Perfil antibiótico de estreptococos del grupo viridans aislados de cavidad oral en individuos con uso prolongado de antibióticos / Antibiotic profile of viridans streptococci group isolated of oral cavity from patients with prolonged use of antibiotics

RESUMEN Los estreptococos del grupo viridans (EGV) son un grupo heterogéneo de bacterias saprófitas anaerobias facultativas que forman parte de la flora normal de cavidad oral. El incremento de la resistencia antibiótica de este grupo de bacterias cobra importancia en pacientes hospitalizados con terapia antibiótica prolongada, en los cuales estos microorganismos pueden ser sustituidos por bacterias multirresistentes. Objetivos: Determinar el porcentaje de cepas de EGV aisladas de cavidad oral resistentes a los antibióticos utilizados en el tratamiento de diversas patologías infecciosas hospitalarias. Material y Métodos: Estudio observacional descriptivo en el que se incluyeron 60 pacientes hospitalizados con historia de terapia antibiótica por más de 3 semanas. Las muestras se procesaron siguiendo protocolos estandarizados de recolección, aislamiento e identificación para EGV de cavidad oral y un protocolo de pruebas de sensibilidad antibiótica. Los resultados se muestran en tablas y gráficas de frecuencia. Resultados: La principal indicación para terapia antibiótica intrahospitalaria fue infección orofacial: 28,33%. La penicilina fue el antibiótico más utilizado ya sea en terapia única, combinada o múltiple en todos los pacientes. Se aislaron en total 108 cepas de EGV, con un promedio de 1,8 cepas por paciente. La especie predominantemente identificada fue S. mutans. El 96,3% de las cepas de EGV fue sensible a todos los antibióticos incluidos en el panel. Conclusiones: El uso de distintas combinaciones y modalidades de terapia antibiótica no tiene efecto en la susceptibilidad de EGV aislados de cavidad oral en pacientes hospitalizados, independiente de la duración del tratamiento.

ABSTRACT Viridans group streptococci (VGS) are a heterogeneous group of saprophytic facultative anaerobic bacteria that are part of the normal flora of the oral cavity. The increased resistance to multiple antibiotics in this group of bacteria becomes important in prolonged antibiotic therapies inpatient where these common microorganisms are replaced by multi-resistant bacteria. Objectives: To determine the percentage of VGS strains isolated from oral cavity resistant to antibiotics used in hospital infectious diseases. Material and methods: This is a descriptive cross-sectional study that included 60 hospitalized patients with a history of antibiotic therapy for more than 3 weeks. The samples were processed following standardized protocols for collection, isolation and identification of oral cavity VGS and a protocol of antibiotic susceptibility testing. The results are shown in tables and graphics of absolute and relative frequencies. Results: The main indication for antibiotic therapy was orofacial infection with a 28.33%. Penicillin was the antibiotic further used either in single, combined or multiple therapies in all patients. A total of 108 samples (1.8 per patient swabs) were collected. The predominantly identified specie was Streptococcus mutans. The 96.3% of all VGS strains were sensitive to all antibiotics included in the panel. Conclusion: Using different combinations and types of antibiotic therapy inpatient has no effect on the susceptibility of VGS isolated from oral cavity separate from treatment.

Desarrollo y validación de técnicas analíticas para la determinación de biomarcadores sanguíneos en ensayos preclínicos. ¿Por qué y para qué? / Development and validation of analytical techniques for the determination of blood biomarkers in preclinical trials. Why and what for?

Resumen El descubrimiento de un nuevo principio activo farmacéutico implica estudios preclínicos, que tienen como objetivo demostrar que es eficaz y seguro para un posterior ensayo en seres humanos. Esto conduce a la necesidad de desarrollar tecnologías que aprovechen las nuevas herramientas analíticas disponi bles dentro de un contexto donde los resultados de las pruebas realizadas, estén plenamente documentados, bajo sistemas de buenas prácticas de laboratorio auditables. En esta revisión se actualizan y describen algunos de los ensayos realizados en la etapa preclínica del desarrollo de un nuevo fármaco y el estado actual de la tecnología analítica empleada para el dosaje de diferentes biomarcadores sanguíneos de interés. Se analizaron los biomarcadores más relevantes, las normativas de validación de las técnicas analíticas empleadas para su determinación y los problemas que se presentan al tratar de aplicarlas.

Abstract New drug discovery involves preclinical studies to demonstrate its effectivity and safety for further tests in humans. This leads to the need to develop technologies that take advantage of the new analytical tools available within a context where the results of the tests carried out are fully documented, under auditable systems of good laboratory practice. This review updates and describes some of the tests carried out in the preclinical stage of the development of a new drug and the current state of the analytical technology used to measure different blood biomarkers of interest. Biomarker parameters were analyzed at the physiological level, considering both the validation regulations of the analytical techniques used for their determination as the problems that arise when trying to apply them, since many of these biomarkers are endogenous compounds in the used matrices.

Characterization and cytotoxic activity on glial cells of alkaloid-enriched extracts from pods of the plants Prosopis flexuosa and Prosopis nigra (Fabaceae) / Caracterización, y actividad citotóxica en células gliales, de extractos enriquecidos con alcaloides de vainas de las plantas Prosopis flexuosa y Prosopis nigra (Fabaceae)

Introduction: Prosopis spp. pods have shown to be a potential source of protein and energy in livestock. However, prolonged ingestion of some of these species produces neurological symptoms in ruminants. Objective: In the present study, the alkaloid content and the in vitro neurotoxic activity of alkaloid enriched-extracts from P. flexuosa and P. nigra pods were determined in order to elucidate the mechanism of animal poisoning caused by these species. Methods: The main alkaloids present in both extracts were analysed by high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry (HPLC-HRMS). The cytotoxic activity of Prosopis alkaloid enriched-extracts in primary mixed glial cell culture was assessed by phase contrast microscopy and using neutral red, and lactate dehydrogenase (LDH) activity assays. Results: Juliprosine and juliprosopine were identified in P. flexuosa pods, while the absence of these alkaloids in P. nigra was confirmed. Both extracts (5-30 μg/mL) induced in a dose dependent manner, morphological alterations, such as swelling, enlargement and detachment from the culture surface. Consistent with this, decrease in cell viability and release of LDH 48 hours after exposure, revealed that P. flexuosa pods was significantly more cytotoxic than P. nigra. Conclusions: In P. flexuosa pods, juliprosine and juliprosopine alkaloids were identified for the first time. Moreover, the present study suggests that the cytotoxic effect displayed by both extracts is due to its alkaloid content. However, the presence of piperidine alkaloids in P. flexuosa could explain the greater cytotoxicity on glial cells with respect to P. nigra that was not shown to contain these alkaloids.

Introducción: Las vainas de diversas especies de Prosopis muestran ser una potencial fuente de proteínas y energía para el ganado. Sin embargo, la ingestión prolongada de algunas de estas especies produce síntomas neurológicos en los rumiantes. Objetivo: En el presente estudio se determinó el contenido de alcaloides y la actividad neurotóxica in vitro de los extractos enriquecidos con alcaloides obtenidos en las vainas de P. flexuosa y P. nigra, con el fin de dilucidar el mecanismo de la intoxicación animal causada por estas especies. Métodos: Los principales alcaloides presentes en ambos extractos se analizaron mediante cromatografía líquida de alto rendimiento-espectrometría de masas de alta resolución (HPLC-HRMS). La actividad citotóxica de los extractos enriquecidos con alcaloides de Prosopis se determinó en cultivos primarios de células gliales mixtas y se evaluó mediante microscopía de contraste de fase y utilizando ensayos de actividad de rojo neutro y de deshidrogenasa láctica (LDH). Resultados: Se identificaron la juliprosina y la juliprosopina en las vainas de P. flexuosa, mientras que se confirmó la ausencia de estos alcaloides piperidínicos en P. nigra. Ambos extractos (5-30 μg/mL) indujeron, de manera dependiente a la dosis, alteraciones morfológicas, como hinchazón, agrandamiento y desprendimiento de la superficie de cultivo. En consecuencia, la disminución de la viabilidad celular y la liberación de la LDH después de 48 horas de exposición, reveló que las vainas de P. flexuosa eran significativamente más citotóxicas que las de P. nigra. Conclusiones: El presente estudio muestra la presencia de los alcaloides juliprosina y juliprosopina en vainas de P. flexuosa y sugiere que el efecto citotóxico mostrado por ambos extractos se debe al contenido de alcaloides. Sin embargo, la presencia de estos alcaloides piperidínicos en P. flexuosa podría explicar la mayor citotoxicidad en las células gliales con respecto a P. nigra que no mostró que tuviera estos alcaloides.

Ex vivo model for studying polymicrobial biofilm formation in root canals / Modelo ex vivo para el estudio de la formación de biopelícula polimicrobiana en conductos / Efeitos sobre a pesca nos elasmobrânquios no Pacífico colombiano

Abstract Endodontic disease has mainly a microbial origin. It is caused by biofilms capable of attaching and surviving in the root canal. Therefore, it is important to study the conditions in which those biofilms grow, develop and colonize the root canal system. However, few studies have used natural teeth as models, which would take into account the root canal anatomical complexity and simulate the clinical reality. In this study, we used human premolar root canals to standardize in vitro biofilm optimal formation conditions for microorganisms such as Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus and Candida albicans. 128 lower premolars underwent canal preparation using K-type files, and were treated with 5.25% sodium hypochlorite and EDTA. Samples were inoculated with microorganisms and incubated for 15, 30, 45, and 60 days under anaerobiosis (CO2 atmosphere) and aerobiosis. Microorganism presence was confirmed by Gram staining, cell culture, and electron microscopy. Exopolysaccharide matrix and microorganism aggregation were observed following 15 days of incubation. Bacterial growth towards the apical third of the root canal and biofilm maturation was detected after 30 days. CO2 atmosphere favored microbial growth the most. In vitro biofilm maturation was confirmed after 30 days of incubation under a CO2 atmosphere for both bacteria and yeast.

Resumen La enfermedad endodóntica tiene principalmente un origen microbiano. Es causada por biopelículas capaces de adherirse y sobrevivir en el conducto dental. Por ello es importante estudiar las condiciones en las que estas biopelículas crecen, se desarrollan y colonizan el conducto. Sin embargo, pocos trabajos han utilizado como modelos dientes naturales, que tengan en cuenta la complejidad anatómica de los conductos y simular la realidad clínica. En este estudio se utilizaron conductos de premolares para estandarizar las condiciones óptimas de formación in vitro de la biopelícula de microorganismos como Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus and Candida albicans. Se prepararon los conductos de 128 premolares inferiores usando limas para endodoncia tipo-K, y fueron tratados con 5.25 % hipodorito de sodio y EDTA. Las muestras se inocularon con microrganismos y fueron incubadas por 15, 30, 45 y 60 días en anaerobiosis (atmósfera de CO2) y aerobiosis. La presencia de microorganismos fue confirmada por tinción de Gram, cultivo celular y microscopia electrónica. Se observó una matriz de exopolisacáridos y agregación de microorganismos a los 15 días de incubación. Después de 30 días se detectó crecimiento bacteriano hacia el tercio apical del conducto, así como maduración de la biopelícula. La atmósfera de CO2 fue la que más favoreció el crecimiento microbiano. La maduración in vitro de la biopelícula se confirmó después de 30 días de incubación en atmósfera de CO2 tanto para la bacteria como para el hongo.

Resumo A doença endodôntica tem principalmente uma origem microbiana. É causada por biofilmes capazes de se fixar e sobreviver no canal radicular. Portanto, é importante estudar as condições em que esses biofilmes crescem, se desenvolvem e colonizam o sistema de canais radiculares. No entanto, poucos estudos utilizaram dentes naturais como modelo, os quais consideram a complexa anatomia dos canais radiculares e simulam a realidade clínica. Neste estudo, utilizamos canais radiculares pré- molares para padronizar as condições de formação ótima in vitro de biofilme para microrganismos como Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus e Candida abicans. Foram preparados os canais de 128 pré-molares inferiores usando limas odontológicas tipo K, e foram tratados com hipoclorito de sódio 5,25 % e EDTA. As amostras foram inoculadas com microrganismos e incubadas por 15, 30, 45 e 60 dias em anaerobiose (atmosfera de CO2) e aerobiose. A presença de microrganismos foi confirmada por coloração de Gram, cultura celular e microscopia eletrônica. Observou-se uma matriz de exopolisacáridos e um agregado de microrganismos depois de 15 dias de incubação. Após 30 dias de incubação foram detectados crescimento bacteriano no terço apical do canal radicular e maduração do biofilme. A atmosfera de CO2 foi a que mais favoreceu o crescimento microbiano. A maduração in vitro do biofilme foi confirmada depois de 30 dias de incubação em atmosfera de CO2 tanto para bactérias como para fungos.

Microorganismos en lengua y saliva de pacientes edéntulos y con periodontitis crónica y su posible conexión con la Proteína C reactiva / Microorganisms in the Tongue and Saliva of Edentulous and Chronic Periodontal Disease Patients and the Possible Relation to the C-Reactive Protein

Antecedentes: Existe evidencia clínica y experimental que la proteína C reactiva (PCR) es un marcador de inflamación sistêmica asociado a periodontitis crónica. Esta enfermedad es la principal causa de cdcntulismo y ambas condiciones presentan, en algunos casos, los mismos microorganismos. Objetivo : Identificar microorganismos periodontopatógenos presentes en pacientes cdéntulos y en pacientes con periodontitis moderada/avanzada y establecer su relación con la PCR ultrasensible (PCR-us). Métodos: Se realizó un estudio de corte transversal en 61 pacientes mayores de 30 años de edad, divididos en dos grupos: con periodontitis crónica y cdcntulos. A cada paciente se le tomó una muestra de saliva y del dorso de la lengua, para identificación microbiológica de microorganismos, y muestra sérica, para evaluación de PCR-us. Se analizó la asociación entre microorganismos, PCR-us y por grupo de pacientes. Resultados: La PCR-us mostró un valor máximo de 1,12 mg/1 en el grupo de cdéntulos sin mostrar diferencia estadísticamente significativa con el grupo de periodontitis crónica (p = 0,29). Sin embargo, valores mayores de PCR-us se observaron en pacientes con microorganismos como Candida albicans, Porphiromona gingival is, Actinomyces nacslundii (A. nacslundii), Capnocytophaga sp., Streptococcus intermedius (S. intermedius) y Bactcroidcs thctaiotaomicron. Conclusión: De acuerdo con los resultados de este estudio, no hay diferencia en PCR-us entre pacientes cdéntulos y aquellos con enfermedad periodontal. Se encontraron periodontopatógenos en cdéntulos principalmente Capnocytophaga sp., A. nacslundii y S. intermedius, tanto en lengua como en saliva.

Background: Ihcrc is clinical and experimental evidence that C-Rcactivc Protein (CRP) is a systemic inflammation marker associated to the chronic periodontal disease. This disease is the main cause of cdcntulousncss and, in some eases, both conditions involve the same microorganisms. Objective: To identify the pcriodontopathic microorganisms appearing in both edentulous patients and patients with moderate/advanced periodontal disease and to determine how they relate to the ultrasensible CRP (US-CRP). Methods: A cross-sectional study was carried out in 61 patients with ages above 30 years divided into two groups: patients with chronic periodontal disease and edentulous patients. Each patient was taken a saliva sample from the tongue dorsum for microbiologic identification of microorganisms, and scrum samples for US-CRP evaluation. The relation between microorganisms and US-CRP was analyzed and described per group. Results: Ihc US-CRP showed a maximum value of 112 mg/L in the edentulous group without any statistically significant difference as compared to the periodontal chronic disease group (p = 029). However, higher values of US-CRP were observed in patients with microorganisms such as Candida albicans, Porphiromona gingivalis, Actinomyces nacslundii (A. nacslundii), Capnocytophaga sp., Streptococcus intermedius (S. intermedius) and Bactcroidcs thctaiotaomicron. Conclusion: Based on the results herein, no difference is observed for che US-CRP between edentulous patients and chronic periodontal disease patients. 'Ihc main periodontal pathogens found in the edentulous subjects include Capnocytophaga sp., A. nacslundii and S. intermedius, both in the tongue and the saliva.

Acute Respiratory Infection by Chlamydophila pneumoniae and Mycoplasma pneumoniae in a Population of Older Adults in Colombia / Infección respiratoria aguda por Chlamydophila pneumoniae y Mycoplasma pneumoniae en una población de adultos mayores en Colombia

Introduction: Acute Respiratory Infection (ARI) is a heterogeneous group of viral and bacterial respiratory pathologies including Chlamydophila pneumoniae (CP) and Mycoplasma pneumoniae (MP) that are not routinely identified; these infections in the older adults have mortality rates 3 to 5 times higher than that recorded in other age groups. Methods: this study was conducted prospectively to determine the proportion of atypical bacterial pathogens in older adults with ARI in Bogotá. Microbiological diagnosis was determined by real-time PCR (qPCR) in samples of respiratory origin and serology for antibodies IgG, IgA and IgM to MP and CP. Results: A total of 71 patients were enrolled from 2012 to 2013. Upper respiratory infections were diagnosed in the 69% of patients and lower respiratory infections in 31%. MP was identified in 9.8% and CP in 8.5%. Conclusions: these findings indicated that CP and MP must be viewed as a significant etiological agent of ARI in older adults in Bogotá.

Introducción: La infección respiratoria aguda (IRA) es un grupo heterogéneo de patologías respiratorias de etiología viral y bacteriana que incluye Chlamydophila pneumoniae (CP) y Mycoplasma pneumoniae (MP), que no son identificados de manera rutinaria, y en el adulto mayor presentan tasas de mortalidad 3-5 veces mayores que las registradas en otros grupos etarios. Metodología: Estudio prospectivo para determinar la proporción de patógenos bacterianos atípicos en los adultos mayores con IRA, en Bogotá. El diagnóstico microbiológico se determinó mediante PCR en tiempo real (qPCR) en muestras de origen respiratorio y serología para anticuerpos IgG, IgA e IgM frente a MP y CP. Resultados: Un total de 71 pacientes fueron incluidos entre 2012 y 2013. Las infecciones respiratorias superiores fueron diagnosticadas en el 69 % de los pacientes y las infecciones del tracto respiratorio inferior en un 31 %. MP fue identificado en el 9,8 % y el 8,5 % en CP. Conclusiones: Estos resultados indican que CP y MP son agentes etiológicos importantes de infecciones respiratorias agudas en los adultos mayores en Bogotá.

El corazón y sus ruidos cardíacos normales y agregados. Una somera revisión del tema / The heart, normal sounds and murmurs

Resumen Los ruidos cardíacos son la expresión sonora del cierre de las válvulas cardíacas, su funcionamiento fisiológico siempre es unidireccional, lo cual permite la correcta circulación de la sangre a través del circuito cardiovascular. La auscultación del área precordial permite la identificación de estos ruidos y sus matices en los 5 focos de auscultación. Existen ruidos que no son producidos por el cierre de las válvulas, por mencionar algunos podemos encontrar los llamados soplos y los ruidos de Korotkoff, ambos producidos por la interrupción del flujo natural de la sangre (flujo laminar) al convertirse en flujo turbulento cada vez que se encuentra una disminución del radio de los conductos por donde ésta circula.

Abstract The heart sounds are an audible expression of the heart valves closing. Their physiological function is always unidirectional, allowing the proper blood flow through the cardiovascular circuit. Listening - by auscultation- to the specific chest areas allows the identification of these sounds and nuances in the five auscultation areas. There are sounds that are not produced by the closing of the valves; to mention a few, we can find the so-called puffs and Korotkoff sounds, both produced by interrupting the natural flow of blood flow (laminar flow) that becomes a turbulent flow whenever there is a reduction of the radius of the conduits through which this the blood circulates.

Baja frecuencia de Enterococcus faecalis en mucosa oral de sujetos que acuden a consulta odontológica / Low frequency of Enterococcus faecalis in the oral mucosa of subjects attending dental consultation

Introducción: Enterococcus faecalis (E. faecalis) es un coco Gram positivo, facultativo anaerobio y no esporulado, cuyo hábitat es el tracto gastrointestinal. También puede encontrarse en el tracto hepatobiliar, vagina y heridas de tejidos blandos. Se ha mostrado que E. faecalis, debido a su alta virulencia, puede penetrar los túbulos dentinales sobreviviendo a la instrumentación químico-mecánica, colonizarlos a una profundidad de 300 µm y reinfectar los conductos aún después de estar obturados, pero no es claro el origen de la infección. El objetivo fue determinar la frecuencia y el perfil de resistencia de E. faecalis en mucosa oral de personas que acuden a consulta odontológica. Métodos: se tomaron muestras por medio de barrido de encía, surco yugal, paladar, lengua y carrillos en 200 sujetos mayores de edad que acudieron a consulta odontológica. La identificación de E. faecalis se realizó mediante un tamizaje que incluyó catalasa, hemólisis en agar sangre, bilis esculina, NaCl 6,5%, PYR y se confirmó con un panel Microscan (DadeBehring). Resultados: se aisló E. faecalis en 10 muestras de microbiota oral (5%). Conclusiones: este estudio determinó una baja frecuencia de E. faecalis en mucosa oral de sujetos que acuden a consulta odontológica.

Introduction: Enterococcus faecalis (E. faecalis) is a Gram-positive, facultative anaerobic, unsporulated coccus whose habitat is the gastrointestinal tract. It can also be found in the hepatobiliary tract, the vagina, and wounds on soft tissues. It has been shown that due to its high virulence, E. faecalis can penetrate the dentinal tubules, surviving chemical-mechanical instrumentation, colonize them at a depth of 300 µm and re-infest the canals even after being obturated, but the source of infection is not clear. The objective of this study was to determine the frequency and resistance profile of E. faecalis in the oral mucosa of patients attending dental consultation. Methods: samples were collected from the gingiva, gingival sulcus, palate, tongue, and cheeks of 200 adult subjects attending dental consultation. E. faecalis was identified by means of a screening that included catalase, hemolysis in agar blood, bile esculin, 6.5% NaCl, and PYR, confirming by a Microscan panel (DadeBehring). Results: E. faecalis was isolated from the oral microbiota of 10 samples (5%). Conclusions: this study found low frequencies of E. faecalis in the oral mucosa of subjects attending dental consultation.

Bronquiolite obliterante com pneumonia organizada simulando síndrome de Pancoast / Bronchiolitis obliterans organizing pneumonia mimicking Pancoast syndrome

É descrito o caso de um paciente de 52 anos, tabagista, que procurou atendimento médico queixando-se de dor em região interescápulo vertebral direita acompanhada de parestesia distal de metacarpos ipsilateral, febre, tosse produtiva e perda ponderal. Ao exame físico, havia presença de murmúrio vesicular diminuído em ápice pulmonar direito. A radiografia de tórax evidenciava opacidade neste mesmo local e na tomografia computadorizada, havia presença de massa encapsulada lobo superior direito, com mediastino superior desviado para esquerda e presença de linfadenomegalias. Com a hipótese de neoplasia pulmonar e síndrome de Pancoast, foi solicitado uma mediastinoscopia com biópsia cujo resultado foi inconclusivo. Logo, optou-se pela toracotomia para retirada da massa e realização de biópsia cujo resultado foi confirmatório para BOOP. Para o tratamento, optou-se por prednisona, cuja resposta foi efetiva.

Cytoskeletal proteins in the follicular wall of normal andcystic ovaries of sows

The expression of cytoskeletal proteins was evaluated immunohistochemically in 36 normal ovaries sampled from 18 sows and 44 cystic ovaries sampled from of 22 sows, was evaluated. All sows had history of reproductive problems, such as infertility or subfertility. The immunohistochemically stained area (IHCSA) was quantified through image analysis to evaluate the expression of these proteins in the follicular wall of secondary, tertiary, and cystic follicles. Cytokeratins (CK) immunoreactivity was strong in the granulosa cell layer (GC) and mild in the theca interna (TI) and externa (TE) of the normal follicles. There was severe reduction of the reaction to CK in the GC in the cystic follicles, mainly in the luteinized cysts. The immunoreactivity for vimentin was higher in the GC from normal and cystic follicles in contrast with the other follicular structures. In the luteinized cysts, the IHCSA for vimentin was significantly higher in TI and in both observed cysts, the labeling was more accentuated in TE. Immunohistochemical detection of desmin and -SMA was restricted to the TE, without differences between the normal and cystic follicles. The results of the current study show that the development of ovarian cysts in sows is associated to changes in the expression of the cytoskeletal proteins CK and vimentin.

A expressão de proteínas do citoesqueleto foi avaliada por imuno-histoquímica em ovários normais e císticos de porcas matrizes. Amostras de 36 ovários normais (18 porcas) e de 44 císticos (22 porcas) foram avaliadas. Todas as matrizes apresentaram histórico de problemas reprodutivos, como infertilidade ou subfertilidade. As áreas coradas por imuno-histoquímica (IHCSA) foram quantificadas por avaliação de imagens avaliando a expressão dessas proteínas na parede folicular de folículos secundários, terciários e císticos. A imuno-reatividade para citoqueratina (CK) foi forte na camada de células da granulosa (GC) e discreta nas tecas interna (TI) e externa (TE) dos folículos normais. Houve redução acentuada da reação de CK na CG dos folículos císticos, principalmente nos cistos luteinizados. A reação para vimentina foi mais intensa na CG dos folículos normais e císticos em comparação com outras estruturas foliculares. Nos cistos luteinizados, a IHCSA para vimentina foi significativamente maior na TI e, em ambos os cistos observados, a marcação foi mais acentuada na TE. A marcação de desmina e actina alfa de músculo liso foi restrita a TE, sem diferenças entre os folículos normais e císticos. Os resultados do presente estudo mostram que o desenvolvimento de cistos ovarianos em porcas matrizes está associado a alterações na expressão das proteínas do citoesqueleto CK e vimentina.

Síndrome de Swyer James-Mcload: relato de casos / Swyer James-Mc Load syndrome: case reports

A síndrome de Swyer James-Mc Load é uma entidade rara descrita pela primeira vez em 1953 sendo caracterizada por hipoplasia ou agenesia das artérias pulmonares, resultando em hiperlucência pulmonar unilateral. Embora a patogênese ainda não tenha sido completamente elucidada, acredita-se que seja uma complicação pós-infecciosa de bronquiolites ocorridas na infância. O objetivo deste estudo estudo foi analisar a melhor conduta terapêutica na síndrome de Swyer James-Mc Load e o impacto na qualidade de vida das pessoas acometidas. Relata-se dois casos desta síndrome diagnosticados em pacientes adultos, sendo que uma delas apresenta asma persistente grave e a outra é ex-tabagista e já realizou cirurgia para ressecção de um nódulo pulmonar no pulmão contralateral ao acometido. A terapêutica conservadora foi capaz de estabilizar a condição clínica dos pacientes, mantendo uma boa qualidade de vida. No entanto, pacientes que não se estabilizam com tal terapêutica provavelmente devem ser incluídos à intervenção invasiva, visto que fornece ao paciente melhora na qualidade e expectativa de vida. Uma breve revisão da literatura pertinente foi realizada para melhor compreensão do assunto...

The Swyer-James Mc Load syndrome is a rare entity first described in 1953 and is characterized by hypoplasia or agenesis of the pulmonary arteries, resulting in unilateral lung hyperlucency. Although the pathogenesis has not yet been fully elucidated, it is believed to be a post-infectious complication of bronchiolitis occurring in childhood. The objective of this article was analyzing the best treatment for SSJM and its impact on affected people's lives. We report two cases of this syndrome diagnosed in adult patients, one of whom has severe persistent asthma and the other is a former smoker and has undergone surgery for resection of a pulmonary nodule in the contralateral lung to the affected. We concluded that conservative therapy is able to stabilize the clinical condition of patients maintaining a good quality of life. However, patients who do not stabilize with such therapy are likely to be included in invasive intervention, since it improves the quality of life and life expectancy of the patient. A brief review of the literature was conducted to better understand the subject...

Expresión de enzimas relacionadas con el metabolismo de glucocorticoides en tejidos ováricos bovinos / Expression of enzymes related with the metabolism of the glucocorticoids in bovine ovarian tissue

Objetivo. Identificar la expresión de enzimas relacionadas con el metabolismo de glucocorticoides en tejidos ováricos bovinos. Materiales y métodos. Se obtuvieron muestras de tejidos provenientes de ovarios sanos (n=10) y con Enfermedad Quística Ovárica (COD) (n=10), a las cuales luego de su procesamiento histológico, se las incluyó en parafina. Mediante la técnica de inmunohistoquímica indirecta, se identificaron in situ en folículos primarios, secundarios, terciarios, atrésicos y quistes de las isoformas 1 y 2 de la enzima 11ß-hidroxiesteroide deshidrogenasa (11βHSD) utilizando anticuerpos específicos. Resultados. La expresión de la enzima 11βHSD-1 presentó diferencias significativas únicamente en las células de la granulosa de los diferentes grupos foliculares. La enzima 11βHSD-2 mostró diferencias significativas con respecto a su expresión en las células de la granulosa de los folículos primarios comparada con los folículos secundarios y quísticos. En las células de la teca interna, esta diferencia se observó entre los folículos terciarios y los folículos atrésicos y quísticos. En las células de la teca externa, los folículos terciarios mostraron diferencias significativas en su expresión con respecto a los folículos atrésicos. Conclusiones. Se demostró la presencia de las isoformas tipo I y II de 11βHSD en tejidos ováricos bovinos obtenidos de frigorífico, lo que permite inferir la existencia de un mecanismo endocrino de regulación de la actividad de los glucocorticoides, que podría alterar el patrón normal de desarrollo folicular generando estructuras foliculares anovulatorias y/o quistes foliculares, y al mismo tiempo anestro y otras alteraciones reproductivas en bovinos.

Objective. Identify the expression of enzymes related to metabolism of glucocorticoids in bovine ovarian tissue. Materials and methods. Samples of tissues of healthy ovaries (n=10) and ovaries with Cystic Ovarian Disease (COD) (n=10) were obtained and then preserved in paraffin after their histological processing. By applying the indirect inmunohistochemistry technique and using specific antibodies it was possible to identify in situ the 1 and 2 isoforms of the 11ß-hidroxiesteroide dehydrogenase (11ßHSD) enzyme in primary, secondary, tertiary, atretic and cystic follicles. Results. The expression of the 11ßHSD-1 enzyme showed significant differences only in the granulosa cells of the different follicular groups. The 11ßHSD-2 enzyme showed significant differences with respect to its expression in the granulosa cells of primary follicles compared to the secondary and cystic follicles. In the cells of the theca interna this difference was observed between the tertiary and the atretic and cystic follicles. In the external theca cells, the tertiary follicles showed significant differences in its expression with respect to the atretic follicles. Conclusions. The presence of isoforms I type and II type of 11ßHSD was observed in ovarian bovine tissues, obtained in slaughterhouses. This allows for concluding the existence of an endocrine mechanism, which regulates glucocorticoid activity. This mechanism allows for the alteration of the normal level of follicular development by generating follicular anovulatory structures and/or follicular cysts and at the same time generating anestrus and others reproductive alterations in cattle.

Evaluación de actividades enzimáticas de Fusarium spp., aislados de lesiones en humanos, animales y plantas / Avaliação das atividades enzimáticas de Fusarium spp. Isolados a partir de lesões em humanos, animais e plantas / Assessment of enzymatic characterization of Fusarium spp. isolated from human, animal, and plant rounds

Objetivo. Determinar actividades amilolíticas, celulolíticas, lipolíticas, pectinolíticas y proteolíticas en 32 aislamientos de Fusarium spp. de origen humano, animal y vegetal. Materiales y métodos. Las actividades enzimáticas se determinaron a nivel cualitativo, por medio de la medición de halos de hidrólisis en placas de agar con el respectivo sustrato, y a nivel cuantitativo se realizó un cultivo líquido para determinar la degradación del respectivo sustrato por medio de técnicas colorimétricas. Resultados. Todos los aislamientos presentaron actividades enzimáticas a nivel cualitativo, excepto las amilolíticas y lipolíticas. La determinación a nivel cuantitativo fue posible para las enzimas evaluadas, a excepción de las lipasas. Conclusión. La determinación de los perfiles enzimáticos amilolíticos, celulolíticos, pectinolíticos y proteolíticos de cada uno de los aislamientos evaluados pertenecientes al género Fusarium sugirió su capacidad, indistintamente de su procedencia, de degradar estos sustratos...

Assessment of enzymatic characterization of Fusarium spp. isolated from human, animal, and plant wounds. Objective. To determine amylolytic, cellulolytic, lipolytic, pectinolytic and proteolytic activities in 32 Fusarium spp. isolates from humans, animals and plants. Materials and methods. Qualitative determination of enzymatic activities was done by measuring hydrolysis halos in agar plates with their corresponding substrate. Quantitative determination was done by colorimetric techniques, using liquid culture supernatants to determine the respective substrate degradation. Results. All isolates showed enzymatic activities from a qualitative point of view, except amylolytic and lipolytic. Quantitative determination was possible for all the evaluated enzymes except lipases. Conclusion. The determination of amylolytic, cellulolytic, pectinolytic and proteolytic enzymatic profiles of each of the Fusarium isolates assessed suggests their capacity to degrade these substrates, irrespectively of their origin...

Avaliação das atividades enzimáticas de Fusarium spp. Isolados a partir de lesões em humanos, animais e plantas. Objetivo. Determinar as atividades amilolíticas, celulolíticas, lipolítica, pectinolíticas e proteolíticas em 32 isolamentos de Fusarium spp. de origem humana, animal e vegetal. Materiais e métodos. As atividades enzimáticas foram determinadas a nível qualitativo medindo os halos de hidrólise em placas de agar com o substrato respectivo e a nível quantitativo realizou-se uma cultura líquida para determinar a degradação do substrato respectivos por meio de técnicas colorimétricas. Resultados. Todos os isolados apresentaram uma atividade enzimática a nível qualitativo, exceto as amilolíticas e lipolíticas. A determinação a nível quantitativo foi possível para as enzimas testadas, exceto para as lipases. Conclusão. A determinação de perfis enzimáticos amilolíticos, celulolíticos, pectinolíticos e proteolíticos de cada um dos isolados testados pertencentes ao gênero Fusarium, sugeriu sua capacidade, independentemente da sua origem, para degradar estes substratos...

Utilização da válvula unidirecional de tórax como sistema de drenagem no pós-operatório de ressecções pulmonares / Use of a one-way flutter valve drainage system in the postoperative period following lung resection

OBJETIVO: Avaliar a drenagem pleural através de válvula unidirecional de tórax no pós-operatório de ressecção pulmonar eletiva. MÉTODOS: Foram realizadas 39 ressecções pulmonares, de forma prospectiva e com análise descritiva, em pacientes que utilizaram a válvula unidirecional de tórax (VUT) como o método de drenagem pleural durante o período pós-operatório. Foram excluídos os pacientes com idade inferior a 12 anos, os submetidos à pneumectomia ou a operação de urgência, os que não completaram o seguimento do estudo e os pacientes que utilizaram o sistema de frasco em selo d'água como método inicial de drenagem pleural. Observou-se a expansão pulmonar, o tempo de permanência com o sistema de drenagem, o período de internação e as complicações pós-operatórias. RESULTADOS: Neste estudo, foram incluídos e analisados 36 pacientes. A média de permanência com o sistema de drenagem pleural foi de 3,0 ± 1,6 dias. O laudo da radiografia de tórax, realizado após 30 dias do procedimento cirúrgico foi considerado normal em 34 (95,2 por cento) pacientes. Ocorreram oito (22,4 por cento) casos de complicações pós-operatórias, sendo três (8,4 por cento) relacionadas à VUT. CONCLUSÕES: A utilização da VUT no pós-operatório de ressecção pulmonar eletiva foi eficiente, bem tolerada e apresentou baixo índice de complicação.

OBJECTIVE: To evaluate pleural drainage using a one-way flutter valve following elective lung resection. METHODS: This was a prospective study, with descriptive analysis, of 39 lung resections performed using a one-way flutter valve to achieve pleural drainage during the postoperative period. Patients less than 12 years of age were excluded, as were those submitted to pneumonectomy or emergency surgery, those who were considered lost to follow-up and those in whom water-seal drainage was used as the initial method of pleural drainage. Lung expansion, duration of the drainage, hospital stay and postoperative complications were noted. RESULTS: A total of 36 patients were included and analyzed in this study. The mean duration of pleural drainage was 3.0 ± 1.6 days. At 30 days after the surgical procedure, chest X-ray results were considered normal for 34 patients (95.2 percent). Postoperative complications occurred in 8 patients (22.4 percent) and were related to the drainage system in 3 (8.4 percent) of those. CONCLUSIONS: The use of a one-way flutter valve following elective lung resection was effective, was well tolerated and presented a low rate of complications.

Discinesia ciliar primária: considerações sobre seis casos da síndrome de Kartagener / Primary ciliary dyskinesia: considerations regarding six cases of Kartagener syndrome

A discinesia ciliar primária (DCP), anteriormente conhecida como síndrome dos cílios imóveis, é uma doença hereditária autossômica recessiva que inclui vários padrões de defeitos em sua ultra-estrutura ciliar. Sua forma clínica mais grave é a síndrome de Kartagener (SK), a qual é encontrada em 50 por cento dos casos de DCP. A DCP causa deficiência ou mesmo estase no transporte de secreções em todo o trato respiratório, favorecendo a proliferação de vírus e bactérias. Sua incidência varia de 1:20.000 a 1:60.000. Como conseqüência, os pacientes apresentam infecções crônicas e repetidas desde a infância e geralmente são portadores de bronquite, pneumonia, hemoptise, sinusite e infertilidade. As bronquiectasias e outras infecções crônicas podem ser o resultado final das alterações irreversíveis dos brônquios, podendo progredir para cor pulmonale crônico e suas conseqüências. Somente a metade dos pacientes afetados pela DCP apresenta todos os sintomas, condição denominada SK completa; no restante, não ocorre situs inversus, condição denominada SK incompleta. O diagnóstico é feito com base no quadro clínico e confirmado por meio da microscopia eletrônica de transmissão. Como não há tratamento especifico para a DCP, recomenda-se que, tão logo seja feito o diagnóstico, as infecções secundárias sejam tratadas com antibióticos potentes e medidas profiláticas sejam adotadas. Neste trabalho, relatamos seis casos de DCP (cinco casos de SK completa e um caso de SK incompleta) e revisamos a literatura sobre o assunto, tendo como foco os aspectos diagnósticos, terapêuticos e clínicos desta doença.

Primary ciliary dyskinesia (PCD), previously known as immotile cilia syndrome, is an autosomal recessive hereditary disease that includes various patterns of ciliary ultrastructural defects. The most serious form is Kartagener syndrome (KS), which accounts for 50 percent of all cases of PCD. The incidence of PCD ranges from 1:20,000 to 1:60,000. Since PCD causes deficiency or even stasis of the transport of secretions throughout the respiratory tract, it favors the growth of viruses and bacteria. As a result, patients have lifelong chronic and recurrent infections, typically suffering from bronchitis, pneumonia, hemoptysis, sinusitis, and infertility. Bronchiectasis and other chronic conditions infections can be the end result of the irreversible bronchial alterations, leading to chronic cor pulmonale and its consequences. Only half of the patients affected by PDC present all of the symptoms, a condition designated complete KS, compared with incomplete KS, typically defined as cases in which situs inversus does not occur. The diagnosis is made clinically and confirmed through transmission electron microscopy. Since there is no specific therapy for PCD, it is recommended that, upon diagnosis, secondary infections be treated with potent antibiotics and prophylactic interventions be implemented. In this paper, we report six cases of PCD (five cases of complete KS and one case of KS) and review the related literature, focusing on the diagnostic, therapeutic and clinical aspects of this disease.

Polycystic ovarian syndrome: temporal characterization of the induction and reversion process in an experimental model

Numerosos modelos experimentais têm sido desenvolvimos para o estudo da síndrome do ovário policístico em ratos. No presente estudo, a síndrome foi inducida por exposição à luz constante. O processo foi avaliado durante sua indução e inclusive durante sua reversão. O ciclo estral foi analisado através de citologia vaginal; parámetros reprodutivos foram avaliados por acasalamento, bem como a morfologia ovariana. Todos animais desenvolveram a síndrome depois de 13 semanas de luz permanente. As características histológicas dos ovários, na semana 15, foram similares àquelas observadas na síndrome do ovário policístico em humanos e outras espécies. Após a regressão da síndrome, não houve diferenta em nenhum dos parámetros reprodutivos avaliados, quando comparados com o grupo controle.

Histochemical study of the extracellular matrix components in the follicular wall of induced polycystic ovaries

Numerous models have been developed to study polycystic ovarian syndrome in rats. In the present study, the syndrome was induced by exposure to constant light. The histological structure and differential distribution of extracellular matrix (ECM) fibers as well as the glycosaminoglycans (GAGs) content and composition of the ovarian follicular wall of rats with polycystic syndrome were evaluated. Histochemical differences were observed in the graunlosa and theca externa of follicular cysts when compared to normal preovulatory follicles. The colagen content of the theca externa of follicular cysts, quantified by the picrosirius method, was higher than in the controls. The neural carbohydrate and acidic GAC levels were lower in the granulosa and higher in the theca externa of cyst follicles than in control ovaries. Histomorphometrically, the follicular diameter was both a convenient and appropriate measurement for describing the cyst status; there were no differences in the thickness of each follicular layer. In conclusion, differences in the components of ECM were observed in the follicular wall of ovarian cysts compared eith normal preovulatory follicles. Howere, sinde these changes did not occur uniformly in all layers of the follicular wall, their role in cyst development remains to be established.

Muscular regeneration after myonecrosis induced by Bothrops jararacussu snake venom from Argentina

Venom from Bothrops snake produces severe local symptoms on the envenomed victim, such as hemorrhage, edema and myonecrosis. The latter is perhaps the most important of all, since antivenom therapy is not effective for it, even when antivenom is injected only a few minutes after the accident. In this work, mice weighing 18-20 g (n = 5) were inoculated with 70 micrograms Bothrops jararacussu venom in 0.1 ml PBS in the gastrocnemius muscle. Mice were sacrificed using ether after 1, 12 hours, 3, 5, 7 days and 2, 3, 5, 6 weeks after the injection of the venom to obtain gastrocnemius muscles. They were fixed with Bouin's solution and stained using Hematoxylin--Eosin and Mason's trichromic stain was applied to visualize collagen fibers. Results showed that inflammatory reaction was evident after a few minutes of the venom injection, which was not evident after 6 weeks. Muscular fiber necrosis reached its highest level on the seventh day. Even thought regeneration of muscular fibers was important, they never reached the size of the control. We conclude that Bothrops jararacussu venom causes severe necrosis on muscle fibers with partial recovery, showing low hemorrhage and abundance of granulation tissue. This points that not all fibers were regenerated, which can be seen as a functional sequel for injured muscle.

Doença cística traqueobrônquica / Tracheobronchial cystic disease

Cistos aéreos que emergem anormalmente da traquéia e/ou brônquios de maior calibre são doença extremamente rara. Na literatura encontram-se poucas descrições de casos isolados de cistos paratraqueais associados a pneumopatias crônicas. Relatamos dois casos dessa entidade clínica, rara, em membros de uma mesma família: o pai das pacientes faleceu dessa doença com 43 anos de idade e as duas filhas encontram-se em tratamento. O quadro clínico é semelhante ao da supuração pulmonar crônica. O diagnóstico foi firmado através de broncovideoscopia e tomografia computadorizada de tórax com reconstrução em 3D e broncoscopia virtual. As pacientes estão sob observação e tratamento clínico paliativo.

Identificación de hongos en tejidos y cultivos: importancia de sustancias argirófilas en su estructura / Identification of fungi in tissues and cultures: the importance of argirophilic substances on its cellular walls

Se presenta un método basado en la combinación de la acción de microondas con uno de los métodos de impregnación argéntica de Del Río Hortega. Se estudiaron materiales de tejidos patológicos y cultivos de hongos. Además del análisis morfológico, se consideran las causas de la reducción de la plata iónica a metálica, algunas características del reactivo argéntico y su relación con la constitución histoquímica de las paredes celulares. Se destaca la rapidez en la demostración de los hongos, la definición satisfactoria de los tejidos afectados, las ventajas de trabajar con un reactivo estable, la omisión de sustancias carcinogenéticas, la posibilidad de impregnar estructuras fúngicas en preparados previamente teñidos con técnica anilínica y la extensión del método a materiales de cultivo sin necesidad de fijación formólica previa.