Detección rápida de resistencia a drogas en Mycobacterium tuberculosis mediante PCR-SSCP y PCR-heteroduplex / Quick detection of Mycobacterium tuberculosis drug resistance using PCR-SSCP and PCR-heteroduplex

Objetivo: Detectar tempranamente la susceptibilidad a las drogas antituberculosas rifampicina e isoniacida mediante PCR y electroforesis conformacional. Materiales y métodos: Se implementaron dos ensayos de amplificación de los genes rpoB y katG y mediante Heteroduplex y SSCP se determino la susceptibilidad antituberculosa de 31 muestras clínicas procedentes de pacientes con diagnóstico de tuberculosis pulmonar baciloscopia positiva. La caracterización fenotípica de la susceptibilidad, se realizó empleando el método de las proporciones. Resultados: Los ensayos de PCR detectaron hasta 2,5 pg de ADN genómico de M. tuberculosis; no amplificando ADN de otras micobacterias y bacterias comunes de la flora bucal. Se encontró una concordancia general entre la detección molecular y convencional de la susceptibilidad a rifampicina e isoniacida de 96.7 por ciento y 83,9 por ciento (p<0,05), respectivamente. Sin embargo sólo en pacientes con antecedente de tratamiento se presentó una concordancia del 100 por ciento y 90,9 por ciento (p<0,05) para rifampicina e isoniacida, respectivamente. Además, este sistema de detección de resistencia puede emitir resultados 48 horas después de la recepción de la muestra clínica. Conclusiones: Estos sistemas se presentan como una excelente alternativa para la identificación temprana de pacientes infectados con bacilos de M. tuberculosis drogoresistentes. Potencialmente se podrán dirigir óptimos y oportunos esquemas terapéuticos que contribuiran con el control y prevención de la transmisión de cepas multidrogo-resistentes que afectan en gran medidad a la salud pública d nuestro país

Acidic ribosomal proteins and histone H3 from Leishmania present a high rate of divergence

Another additional peculiarity in Leishmania will be discussed about of the amino acid divergence rate of three structural proteins: acidic ribosomal P1 and P2b proteins, and histone H3 by using multiple sequence alignment and dendrograms. These structural proteins present a high rate of divergence regarding to their homologous protein in Trypanosoma cruzi. At this regard, L. (V.) peruviana P1 and T. cruzi P1 showed 57.4 per cent of divergence rate. Likewise, L. (V.) braziliensis histone H3 and acidic ribosomal P2 protein exhibited 31.8 per cent and 41.7 per cent respectively of rate of divergence in comparison with their homologous in T. cruzi.

Identificación de una nueva proteína en Leishmania (Viannia) preuviana / Identification of a new protein in Leishmania (Viannia) peruviana

El análisis de la secuencia nucleótidica y aminoacídica de un clon de la biblioteca de expresión en fagogt11 de Leishmania (Viannia) peruviana, estableció identidad parcial con los genes de las proteínas acídicas ribosomales P2 de Leishmania (Leishmania) infantum. Este hallazgo unido a ciertos dominios genómicos conservados, sugeridos de la comparación de 14 secuencias de otras proteínas P1 eucarióticas, confirman que la secuencia del inserto de clon codifica la proteína acídica ribosomal P1 de L. (V.) peruviana denominada LpP1. Este es el primer reporte sobre este tipo de proteína en el género Leishmania

Diagnóstico molecular para leishmaniasis / Molecular diagnosis for leishmaniasis

El potencial diagnóstico de epitopes inmunodominantes seleccionados fue ensayado satisfactoriamente a fin de obtener una prueba serodiagnóstica alternativa para la Leishmaniasis Tegumentaria Americana. Dos proteínas recombinantes prometedoras de L. (v.) peruviana referidas como T-26-U2/T26-U4 fueron reconocidas por sueros individuales de pacientes con Leishmaniasis Tegumentaria Americana usuando Western Blot. La sensibilidad de la prueba fue de 86 con sueros permanetes con Leishmaniasis peruana

Proteínas inmunodominantes de Brucella melitensis evaluadas por wetern blot / Immunodominant proteins of Brucella melitensis assessed by western blot

Se separaron extractos de proteínas totales de Brucella melitensis en gel 15 SOS-PAGE. Su seroreactividad fue analizada por Western Blot con resultados satisfactorios. Para éste propósito sueros controles negativos (n=03), sueros de pacientes con brucelosis (n=34), cólera (n=12), tifoidea (n=02) y tuberculosis (n=22) fueron usados. Esta prueba inmunodiagnóstica detectó bandas seroreactivas altamente específicas (100) correspondientes a 8,14,18, un complejo de 25-48 y 58kDa. La sensibilidad del test fue del 90 usando los sueros antes mencionados