Detection of Serum Antibodies and Peripheral Blood Mononuclear Cells Response to Escherichia coli Antigens in Humans

Abstract Among the microorganisms that make up the intestinal microbiota, stands out Escherichia coli, which has as main ecological niche, the large human intestine. Its importance stands out in being part of the pioneer's commensal microorganisms on the colonization of the intestinal mucosa and its pathogenic role causing extra and intra intestinal diseases. The aim of the study was to evaluate the antibody production and proliferative response of Peripheral Blood Mononuclear Cells (PBMC) to E. coli antigens. The bacteria were grown on Brain Heart Infusion broth medium at 35 ºC for 72 hours. Pellet bacteria were lysed for one hour at room temperature with an 8M sodium guanidine solution. After spin and dialysis, the protein antigens were measured in the supernatant by protein assay. The antigens were characterized by polyacrylamide gel electrophoresis and the antigenic profile by western blotting. The presence of specific IgG and IgA antibodies were evaluated using thirty normal human sera by an indirect ELISA. The response of PBMC to E. coli antigens was assessed by MTT metabolization. The results demonstrated that the antigens were composed of proteins of different sizes and they were recognized by antibodies present in normal human serum. Human sera presented high titers of IgG and IgA antibodies to E. coli antigens when compared to the results of lipopolysaccharide. We also showed that total E. coli antigens induced PBMC proliferation at different antigen concentrations. Taken together the results suggest that the antigens from E. coli can induce local and systemic immune responses.

Phylogenetic analysis of Dengue virus 1 isolated from South Minas Gerais, Brazil

Abstract Dengue is a major worldwide public health problem, especially in the tropical and subtropical regions of the world. Primary infection with a single Dengue virus serotype causes a mild, self-limiting febrile illness called dengue fever. However, a subset of patients who experience secondary infection with a different serotype can progress to a more severe form of the disease, called dengue hemorrhagic fever. The four Dengue virus serotypes (1–4) are antigenically and genetically distinct and each serotype is composed of multiple genotypes. In this study we isolated one Dengue virus 1 serotype, named BR/Alfenas/2012, from a patient with dengue hemorrhagic fever in Alfenas, South Minas Gerais, Brazil and molecular identification was performed based on the analysis of NS5 gene. Swiss mice were infected with this isolate to verify its potential to induce histopathological alterations characteristic of dengue. Liver histopathological analysis of infected animals showed the presence of inflammatory infiltrates, hepatic steatosis, as well as edema, hemorrhage and necrosis focal points. Phylogenetic and evolutionary analyses based on the envelope gene provided evidence that the isolate BR/Alfenas/2012 belongs to genotype V, lineage I and it is probably derived from isolates of Rio de Janeiro, Brazil. The isolate BR/Alfenas/2012 showed two unique amino acids substitutions (SER222THRE and PHE306SER) when compared to other Brazilian isolates from the same genotype/lineage. Molecular models were generated for the envelope protein indicating that the amino acid alteration PHE 306 SER could contribute to a different folding in this region located within the domain III. Further genetic and animal model studies using BR/Alfenas/2012 and other isolates belonging to the same lineage/genotype could help determine the relation of these genetic alterations and dengue hemorrhagic fever in a susceptible population.

Prevalence of prracoccidioidomycosis infection y intradermal reaction in rurall areas in alfenas, minas gerais, Braill / Prevalência da paracoccidioidomicose por intradermorreação em áreas rurais de Alfenas, Minas Gerais, Brasil

This study aimed to estimate the prevalence of paracoccidioidal infection by intradermal reaction (Delayed-Type Hypersensitivity, DTH) to Paracoccidioides brasiliensis in rural areas in Alfenas, Southern Minas Gerais (MG) State, Brazil, and to assess risk factors (gender, occupation, age, alcohol intake and smoking) associated with infection. We conducted a population-based cross-sectional study using intradermal tests with gp 43 paracoccidioidin in 542 participants, who were previously contacted by local health agents and so spontaneously attended the test. Participants underwent an interview by filling out a registration form with epidemiological data and were tested with an intradermal administration of 0.1 mL of paracoccidioidin in the left forearm. The test was read 48 hours after injection and was considered positive if induration was greater than or equal to 5 mm. Out of 542 participants, 46.67% were positive to the skin test. Prevalence increased in accordance with an increase of age. There was statistical significance only for males. Occupation, alcohol intake and smoking habits were not significantly associated with the risk of paracoccidioidomycosis infection. There is relevance of paracoccidioidomycosis infection in such rural areas, which suggests that further epidemiological and clinical studies on this mycosis should be done in the southern part of Minas Gerais State.

Este estudo teve como objetivo estimar a prevalência de sensibilização da pele pelo Paracoccidioides brasiliensis em áreas rurais em Alfenas, MG, Brasil, e avaliar os fatores de risco associados à infecção. Foi realizado um estudo transversal de base populacional utilizando testes intradérmicos com paracoccidioidina em 542 indivíduos selecionados por demanda espontânea. Os participantes foram submetidos a uma entrevista através do preenchimento de um formulário de inscrição com os dados epidemiológicos e os testes com a administração intradérmica de 0,1 mL de paracoccidioidina no antebraço esquerdo. O teste foi lido 48 h após a injeção e foi considerado positivo se enduramento era maior ou igual a 5 mm. De 542, 46,67% participantes foram positivos ao teste de pele. Prevalência aumentou de acordo com o aumento da idade. Houve significância estatística apenas para o sexo masculino. Profissão, alcoolismo e tabagismo não foram significativamente associados com o risco de infecção paracoccidioidomicose. Há relevância da infecção paracoccidioidomicose em áreas rurais, o que sugere mais estudos epidemiológicos e clínicos sobre esta micose no sul do estado de Minas Gerais.

Distinct cytokine profiles of circulating mononuclear cells stimulated with Staphylococcus aureus enterotoxin A in vitro during early and late episodes of chronic osteomyelitis

We investigated the cytokine profile of peripheral mononuclear cells from chronic osteomyelitis (OST) patients following in vitro stimulation with staphylococcal enterotoxin A (SEA). We demonstrate that stimulation with SEA induced prominent lymphocyte proliferation and high levels of tumour necrosis factor (TNF)-α, interleukin (IL)-4 and IL-10 secretion in both OST and non-infected individuals (NI). Even though stimulation with SEA had no impact on IL-6 production in either patient group, the baseline level of IL-6 production by cells from OST patients was always significantly less than that produced by cells from NI. After classifying the osteomyelitic episodes based on the time after the last reactivation event as "early" (1-4 months) or "late" osteomyelitis (5-12 months), we found that increased levels of TNF-α and IL-4 in combination with decreased levels of IL-6 were observed in the early episodes. By contrast, increased levels of IL-10, IL-2 and IL-6 were hallmarks of late episodes. Our data demonstrate that early osteomyelitic episodes are accompanied by an increased frequency of "high producers" of TNF-α and IL-4, whereas late events are characterised by increased frequencies of "high producers" of IL-10, IL-6 and IL-2. These findings demonstrate the distinct cytokine profiles in chronic osteomyelitis, with a distinct regulation of IL-6 production during early and late episodes.

PCR detection of multiple human herpesvirus DNA in saliva from HIV-infected individuals in Teresina, State of Piauí, Brazil / Detecção por PCR do DNA de vários herpesvírus humanos na saliva de indivíduos infectados pelo HIV em Teresina, Estado do Piauí, Brasil

INTRODUCTION: Human herpesviruses are frequently associated with orofacial diseases in humans (HSV-1, EBV, CMV and HHV-8), some can also cause systemic disease (CMV and HHV-8). The transmission of these viruses occurs by contact with infected secretions, especially saliva. Human immunodeficiency virus infection is associated with an increased risk of HHVs and related diseases. METHODS: This work aimed to detect HSV-1, EBV, CMV and HHV-8 DNA in saliva of HIV-infected patients from Teresina, northeast Brazil, by PCR and compare these findings with age and sex matched HIV-seronegative individuals. RESULTS: No difference in prevalence was verified between HHV detection in the saliva of HIV-seropositive individuals and controls. The individual frequencies of these viruses in these two populations were different. HIV seropositivity correlated positively with the presence of CMV (OR: 18.2, p= 0.00032) and EBV (OR: 3.44, p= 0.0081). No association between CD4 counts and the prevalence of HHVs in the saliva was observed; however, a strong association was determined between seropositivity and the presence of multiple HHV DNAs in saliva (OR: 4.83, p = 0.0028). CONCLUSIONS: These findings suggest the asymptomatic salivary shedding of HHVs is a common event between HIV-seropositive and seronegative individuals from Teresina, Piauí, Brazil, and, especially for HIV-seropositive patients, saliva is a risk factor for the acquisition/transmission of multiple HHVs.

INTRODUÇÃO: Alguns herpesvírus humanos são frequentemente associados a doenças orofaciais em humanos. A transmissão destes vírus ocorre através do contato com secreções contaminadas, especialmente a saliva. A infecção pelo vírus da imunodeficiência humana é considerada um fator de risco para a aquisição de HHVs e doenças correlatas. MÉTODOS: Este trabalho teve como objetivo detectar por PCR o DNA de HSV-1, EBV, CMV e HHV-8 na saliva de pacientes infectados com HIV em Teresina, nordeste do Brasil, e comparar os dados obtidos com o grupo controle (indivíduos HIV negativos). RESULTADOS: Não há diferença na prevalência de detecção de HHVs na saliva de indivíduos HIV soropositivos e soronegativos. No entanto, as frequências individuais de detecção dos diferentes HHVs são diferentes entre estas duas populações. A soropositividade para HIV apresentou correlação positiva com a presença de CMV (OR: 18,2, p = 0,00032) e EBV (OR: 3,44, p = 0,0081). Não foi verificada nenhuma associação entre a contagem de CD4 e prevalência de HHVs na saliva, no entanto existe uma forte associação entre a soropositividade e a detecção do DNA de vários HHVs na saliva (OR: 4,83, p = 0,0028). CONCLUSÕES: Estes resultados sugerem que a transmissão salivar de HHVs é um evento comum entre os indivíduos HIV soropositivos e soronegativos de Teresina, Piauí, Brasil, e, especialmente para os pacientes soropositivos, a saliva é um fator de risco para a aquisição/transmissão de múltiplos HHVs.

Avaliação das ações de controle da hanseníase no município de Governador Valadares, Brasil, no período de 2001 a 2006 / Assessment of actions for the control of leprosy in the municipality of Governador Valadares, Brazil, the period of 2001/2006

A hanseníase é uma doença infecto-contagiosa de evolução crônica que se manifesta principalmente através de sinais e sintomas dermatoneurológicos: lesões na pele e nos nervos periféricos. O objetivo deste trabalho é avaliar a situação epidemiológica e operacional do controle da hanseníase no município de Governador Valadares/MG no período de 2001 a 2006. Trata-se de um estudo epidemiológico, de natureza descritiva, do tipo transversal. Os altos coeficientes de detecção geral e em menores de 15 anos encontrados no município de Governador Valadares entre 2001 e 2006 mantêm o município como hiperendêmico para hanseníase. Apesar do predomínio de adultos jovens, a quantidade de pessoas com menos de 15 anos diagnosticadas ainda é alta sinalizando a necessidade de ações de prevenção nesta faixa etária. Há uma tendência de melhora com relação ao tipo de alta com um aumento dos casos de cura e diminuição dos índices de abandono a partir de 2005. Governador Valadares vem apresentando melhora em suas ações de controle ao longo dos anos, porém há um grande desafio pela frente no controle da hanseníase no município. É necessário a intensificação da vigilância epidemiológica e adoção de ações efetivas de controle para que o município alcance as metas de eliminação da doença enquanto problema de saúde pública.

Leprosy is an infectious and contagious disease of chronic evolution manifested primarily through signs and dermato-neurological symptoms: skin and peripheral nerve lesions. The aim of this study is to evaluate the epidemiological and operational control of leprosy in the city of Governador Valadares/MG in the period 2001 to 2006. This is an epidemiological, descriptive, and transversal study. The high detection rates in general and in children under 15 found in the city of Governador Valadares between 2001 and 2006's characterized the municipality as hyperendemic for leprosy. Despite the predominance of young adults, the amount of people under 15 years diagnosed is still high indicating the need for preventive actions in this age group. There is a trend of improvement with respect to the type of discharge, with an increase in cases of healing and reduction of dropout rates from 2005. Governador Valadares has shown improvement in their control actions over the years, but there is a big challenge in the control of leprosy in the district. It is necessary to intensify surveillance and adoption of effective control so that the council reaches the goals of eliminating the disease as a public health problem.

Avaliação protéica de uma nova multimistura com base no milho QPM BR 473 / Protein evaluation of a nutritional supplement based on QPM BR 473 maize

A multimistura tem sido utilizada no Brasil pela Pastoral da Criança, em parceria com governos municipais, a fim de reduzir a desnutrição infantil. Não obstante, a eficácia deste suplemento tem sido constantemente arguida, devido à possível presença de fatores antinutricionais. No presente trabalho descrevemos a avaliação biológica de um suplemento contendo milho QPM BR473. Trinta e seis ratos Wistar machos, com 21-23 dias de idade, foram divididos em seis grupos de seis animais cada e alimentados com dietas de caseína contendo multimistura pura, com QPM BR473, láctea (contendo leite em pó), láctea contendo QPM BR473 ou a multimistura proposta (contendo QPM BR473, farinhas de aveia, soja e banana e açúcar mascavo). Mediu-se a Retenção Protéica Líquida. A condição microbiológica dos suplementos e seu custo foram também determinados. Os resultados obtidos mostraram que o QPM BR473 pode ser usado em suplementos nutricionais, com alto valor nutritivo, expresso por sua qualidade protéica, e com baixa relação custo/benefício.

Transmissao e controle da hanseniase no Municipio de Governador Valadares/MG - Periodo de 1990 a 2000 / Transmission and control of leprosy in the municipality of Governador Valadares/MG - Period 1990 / 2000

Este estudo tem como objeto a transmissao e controle da hanseniase em Governador Valadares, tendo em vista analisar indicadores epidemiologicos e operacionais, delimitar areas de risco e formular estrategias para controle e eliminacao da hanseniase como problema de saude publica. Trata-se de um estudo epidemiologico de natureza descritiva, de tipo operacional. Os resultados indicam que Governador Valadares situa-se na categoria de municipio hiperendemico (prevalencia de 16,2/10.00 habitantes e deteccao de 10,22/10.00 habitantes em 2000). Aumento da deteccao em menores de 15 anos contraria a descendencia da deteccao geral verificada no periodo. Dos casos novos, 14% foram detectados com alguma incapacidade, indicando diagnostico tardio e prevelencia oculta. A implantacao do Programa de Saude da Familia, a partir de 1998, nao alterou o quadro endemico da doenca. Concluimos qua a endemia esta em expansao no municipio. Sugerimos a intensificacao das estrategias de controle atraves de Plano de Eliminacao baseado em diretrizes politicas e epidemiologicas, tais como: construcao de sustentabilidade economica, politica e social para a eliminacao; descentralizacao das acoes de controle de hanseniase atraves do Programa de Saude da Familia; busca ativa de casos; e investigacao de eventos-sentinela para hanseniase em "areas silenciosas".