Comparação de três modelos matemáticos para predição de metástases em linfonodos não sentinela em pacientes com câncer de mama e linfonodo sentinela positivo / Comparison of three mathematical models for prediction of non-sentinel lymph node metastasis in patients with breast cancer and positive sentinel lymph node

Objetivo: foi comparar um "Nomograma Brasileiro" desenvolvido para este estudo com o "Nomograma do Memorial Sloan Kettering Câncer Center" e o Stanford Online Calculator na predição de metástases em linfonodos não sentinela em um mesmo grupo populacional de pacientes brasileiras com câncer de mama e linfonodo sentinela positivo. Métodos: foram incluídas 261 pacientes com resultado positivo na biópsia do linfonodo sentinela e submetidas ao esvaziamento axilar em dois centros brasileiros de tratamento de câncer de mama, das quais 92 (35%) apresentaram metástases em linfonodos não sentinela. O "Nomograma Brasileiro", e o "Nomograma do Memorial Sloan Kettering Câncer Center" e o Stanford Online Calculator foram aplicados para calcular a probabilidade de metástases em linfonodos não sentinela. A acurácia de cada modelo foi calculada pela área sob a curva ROC (AUC). Resultados: o "Nomograma Brasileiro", e o "Nomograma do Memorial Sloan Kettering Câncer Center" e o Stanford Online Calculator apresentaram valores da AUC de 0,694 (IC95%0,629-0,760; p<0,0001), 0,626 (IC95% 0,555-0,697; p<0,001) e 0,619 (IC95% 0,548 -689;p=0,002), respectivamente. Conclusões: os três modelos apresentaram uma discriminação razoável na predição de metástases em linfonodos não sentinela em pacientes com câncer de mama. O "Nomograma Brasileiro apresentou a melhor acurácia entre os modelos testados, mas precisa ser validado em populações de pacientes diferentes daquelas utilizadas em sua construção.

Marcadores moleculares em câncer de mama preditivos de metástases axilares / Molecular features of breast cancer predictive of lymph node metastases

OBJETIVO: Avaliar e relacionar fatores morfológicos e moleculares de câncer de mama preditivos de metástases em linfonodos axilares. MÉTODOS: Selecionamos 123 casos de carcinomas mamários invasores subdivididos em três grupos de acordo com o status axilar (pacientes com macrometástases, com micrometástases e linfonodo-negativas). Avaliamos e correlacionamos a presença de metástases axilares com fatores morfológicos (tamanho do tumor, tipo e grau histológicos, invasão linfática e sangüínea em lâminas coradas pela hematoxilina e eosina) e moleculares do tumor primário (receptores de estrógeno e progesterona, Ki67, p53, E-caderina, Her2, e invasão linfática e sangüínea em lâminas coradas pela imunoistoquímica, para D2-40 e CD31). RESULTADOS: A ocorrência de metástases axilares esteve positivamente relacionada à embolização neoplásica em vasos linfáticos em lâminas coradas pela hematoxilina e eosina (HE), quando analisamos os casos com metástases e sem metástases (p=0,04), e, quando eles eram analisados em três subgrupos (p=0,002). Também identificamos relação positiva e estatisticamente significativa entre a presença de metástases axilares e invasão de vasos sangüíneos em lâminas coradas pelo CD31 (p=0,02). As demais variáveis moleculares e morfológicas não mostraram relação estatisticamente significativa com a presença de metástases. CONCLUSÃO: A invasão neoplásica em vasos linfáticos e sangüíneos identificadas em cortes histológicos corados pela HE e por marcadores imunoistoquímicos relaciona-se positivamente com a ocorrência de metástases, e é preditivo de metástases em linfonodos axilares em câncer de mama.

OBJECTIVE: The aim of our study was to analyze morphologic and molecular markers of breast cancer relating them to the presence of metastases in axillary lymph nodes. METHODS: We selected 123 cases of invasive mammary carcinomas stratified into three subgroups: with macrometastases, with micrometastases, and lymph node negative. Presence of metastases was evaluated relating them with morphologic factors (size of primary tumor, type and grade, presence of lymphatic and blood vessel invasion in hematoxylin and eosin-stained slides) and molecular factors of primary tumor (estrogen and progesterone receptors, E-cadherin, Ki67, p53, Her2 expression, and the presence of lymphatic and blood vessel invasion in immunostained sections for D2-40 and CD31). RESULTS: Axillary lymph node metastases were positively related to the presence of lymphatic vessel invasion in hematoxylin and eosin (H&E)-stained slides, when analyzed with or without metastases (p=0.04) and when analyzed in the three subgroups (p=0.002). Lymph node metastases were also positively related to presence of blood vessel invasion identified by immunohistochemistry (IHC) for CD31 (p=0.02). However other morphologic and molecular factors were not related to the presence of axillary node metastases. CONCLUSION: Lymphatic and blood vessel invasion identified in H&E and IHC-stained slides are positively related to the rmetastatic status of axillary lymph nodes and are predictive of axillary lymph node metastases in breast cancer.

D2-40, a novel lymphatic endothelial marker: identification of lymphovascular invasion and relationship with axillary metastases in breast cancer

BACKGROUND: Studies of lymphatic vessels were limited by the lack of specific markers. Recently, they have become possible due to the release of new D2-40 antibody, a selective marker for lymphatic endothelium. The aim of our study was to compare neoplastic invasion in lymphatic and blood vessels detected in hematoxylin and eosin (H&E) and immunohistochemistry-stained sections. METHODOLOGY: A total of 123 cases of invasive mammary carcinomas were studied and sorted out into three subgroups according to axillary staging (macrometastasis, micrometastasis and lymph node negative). Lymphatic vessel invasion (LVI) and blood vessel invasion (BVI) were initially evaluated in histological H&E and immunohistochemistry-stained sequential sections. Lymphatic and blood vessel invasions were assessed by immunohistochemistry, employing D2-40 and CD31 antibodies, respectively. LVI and BVI were related to size, type, histologic grade of primary tumors, and the presence of metastasis. RESULTS: LVI was detected through H&E staining procedure in 17/123 cases (13.8 percent), and through immunohistochemistry procedure in 35/123 cases (28.5 percent) (kappa = 0.433). BVI was detected through H&E in 5/123 cases (4.1 percent), and through immunohistochemistry in 19/123 cases (15.4 percent) (kappa = 0.198). LVI and BVI were positively related to higher histologic grade of primary tumors (p < 0.05). LVI was also positively related to the presence of macrometastasis. CONCLUSION: The detection of lymphatic and blood vessel invasions through immunohistochemistry employing D2-40 and CD31 was higher than the detection through H&E, and it was related to higher tumor grade and metastasis in axillary lymph nodes.

INTRODUÇÃO: Estudos de vasos linfáticos eram limitados pela ausência de marcadores endoteliais linfáticos específicos. Recentemente, eles se tornaram possíveis após liberação comercial do novo anticorpo D2-40, marcador seletivo para endotélio linfático. O objetivo do nosso estudo foi comparar invasão neoplásica em vasos linfáticos e sanguíneos detectada em secções coradas pela hematoxilina e eosina (HE) e imuno-histoquímica (IIQ). MATERIAIS E MÉTODOS: Foram estudados 123 casos de carcinomas mamários invasores subdivididos em três subgrupos de acordo com o estadiamento axilar: macrometástases (Mac-Met), micrometástases (Mic-Met) e linfonodo negativo (LNN). Invasão de vasos linfáticos (IVL) e de vasos sangüíneos (IVS) foi inicialmente avaliada em secções histológicas coradas pela HE e através da IIQ realizada em cortes seqüenciais. A invasão de vasos linfáticos e sanguíneos foi avaliada pela imuno-histoquímica, empregando-se respectivamente os anticorpos D2-40, e CD31. IVL e IVS foram relacionadas com tamanho tumoral, tipo e grau histológico dos tumores primários e com a presença de metástases. RESULTADOS: IVL foi observada pela HE em 17/123 casos (13,8 por cento) e pela IIQ em 35/123 casos (28,5 por cento) (kappa = 0,433). IVS foi observada pela HE em 5/123 casos (4,1 por cento) e pela IIQ em 19/123 casos (15,4 por cento) (kappa = 0,198). IVL e IVS estavam positivamente relacionadas com maior grau histológico dos tumores primários (p < 0,05). IVL também estava positivamente relacionada com a presença de macrometástases. CONCLUSÃO: A detecção IIQ, respectivamente por D2-40 e CD31, de invasão de vasos linfáticos e sanguíneos foi maior que a detecção feita em cortes corados pela HE e relacionou-se com maior grau tumoral e metástases em linfonodos axilares.

Concordância interobservador na interpretação imuno-histoquímica da superexpressão do Her2 detectada por cinco diferentes anticorpos em array de carcinomas mamários / Interobserver agreement in scoring immunohistochemical overexpression of Her2 detected by five different antibodies on tissue microarrays of breast carcinomas

OBJETIVO: Estudar a concordância interobservador na interpretação da superexpressão imuno-histoquímica para a proteína Her2 empregando diferentes anticorpos em array de carcinomas mamários. MATERIAL E MÉTODO: Foi construído um array contendo dois cilindros (2 mm de diâmetro cada) de 25 carcinomas mamários. Cortes histológicos seriados do array foram submetidos à imuno-histoquímica utilizando-se cinco anticorpos anti-Her2: SP3 (NeoMarkers), HercepTest e A0485 (Dako), CB11 (Novocastra) e 4D5 (Genentech). Uma lâmina corada por cada anticorpo (total = cinco lâminas) foi submetida à avaliação individual por cinco observadores seguindo-se o sistema de escore proposto no HercepTestTM. Para a avaliação interobservador os resultados foram interpretados em três diferentes análises: I (0; 1+; 2+; 3+); II (0 e 1+; 2+ e 3+) e III (0 e 1+; 2+; 3+) e aplicado o teste estatístico de kappa. RESULTADOS: A concordância interobservador foi boa quando os casos foram avaliados em quatro categorias (0; 1+; 2+; 3+). Quando avaliados em duas categorias (0 e 1+; 2+ e 3+), a concordância interobservador foi boa para os casos corados por SP3 e CB11 e muito boa para os corados por A0485, HercepTest e 4D5. Na análise III (0 e 1+; 2+; 3+), a concordância interobservador foi considerada moderada para os casos corados por CB11 e boa para os corados pelos outros anticorpos. CONCLUSÃO: A concordância interobservador foi considerada entre moderada e muito boa na avaliação dos cinco anticorpos. A menor concordância interobservador ocorreu nos casos com marcações fraca (1+) e moderada (2+). A experiência dos observadores influenciou as taxas de concordância.

AIM: To examine interobserver agreement in immunohistochemical evaluation of Her2 overexpression using five different antibodies on breast cancer array. MATERIAL AND METHOD: Material and method: One array was built with two cores (2 mm diameter each) from 25 breast carcinomas. Serial sections from the array were submitted to immunohistochemistry using five anti-Her2 antibodies: SP3 (NeoMarkers), HercepTest and A0485 (Dako), CB11 (Novocastra), and 4D5 (Genentech). One slide immunostained for each antibody (total = five slides) were independently scored by five observers following HercepTestTM scoring system. Interobserver agreement was evaluated in three different analysis: I (0; 1+; 2+; 3+); II (0 and 1+; 2+ and 3+) and III (0 and 1+; 2+; 3+), and the kappa statistics was applied. RESULTS: There was a good rate of interobserver agreement when the four scores were considered (0; 1+; 2+; 3+). When the scores were considered in two categories (0 and 1+; 2+ and 3+) the interobserver agreement rate was considered substantial for cases stained for SP3 and CB11, and almost perfect for cases stained for A0485, HercepTest and 4D5. For analysis III (0 and 1+; 2+; 3+), a moderate rate of interobserver agreement was considered for cases stained for CB11, and a substantial rate for other antibodies. CONCLUSION: The overall interobserver agreement was considered moderate to substantial in the evaluation of cases stained for the five antibodies. The lowest rate of agreement was obtained in the evaluation of the cases scored as weak (1+) and moderate (2+). The observers experience altered the concordance rates.

Micrometástases de carcinoma da mama em linfonodos axilares: detecção por imunoistoquímica versus hematoxilina e eosina / Micrometastasis in axillary lymph node in breast cancer: immunohistochemistry versus hematoxylin and eosin detection

INTRODUÇAO: Os métodos de detecção e o significado prognóstico das micrometástases (Mic-Met) em linfonodos axilares (LA) de pacientes com carcinoma mamário invasor são controversos na literatura. OBJETIVOS: Comparar a detecção de micrometástases de carcinoma mamário em LA através de segunda revisão de lâminas coradas por hematoxilina e eosina (HE) e comparar com a detecção imunoistoquímica (IHQ) e seu impacto no restadiamento das pacientes. MATERIAIS E MÉTODOS: Foram estudados 190 casos de carcinoma mamário inicialmente diagnosticados como linfonodo-negativos, com reavaliação dos linfonodos em lâminas coradas por HE e IHQ para pancitoqueratina (clone AE1/AE3) e método streptavidina-biotina-peroxidase (LSAB+). RESULTADOS: Foram revistos 2.868 linfonodos corados por HE (média = 15,1 linfonodos/paciente) e 2.444 linfonodos corados por IHQ (média = 12,9 linfonodos/paciente). Micrometástases foram detectadas em 28/190 casos, sendo que a detecção por IHQ (25/190 casos; 13,2 por cento) foi superior à detecção por HE (14/190 casos; 7,4 por cento). A revisão de lâminas coradas por HE apresentou boa especificidade (98,2 por cento), mas baixa sensibilidade (44 por cento) em relação à IHQ (considerada padrão-ouro). Conclusão: A detecção de Mic-Met foi maior por imunoistoquímica do que por segunda leitura de lâminas, e gerou mudança no estadiamento de 28 pacientes (14,7 por cento).