Hb D/Talassemia beta associada à anemia crônica / Hb D/ Beta thalassaemia associated with chronic anaemia

We describe a case of Hb D/Beta thalassemia associated with chronic anemia. Hematological analyses performed in a patient with chronic anemia demonstrating microcytosis and hypochromic in his erythrocytes. Specific laboratory diagnosis performed by alkaline and acid electrophoresis, and fetal determination by alkali resistance, indicated it to be Hb D associated with beta thalassemia. Analyses carried out on his family (father, mother and brother) confirmed the suspected diagnosis. Hb D/Beta thalassemia is a very rare interaction in the Brazilian population, and its determination required specific laboratorial techniques and hematological analyses.

Hemoglobina Köln diagnosticada em programa de triagem neonatal em Säo José do Rio Preto, SP / Köln Hemoglobin found in Neonatal Screening Program in Säo José do Rio Preto, Säo Paulo, Brazil

Alteraçöes genéticas em que a mutaçäo de aminoácidos nas globinas afeta a estrutura da molécula tornando-a instável säo classificadas como hemoglobinas instáveis. Devido à grande diversidade dos pontos de mutaçöes por substituiçöes e deleçöes de aminoácidos, as formas de instabilizaçäo se apresentam muito variadas. A hemoglobina Köln é a variante instável descrita com maior freqüência na literatura e a terceira descoberta no Brasil, as outras säo Hb Niterói e Hb Hasharon. Anemia moderada, icterícia e presença de urina escura caracterizam as manifestaçöes clínicas da Hb Köln. Em programa de triagem neonatal identificamos uma criança com suspeita de heterozigose para hemoglobina Köln, confirmada por procedimentos eletroforéticos e HPLC. Avaliaçöes por diferentes metodologias laboratoriais e estudo familiar auxiliam no diagnóstico precoce, possibilitando minimizar os sintomas decorrentes da hemoglobina anormal e a realizaçäo do aconselhamento genético e educacional destas alteraçöes hereditárias

Hemoglobin Kansas found by electrophoretic diagnosis in Brazil

Some hemoglobin variants with abnormal oxygen affinity have been reported so far from various regions of the world. They can be classified by their oxygen affinity and 15 variants with low oxygen affinity have been reported. A number of hemoglobin mutants which show an abnormal affinity for oxygen have been reported, but only few cases of hemoglobin Kansas. All cases reported so far are from Japan or in Japanese families. In this paper we describe a Brazilian patient with cyanosis and hemoglobin Kansas diagnosed by an electrophoretical procedure

Avanços tecnológicos em hematologia laboratorial / Technological advances in laboratorial haematology

O recente avanço científico e tecnológico direcionado à identificação imuno-hematológica de produtos celulares (ex.: citocinas, interleucinas, interferons, entre outros) sintetizados por determinadas células sanguíneas, bem como na identificação de antígenos de membrana de leucócitos e células progenitoras hematopoiéticas, promoveram excepcional desenvolvimento no diagnóstico laboratorial de diversas doenças hematológicas. Somam-se a esse fato as aplicações das técnicas de biologia molecular que se tornam cada vez mais instrumentos laboratoriais de grande definição no diagnóstico e na prevenção de doenças hematológicas, notadamente aquelas de origem hereditária. O presente artigo teve o objetivo de expor as principais aplicações de novas tecnologias que deverão ser adotadas rapidamente pela moderna hematologia laboratorial, bem como a de sensibilizar os profissionais hematologistas, clínicos e laboratoriais, para a necessidade de se atualizarem numa nova ciência, a dos produtos celulares

Recent progress towards the identification of products synthesised by some blood cells (ex. cytokines, inerleukins, interferons, etc) as well as the identification of white blood cell and stem development of laboratory diagnostics of several haematological diseases. in addition to this there has been a great development in the use of molecular biologyu techniques which have become instrumentals of high definition in the diagnosis and prevention of haematological diseases, specifically those of hereditary origin. This article has the aim of disclosing the main applications of the new technologies that will soon be used widely in laboratory haematology.

Prevençäo de hemoglobinopatias a partir do estudo em gestantes / Hemoglobinopathies: a study in pregnancy

A populaçäo brasileira apresenta genes para as hemoglobinas anormais com freqüências variáveis e influenciadas por seus grupos raciais formadores. Portanto, detecçäo dos portadores destas alteraçöes genéticas é de importância para a saúde pública pois representam fonte de novos heterozigotos e de possíveis homozigotos. O controle das hemoglobinopatias tem sido possível por meio do aconselhamento genético e diagnóstico precoce. O acompanhamento clínico dos homozígotos, o esclarecimento dos heterozigotos e em especial dos casais de risco, pode contribuir para evitar o nascimento de crianças portadoras de uma patologia genética, muitas vezes letal. Por essas razöes o presente trabalho teve como objetivos: avaliar a importância da análise de gestantes para detecçäo de hemoglobinopatias com os propósitos de detectar a prevalência e efetuar a prevençäo, o estudo familial e a conscientizaçäo; para os casos positivos como casal de risco, orientar para o devido encaminhamento médico; avaliar a resposta do programa. Do total de 696 gestantes analisadas, 10,7 por cento apresentaram hemoglobinopatias com as seguintes prevalências: Talassemia alfa 6,75 por cento; Hb AS 2,01 por cento; Talassemia beta menor 1,29 por cento; Hb AC o,28 por cento; Hb Aj 0,14 por cento; Hb AS/Tal. alfa: 0,14 por cento; e P.H.H.F.0,14 por cento. A elevada prevalência de hemoglobinopatias encontrada na populaçäo de gestantes estudada, evidencia a necessidade da implantaçäo de exames para hemoglobinopatias na rotina de pré-natais, uma vez que neste período as mäes estäo mais propensas à se preocuparem com sua própria saúde e a de seu bebê e, quanto mais precoce forem diagnosticadas as alteraçöes das hemoglobinas, melhor e mais adequada será a orientaçäo dada ao casal.

Hemoglobinas AS/alfa talassemia: importância diagnóstica / Hemoglobins AS/alpha thalassemia: diagnostic importance

Portadores de traço falciforme (hemoglobina AS) associados a talassemia alfa apresentam alterações na morfologia dos eritrócitos, normalmente ausentes nos heterozigotos para esta variante de hemoglobina. A interação entre hemoglobina S e talassemia alfa tem sido descrita como um dos fatores responsáveis pela melhora no quadro clínico de portadores homozigotos de hemoglobina S (anemia falciforme), diminuindo os episódios de crises de falcização. Os mecanismos genéticos desta influência são avaliados em análises moleculares dos genes da globina humana. Com o objetivo de verificar a presença de talassemia alfa em portadores de hemoglobina S em heterozigose, com presença de anemia, encaminhados ao Laboratório de Hemoglobinas do Departamento de Biologia da UNESP, de São José do Rio Preto, analisamos 1.002 amostras de sangue com traço falciforme, no período de 1990 a 1998. As amostras foram colhidas com EDTA como anticoagulante, após prévia autorização dos portadores. Para o diagnóstico laboratorial as amostras de sangue foram submetidas a procedimentos eletroforéticos em pH alcalino e ácido e pesquisa citológica de hemoglobina H. Os procedimentos eletroforéticos confirmaram a presença de hemoglobina AS. A pesquisa citológica evidenciou a presença de talassemia alfa. Deste total analisado, 16 (1,59 por cento) amostras de sangue apresentaram a associação entre hemoglobina AS e alfa talassemia, sendo que duas eram de indivíduos de uma mesma família. Os resultados obtidos nos direcionaram a sugerir aos laboratórios de rotina que realizem a pesquisa de alfa talassemia entre os portadores de hemoglobina AS, com presença de anemia, para verificar a interação com talassemia alfa, fornecendo assim aos portadores informação importante sobre seu perfil hematológico.

Sickle Cell disease is a generic term for a group ofgenetic disorders characterized by thepredominance of hemoglobin S. These disorders include Sickle Cell anemia, the Sickle Cell betaThalassemia syndromes, and Hemoglobinopathies in which hemoglobin S is in association withanother abnormal hemoglobin, such ashemoglobin S/C. The Sickle Cell trait (hemoglobin AS) associated with Alpha Thalassemia presentsalterations in the red blood cells morphology,usually absent in the heterozygous for thishemoglobin variant. ........... The genetic mechanisms of this influence are evaluated using molecular analyses of the human globin genes. With the objective ofverifying the presence of alpha Thalassemia inheterozygous of hemoglobin S, with anemia, sentto the Laboratory of Hemoglobins, Department ofBiology, UNESP, São José do Rio Preto, SP, weanalyzed 1002 blood samples with Sickle Cell trait, n the period from 1990 to 1998. The samples werepicked with EDTA 5% as anticoagulant, afterprevious authorization of the carriers.Appropriated counseling and managementrequires definitive diagnosis. For the laboratorialdiagnosis the blood samples were submitted toelectrophoretic procedures in alkaline and acidpH and cytological evaluation of hemoglobin H.The electrophoretic procedures confirmed thepresence of hemoglobin AS. The cytologicalevaluation evidenced the presence of alphaThalassemia. Of this total analyzed, 16(1,59%)blood samples presented the associationbetween hemoglobin AS and alphaThalassemia and two individuals belonged ofthe same family. Our results addressed us tosuggest to the routine laboratories, that isimportant to accomplish the research of alphaThalassemia among the Sickle Cell trait, withanemia, to verify the interaction with alphaThalassemia, supplying to the carriers aimportant information on its hematologicalprofile, genetic pattern of hemoglobinopathiesand the appropriated counseling.

Hemoglobinas anormais e dificuldade diagnóstica / Abnormal hemoglobins

As hemoglobinas humanas, com padrão de herança definido geneticamente, apresentam variações polimórficas características dentro de nossa população, na dependência dos grupos raciais que formam cada região. Aparecem sob a forma de variantes de hemoglobinas ou talassemias, sendo mais freqüentes, no Brasil, os tipos variantes S e C e as talassemias alfa e beta, todas na forma heterozigota. Durante o ano de 1999, amostras de sangue de 506 indivíduos com anemia a esclarecer ou que já passaram por alguma triagem de hemoglobinopatias foram encaminhadas ao Centro de Referência de Hemoglobinas da UNESP, para confirmação diagnóstica e submetidas a procedimentos eletroforéticos, análises bioquímicas e citológicas, para caracterização das hemoglobinas anormais. O objetivo do presente estudo foi verificar quais tipos de hemoglobinas anormais apresentam maior dificuldade diagnóstica. As amostras foram provenientes de 24 cidades de doze estados. Os resultados mostraram que 354 indivíduos (69,96 por cento) apresentaram hemoglobinas anormais, sendo 30 Hb AS (5,93 por cento), 5 Hb AC (0,98 por cento), 76 sugestivos de talassemia alfa heterozigota (15,02 por cento), 134 sugestivos de talassemia beta heterozigota (26,48 por cento) e 109 com outras formas de hemoglobinas anormais (21,54 por cento), que incluem variantes raras e interações de diferentes formas de talassemias e hemoglobinas variantes. Concluiu-se que, apesar da melhoria técnica oferecida atualmente e a constante formação de recursos humanos capacitados, as talassemias em sua forma heterozigota (210 indivíduos -- 41,50 por cento) são responsáveis pela maior dificuldade diagnóstica, seguido da caracterização de variantes raras e formas interativas de hemoglobinopatias (109 indivíduos -- 21,54 por cento), sugerindo que se deve aumentar a capacidade de formação de pessoal e as informações a respeito destas alterações genéticas em nossa população.

The human hemoglobins, with genetically definedinheritance patterns, have shown characteristicpolymorphic variation within the Brazilianpopulation, depending on the racial groups of eachregion. They have appeared under the form ofhemoglobin variants or thalassemias, the varianttypes S and C and the alpha and beta thalassemiasbeing more common, all of them in heterozygoteform. During the year of 1999, blood samples from506 individuals, with suspected anemia or thathad already passed through hemoglobinopathiesscreening, were sent to the Hemoglobin ReferenceCenter – UNESP for diagnostic confirmation andsubmitted to electrophoresis proceedings,biochemical and cytological analyses in order tocharacterize the type of abnormal hemoglobins.The goal of the present study was to verify whichabnormal hemoglobin types show greaterdiagnostic difficulty. The samples came from 24cities in twelve states. The results showed that 354(69.96%) individuals presented abnormalhemoglobins, 30 (5.93%) being Hb AS, 5 (0.98%)being Hb AC, 76 (15.02%) suggestive ofheterozygote alpha thalassemia, 134 (26.48%)suggestive of heterozygote beta thalassemia and 109(21.54%) with other forms of abnormalhemoglobin, including rare variants and differentforms of thalassemias and variant hemoglobininteractions. It has been concluded that, despitethe improved techniques currently available anda constant influx of capacitated personnel, theheterozygote form of thalassemias (210 individuals– 41.50%) is challenging to diagnose, followed indifficulty by rare variant characterization andinteractive forms of hemoglobinopathies (109individuals – 21,54%), suggesting that the capacityfor production of qualified professionals andinformation about these genetic changes in ourpopulation should be increased.

Diagnóstico laboratorial de hemogloginopatias em populaçöes diferenciadas / Laboratory diagnostics of hemoglobinopathies in different populations

As hemoglobinopatias säo um grupo heterogêneode disturbios herdados recessivamente que incluem as talassemias e as doenças falciformes. As mutaçöes que as originam säo específicas de alagumas regiöes e em muitos casos determinadas por distribuiçöes étnicas e geográficas, fundamentando os programas de controle destas alteraçöes e o aconselhamento genético. O diagnóstico de alteraçöes de hemoglobinas envolve cuidados com a metodologia aplicada e o grupo populacional que será avaliado. A informaçäo sobre o tipo de hemoglobina alterada e o suporte clínico, psicológico e genético ao portador e seus familiares é de grande importância para o sucesso de programas preventivos nesta área. Com objetivo de avaliar as metodologias disponíveis para o diagnóstico laboratorial das hemoglobinopatias e suas aplicaçöes em laboratórios clínicos, comparamos a incidência de hemoglobinas anormais em populaçöes diferenciadas a saber: doadores de sangue, portadores de anemia a esclarecer, recém-nascidos, e estudantes. As metodologias aplicadas envolveram procedimentos eletroféricos, análises citológicas e bioquímicas de triagem e para confirmaçäo. No período de setembro de 1999 a janeiro de 2000 analisamos 524 indivíduos, com presença de formas variadas de alteraçäo de hemoglobina para cada grupo, sendo que, dentre as amostras da populaçäo de doadores de sangue, foram diagnosticados dois casos de indivíduos heterozigotos para anemia falciforme.

Hemoglobinopatias e hepatoglobinas em portadores de doença de Chagas / Hemoglobinopathies and haptoglobin in patients with Chagas disease

A endemia chagásica é uma das doenças tropicais mais difundidas e graves, tornando-se um problema de saúde pública de primeira ordem nas Américas do Sul e Central. As condiçöes básicas para a transmissåo da doença indicam que esta endemia é de característica de áreas rurais de baixo nível sócio-econômico. A evoluçåo da doença manifesta-se diferentemente entre os indivíduos e, também, regionalmente. Diferenças de ordem individual e regional såo igualmente observadas em alguns tipos de hemoglobinas anormais e haptoglobinas. Com o objetivo de verificar a prevalência de hemoglobinas anormais e a freqüência de fenótipos de haptoglobinas em chagásicos, analisamos 2.739 amostras de sangue, dos quais 337 pertenciam a pacientes com diagnóstico clínico e laboratorial da doença de Chagas, 1402 tinham sorologia negativa para doença de Chagas (Grupo A) e 1.000 estudantes de 2§ gru de Såo José do Rio Preto (Grupo B). Na análise geral de hemoglobinas anormais, observou-se que a hemoglobina A2 (HbA2) aumentada foi mais prevalente entre chagásicos (8,3 por cento) em comparaçåo com os grupos A (1,21 por cento) e B (0,70 por cento). Análises posteriores comprovaram que este fato nåo se devia à associaçåo da doença de Chagas com talassemia beta heterozigota, principal causa de aumento desta fraçåo hemoglobínica, fato que pode ser indicativo de condiçöes adquiridas. A presença de agregados intraeritrocitários de hemoglobina H (HbH), que é comum na talassemia alfa, também foi mais prevalente entre os portadores da doença de Chagas, notadamente na forma indeterminada da doença (FIDC). Os estudos evidenciaram que esta prevalência também se deve à forma adquirida. A presença de outras hemoglobinas anormais nåo motrou diferenças signficativas entre os portadores da doença de Chagas e os grupos controle. Com relaçåo à estimativa dos valores quantitativos de hemoglobina Fetal (HbF), a média foi menor em portadores de Chagas quando comparados com os grupos sem esta doença, enquanto que para HbA2, sua concentraçåo média foi maior em chagásicos que em nåo chagásicos. Na análise de haptoglobinas obteve-se a qualificaçåo dos três fenótipos mais freqüentes (Hp 1-1, Hp 2-1, Hp 2-2). Os resultados mostraram que tanto em chagásico quanto nos grupos controle o fenótipo Hp 2-1 foi o mais prevalente, seguido de Hp 2-2 e Hp 1-1

Atualizaçäo no diagnóstico das talassemias com o emprego da tecnologia de DNA / Update in thalassaemia diagnosis by DNA tecnology

Os autores apresentam um tema de atualizaçåo sobre o diagnóstico de talassemia, especialmente da talassemia heterozigota ou microcitemia. Incluem conceitos recents, variaçöes de tipos de hemoglobinas nas talassemias heterozigotas, características étnicas relacionadas aos tipos de talassemias e três níveis de análises para o diagnóstico de talassemias, destacando-se: índices eritrocitários, resistência osmótica eritrocitária, morfologia eritrocitária, síntese de globina, isoeletrofocalizaçäo e tecnologia de DNA.

Distribuiçäo dos fenótipos das hemoglobinas no Vale do Ribeira, Säo Paulo / Distribution of hemoglobins phenotypes in Vale do Ribeira, Säo Paulo

Foram analisados, quanto as freqüências das hemoglobinas anormais e os índices eritrométicos, 599 escolares do primeiro grau (6 a 13 anos), moradores dos municípios de Eldorado e Cananéia (Vale do Ribeira - SP), sendo 390 caucasóides e 209 negróides. Do total, 329 residiam na zona rural (Itapeuna e Barra do Braço no município de Eldorado; Acaraú e Itapitangui no município de Cananéia) e 270 na zona urbana (e. E. Salete E. E. Viana no município de Eldorado; E. E. Carijó e E. E. Yolanda no município de Cananéia). Os resultados evidenciaram 15 casos de hemoglobinas anormais, correspondendo a 2,5% da populaçäo total, sendo mais freqüente o traço falcêmico (1,2%) seguido do traço talassêmico beta (0,8%) e do heterozigoto AC (0,5%). Para os caucasóides observou-se prevalência do traço talassêmico beta (1,0%) seguido do traço falcêmico (0,8%) e da HbAC (0,3%), enquanto que para os negróides prevaleceu o traço falcêmico (1,9%) seguidos da Hb AC (1,0%) e do traço talassêmico beta (0,5%). A zona rural apresentou um índice de hemoglobinopatias de 3:2 com relaçäo a zona urbana. Na populaçäo total evidenciou-se 10% de anemia microcítica hipocrômica, sendo este índice maior na zona rural (11,5%) do que na zona urbana (9,1%)

Talassemia alfa adquirida nas doenças linfo e mieloproliferativas / Acquired alpha thalassemia in lympho and myeloproliferative disorders

Foram analisados 60 pacientes portadores de doenças linfo e mieloproliferativas (DLMP) com o objetivo de determinar a prevalência da associaçäo com a talassemia alfa. A talassemia alfa foi diagnósticada pela presença de agregados intra-eritrocitários de Hb H. Os resultados mostraram que 46,6% dos portadores de DLPM têm talassemia alfa; no grupo controle, composto por pessoas aparentemente sadias, a prevalência de talassemia alfa foi de 3,9%

Variabilidade polimórfica de hemoglobinas humanas anormais em indivíduos das cidades de Barretos e Colina, Säo Paulo, Brasil / Polymorphic variability of human abnormal hemoglobins in inhabitants of the towns of Barretos and Colina, State of Säo Paulo, Brazil

Foi estudada uma amostra de 2822 indivíduos das cidades de Barretos e Colina, Estado de Säo Paulo, constituída por escolares, jovens do tiro de guerra e crianças de creches e do posto de saúde. Previamente foi realizado um programa de conscientizaçäo, incluindo palestras e distribuiçäo de cartilhas explicativas sobre as hemoglobinas anormais. As colheitas das amostras de sangue foram feitas por punçäo digital, utilizando lancetas descartáveis e tubos heparinizados de microematócrito. Após os exames laboratoriais, os portadores de hemoglobinas anormais e seus familiares foram convidados para reuniöes de esclarecimentos, com 81,25% de comparecimento. Foram detectados 99 casos de hemoglobinas anormais (3,51%), sendo 77 de hemoglobinas variantes (HbAS, HbAC, HbAJ e HbAN) - 2,73% e 22 casos de talassemias (alfa, beta e PHHF) - 0,78%