones of the thoracic limb of Tamandua tetradactyla by means of macroscopic and radiographic analyzes. We used 34 specimens, which were deaths by running over. Evaluation of the humerus demonstrated the same structures present in domestic animals, besides others without previous description. In the forearm, radius and ulna were completely separated, and although, like the humerus, some of the same anatomical accidents described in other species were identified, we also noticed particularities. All the structures described in the macroscopic analysis were identified on radiography, when performed in at least two orthogonal projections. The anatomic-radiographic structures of the long bones of T. tetradactyla showed great anatomical variation compared to other mammals, which makes the species very unique. Thus knowledge of their particularities is fundamental for safer clinical-surgical approaches.

Anátomo-radiografia dos ossos longos do membro torácico do Tamandua tetradactyla / Anatomo-radiography of long-bones in thoracic limb of Tamandua tetradactyla

Objetivou-se descrever os acidentes anatômicos dos ossos longos do membro torácico de Tamandua tetradactyla por meio de análises macroscópicas e radiográficas. Foram utilizados 34 espécimes, que foram a óbito por atropelamento. A avaliação do úmero demonstrou as mesmas estruturas presentes nos animais domésticos, além de outras sem prévia descrição. Já no antebraço, rádio e ulna se apresentaram completamente separados, e apesar de, como o úmero, serem identificados alguns dos mesmos acidentes anatômicos descritos em outras espécies, também notamos particularidades. Todas as estruturas descritas na análise macroscópica foram identificadas à radiografia, quando realizada em pelo menos duas projeções ortogonais. As estruturas anátomo-radiográficas dos ossos longos do T. tetradactyla demonstraram grande variaçãoanatômica em comparação a outros mamíferos, o que torna a referida espécie muito singular. Assim o conhecimento de suas particularidades é fundamental para abordagens clínico-cirúrgicas mais seguras.

The objective was to describe the anatomical accidents of the long bones of the thoracic limb of Tamandua tetradactyla by means of macroscopic and radiographic analyzes. We used 34 specimens, which were death by running over. Evaluation of the humerus demonstrated the same structures present in domestic animals, besides others without previous description. In the forearm, radius and ulna were completely separated, and although, like the humerus, some of the same anatomical accidents described in other species were identified, we also noticed particularities. All the structures described in the macroscopic analysis were identified on radiography, when performed in at least two orthogonal projections. The anatomic-radiographic structures of the long bones of T. tetradactyla showed great anatomical variation compared to other mammals, which makes the species very unique. Thus knowledge of their particularities is fundamental for safer clinical-surgical approaches.

Skeletopy of the medullary cone in Sapajus apella: Clinical implications in epidural anesthesia / Esqueletopia do cone medular em Sapajus apella: Implicações clínicas na anestesia epidural

This work aimed to describe the skeletopy of the medullary cone of the capuchin monkey (Sapajus apella) and to lay morphological foundations to propose a route of administration for epidural anesthesia. We used five females adults S. apella, and dissected them to study their medullary cone. The fixated animals were dissected, a skin incision was made from the dorsal median line, epaxial musculature and vertebral arcs was removed to expose the spinal cord, individualizing the medullary cone and the lumbar intumescence. The base of S. apella medullary cone was located near the L5 vertebra and the apex near S3, the structure was 4.5 cm in average. The evaluated specimens presented five lumbar and four sacral vertebrae. We concluded that the positioning of S. apella medullary cone is caudally than in other species, suggesting that the most appropriate location for epidural anesthetic procedures is the sacrocaudal region.

Este estudo visa descrever a esqueletopia do cone medular em macaco prego (Sapajus apella), com a intenção de estabelecer bases morfológicas para prestar o apoio à implementação de procedimentos anestésicos e outros procedimentos de rotina clínica-cirúrgica veterinária, dada a crescente importância do papel do veterinário na saúde dos animais selvagens. Cinco S. apella adultos fêmeas foram utilizadas neste trabalho e dissecados para o estudo do cone medular. Os animais fixados foram dissecados, foi feita uma incisão na pele na linha média dorsal, a musculatura epaxial e os arcos vertebrais foram removidos para exposição da medula espinhal, individualizando o cone medular e a intumescência lombar. A base do cone medular do S. apella foi observada na altura da vértebra L5 com o ápice em S3, com comprimento médio de 4,5 cm. Os espécimes avaliados apresentaram cinco vértebras lombares e quatro sacrais. Conclui-se que o posicionamento do cone medular do S. apella é mais caudal em relação às outras espécies. Por conseguinte, é sugerido que o local mais apropriado para o procedimento anestésico peridural é a sacrocaudal região.

Skeletopy of the medullary cone in Sapajus apella: Clinical implications in epidural anesthesia / Esqueletopia do cone medular em Sapajus apella: Implicações clínicas na anestesia epidural

This work aimed to describe the skeletopy of the medullary cone of the capuchin monkey (Sapajus apella) and to lay morphological foundations to propose a route of administration for epidural anesthesia. We used five females adults S.apella, and dissected them to study their medullary cone. The fixated animals were dissected, a skin incision was made from the dorsal median line, epaxial musculature and vertebral arcs was removed to expose the spinal cord, individualizing the medullary cone and the lumbar intumescence. The base of S. apella medullary cone was located near the L5 vertebra and the apex near S3, the structure was 4.5 cm in average. The evaluated specimens presented five lumbar and four sacral vertebrae. We concluded that the positioning of S. apella medullary cone is caudally than in other species, suggesting that the most appropriate location for epidural anesthetic procedures is the sacrocaudal region.

Este estudo visa descrever a esqueletopia do cone medular em macaco prego (Sapajus apella), com a intenção de estabelecer bases morfológicas para prestar o apoio à implementação de procedimentos anestésicos e outros procedimentos de rotina clínica-cirúrgica veterinária, dada a crescente importância do papel do veterinário na saúde dos animais selvagens. Cinco S. apella adultos fêmeas foram utilizadas neste trabalho e dissecados para o estudo do cone medular. Os animais fixados foram dissecados, foi feita uma incisão na pele na linha média dorsal, a musculatura epaxial e os arcos vertebrais foram removidos para exposição da medula espinhal, individualizando o cone medular e a intumescência lombar. A base do cone medular do S. apella foi observada na altura da vértebra L5 com o ápice em S3, com comprimento médio de 4,5 cm. Os espécimes avaliados apresentaram cinco vértebras lombares e quatro sacrais. Conclui-se que o posicionamento do cone medular do S. apella é mais caudal em relação às outras espécies. Por conseguinte, é sugerido que o local mais apropriado para o procedimento anestésico peridural é a sacrocaudal região.

Topography of the medullary cone of the feline night monkey: Clinical implications in epidural anesthesia / Topografia do cone medular do macaco-da-noite: auxiliando a abordagem peridural

Feline night monkey (Aotus azarae infulatus) is an arboreal primate that sleeps during the day hidden among branches of trees, leaving its hideout after nightfall. Little is known about the morphology of these animals, which leads to some difficulty in clinical and surgical approaches, as there has been substantial growth in the veterinarian’s role in maintaining the health and well-being of wildlife. Thus, we sought to investigate the topography and morphometry of the medullary cone, a small portion of the nervous system of the feline night monkey, which is of paramount importance in approaches for epidural anesthesia. Specimens from five young females were used, each with eight lumbar vertebrae, three sacral vertebrae, and a medullary cone with an average length of 7.5 cm, located between L5 and S3. Based on this finding, we suggest that a probable site for the application of epidural anesthesia is the space between S3 and Cc1.

O macaco-da-noite (Aotus azarae infulatus) é um animal arborícola que dorme durante o dia escondido entre os ramos, saindo do esconderijo após o anoitecer. Pouco se sabe sobre a morfologia destes animais, o que gera certa dificuldade nas abordagens clínico-cirúrgicas, uma vez que cresce substancialmente o papel do médico veterinário nas questões de saúde e bem-estar de animais selvagens. Visando contribuir com esses profissionais, buscou-se investigar a topografia e morfometria de uma pequena porção do sistema nervoso do macaco-da-noite, o cone medular, que é de suma importância nas abordagens quanto à anestesia peridural. Foram utilizados cinco espécimes fêmeas, jovens, de macaco-da-noite, que apresentavam oito vértebras lombares e três vértebras sacrais, e cone medular possuindo em média de 7,5 cm de comprimento, localizando-se entre L5 e S3. Este achado nos leva a sugerir como sítio provável para a aplicação de anestesia epidural, o espaço entre S3 e Cc1.

Topography of the medullary cone of the feline night monkey: Clinical implications in epidural anesthesia / Topografia do cone medular do macaco-da-noite: auxiliando a abordagem peridural

Feline night monkey (Aotus azarae infulatus) is an arboreal primate that sleeps during the day hidden among branches of trees, leaving its hideout after nightfall. Little is known about the morphology of these animals, which leads to some difficulty in clinical and surgical approaches, as there has been substantial growth in the veterinarian's role in maintaining the health and well-being of wildlife. Thus, we sought to investigate the topography and morphometry of the medullary cone, a small portion of the nervous system of the feline night monkey, which is of paramount importance in approaches for epidural anesthesia. Specimens from five young females were used, each with eight lumbar vertebrae, three sacral vertebrae, and a medullary cone with an average length of 7.5 cm, located between L5 and S3. Based on this finding, we suggest that a probable site for the application of epidural anesthesia is the space between S3 and Cc1.

O macaco-da-noite (Aotus azarae infulatus) é um animal arborícola que dorme durante o dia escondido entre os ramos, saindo do esconderijo após o anoitecer. Pouco se sabe sobre a morfologia destes animais, o que gera certa dificuldade nas abordagens clínico-cirúrgicas, uma vez que cresce substancialmente o papel do médico veterinário nas questões de saúde e bem-estar de animais selvagens. Visando contribuir com esses profissionais, buscou-se investigar a topografia e morfometria de uma pequena porção do sistema nervoso do macaco-da-noite, o cone medular, que é de suma importância nas abordagens quanto à anestesia peridural. Foram utilizados cinco espécimes fêmeas, jovens, de macaco-da-noite, que apresentavam oito vértebras lombares e três vértebras sacrais, e cone medular possuindo em média de 7,5 cm de comprimento, localizando-se entre L5 e S3. Este achado nos leva a sugerir como sítio provável para a aplicação de anestesia epidural, o espaço entre S3 e Cc1.

Influence of tramadol on functional recovery of acute spinal cord injury in rats

Abstract Purpose: To evaluate the influence tramadol on functional recovery of acute spinal cord injury in rats. Methods: Ten rats were divided into two groups (n = 5). All animals were submitted by a laminectomy and spinal cord injury at eighth thoracic vertebra. In control group, the rats didn't receive any analgesic. In tramadol group, the rats received tramadol 4mg/Kg at 12/12h until 5 days by subcutaneous. Animals were following by fourteen days. Was evaluated the Basso, Beattie, Bresnahan scale (locomotor evaluation) and Rat Grimace Scale (pain evaluation) at four periods. Results: There no difference between the groups in locomotor evaluation in all periods evaluated (p>0.05) and in both groups there was a partial recover of function. The tramadol group show a lower pain levels at the first, third and seventh postoperatively days when comparing to the control group. Conclusion: The tramadol as an analgesic agent don't influence on functional recovery of acute spinal cord injury in rats

Nematode capilaridae in the tongue of Cerdocyon thous of free life in Brazil / Nematoide capilaridae na língua de Cerdocyon thous de vida livre no Brasil

Abstract Studies of helminths in road-killed wild animals are still uncommon but may provide promising results since they can identify the parasites in juvenile and adult hosts and meet the recommendations of current discussions on bioethics that prioritize alternative methods for the use of animals. This study evaluated three Cerdocyon thous individuals that were donated after dying from being run over. Two of them had small nematode adults in the epithelial and connective tissues of the tongue. The diagnosis was based on the presence of eggs, observed in histological sections, and morphological characteristics of the nematodes in the tongue. Morphologically, this nematode has a body with transverse grooves, simple mouth opening and no lips, esophagus and stichosome with stichocytes and bacillary bands along the body, which is characteristic morphology of the family Capilariidae and genus Capillaria . The presence of this nematode in the tongue of C. thous is an extremely important fact that contributes to what is known about the biodiversity of zoonotic parasites in wild canid populations. However, an explanation for these findings remains unclear because, until now, this has not been observed in the biological cycle of the species.

Resumo O estudo de helmintos de animais selvagens vitimados por atropelamento, ainda é uma prática pouco comum, porém pode ser promissor, uma vez que permite a identificação de helmintos a partir de hospedeiros juvenis e adultos, e atendem às atuais discussões em bioética, as quais priorizam métodos alternativos para o uso de animais. Foram avaliados 3 exemplares de Cerdocyon thous provenientes de doação pós-óbito por atropelamento. Dois deles apresentaram pequenos nematoides adultos inseridos nos tecidos epitelial e conjuntivo da língua. O diagnóstico foi baseado na análise de cortes histológicos que evidenciaram a presença de ovos no interior do nematoide e nas características morfológicas gerais do mesmo. Morfologicamente estes nematoides apresentavam corpo com estrias transversais, abertura bucal simples e lábios ausentes, esôfago trichuroiude com a presença de esticócitos e bandas bacilares ao longo do corpo, característica morfologicamente sugestiva da família Capillariidae e do gênero Capillaria . A presença de nematoides inseridos na língua de C. thous é um fato de extrema importância para o conhecimento da biodiversidade de parasitos zoonóticos circulantes presentes em populações selvagens de canídeos. Porém, permanece obscura a explicação para tais achados, uma vez que tal evento não foi observado no ciclo biológico das espécies até o momento.

Açaí seed bran in the feed of slow-growth broilers / Farelo de caroço de açaí em ração para frangos de crescimento lento

The aim of this study was to analyze the potential use of açaí seeds as an alternative ingredient in the feed of slow-growth broilers until 28 days of age. We carried out a bromatological analysis of fractions of the açaí fruit. The açaí seed without mesocarp was the best choice for formulation of the açaí seed bran (ASB), which was evaluated in terms of bird performance and economic viability of the supplemented feed. A total of 416 male chicks of the French Red-Naked Neck lineage were used in a completely randomized design with four treatments (0, 2, 6 and 10% inclusion of ASBin the feed) with eight replicates each. The results indicated that ASB can be included in proportions of up to 10% in the diet of slow growth broilers at early development stage without impairing performance. The 10% inclusion level also was economically equal to the control treatment, representing a viable alternative for broiler production, with potential for reduction of the negative impacts generated by açaí residue in the environment.

Objetivou-se analisar o potencial da utilização do caroço de açaí como ingrediente alternativo na alimentação de frangos de corte de crescimento lento, até 28 dias de idade. Primeiramente foi feita a análise bromatológica de frações do fruto do açaí, que resultou no caroço de açaí sem mesocarpo como sendo a melhor opção para a formulação do farelo de caroço de açaí (FCA). O farelo foi usado na composição de rações em um experimento de desempenho das aves. Ao final foi realizada uma análise da viabilidade econômica do uso de FCA em ração pata frangos. Utilizamos 416 pintos machos, da linhagem Francês Pescoço Pelado Vermelho, em um delineamento inteiramente casualisado com quatro tratamentos (0, 2, 6 e 10% de inclusão de FCA) de oito repetições cada. Concluímos que o FCA pode ser incluído em até 10% na dieta para frango de corte de crescimento lento em fase inicial, sem ocasionar prejuízo em seu desempenho. O nível de 10% de inclusão mostrou-se economicamente equivalente ao tratamento controle, sendo uma alternativa viável de insumo na produção de frangos, que pode contribuir para a redução do impacto negativo gerado pelo resíduo do açaí no meio ambiente.

Morphological Characterization of Diaphragm in Common Squirrel Monkey (Saimiri sciureus)

ABSTRACT The wall of the diaphragm can be affected by congenital or acquired alterations which allow the passage of viscera between the abdominal and chest cavities, allowing the formation of a diaphragmatic hernia. We characterized morphology and performed biometrics of the diaphragm in the common squirrel monkey Saimiri sciureus. After fixation, muscle fragments were collected and processed for optical microscopy. In this species the diaphragm muscle is attached to the lung by phrenopericardial ligament. It is also connected to the liver via the coronary and falciform ligaments. The muscle is composed of three segments in total: 1) sternal; 2) costal, and 3) a segment consisting of right and left diaphragmatic pillars. The anatomical structures analyzed were similar to those reported for other mammals. Histological analysis revealed stable, organized muscle fibers with alternation of light and dark streaks, indicating transverse striation.

Mammary gland morphology in the northern Amazon red squirrel (Sciurus igniventris) / Morfologia da glândula mamária em esquilo do Norte Amazônico (Sciurus igniventris)

Sciurus igniventris is a squirrel with broad distribution in South America. We examined one female adult specimen which was donated after death by trampling. The aim of this work was describe the morphological characteristics of mammary gland of one specimen. The body was fixed using 10% aqueous formaldehyde. Tissues were processed and slides prepared following standard histological protocols. Morphological analysis of the mammary glands revealed similarities to those described in the literature for domestic and wild mammals. As special features in kind, macroscopically identified a pair of thoracic glands, followed by three pairs of abdominal glands. Microscopically the abundant presence of connective tissue dividing the alveolar-tubular glands. Similar to that described for domestic and wild mammals.

Sciurus igniventris é um esquilo com distribuição na América do Sul. Nós examinamos uma fêmea adulta que foi doada após morte por atropelamento. O objetivo do trabalho foi descrever as características morfológicas da glândula mamária de um exemplar da espécie. O animal foi fixado utilizando solução aquosa de formoldeído a 10%. Os tecidos foram processados e lâminas foram preparadas seguindo protocolos histológicos padrões. A análise morfológica da glândula mamária revelou similaridades com o que temos descrito na literatura para animais domésticos e selvagens. Como particularidades na espécie, macroscopicamente foi identificado um par de glândulas torácicas, seguidas por três pares de glândulas abdominais. Microscopicamente ocorreu a presença abundante de tecido conectivo dividindo as glândulas túbuloalveolares. Semelhante ao descrito para mamíferos domésticos e selvagens.

Immunophenotyping of leukocytes in bovine placenta / Imunofenotipagem de leucócitos na placenta bovina

Lymphocytes and macrophages are the main white cells involved in fetal-maternal tolerance. Little is known about these leukocytes in bovine placenta, such as the quantity and location of these cells. Thus, the objective of this study was to identify lymphocyte and macrophage populations in bovine placenta using specific markers and flow cytometry. This study analyzed samples of placentomes and intercaruncular regions of cows in the three quarters of pregnancy. In the placentomes, during the first quarter of pregnancy, mean percentage of labeled CD3+ cells was 2.34%; CD8+, 1.28%; CD14+, 1.66%; and CD335+, 0.96%. For the intercaruncular region, percentage of CD3+ cells was 0.71%; CD8+, 1.63%; CD14+, 2.81%; and CD335+, 2.81%. In the second quarter, placentomes showed 0.94% CD3+ cells; 0.77% CD8+; 0.72% CD14+; and 0.51% CD335+. In the intercaruncular region, percentage of labeled CD3+ cells was 0.50%; CD8+, 1.81%; CD14+, 2.64%; and CD335+, 0.51%. In the third quarter, placentomes showed labeling of 0.88% CD3+; 0.66% CD8+; 1.06% CD14+; and 0.74% CD335+ cells. In the intercaruncular region, percentage of labeled CD3+ cells was 0.19%; CD8+, 2.23%; CD14+, 2.43%; and CD335+, 0.16%. The results showed that there was a greater immunomarking of leukocytes CD3+ and CD335+ in the placentome when compared to the intercaruncular region during the third trimester. It can be concluded that leukocytes populations in bovine placenta is reduced, probably because of the syndesmochorial characteristic of bovine placenta. This represents a significant barrier for the immunological system of the mother, sharply decreasing the exposure of the conceptus to the mother's immune system.(AU)

Linfócitos e macrófagos são os principais leucócitos envolvidos na tolerância materno-fetal. Pouco se sabe sobre esses leucócitos na placenta bovina, como por exemplo, a quantidade e localização dessas células. Assim, o objetivo desse estudo foi identificar populações de linfócitos e macrófagos na placenta bovina utilizando marcadores específicos e citometria de fluxo. Este estudo analisou amostras de placentônios da região intercaruncular de bovinos nos três trimestres da gestação. No primeiro trimestre, nos placentônios, a porcentagem média de células CD3+ foi 2,34%; CD8+, 1,28%; CD14+, 1,66%; e CD335+, 0,96%. Na região intercaruncular, a porcentagem de células CD3+ foi 0,71%; CD8+, 1,63%; CD14+, 2,81%; e CD335+, 2,81%. No segundo trimestre, os placentônios apresentaram 0,94% de células CD3+; 0,77% de CD8+; 0,72% de CD14+e 0,51% de CD335+. Na região intercaruncular, a porcentagem de células CD3+ foi 0,50%; CD8+, 1,81%; CD14+, 2,64%; e CD335+, 0,51%. No terceiro trimestre, os placentônios apresentaram 0,88% de células marcadas CD3+; 0,66% de CD8+; 1,06% de CD14+ e 0,74% de CD335+. Na região intercaruncular, a porcentagem de células CD3+ foi 0,19%; CD8+, 2,23%; CD14+, 2,43% e CD335+, 0,16%. Os resultados mostraram que a imunomarcação de leucócitos na região do placentônio foi maior do que na região intercaruncular no terceiro trimestre. Concluiu-se que a população de leucócitos CD3+ e CD335+ na placenta bovina está reduzida, provavelmente devido à sua característica sindesmocorial. Essa característica representa uma barreira significante para o sistema imunológico da mãe, o que diminui drasticamente a exposição do concepto ao sistema de defesa da mãe.(AU)

Protocol for collection and separation of bone marrow mononuclear cells in chlorocebus aethiops / Protocolo para colheita e isolamento de células mononucleares de medula óssea em chlorocebus aethiops

Chlorocebus aethiops is a species of non-human primate frequently used in biomedical research. Some research involves this species as an experimental model for various diseases and possible treatment with stem cells. The bone marrow is one of the main sources of these cells and provides easy access. The aim of this study was to standardize the protocol of collection and separation of bone marrow in C. aethiops. Ten animals were submitted to puncture of bone marrow with access to the iliac crest and cell separation by density gradient. The bone marrow of C. aethiops had an average of 97% viability. From the results achieved, we can conclude that C. aethiops is an excellent model to obtain and isolate mononuclear cells from bone marrow, fostering several studies in the field of cell therapy.

Chlorocebus aethiops é uma espécie de primata não humano frequentemente utilizados em pesquisa biomédica. Algumas pesquisas envolve esta espécie como modelo experimental para várias doenças e possível tratamento com células-tronco. A medula óssea é uma das principais fontes destas células e proporciona fácil acesso. O objetivo deste estudo foi o de padronizar o protocolo de coleta e separação de medula óssea em C. aethiops. Dez animais foram submetidos a punção de medula óssea com acesso à crista ilíaca e separação de células por gradiente de densidade. A medula óssea de C. aethiops tinha uma média de 97% de viabilidade. A partir dos resultados obtidos, podemos concluir que C. aethiops é um excelente modelo para obter e isolar células mononucleares da medula óssea, promovendo vários estudos no campo da terapia celular.

Morfologia e morfometria da traqueia da preguiça (bradypus variegatus): conhecimentos para procedimentos de emergência / Morphological and morphometric trachea sloth (bradypus variegatus): knowledge for emergency procedures

Por ser uma espécie pouco estudada, principalmente do ponto de vista morfológico, objetivou-se conhecer a anatomia da traqueia da preguiça (Bradypus variegatus) a fim de fornecer informações para facilitar a eleição de tubo endotraqueal adequado, máscara laríngea ou cânula de traqueostomia para anestesia e procedimentos de emergência, uma vez que a mesma revelou-se possuidora de uma morfologia especial. Foram investigados 11animais jovens de idades diferentes, sendo quatro machos e sete fêmeas, provenientes do Museu Emilio Goeldi e doados a UFRA. Os exemplares foram perfundidos via intramuscular com solução aquosa de formol a 10% para fins de conservação e posteriormente foram dissecados em nível cervico-torácico, por meio de mesoscopia, expondo-se desde a laringe até os brônquios principais direito e esquerdo ao nível do hilo pulmonar. As traqueias foram divididas em cinco regiões (região cervical, região da primeira flexura, região da segunda flexura, região da terceira flexura e região da carina) as quais foram mensuradas altura e largura, assim como o comprimento traqueal total e parte do material foi submetido à técnicas de rotina histológica. Macroscopicamente, destacou-se a presença de sinuosidades acentuadas em porção médio caudal, contemplando a carina. O comprimento médio traqueal foi de 14,6cm. Microscopicamente, a traqueia era constituída por placas separadas de cartilagem hialina constituindo cada anel, sendo revestido por epitélio estratificado ciliado. Apesar da traqueia da preguiça comum apresentar revestimento padrão encontrado na traqueia de outros animais, na literatura não há registros de outras espécies que tenham morfologia macroscópica nas condições descritas, o que nos leva a sugerir, quando necessário acesso para ventilação de emergência, a prática da IOT e não a de traqueostomia.

As the sloth (Bradypus variegatus) is a little studied species, especially from a morphological point of view, this research aimed to define the anatomy of its trachea. The information would facilitate the selection of a proper endotracheal tube, laryngeal mask or tracheostomy tube for anesthesia and emergency procedures, since it appeared to have a special morphology. Eleven young animals of different ages were investigated, four males and seven females, obtained from the Emilio Goeldi Museum and donated to UFRA. The specimens were infused intramuscularly with 10% aqueous formaldehyde for preservation and were later dissected at the cervico-thoracic level, by mesoscopia, exposing the area from the larynx to the right and left primary bronchi at the hilum. The tracheae were divided into five regions (cervical, first flexure, second flexure, third flexure, and carina) for which length and width were measured, as well as the total tracheal length. Sharp windings were seen in the middle caudal portion, including the carina. The average tracheal length was 14.6 cm. Microscopically, the trachea was made up of separate plates of hyaline cartilage forming each ring, lined with ciliated epithelium. Despite the trachea of the common sloth displaying the same lining pattern found in other animals, there are no reports in the literature of other species having a macroscopic morphology as described here, which leads us to suggest, where appropriate access to emergency ventilation, the practice of IOT and not tracheostomy.

Os ramos colaterais da aorta abdominal em jaguatirica (Leopardus pardalis) / The collateral branches from abdominal aorta in ocelot (Leopardus pardalis)

A jaguatirica (Leopardus pardalis) é uma das espécies de felino silvestre que pouco foi investigada quanto a sua morfologia. Assim, o estudo objetivou detalhar a origem e distribuição dos ramos colaterais da aorta abdominal deste animal. [...] A aorta abdominal do L. pardalis teve origem entre T12 e L1, sendo a artéria celíaca o primeiro ramo visceral no sentido crânio-caudal, resultando nas artérias hepática, gástrica esquerda e esplênica. A artéria mesentérica cranial surgiu como segundo ramo da aorta abdominal, originando as artérias jejunais. Na sequência localizamos artéria pancreáticoduodenal caudal, artérias ileais, artérias ileocólicas, artérias renais direita e esquerda, artérias adrenais direita e esquerda e artérias ováricas ou testiculares direita e esquerda. Parietalmente, a aorta abdominal originou em média seis ramos lombares, bem como a artéria frenicoabdominal, as artérias circunflexas ilíacas profundas e artérias ilíacas externa e interna. A aorta abdominal gerou ainda a artéria mesentérica caudal, a qual dividiu-se em artérias cólica esquerda e retal cranial. A artéria cólica esquerda seguiu cranialmente paralela ao cólon descendente irrigando-o, originando em média 18 ramos, e anastomosando-se com a artéria cólica média. A artéria retal cranial seguiu em direção caudal distribuindo oito ramos à porção final do cólon descendente e ao reto, e uniu-se com a artéria retal média. Por fim, a aorta abdominal emitiu como ramo terminal a artéria sacral mediana. A vascularização arterial abdominal desta espécie é bastante semelhante ao descrito em felinos domésticos e demais mamíferos, com diferenças quanto ao número de artérias jejunais e origem das artérias renais.

The ocelot (Leopardus pardalis) is a species of wild cat that little has been investigated by their morphology. Thus, the study aimed to detail the origin and distribution of collateral branches from abdominal aorta this animal. [...]The abdominal aorta of L. pardalis originated between T12 and L1, and the celiac artery was first visceral branch in the craniocaudal direction, resulting in the hepatic a., gastric left a. and splenic a.. The caudal pancreaticoduodenal a., ileal aa., ileocolic aa., right and left renal aa., right and left adrenal aa., and. right and left ovarian aa. or testicular aa. were founded after. Parietally the abdominal aorta yielded an average of six lumbar branches, as well as frenicoabdominal aa., deep circumflex iliac aa. and external and internal iliac aa.. The abdominal aorta still originated the caudal mesenteric a., which is divided into the left colic a. and the cranial rectal a.. The left colic artery followed cranially parallel to the descending colon irrigating it, originating an average of 18 branches, and anastomosing with middle colic a.. The cranial rectal artery followed caudally emerging into eight branches uniting with the final portion of the descending colon and the rectum, together with the rectal middle a.. Finally, the abdominal aorta emerged as the terminal branch, the median sacral. The abdominal arterial vascularization of the ocelot is quite similar to that described in domestic cats, with differences in the number of jejunal arteries and origin of the renal arteries. The abdominal arterial vasculature of this species is quite similar to that described in domestic cats and other mammals, differing in number of the jejunal arteries and origin of the renal arteries.

Cambios metabólicos durante la epimastigogénesis in vitro de Trypanosoma cruzi / Metabolic changes during in vitro Trypanosoma cruzi epimastigogenesis

La epimastigogénesis de Trypanosoma cruzi es la transformación del tripomastigota sanguícola en epimastigota que ocurre en la porción anterior del tracto intestinal del insecto vector. Se ha reportado la activación de cisteín proteasas durante la epimastigogénesis in vitro en condiciones axénicas, sugiriendo la utilización de aminoácidos como fuente de carbono para la obtención de energía. El objetivo del presente trabajo fue estudiar a través de indicadores los cambios metabólicos producidos durante la diferenciación tripomastigota-epimastigota. Se partió de un 100% de tripomastigotas sobrenadantes de células Vero, incubados en medio LITB a 27ºC en condiciones de alta (epimastigogénesis horizontal) y baja (epimastigogénesis vertical) tensión de oxígeno. Se realizó contaje de parásitos (Cámara de Neubauer) y recuento diferencial (Giemsa) a diferentes tiempos de incubación (0, 1, 2, 4, 6, 8, 11 y 12 días). A cada tiempo se determinó en los sobrenadantes del medio de cultivo las concentraciones de glucosa y amoníaco, así como los valores de pH. Los resultados mostraron que: 1) Independientemente de la tensión de oxígeno se evidenció formas en diferenciación y amastigotas durante el proceso, siendo la aparición de epimastigotas más tardía en alta tensión de oxígeno; 2) El incremento poblacional fue significativamente mayor en condiciones de alta tensión de oxígeno, registrándose alta mortalidad de amastigotas durante los primeros días de incubación en la epimastigogénesis vertical; 3) El consumo de glucosa fue concomitante con la aparición de epimastigotas en ambas condiciones, siendo mayor en alta tensión de oxígeno; 4) No se registró liberación de amoníaco en ninguno de los casos estudiados; 5) Los valores de pH fueron similares hasta el sexto día en ambas condiciones, evidenciándose una acidificación gradual del medio de cultivo en alta tensión de oxígeno. Todo parece sugerir que durante la epimastigogénesis de T. cruzi, los parásitos involucrados en los procesos de diferenciación no muestran activación de las diferentes rutas metabólicas.

The epimastigogenesis of Trypanosoma cruzi is the transformation from bloodstream trypomastigote to epimastigote that occurs in the anterior portion of the intestinal tract of the insect vector. It has been reported cysteine proteases activation during axenic epimastigogenesis in vitro, suggesting the use of amino acids as a carbon source for the production of energy. The aim of this work was to study through indicators metabolic changes produced during the trypomastigote-epimastigote differentiation. We started with a 100% trypomastigotes derived from Vero cell supernatants, incubated in LITB medium at 27°C under high (horizontal epimastigogenesis) and low (vertical epimastigogenesis) oxygen tension. We estimated parasites number (Neubauer chamber) and differential morphology (Giemsa) at different incubation times (0, 1, 2, 4, 6, 8, 11 and 12 days). Each time was determined in the supernatants of the culture medium glucose and ammonia concentrations as well as the pH values. The results showed that: 1) Regardless of the oxygen tension it was evidenced differentiation forms and amastigote during the process, with the later occurrence of epimastigotes in high oxygen tension; 2) Population growth was significantly greater in high oxygen tension, registering high mortality of amastigotes during the firsts incubation days in the vertical epimastigogenesis; 3) Glucose consumption was concomitant with the appearance of epimastigotes in both conditions, being higher in high oxygen tension; 4) There was no ammonia release in any of the cases studied; 5) The pH values were similar to the sixth day in both conditions, showing gradual acidification of the culture medium at high oxygen tension. Everything seems to suggest that during the epimastigogenesis of T. cruzi parasites involved in differentiation processes show no activation of different metabolic pathways.

Cambios morfológicos, proteicos, glicoproteicos y antigénicos de Trypanosoma cruzi cultivado en medio axénico con tensiones de oxígeno diferentes / Morphological, protein, glycoprotein and antigenic changes of Trypanosoma cruzi cultured in axenic medium with different oxygen tensions

Se ha reportado cultivo axénico de amastigotas de Trypanosoma cruzi derivados de epimastigotas. Se cuestiona si formas redondas en cultivos axénicos son verdaderos amastigotas. Aquí se compararon los cambios biológicos y moleculares de epimastigotas creciendo en alta y baja tensión de oxígeno. T. cruzi (EPm6) se creció en frascos con diferentes alturas de medio LITB (condición horizontal 3 mm y vertical 83 mm). Se colectaron masas de parásitos de diferentes tiempos de crecimiento para análisis proteico, glicoproteico y antigénico. Se estudiaron los cambios morfológicos, incremento de inóculo y resistencia al complemento por microscopia de fases y tinción con Giemsa. Los cambios proteicos y glicoproteicos se compararon por SDS-PAGE. Los cambios antigénicos se analizaron por Western blot con suero de conejo y anticuerpos IgY contra formas amastigotas. En condición vertical, los epimastigotas mantuvieron su morfología típica a lo largo de la curva de crecimiento y no mostraron cambios moleculares significativos. En condición horizontal al 4to y 6to día predominaron formas redondas con capacidad de resistir la lisis por complemento. A partir del 4to día se observaron cambios en los perfiles proteicos y glicoproteicos, concomitantemente con los cambios morfológicos. El suero anti-amastigotas reveló un antígeno amastigota-específico transitorio de 55 kDa en parásitos de 4 días en la condición horizontal, mientras el anticuerpo IgY anti-amastigotas no reveló diferencias entre parásitos creciendo en ambas condiciones. Estas evidencias sugieren que epimastigotas de T. cruzi condicionados a sobrevivir en alta tensión de oxígeno puede mimetizar propiedades biológicas y antigénicas propias del estadio amastigota.

Axenic culture of epimastigote-derived amastigotes of Trypanosoma cruzi has been reported. Have been inquired why round forms appear in culture media and if are true amastigotes. Our proposal was study molecular and biological changes in epimastigotes growing in high and low oxygen tension. T. cruzi (EPm6) were grown in flasks with different height of LITB medium (horizontal condition 3 mm and vertical 83 mm). Parasites were collected masses of different times of growth for proteins, glycoproteins and antigenic analysis. Morphological changes, increase of inoculum and resistance to complement lyses were studied in phase’s microscopy and Giemsa-stained smears. Protein and glycoprotein changes were compared by SDS-PAGE. Antigenic changes were analyzed by Western blot with rabbit serum and IgY antibody against amastigote forms. In vertical condition, the epimastigote maintained its typical morphology along the growth curve and not showed significant molecular changes. In horizontal condition round forms prevailed at 4 and 6 days with capacity to resist lyses by complement. From the 4th day changes in proteins and glycoproteins profiles were observed, concomitantly with the morphological changes. Anti-amastigotes serum revealed a 55 kDa transitory amastigote-specific antigen in four day parasites’ from horizontal condition, while IgY antibody anti-amastigotes don’t revealed differences between parasites grown in both conditions. These evidences suggest that epimastigotes of T. cruzi conditioned to survive in high oxygen tension can mimic biological and antigenic properties own the amastigote-stage.

Epimastigogénesis de Trypanosoma cruzi Dm28c en medio ML15-HA: Análisis proteico, glicoproteico y antigénico / Trypanosoma cruzi Dm28c Epimastigogenesis in ML15-HA medium: protein, glycoprotein and antigen analyses

El medio ML15-HA permite simular in vitro los eventos morfogenéticos del ciclo vital de T. cruzi. Se ha evidenciado que los cambios morfológicos de la epimastigogénesis del clon Dm28c de T. cruzi en ML15-HA, ocurren más rápidamente que para otros aislados. Nuestro propósito fue investigar si los cambios macromoleculares ocurren concomitantemente con la rápida transformación morfológica. Tripomastigotas derivados de células infectadas se incubaron por diferentes tiempos en medio ML15-HA a 27ºC. Los cambios morfológicos se determinaron por microscopía de contraste de fases y coloración con Giemsa. Los perfiles peptídico y glicopeptídico se analizaron mediante SDS-PAGE y coloraciones específicas. Los cambios antigénicos se estudiaron mediante Western blot usando sueros anti-Tripomastigotas y anti-Epimastigotas. Los resultados muestran: (1) caída del porcentaje de tripomastigotas e incremento de amastigotas en las primeras 24 horas, con incremento gradual de epimastigotas a partir de 48 horas; (2) tres perfiles peptídicos y glicopeptídicos diferentes: tripomastigotas, epimastigotas a partir del día 4, y un perfil intermedio los días 2 y 3, demostrando la estrecha correlación entre los eventos morfológicos y los cambios proteicos y glicoproteicos; (3) los perfiles antigénicos revelaron estrecha relación entre los cambios morfológicos y la expresión de antígenos estadio-específicos. Los resultados obtenidos evidencian de manera concluyente que los cambios moleculares son más acelerados para el clon Dm28c en medio ML15-HA que en otros medios. Estos hallazgos abren la interrogante, sí la velocidad de la epimastigogénesis está determinada por la constitución genética del aislado o por la riqueza nutricional del medio de diferenciación.

The ML15-HA medium allows simulate in vitro morphogenetic events in the life cycle of T. cruzi. It has been demonstrated that the morphological changes of epimastigogenesis in ML15-HA of the T. cruzi clone Dm28c, occur faster than for other isolates. Our purpose was to investigate whether macromolecular changes occur concomitantly with rapid morphological transformation. Trypomastigotes derived from infected cells were incubated for different times in ML15-HA medium at 27°C. Morphological changes were determined by phase contrast microscopy and staining with Giemsa. Peptide and glycopeptide profiles were analyzed by SDS-PAGE and specific staining. Antigenic changes were studied by Western blot using serum anti-trypomastigotes and anti-epimastigotes. The results show: (1) decline in the percentage of trypomastigotes and amastigotes increased in the first 24 hours, epimastigotes gradually increases from 48 hours, (2) three peptide and glycopeptide profiles different: trypomastigotes, epimastigotes from the day 4 and an intermediate profile on days 2 and 3, showing the close correlation between morphological events and protein and glycoprotein changes, (3) antigenic profiles showed close relationship between the morphological changes and the expression of stage-specific antigens. The results show conclusively that the molecular changes are more rapid for clone Dm28c in ML15-HA medium than in other media. These findings open the question, if the epimastigogenesis speed is determined by the genetic constitution of isolated or nutritional wealth differentiation medium.

Factores de riesgo, nivel de conocimiento y seroprevalencia de enfermedad de Chagas en el Municipio San Diego, Estado Carabobo. Venezuela / Risk factors, level of knowledge and seroprevalence of Chagas disease

En los últimos años se ha reportado en Venezuela una nueva realidad de la enfermedad de Chagas, con múltiples brotes de transmisión oral y vectorial, con participación de triatominos considerados antiguamente como silvestres que han colonizado zonas urbanas próximas a vegetaciones. El Municipio San Diego del Estado Carabobo se ha caracterizado por un gran crecimiento demográfico con expansión habitacional hacia zonas boscosas, y en donde se ha reportado la captura de triatominos domiciliarios y peridomicilarios. En este estudio se evaluó los factores de riesgo y nivel de conocimiento de la enfermedad de Chagas, así como determinación de infección por Trypanosoma cruzi en el Sector A del mencionado Municipio. A través de pruebas serológicas, se obtuvo una seroprevalencia de 5,6% de un total de 90 individuos evaluados. Haciendo uso de un cuestionario, se encontró baja frecuencia de los factores de riesgo clásicos (condiciones de vivienda y presencia de chipos); no obstante, se obtuvo un porcentaje elevado de presencia de animales en el intra o peridomicilio (74%), así como de vegetación abundante próxima al hogar (82%). En cuanto al nivel de conocimiento, aproximadamente la mitad de los encuestados (46%) mostró un nivel intermedio, seguido de una considerable proporción de participantes con nociones bajas (34%). Los conocimientos más elevados correspondieron a la definición sobre la enfermedad de Chagas y sintomatología más frecuente (60%) e insecto vector (72%). Por otro lado, se obtuvo baja frecuencia en cuanto a los mecanismos de transmisión y reservorios del parásito. Los resultados sugieren la necesidad de ampliar los mecanismos de acción en la lucha contra la enfermedad de Chagas, promoviendo estrategias educativas que aumenten el conocimiento en la comunidad.

In recent years it has been Venezuela reported in Venezuela a new reality of Chagas disease, with multiple outbreaks of oral and vectorial transmission, involving formerly considered as wild triatomines that have colonized urban areas near vegetation. The San Diego County Carabobo state was characterized by a high population growth with residential expansion into forested areas, and where it has been reported domiciliary and peridomiciliary triatomine capture. In this study we evaluated the risk factors and level of knowledge of Chagas disease, as well to identify Trypanosoma cruzi infection in Sector A of the said municipality. Through serological tests yielded a seroprevalence of 5.6 % of a total of 90 individuals tested. Using a questionnaire, we found low frequency of traditional risk factors (housing conditions and presence of triatomines), however, we obtained a high percentage of animals in the presence of intra-or peri (74 %) and abundant vegetation close to home (82 %). Regarding the level of knowledge, about half of respondents (46 %) showed an intermediate level, followed by a considerable proportion of participants with low notions (34 %). Knowledge was highest in the definition of Chagas disease and most common symptom (60 %) and insect vector (72 %). On the other hand, it was obtained a low frequency transmission mechanisms and reservoirs of parasite. The results suggest the need to broaden the mechanisms of action in the fight against Chagas disease, promoting educational strategies that increase community awareness.